共聚焦定量分析拉米夫定脂质纳米粒对细胞内HBeAg表达的抑制作用

目的：用共聚焦定量分析方法，观察拉米夫定脂质纳米粒对细胞内HBV基因表达的作用。方法：构建半乳糖修饰的十六酸拉米夫定脂质纳米粒（LAP－GSLN），将其定向导入2．2．15细胞，对导入的细胞所表达HBeAg进行间接免疫荧光染色，用共聚焦技术对其含量进行定量分析。结果：导入LAP－GSLN的细胞内HBeAg荧光量与单纯加入拉米夫定（LA）比较，导入LAP－GSLN的细胞内HBeAg荧光明明显减少。结论：LAP－GSLN与2．2．15细胞上的半乳糖受体结合，将LA导入细胞而发挥对HBeAg抑制作用。     

雌激素高表达与前列腺增生

0　引言　良性前列腺增生 (benigh prostatic hyperplasia,BPH)病因尚无定论 ,可能与一些基因表达异常和各种生长因子的相互作用以及雌雄激素的失衡有关 .本研究比较 BPH和健康男性的前列腺组织雌激素受体 (ER)含量和血清雌二醇 (E2 )水平 ,探讨 ER含量和 E2 水平在 BPH发生中作用 .1　材料和方法1.1　材料　 1997- 0 6 /2 0 0 0 - 0 6行耻骨上经膀胱前列腺摘除患者 32例 ,年龄 5 7～ 79(平均 6 8)岁 ,术后光镜病理证实为BPH,正常前列腺标本 8例取自尸体 ,标本在脑死亡 15 min内取得 ,且经病理诊断为正常前列腺组织 .血清样本选择 2…     

人胎盘滋养层细胞的分离培养及HCV体外感染试验

目的：体外分离培养较高纯度的胎盘滋养层细胞，观察其生物学特性，探讨丙型肝炎病毒（HCV）经胎盘母婴传播的具体途径。方法：采用胰蛋白酶消化法消化人足月胎盘组织，以35％，45％两个Percoll密度梯度进行分离纯化。并用免疫组化及透射电镜等技术对其生物学特性进行观察。HCV阳性血清感染体外分离培养的胎盘滋养层细胞，通过逆转录聚合酶链反应及扩增敏感试验对培养上清进行定性、定量检测，以观察HCV的感染及复制情况。结果：胎盘组织中滋养层细胞角蛋白染色阳性，血管内皮细胞及基质成分波形蛋白染色阳性，经该法分离纯化的细胞角蛋白染色阳性者（滋养层细胞）占90％以上，电镜下滋养层细胞可观察到成熟型、中间型、未成熟型三种形态。HCV感染细胞培养16d内培养上清中可间断检测出HCV RNA.结论：改进后的分离方法可以得到较高纯度的滋养层细胞，HCV感染胎盘滋养层细胞可能是HCV宫内母婴传播的途径之一。     

腺样囊性癌SACC-83细胞对雪旺氏细胞的诱向作用

目的观察并探讨在体外坐骨神经与腺样囊性癌细胞共培养中腺样囊性癌细胞对由坐骨神经长出的雪旺氏细胞生长、迁移的影响。方法采用细胞培养技术将腺样囊性癌细胞、舌癌细胞及成纤维细胞分别与小鼠坐骨神经共培养;制备腺样囊性癌细胞与坐骨神经共培养细胞玻片,并行S100免疫组化染色实验。结果坐骨神经与腺样囊性癌细胞共培养中由坐骨神经长出的雪旺氏细胞向腺样囊性癌细胞群落迁移,表现出趋化性;舌癌细胞与成纤维细胞对雪旺氏细胞无诱向作用;经S100免疫组化染色,坐骨神经生长出长梭形的细胞,染色阳性,为雪旺细胞;多边形的细胞染色阴性,为成纤维细胞。结论坐骨神经与腺样囊性癌细胞共培养中长出的雪旺氏细胞向腺样囊性癌细胞群落趋化性生长,可能是腺样囊性癌嗜神经性重要机理之一,与腺样囊性癌细胞发生雪旺细胞分化有关。     

丹参注射液对慢性肝炎（中度）患者的IL—6及透明质酸作用的观察

为了探讨丹参注射液对于慢性肝炎（中度）的治疗作用，采用静滴丹参注射液，观察治疗前后血清白细胞介素－６（ＩＬ－６）有透明质酸（ＨＡ）的变化。结果表明：丹参可使患者血清中的ＩＬ－６及ＨＡ明显降低，提示丹参可以调节淋巴细胞因子引起的肝细胞的炎症损伤，保护肝细胞以及抑制间质细胞增生，有抗纤维化作用。     

HCV结构基因腺病毒表达载体骨架质粒pAd.HCV-S的构建、鉴定及表达

目的：构建能表达HCV结构基因（C＋E1＋E2）的腺病毒表达载体的重组骨架质粒,为进一步包装能高效表达HCV结构基因的腺病毒载体做准备,方法：用分别含有BglⅡ及HindⅢ酶切位点的HCV结构基因上、下游引物,以含有HCVH株基因序列的质粒pBRTM/BCV1-3011为模板,通过PCR扩增获得HCV结构基因片段,基因片段回收后,以BglⅡ及HindⅢ双酶切,定向插入到腺病毒骨架质粒pAd.CMV-Link.1中CMV启动子下游BglⅡ及HindⅢ位点之间,获得重组表达质粒pAd.HCV-S.通过BglⅡ／HindⅢ双酶切、PCV及插入片段序列测定对质粒进行了鉴定。以抗HCVC单克隆抗体为一抗,利用间接免疫荧光法检测了pAd.HCV-S在人肝癌细胞7721中的瞬时表达。结果：酶切、PCR及测序鉴定证实,pAd.HCV-S插入片段为HCVCE1＋E2区基因片段,免疫荧光法检测表明其可以在7721细胞中瞬时表达。结论：构建的质粒pAd.HCV-S 可以表达HCV结构基因,为包装表达HCV结构基因的腺病毒载体奠定了基础。     

抑制端粒酶活性对人肾癌细胞生长的抑制作用

目的：探讨抗端粒酶在肾细胞癌治疗中的意义。方法：采用脂质体介导法将pBBS212-hTR(反义端粒酶RNA真核表达载体)导入人肾癌GRC—1细胞系中，采用TRAP法测定端粒酶活性，通过MTT法检测细胞动力学，观察细胞的增殖，电镜下观察其对细胞凋亡的影响。结果：端粒酶反义RNA能显著抑制细胞的端粒酶活性，抑制细胞增殖并促进其凋亡。结论：以端粒酶反义RNA抑制端粒酶活性是治疗肾癌的潜在途径。     

美日军事院校研究生教育对我军军医大学的启示

作者分析了美日军事院校的研究生教育特点，以及在研究生教育理念、管理体制等方面的特征，提出军医大学的可借鉴思路与对策。所论述的问题对我军军医大学目前医学研究生教育的改革和发展具有一定的现实意义。     

抗血管内皮生长因子多位点核酶的合成及其体外切割作用

目的: 设计合成血管内皮生长因子多位点核酶,探讨其对靶RNA的切割作用.方法: 利用计算机辅助设计针对VEGF165的3个单位点核酶 (Rz1, Rz2, Rz3) 和联合型多位点核酶 (Rz123),构建其自剪切转录载体,观察多位点核酶对靶RNA的切割作用.结果: 构建的多位点核酶自剪切转录载体在体外转录中,顺式核酶发生了自身剪切,并释放出正确的目的核酶,多位点核酶可切割靶RNA,且效率高于单一核酶,其切割效率分别为 (37±10)% (Rz1), (51±8)% (Rz2 ), (68±15)% (Rz3) 和(88±11)% (Rz123).结论: 抗血管内皮生长因子多位点核酶体外可联合切割靶RNA,具有较高的生物活性.