赤芝多糖肽GL-PP-3A的分离纯化和结构研究

分离纯化赤芝多糖肽，得到具有活性部位GL-PP-3A，对其进行结构分析。水提醇沉透析得赤芝多糖肽，经分级沉淀，Bio-Gel P-10柱色谱纯化得GL-PP-3A。经HPGPC、糖基组成、甲基化分析、 ¹H NMR和 ¹³C NMR等方法研究分析GL-PP-3A的结构。GL-PP-3A是以葡萄糖为主的杂多糖，含Rha、Xyl、Man、Gal、Glc糖残基和17种氨基酸。其M_w为1.7×10⁴；M_n为1.1×10⁴；M_w/M_n为1.49。M_p为1.3×10⁴。该多糖主链由1,6-或1,3-连接的β-D-Glcp构成，二者的比例约为2∶1，在部分1,6-连接的主链葡萄糖的2或3位有分支，分支的非还原末端均主要为β-D-Glcp,少量为鼠李糖，分支内部含有1～3个1,6-连接的β-D-Galp或1,3-连接的α-D-Manp。     

山药多糖RDPS-I的结构分析及抗肿瘤活性

目的研究山药多糖的化学结构和抗肿瘤活性。方法用水提取山药块茎粗多糖,经Sevag反复脱蛋白8次,透析后经DEAE-cellulose及Sephadex G-100柱色谱纯化得山药多糖RDPS-I。经完全酸水解、部分酸水解,用PC,GC,IR,高碘酸氧化,Smith降解,甲基化分析,¹HNMR及¹³CNMR等研究山药多糖的化学结构。并用小鼠移植性实体瘤研究了RDPS-I的体内抗肿瘤作用。结果RDPS-I的分子量为41 000,比旋光度为［α］²⁰_D=+188.4°(c 0.80,H₂O),特性粘度为［η］=16.48×10^-3(g·mL^-1)。RDPS-I是由葡萄糖、甘露糖和半乳糖以1∶0.4∶0.1的摩尔比组成,以α-D-(1→3)-Glcp为主链,在6-O位有α-D-(1→2)-Manp-β-D-1)-Galp支链的杂多糖。RDPS-I对移植性黑色素B16和Lewis肺癌有很强的抑制作用。结论RDPS-I是由葡萄糖、甘露糖和半乳糖构成的杂多糖,有很强的体内抗肿瘤活性。     

麦冬多糖MDG-1的分离纯化和结构分析

目的分离纯化麦冬多糖抗心肌缺血的活性部位，得到相对分子质量均一的组分MDG-1，并进行结构分析。方法水提醇沉得麦冬粗多糖，超滤后经DEAE Sepharose FF柱和Sephadex G25柱色谱纯化后得MDG-1。经完全酸水解、高碘酸氧化、Smith降解、甲基化分析、¹H NMR及¹³C NMR等研究分析MDG-1的化学结构。结果和结论 MDG-1为β-D-果聚糖，易溶于水，数均分子量(M_n)为3 400，重均分子量(M_w)为4 800，峰尖分子量(M_p)为5 000，以2→1连接的呋喃型果糖为主，平均每2.8个主链残基上有一个Fruf(2→6)Fruf(2→分支)。该多糖还含有微量葡萄糖(果糖∶葡萄糖=35∶1)，可能连接在多糖的还原端。     

无毒棉花籽中黄酮苷的分离与结构鉴定

目的　研究无毒棉花籽(glandlesscottonseed)中的黄酮类化学成分。方法　利用大孔树脂、聚酰胺-6、硅胶和SephadexLH-20柱色谱进行分离纯化。用UV ,MS ,¹HNMR ,¹³CNMR ,¹H-¹HCOSY ,¹H-¹³CCOSY ,HMBC和TOCSY等光谱确定化合物结构。结果　从无毒棉花籽中分离得到5个黄酮苷,经光谱鉴定化合物结构为:山奈酚-3-O-β-D-芹菜糖( 1→2 )-[α-L-鼠李糖(1→6)]-β-D-葡糖苷(I)、槲皮素-3-O-β-D-芹菜糖 ( 1→2)-[α-L-鼠李糖( 1→6)]-β-D-葡糖苷(II)、槲皮素-3-O-β-D-芹菜糖 ( 1→2 )-β-D-葡糖苷(III)、芦丁(IV)和陆地棉苷(V)。结论　I是一个新化合物,II和III为首次从该属植物中分离得到。     

云芝子实体多糖化学结构的研究

目的　研究云芝子实体中多糖的化学结构。方法　应用柱色谱方法进行分离、纯化得一均一多糖组份B-1-3。通过完全水解、甲基化、一维和二维¹H和¹³CNMR阐明B-1-3的化学结构。结果　经完全水解证实B-1-3主要由Glc单糖残基组成,用HPLC方法测得其分子量为3.16×10⁵,通过对甲基化反应数据和¹H和¹³CNMR分析发现B-1-3为由β-D-1,4-Glc和β-D-1,3-Glc残基构成主链的葡聚糖,同时在β-D-1,3,6-Glc及β-D-1,4,6-Glc残基处产生分枝。经¹H和¹³CNMR分析表明B-1-3分子中存在β-D-Glc-1→3-β-D-Glc-β-D-Glc-1→4-β-D-Glc及β-D-Glc-1→4-β-D-Glc-β-D-Glc-1→4-β-D-Glc片段。结论　云芝子实体多糖B-1-3为由β-D-1,4-Glc,β-D-1,3-Glc和β-D-1,6-Glc残基构成主链的葡聚糖。     

菟丝子多糖H3的研究

目的　研究从中药菟丝子(Cuscuta chinensis Lam.)种子中提取分离所得的酸性纯多糖H3的结构特征。方法　利用化学方法(糖组分分析、甲基化分析、糖醛酸还原和部分酸水解等)和光谱分析方法(¹HNMR谱、¹³CNMR谱、IR谱等)对其结构进行了研究。结果H3的分子量大于1.0×10⁶,糖组分分析显示其是由阿拉伯糖、鼠李糖、半乳糖和半乳糖醛酸组成的,甲基化分析,部分酸水解和NMR光谱分析进一步揭示H3分子中各糖残基的连接方式及次序。结论　H3为一多分枝的结构复杂的杂多糖,为首次从该植物中分得。     

当归多糖组分AP-3诱生小鼠脾细胞IL-2和IFN-γ的作用

目的研究当归多糖组分AP-3对细胞因子IL-2和IFN-γ的诱生作用，以探讨其免疫调节的特点。方法 流式细胞术测定培养的脾细胞中CD4⁺细胞比例；酶联免疫法测定培养上清液中IL-2和IFN-γ的浓度；RT-PCR法测定IL-2和IFN-γ mRNA的转录水平。结果AP-3在0.6～2 μmol·L^-1，能显著提高培养脾细胞CD4⁺细胞的百分率；在2～6 μmol·L^-1，AP-3时间、剂量依赖性地增加培养的细胞上清液中IL-2的浓度和细胞内IL-2 mRNA的转录水平，而对于IFN-γ和IFN-γ mRNA，则先升高后降低，并呈现剂量依赖性。结论当归多糖能够促进IL-2和IFN-γ的分泌，激活Th1细胞，从而发挥免疫调节作用。     

猪苓多糖通过JAK2-STAT3通路抑制N-甲基-N''-硝基-N-亚硝基诱导的GES-1细胞上皮间充质转化

目的 研究猪苓多糖抑制胃黏膜上皮细胞（GES-1）间充质转化的作用和机制。方法 应用N-甲基-N''-硝基-N-亚硝基（MNNG，40 μmol·L^-1）诱导GES-1细胞间充质转化模型，造模同时给予猪苓多糖（1.25、2.50、5.00、10.00 mg·mL^-1）处理24、48 h后，CCK-8法检测细胞增殖能力；造模同时给予猪苓多糖（5.00 mg·mL^-1）处理48 h后，实时定量PCR（qRT-PCR）法检测猪苓多糖对N-cadherin、Snail、Twist、Fibronection及Vmention mRNA表达的影响；Western blotting法检测E-cadherin、N-cadherin、Snail、Twist、Fibronetin、Vimentin、STAT3、p-STAT3、JAK2、p-JAK2蛋白表达。裸鼠分别sc经MNNG 40 μmol·L^-1处理48 h后的GES-1细胞（5×10⁷·mL^-1 ，0.2 mL）、胃癌细胞SGC7901（5×10⁷·mL^-1 ，0.2 mL ，阳性对照），1个月后观察各组成瘤及体质量情况，注射局部进行HE染色后行组织病理学观察，验证GES-1细胞经MNNG处理后是否达到肿瘤阶段。结果 与模型组比较，随猪苓多糖浓度的增加，GES-1细胞增殖能力逐渐上升，到达5 mg·mL^-1时增殖能力最高，差异显著（P<0.01、0.001）；猪苓多糖组N-cadherin、Snail、Twist、Fironetion及Vimentin的mRNA表达均显著下降（P<0.05、0.01、0.001）；猪苓多糖组E-cadherin蛋白表达显著上升（P<0.05），N-cadherin、Snail、Twist、Fibronetion、Vimentin及通路蛋白STAT3、p-STAT3、JAK2、p-JAK2表达显著下降（P<0.05、0.01、0.001）。对照组和MNNG处理的GES-1组未见瘤体形成，阳性对照SGC7901组注射后1周左右局部出现瘤体，1个月瘤体长至6 cm左右；MNNG处理的GES-1组裸鼠精神较差，体质量明显减轻，SGC7901组裸鼠状态差，体质量大幅减轻；对照组和MNNG组病理染色显示为正常的皮肤组织，阳性对照组显示为肿瘤组织。结论 猪苓多糖可能通过抑制JAK2-STAT3通路干预MNNG诱导的GES-1细胞上皮间充质化。     

黄秋葵胶囊的制备及质量控制

目的 研究黄秋葵胶囊的制备工艺,建立其质量控制方法。方法 采用UV测定多糖含量;以加水量、提取次数、提取时间、提取温度为影响因素,采用L₉(3⁴)正交试验,以多糖含量为指标,优选黄秋葵提取工艺;将提取液过滤、浓缩、加辅料、一步制粒、填充胶囊。结果 最佳提取工艺为：加水量10 倍,提取时间2 h,提取温度100 ℃,提取次数3次;多糖标准曲线为：Y=5.746 0X+0.084 1,r=0.999 7,线性范围为：0.007~0.036 mg·mL^-1,平均回收率为99.54％(RSD为1.29％);处方辅料为：黄秋葵浸膏-淀粉-硬脂酸镁(300 g∶300 g∶3 g);该制剂各项检查均符合2005年版中国药典的相关规定,胶囊多糖平均含量为8.1%。结论 黄秋葵胶囊制备工艺简单可行、合理,质量稳定可控。     

海芒果Cerbera odollam果仁中强心甙的分离鉴定

从海南岛产的海芒果Cerbera odollam果仁中分离到四种强心多糖甙monoacetyl-the-vetinB(Ⅰ)⁽¹⁾ thevetin B(Ⅲ)⁽²⁾及它们的7β,8β环氧衍生物tanghinoside(Ⅱ)⁽³⁾ desacetyl-tanghinoside(Ⅳ)。经果仁中的酶水介获得相应四个单糖甙Cerberin(Ⅴ)⁽⁴⁾ neriifolin(Ⅶ)⁽⁵⁾ tang hinin(Ⅵ)⁽⁶⁾ desacetyl-tanghinin(Ⅷ)⁽⁶⁾ tanghinoside,tanghinin及desacetyl-tanghinin以前未从Cerbera odollam中分到过。甙Ⅳ为一新甙。     

果胶多糖可控性降解及果胶寡糖的制备

目的建立一套果胶多糖可控性降解和果胶寡糖分离分析的完整方法。方法采用酸水解和生物酶法等不同降解方法对柑橘果胶多糖进行可控性降解,以所得果胶寡糖的聚合度范围及相对含量为指标,确定最优降解条件,对降解所得的果胶寡糖进行分离分析。结果以果胶酸为底物,用果胶酶40℃反应1h,可得聚合度范围1~5的寡聚半乳糖醛酸混合物;经强阴离子交换树脂Dowex-1×4分离、薄层色谱和电喷雾电离质谱检测,得到聚合度范围1~5的单一聚合度的半乳糖醛酸寡糖。结论建立的果胶多糖可控性降解和果胶寡糖分离的分析方法为果胶多糖的系统研究提供了参考。     

Structural features of a pectic polysaccharide from mulberry leaves

A pectic polysaccharide SDA was obtained from the boiling water extract of mulberry leaves. It consisted of rhamnose, arabinose, xylose, glucose, galactose, and galacturonic acid units in the molar ratio of 5:4:1:2:6:38. Its molecular weight was determined to be 1.5 x 10(4) by high-performance gel filtration chromatography. A combination of linkage analysis, partial acid hydrolysis, ESIMS, (1)H-NMR, and (13)C-NMR spectral analyses revealed its structural features. It was found that SDA possessed an alpha-(1 --> 4)-galacturonan backbone with some insertions of (1 --> 2) Rha residues, with the side chains attached to the O-3 or O-2 position of GalA residues, or the O-4 position of 1,2-linked Rha residues. The side chains contained branched (1 --> 5) linked arabinan, branched (1 --> 3) linked rhamman, linear (1 --> 4) linked xylan, linear (1 --> 4) linked glucan, and linear (1 --> 2) linked galactan. SDA was a new acidic polysaccharide isolated from mulberry leaves for the first time.     

黄芪多糖的研究

从中药黄芪Aslragalus mongholicus Bunge.的水提液中分离得到两种葡聚糖AG-1、AG-2和两种杂多糖AH-1、AH-2。该四种多糖经电泳、凝胶柱层析等证实均为单一组分。AG-1为水溶性,经水解、过碘酸氧化、甲酸生成、Smith降解、乙酰解、红外、C-13核磁共振等确定为α(1→4)(1→6)葡聚糖、α(1→4)与口(1→6)甙键糖基的组成比例约为5:2。AG-2不溶于水,为α(1→4)葡聚糖。AH-1为水溶性酸性多糖,水解后纸层析检出含己糖醛酸(半乳糖醛酸和葡萄糖醛酸)、葡萄糖、鼠李糖、阿拉伯糖,其分子比值为1:0.04:0.02:0.01。AH-2为水溶性、水解后用纸层析和气相层析检出葡萄糖和阿拉伯糖,其分子比值为1:0.15。AG-1、AH-1具有某些免疫促进作用。     

蝙蝠蛾被孢霉多糖的分离纯化及理化性质

目的提取蝙蝠蛾被孢霉多糖,并对其理化性质进行研究。方法利用水提醇沉法得到粗多糖CPSM,采用硫酸-蒽酮法测定粗多糖含量,考马斯亮蓝法测定蛋白质含量,薄层色谱法检查是否含有单糖。CPSM经纤维素DE-52柱分离得CPSM-1和盐洗脱多糖。两种多糖分别经Sephadex系列凝胶柱分离纯化得到CPSM-1a和CPSM-2,采用光谱法和色谱法测定其单糖组成、分子质量等。结果粗多糖CPSM糖含量为61.4%,蛋白含量为1.8%,不含还原糖。CPSM-1a主要含有甘露糖、半乳糖和葡萄糖,其摩尔比约为5∶2∶3;CPSM-2主要含有甘露糖、半乳糖醛酸、半乳糖、葡萄糖和木糖,其摩尔比约为5∶1∶2∶1∶1。CPSM-1a和CPSM-2重均分子质量分别为8.8×103和7.6×103。结论 CPSM-1a为一水溶性中性多糖,CPSM-2为一水溶性酸性多糖。     

Structural features of a pectic polysaccharide from mulberry leaves

A pectic polysaccharide SDA was obtained from the boiling water extract of mulberry leaves. It consisted of rhamnose, arabinose, xylose, glucose, galactose, and galacturonic acid units in the molar ratio of 5:4:1:2:6:38. Its molecular weight was determined to be 1.5 × 10⁴ by high-performance gel filtration chromatography. A combination of linkage analysis, partial acid hydrolysis, ESIMS, ¹H-NMR, and ¹³C-NMR spectral analyses revealed its structural features. It was found that SDA possessed an α-(1 → 4)-galacturonan backbone with some insertions of (1 → 2) Rha residues, with the side chains attached to the O-3 or O-2 position of GalA residues, or the O-4 position of 1,2-linked Rha residues. The side chains contained branched (1 → 5) linked arabinan, branched (1 → 3) linked rhamman, linear (1 → 4) linked xylan, linear (1 → 4) linked glucan, and linear (1 → 2) linked galactan. SDA was a new acidic polysaccharide isolated from mulberry leaves for the first time.     

石见穿多糖SC3的化学研究

目的研究从中药石见穿(Salvia chinensis)全草中得到的酸性多糖SC3的化学结构。方法利用化学方法(糖组成分析、甲基化分析、糖醛酸还原及部分酸水解)和光谱方法(IR,NMR,ESI-MS)分析其结构特征。结果SC3的分子量为7.7×10⁴,由鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖和半乳糖醛酸组成,甲基化分析、部分酸水解和NMR,ESI-MS进一步分析了糖残基的连接方式和序列。结论SC3为一结构复杂的酸性杂多糖,为首次从该植物中分得。     

Purification, NMR study and immunostimulating property of a fucogalactan from the fruiting bodies of Ganoderma lucidum

A water-soluble polysaccharide (LZ-D-1) was isolated from Ganoderma lucidum fruiting bodies by DEAE-Sepharose Fast Flow and Sephacryl S-300 high-resolution chromatography. The polysaccharide had a molecular weight of 2.8 x 10(4) Da and was mainly composed of L-Fuc, D-Glc and D-Gal in a molar ratio of ca.1 : 1 : 5. LZ-D-1 had a sugar content of 98.7 % as measured using the phenol-sulfuric acid method. On the basis of methylation analysis, FT-IR spectrum and NMR experiments, the structure of the repeating unit of the polysaccharide was established. LZ-D-1 had a backbone composed of 1,6-disubstituted alpha-D-galactopyranosyl, 1,2,6-trisubstituted alpha-D-galactopyranosyl and had a branch composed of fucose attached to O-2 of a 1,2,6-trisubstituted alpha-D-galactopyranosyl residue. At the same time, the polysaccharide contained some 1,6-disubstituted glucopyranosyl residues and 1,3-disubstituted glucopyranosyl residues. An immunostimulating experiment in vitro indicated that LZ-D-1 stimulated proliferation of mouse spleen lymphocytes.     

龙葵水溶性多糖的成分分析(Ⅰ)

从龙葵（SolanummigrumL.）的水提取液中分离出一中性杂多糖。经高效液相色谱分析其酸水解液,证明它由D-葡萄糖、L-鼠李糖、L-阿拉伯糖和D-木糖组成,摩尔比为14.2:5:2．8：1。多糖含量为84．1％。