仙鹤草多糖的分离纯化及理化性质研究

目的从中药仙鹤草中提取仙鹤草多糖,并对其理化性质进行研究。方法利用水提醇沉法得粗多糖,并依次经纤维素DE-52柱和Superdex-200凝胶柱色谱进行纯化。采用光谱法和色谱法对其总糖含量、单糖组成、相对分子质量等理化性质进行研究。结果分离纯化的仙鹤草多糖HAPⅢ总糖含量、蛋白含量、糖醛酸含量分别为81%,3.4%,45%,由半乳糖、葡萄糖、鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、岩藻糖、木糖组成,摩尔比为5.65∶2.67∶2.61∶1.86∶1.12∶1.09∶1。其平均相对分子质量为1.90×105。结论仙鹤草多糖HAPⅢ是一水溶性酸性杂多糖。     

虎掌南星多糖含量及单糖组成研究

目的:研究虎掌南星多糖的含量及其单糖种类及摩尔比。方法:首先采用水提醇沉的方法提取虎掌南星多糖并用苯酚-硫酸法来测定其粗多糖含量;再用柱前衍生化-高效液相色谱法来测定单糖组成并通过标准回归方程计算单糖摩尔比。结果:虎掌南星多糖提取率为4.65%,含有量为56.3%,由甘露糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖组成,其单糖摩尔比为3.54∶3.36∶313.39∶9.01∶1.69。结论:苯酚-硫酸法具有显色稳定,操作简便,重复性良好等优点,可用于虎掌南星多糖含有量的测定;柱前衍生化高效液相色谱法具有简单、准确、快速、重现性好等优点,可用于虎掌南星多糖中单糖组成分析。     

虫草多糖中单糖组成的柱前衍生化HPLC分析

建立了柱前衍生化HPLC法测定虫草多糖中单糖的组成及摩尔比。采用C18柱,以0.1mol/L磷酸盐缓冲液(pH6.7)-乙腈(83∶17)为流动相,检测波长254nm。衍生化试剂为1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮。所测3批样品中虫草多糖由甘露糖、葡萄糖、半乳糖3种单糖组成,单糖的摩尔比约为2∶2∶1。平均回收率分别为101.0%、98.6%和99.2%,RSD分别为1.9%、1.6%和1.2%。     

人工培养蛹虫草多糖的分离纯化及其结构的初步研究

目的人工培养蛹虫草多糖类成分的提取与纯化。方法采用SephadexG 10 0柱色谱法进行了分离纯化 ;通过理化常数测定、化学和光谱分析等方法研究了其化学结构特征。结果分离得到CPS 1、CPS 2和CPS 33种多糖 ,其单糖组成分别为 :CPS 1:鼠李糖 木糖 甘露糖 葡萄糖 半乳糖 (1∶6 .4 3∶2 5 .6∶16 .0∶13.8) ;CPS 2 :鼠李糖 葡萄糖 半乳糖 (1∶4 .4 6∶2 .4 3) ;CPS 3为只含葡萄糖的均一多糖。 3种多糖的分子量分别为 2 30 0 0、12 90 0和 5 0 0 0。CPS 1主要含有β糖苷键 ,CPS 2和CPS 3主要含有α糖苷键。 结论CPS 1为一种含有 5种单糖 ,糖苷键为 β构型的多糖 ;CPS 2是一种含有 3种单糖 ,糖苷键为α构型的多糖 ;CPS 3是一种仅含葡萄糖、糖苷键为α构型的多糖     

气相色谱法测定吐鲁番无核白葡萄树伤流液组成多糖的单糖

目的对吐鲁番葡萄树伤流液多糖进行分离纯化,并分析其单糖组成。方法采用醇沉法提取多糖,Sevage法脱蛋白,经DEAE-52纤维素柱及Sephadex G-150凝胶柱分离纯化,采用气相色谱分析单糖组成。结果用体积分数80%乙醇沉淀、Sevage法除蛋白,得葡萄树伤流液粗多糖,粗多糖经过DEAE-52纤维素柱分离得到8个多糖组分,编号分别为:组分-1,组分-2,组分-3,组分-4,组分-5,组分-6,组分-7,组分-8。其中4个多糖组分经过Sephadex G-150纯化后,通过GC分析组分-1和组分2含有鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖;组分-3含有鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖;组分-5含有鼠李糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖。结论该方法可较好地分离纯化葡萄树伤流液多糖。采用GC分析多糖的单糖组成,研究结果适用于多糖中的单糖组成分析。     

柱前衍生化HPLC法测定黄河滩枣多糖的单糖组成

目的建立PMP(1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮)柱前衍生化HPLC法测定黄河滩枣多糖的单糖组成。方法采用水提醇沉法提取黄河滩枣多糖,多糖水解后进行PMP衍生化,HPLC法测定黄河滩枣多糖的单糖组成及摩尔比,并对等度和梯度洗脱两种模式的测定结果进行分析比较。结果黄河滩枣多糖由D-甘露糖、L-鼠李糖、D-半乳糖醛酸、D-葡萄糖、D-半乳糖、L-阿拉伯糖等六种单糖组成,它们的摩尔比约为0.54∶0.50∶0.27∶2.03∶5.40∶1.00,等度和梯度洗脱测定结果基本一致。结论本实验改进的等度洗脱方式更加简便易行,快速准确,适用于黄河滩枣多糖的单糖组成分析。     

短葶山麦冬多糖提取纯化及组分的研究

目的建立短葶山麦冬多糖的提取纯化方法,以及对多糖组分的初步研究。方法采用水提醇沉法提取短葶山麦冬粗多糖,SephadexG-100凝胶柱(16mm×800mm)对粗多糖进行纯化,将纯化所得的麦冬多糖完全水解,分别以木糖、阿拉伯糖、果糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖等单糖色谱纯为标准品,采用高效液相色谱法对上述全水解产物进行比对分析。结果 HPLC-ELSD定性分析发现麦冬多糖中单糖组成主要是果糖和葡萄糖,以果糖和葡萄糖的质量浓度对数与HPLC-ELSD峰面积对数的线性关系定量分析出其组分的含量。由果糖的线性回归方程和葡萄糖的线性回归方程计算出两者的摩尔浓度比。结论短葶山麦冬中多糖的糖单元基本组成是果糖和葡萄糖,并确定了其摩尔浓度比约为10∶1。     

中药复方海藻制剂水煎液水相化学组成分析

目的对中药复方海藻制剂水煎液水相的化学组成进行初步研究。方法采用苯酚-硫酸法测定复方海藻制剂水煎液水相以及水相醇沉粗多糖的总糖含量;采用硫酸钡-明胶比浊法测定两者的硫酸基含量;采用硫酸咔唑法测定两者的糖醛酸含量;采用Folin酚法测定两者的蛋白质含量。采用气相色谱法对两者的单糖组成进行分析。结果复方海藻制剂水相总糖含量为56.90%,硫酸基含量为25.71%,糖醛酸含量为6.32%,总蛋白含量为38.01%。单糖组成分析显示水相中中性糖主要为葡萄糖,还有少量岩藻糖,甘露糖,半乳糖以及微量的鼠李糖。醇沉后粗多糖含量为53.05%,硫酸基含量为32.24%,糖醛酸含量为7.74%,总蛋白含量为22.01%。单糖组成分析显示粗多糖中性糖主要以葡萄糖为主。结论水相的化学成分主要是以由葡萄糖为主要中性糖组成的多糖类成分,而多糖可能是复方抗肿瘤重要的药效成分。     

天葵子多糖的提取与鉴定

目的提取天葵子多糖,并对其进行定性定量分析。方法采用水提醇沉法提取天葵子多糖,用苯酚-硫酸比色法测定多糖粗提物中的总糖含量,咔唑-硫酸法测定酸性多糖含量,双缩脲法测定蛋白质含量,凝胶过滤法测定相对分子质量(Mr),气相色谱法确定天葵子多糖的单糖组成及摩尔比。并对其进行红外光谱分析。结果总糖含量为80.4%,酸性糖含量为6.8%,蛋白质含量为16.6%,Mr约为6.3×104,天葵子多糖含葡萄糖、半乳糖、甘露糖、阿拉伯糖、岩藻糖,摩尔比例为6.23∶2.04∶3.15∶1.03∶1。多糖结构含非O-型呋喃糖苷键。结论天葵子多糖为5种单糖组成的混合物。     

一种水溶性茶多糖的单糖组成及糖醛酸含量的测定

目的研究一种水溶性茶多糖中的中性糖组成及其对糖醛酸含量测定的影响,为准确测定茶多糖中糖醛酸含量提供参考依据。方法采用气相色谱法分析了10种茶多糖样品单糖组成,考察了其主要的三种单糖组分组成的混合中性糖（1∶1∶0.5,摩尔比）对硫酸咔唑法、间羟联苯法两种方法测定糖醛酸含量的影响。结果10种水溶性茶多糖样品的主要单糖组成为阿拉伯糖（Ara）、半乳糖（Gal）以及葡萄糖（Glc）。结论在测定茶多糖中糖醛酸含量时,这3种中性糖对间羟联苯法的干扰远小于硫酸咔唑法。     

山药多糖RDPS-I的结构分析及抗肿瘤活性

目的研究山药多糖的化学结构和抗肿瘤活性。方法用水提取山药块茎粗多糖,经Sevag反复脱蛋白8次,透析后经DEAE-cellulose及Sephadex G-100柱色谱纯化得山药多糖RDPS-I。经完全酸水解、部分酸水解,用PC,GC,IR,高碘酸氧化,Smith降解,甲基化分析,¹HNMR及¹³CNMR等研究山药多糖的化学结构。并用小鼠移植性实体瘤研究了RDPS-I的体内抗肿瘤作用。结果RDPS-I的分子量为41 000,比旋光度为［α］²⁰_D=+188.4°(c 0.80,H₂O),特性粘度为［η］=16.48×10^-3(g·mL^-1)。RDPS-I是由葡萄糖、甘露糖和半乳糖以1∶0.4∶0.1的摩尔比组成,以α-D-(1→3)-Glcp为主链,在6-O位有α-D-(1→2)-Manp-β-D-1)-Galp支链的杂多糖。RDPS-I对移植性黑色素B16和Lewis肺癌有很强的抑制作用。结论RDPS-I是由葡萄糖、甘露糖和半乳糖构成的杂多糖,有很强的体内抗肿瘤活性。     

半枝莲多糖B3-PS2分离纯化及抗补体活性研究

本文提取半枝莲多糖,分别经DEAE-cellulose、Sephacryl S-300柱层析分离纯化后得到均一的B3-PS2组分,并对该组分进行了抗补体活性研究。研究结果表明B3-PS2组分分子质量为1 100 kD,主要由Glc、Gal和Ara三种单糖组成,糖残基摩尔比为2.7∶2.7∶1.0,还含有少量的Man、Rha、Fuc和Xyl。B3-PS2抑制补体活性的经典途径CH₅₀为(0.23 ± 0.03) mg·mL⁻¹,抗补体作用靶点为补体C1r、C1s、C3、C4组分。半枝莲多糖B3-PS2组分体外抗补体活性接近于阳性对照肝素,表明活性较好,这显示了半枝莲多糖治疗补体过度激活相关疾病的潜在价值。     

白木通多糖的研究

用碱液从白木通(Akebia trifoliate)茎中提取所得的粗多糖ATB经DEAE-Celulose及SephadexG-200柱层析后得到一多糖纯品ATBB 2,其分子量为2.3×10⁵。糖组分分析ATBB-2中各糖残基的摩尔比为Rha∶Ara∶Xyl∶Gal∶Glc∶GalA=1.22∶1.00∶1.10∶0.85∶0.24∶0.82。经甲基化,高碘酸氧化,Smith降解,部分酸水解,¹H和¹³CNMR谱的分析揭示ATBB-2是一个结构复杂的杂多糖。     

枸杞子中免疫活性成分的分离、纯化及物理化学性质的研究

从宁夏枸杞子提取得到的糖缀合物LBP经DEAE-celulose柱色谱得到5个组分,其中Lbp3,Lbp4和Lbp5分别经CM-SephadexC-50,SephadexG-100,SephadexG-50柱色谱得到均一组分LbGp3,LbGp4和LbGp5。N含量:LbGp30.83%,LbGp41.72%,LbGp59.58%。总糖含量:LbGp393.6%,LbGp485.6%,LbGp58.6%。分子量:LbGp39.25×10⁴,LbGp4 21.48×10⁴,LbGp52.37×10⁴。糖组成为:LbGp3:Ara∶Glc=1∶1,LbGp4:Ara∶Gal∶Rha∶Glc=1.5∶2.5∶0.43∶0.23,LbGp5:Rha∶Ara∶Xyl∶Gal∶Man∶Glc=0.33∶0.52∶0.42∶0.94∶0.85∶1。初步分析表明LbGp4是O-连接的糖蛋白。     

赤芝多糖肽GL-PP-3A的分离纯化和结构研究

分离纯化赤芝多糖肽，得到具有活性部位GL-PP-3A，对其进行结构分析。水提醇沉透析得赤芝多糖肽，经分级沉淀，Bio-Gel P-10柱色谱纯化得GL-PP-3A。经HPGPC、糖基组成、甲基化分析、 ¹H NMR和 ¹³C NMR等方法研究分析GL-PP-3A的结构。GL-PP-3A是以葡萄糖为主的杂多糖，含Rha、Xyl、Man、Gal、Glc糖残基和17种氨基酸。其M_w为1.7×10⁴；M_n为1.1×10⁴；M_w/M_n为1.49。M_p为1.3×10⁴。该多糖主链由1,6-或1,3-连接的β-D-Glcp构成，二者的比例约为2∶1，在部分1,6-连接的主链葡萄糖的2或3位有分支，分支的非还原末端均主要为β-D-Glcp,少量为鼠李糖，分支内部含有1～3个1,6-连接的β-D-Galp或1,3-连接的α-D-Manp。     

蒺藜中水溶性多糖的研究——杂多糖H的纯化与结构初步确定

从蒺藜(Tribulus terristris L)茎和叶中提出醇溶皂甙后,再提取水溶性粗多糖,其单糖组成及其摩尔比为Ara.,Rha.,Xyl.,GalA.,Gal.,Glc.,Man.,6.0:2.1:1:3.6:3.4:7.7:2.9.粗多糖经分级与纯化得一均一级分H,其单糖组成及其摩尔比为Ara.,Rha,Xyl,GalA,Gal,Glc,1.6:2.4:0.1:3.5:1.3:1。H为酸性杂多糖,分子量约为10万。经果胶酶酶解、β-D-半乳糖苷酶酶解,高碘酸氧化、Smith降解、部分酸水解、甲基化、与GC及GC-MS分析等,表明H为α-D-GalA(1→4)与L-Rha(1→2)可能交替连接构成的主链,一些Rha.上带有分枝。     

柱前衍生化HPLC分析蒲公英多糖的单糖组成

目的合理优化衍生方法测定蒲公英多糖中单糖的组成及摩尔比。方法采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮（PMP）柱前衍生,用反相高效液相色谱法进行测定。色谱条件为：ZORBAX-C18柱;流动相：0.1mol·L^-1的磷酸盐缓冲液（pH6.7）-乙腈（83∶17）;流速：1mL·min^-1;检测波长：245nm;进样量：20μL;柱温：室温。结果蒲公英多糖由D-鼠李糖、葡萄糖、D-半乳糖、D-木糖和D-阿拉伯糖组成,以不同方法提取的各单糖含量的摩尔比为：水提取法,Rha∶Glc∶Gal∶Ara=0.088∶0.500∶0.190∶0.340;超声提取法,Rha∶Glc∶Gal∶Ara=0.050∶0.350∶0.080∶0.320;酶提取法,Rha∶Glc∶Gal∶Ara=0.270∶0.630∶0.330∶0.460;超声协提取同酶法,Rha∶Glc∶Gal∶Ara=0.078∶0.550∶0.130∶0.170。结论改进后的衍生化方法和等度洗脱的色谱方法具有操作简单、快速、重复性好等特点,可用于蒲公英多糖中单糖组成和摩尔比的测定。