Effect of shikonin on the COX-2 expression of synoviai fibroblasts in rheumatoid arthritis

目的 观察紫草素对人滑膜成纤维细胞环氧化酶-2(COX-2)mRNA表达的影响,探讨紫草素可能的免疫抗炎作用机制.方法 分离并培养人膝关节滑膜成纤维细胞,各加入IL-1β、TNF-α 15 ng/mL,体外模拟人类风湿关节炎滑膜细胞.以塞来昔布作阳性对照,进行紫草素(浓度为5～80μg/L)干预,分别作用24、48、72 h后终止培养.用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测滑膜成纤维细胞COX-2 mRNA表达情况.结果 紫草素对滑膜成纤维细胞COX-2 mRNA的表达,对浓度无明显依赖性(P=0.089),用药时间上有显著统计学意义(P＜0.0001).塞来昔布抑制滑膜成纤维细胞COX-2mRNA水平的表达亦无明显浓度依赖性(P=0.051),而与用药时间显著相关(P＜0.0001).紫草素对滑膜成纤维细胞COX-2 mRNA表达的影响与塞来昔布相比,其抑制作用无明显差异.结论 紫草素可通过抑制COX-2 mRNA基因表达,减少炎症性细胞因子的产生而发挥其对类风湿关节炎的免疫抗炎作用,为开发紫草素成为COX-2抑制剂提供一定的实验基础.     

COX-2抑制剂对人红白血病HEL细胞增殖、凋亡及迁移的影响

目的 :探讨环氧化酶(cyclooxygenase-2,COX-2)抑制剂塞来昔布对人红白血病HEL细胞增殖、凋亡及迁移的影响及其作用机制。方法:不同浓度的塞来昔布处理HEL细胞,CCK-8法检测细胞增殖抑制率;Hoechst33342荧光染色检测细胞凋亡;Transwell小室检测细胞迁移率;RT-PCR检测COX-2及JAK2 mRNA水平;Western blot检测COX-2及p-JAK2蛋白表达。结果:塞来昔布能够时间和剂量依赖性抑制HEL细胞增殖,不同浓度(25、75、125μmol/L)的塞来昔布在48 h时对细胞生长抑制率分别为(9.96±0.82)%、(18.46±2.01)%、(21.36±2.48)%(P<0.05);Hoechst33342凋亡细胞染色显示125μmol/L塞来昔布处理HEL细胞后,凋亡细胞明显增多;细胞迁移实验结果显示75μmol/L塞来昔布处理细胞24 h后漏出细胞为(22.13±7.51)个,明显低于对照组(77.89±6.94)个,P<0.05;RT-PCR结果显示不同浓度塞来昔布处理HEL细胞48 h后COX-2 mRNA呈剂量依赖性减低,而对JAK2 m RNA无明显影响;Western blot结果显示塞来昔布处理HEL细胞COX-2蛋白表达明显减低(P<0.05),而对p-JAK2无明显影响。结论:塞来昔布能够抑制HEL细胞增殖,可能与抑制COX-2表达有关,而对JAK2信号通路无明显影响。     

塞来昔布对人子宫内膜腺癌细胞系HEC-1B增殖和凋亡的影响

目的探讨环氧化酶-2(COX-2)选择性抑制剂塞来昔布对人子宫内膜腺癌细胞系HEC-1B增殖及凋亡的影响及其作用机制。方法噻唑蓝(MTT)法检测不同浓度塞来昔布作用HEC-1B细胞后细胞增殖的变化;不同浓度塞来昔布作用HEC-1B细胞24 h后,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡;RT-PCR检测细胞中COX-2 mRNA的表达。结果MTT结果显示,塞来昔布对HEC-1B细胞的增殖抑制作用呈现时间依赖性和浓度依赖性;不同浓度塞来昔布作用HEC-1B细胞24 h后,流式细胞仪结果显示G0/G1期细胞增加,S期和G2/M细胞减少,细胞凋亡率增加,各药物组与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05);RT-PCR结果显示,在50~200μmol/L塞来昔布组,随着药物浓度的增加COX-2 mRNA的表达逐渐减弱(P<0.05)。结论塞来昔布能抑制HEC-1B细胞的增殖,并能改变细胞周期和诱导凋亡,其机制可能与下调细胞中COX-2 mRNA的表达有关。     

塞来昔布对乳腺癌细胞株MCF-7生长的影响

目的 检测乳腺癌细胞株MCF-7中COX-2的表达及其意义,观察选择性COX-2抑制剂塞来昔布对其生长的影响,寻求新的乳腺癌的治疗方法.方法 采用免疫组化、原位杂交的方法分别检测应用选择性COX-2抑制剂塞来昔布前、后.COX-2蛋白和mRNA的表达情况;采用MTT法研究塞来昔布对乳腺癌细胞株MCF-7生长的影响.结果 应用选择性COX-2抑制剂塞来昔布作用前、后,COX-2蛋白和mRNA在乳腺癌细胞株MCF-7细胞质中的表迭差异有显著性(P＜0.01);塞来昔布可明显抑制MCF-7细胞生长,且随药物浓度的增加和时间的延长,细胞凋亡数目逐渐增加,呈浓度和时间依赖性.结论 选择性COX-2抑制剂塞采昔布可抑制乳腺癌细胞增殖,并促进细胞凋亡,提示COX-2可作为乳腺癌治疗的新的分子靶点,塞来昔布可作为一种新的药物来治疗乳腺癌.     

塞来昔布对人子宫内膜腺癌细胞系HEC-1B增殖和凋亡的影响

目的 探讨环氧化酶-2(COX-2)选择性抑制剂塞来昔布对人子宫内膜腺癌细胞系HEC-1B增殖及凋亡的影响及其作用机制.方法 噻唑蓝(MTT)法检测不同浓度塞来昔布作用HEC-1B细胞后细胞增殖的变化;不同浓度塞来昔布作用HEC-1B细胞24 h后,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡;RT-PCR检测细胞中COX-2 mRNA的表达.结果 MTT结果显示,塞来昔布对HEC-1B细胞的增殖抑制作用呈现时间依赖性和浓度依赖性;不同浓度塞来昔布作用HEC-1B细胞24 h后,流式细胞仪结果显示G0/G1期细胞增加,S期和G2/M细胞减少,细胞凋亡率增加,各药物组与对照组相比差异均有统计学意义(P＜0.05);RT-PCR结果显示,在50 ～ 200 μmol/L塞来昔布组,随着药物浓度的增加COX-2 mRNA的表达逐渐减弱(P＜0.05).结论 塞来昔布能抑制HEC-1B细胞的增殖,并能改变细胞周期和诱导凋亡,其机制可能与下调细胞中COX-2 mRNA的表达有关.     

塞来昔布对人成骨细胞增殖的影响及其作用机制

目的：观察塞来昔布对人成骨细胞增殖的影响及其作用机制。方法将人成骨细胞分为3个组：空白对照组、IL-1刺激组(阴性对照组)、塞来昔布+ IL-1刺激组(药物干预组),用 RT-PCR 法和 Western blot 法分别检测三组成骨细胞环氧化酶-2( COX-2)、膜相关前列腺素 E2合成酶1(mPGES-1) mRNA 和蛋白的表达。 MTT 法检测塞来昔布对阴性对照组人成骨细胞增殖的影响。结果 RT-PCR 法和Western blot 法实验结果显示,同空白对照组相比,阴性对照组的人成骨细胞中 COX-2、mPGES-1 mRNA 和蛋白的表达均增加;同阴性对照组相比,药物干预组的 COX-2、mPGES-1 mRNA 和蛋白的表达均降低。塞来昔布对 IL-1刺激的人成骨细胞的生长具有抑制作用,呈现剂量依赖性,浓度越大,抑制作用越大;并且随着作用时间的延长,细胞的抑制作用增大。结论塞来昔布可以抑制炎性状态下人成骨细胞的生长,可能是通过调控 COX-2、mPGES-1 mRNA 和蛋白的表达,使其表达下调而发挥作用。     

COX-2抑制剂对成纤维细胞的增殖和细胞外基质产生的影响

目的: 探讨COX-2抑制剂对成纤维细胞增殖、活力及细胞外基质产生的影响,研究COX-2抑制剂抗肝纤维化的机制. 方法:采用体外培养的NIH/3T3成纤维细胞作为肝星状细胞(HSC)的替代模型,常规培养. COX-2特异性抑制剂塞来昔布(celecoxib)(终浓度为5,10,20,40 μmol/L)加入细胞中,用MTT法检测塞来昔布对NIH/3T3细胞的增殖,活力的影响;用放射免疫法测定培养上清细胞外基质(HA, LN, PCIII, IVC)的生成;用Western blot法检测NIH/3T3细胞上的COX-2的蛋白表达. 结果:NIH/3T3细胞的COX-2蛋白表达阳性,是塞来昔布作用靶点;塞来昔布在所用浓度下对细胞无明显毒性,但可显著抑制细胞增殖,呈浓度依赖性(P<0.01), 抑制HA及LN的合成. 5~40 μmoL/L对LN的抑制率分别为19.74%, 18.16%, 22.05%和24.65%;20~40 μmoL/L对HA的抑制率分别为17.53%和24.24%, HA及LN的含量与对照组比较差异显著(P<0.05). 结论:塞来昔布可显著抑制NIH/3T3细胞增殖和细胞外HA及LN的合成,在体外具有一定的抗肝纤维化作用.     

塞来昔布对肺癌细胞的增殖抑制、环氧化酶-2表达的影响和化疗敏感性

目的：探讨环氧化酶（COX）-2抑制剂塞来昔布（celecoxib）对肺癌A549细胞的增殖抑制、COX-2表达和化疗敏感性的影响。方法：用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法（MTY法）检测塞来昔布单药及联合顺铂（DDP）对COX-2高表达的人肺腺癌细胞A549的增殖抑制，流式细胞术分析塞来昔布联合DDP对细胞周期及细胞凋亡的影响,Westernblot法分析不同浓度塞来昔布干预后对A549细胞内COX-2蛋白表达的影响。结果：MTT法检测显示，塞来昔布（0-100μmol／L）对肺腺癌A549细胞的抑制作用呈时间依赖性、剂量依赖性效应。联合用药组与单药组相比差异有显著性（P〈0．001）。流式细胞术分析显示，塞来昔布12．5μmol／L与25μmol／L联合DDP0．5ms／L时，A549细胞明显阻滞于c,o-Gl期，S期细胞比例减少，联合用药组的凋亡率明显高于单药组（P〈0．001）。Westem blot法分析显示，塞来昔布浓度超过50μmol／L时，COX-2蛋白的表达受到了抑制。结论：塞来昔布的抗肿瘤作用机制涉及到COX．2依赖性途径。塞来昔布能增加DDP的化疗敏感性，塞来昔布与DDP联用对人肺腺癌A549细胞有明显协同抗肿瘤效应，该作用可能是通过增强对A549细胞的增殖抑制、诱导凋亡来实现的。     

塞来昔布对人结肠癌裸鼠移植瘤的抑制作用及其机制

目的 研究不同剂量环氧化酶-2(COX-2)抑制剂塞来昔布对人结肠癌裸鼠移植瘤生长的影响及机制.方法 将人结肠癌HT-29细胞注射于裸鼠背部皮下建立移植瘤模型,16 d后,将裸鼠以随机数字表法分为5组:对照组、塞来昔布1组(25 mg·kg-1·d-1)、塞来昔布2组(50 mg·kg-1·d-1)、塞来昔布3组(75 mg·kg-1·d-1)、塞来昔布4组(100 mg·kg-1·d-1),并给予相应剂量的塞来昔布.每周测量肿瘤体积,给药35 d后,处死裸鼠,切取移植瘤组织检测COX-2,survivin表达, VEGF mRNA表达和微血管密度(MVD).结果 塞来昔布1、2、3、4组的抑瘤率分别为34.94%、39.20%、53.50%、59.20%,与对照组比较移植瘤体积明显缩小(P<0.05).与对照组比较,塞来昔布各组COX-2、survivin的表达水平均明显降低(P<0.05),并且抑制程度呈药物剂量依赖性.低剂量(25 mg·kg-1·d-1)塞来昔布可明显抑制VEGF mRNA表达和结肠癌移植瘤微血管生成(P<0.05,vs对照组),其抑制作用并未随用药剂量的增加而增强.结论 不同剂量的塞来昔布均能明显抑制结肠癌移植瘤的生长,其抑制作用呈用药剂量依赖性,这种作用可能是通过抑制survivin的表达实现的.低剂量塞来昔布可抑制人结肠癌裸鼠移植瘤微血管生成,可能对防止肿瘤转移起到重要作用.     

塞来昔布对Lewis肺癌细胞增殖及移植瘤的抑制作用

目的:探讨选择性环氧化酶-2(COX-2)抑制剂塞来昔布对Lewis肺癌细胞株增殖及小鼠皮下移植瘤的影响。方法:常规培养Lewis肺癌细胞,实验分为对照组和塞来昔布用药组。MTT法检测细胞增殖水平,损伤修复实验检测细胞迁移能力;将Lewis肺癌细胞接种于12只C57BL/6小鼠皮下,对照组隔日腹腔注射生理盐水;塞来昔布用药组隔日腹腔注射塞来昔布30 mg/kg,24 d后处死,计算抑瘤率,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测移植瘤组织中VEGF mRNA表达水平,同时酶联免疫检测小鼠血清中MMP-9浓度。结果:塞来昔布对Lewis肺癌细胞增殖的抑制作用呈时间-剂量依赖性效应(P<0.05)。20μmol/L塞来昔布组细胞迁移速度(0.37±0.03)μm/h明显减慢,与对照组(3.17±0.22)μm/h相比具有显著性差异(P<0.01);在体实验显示,塞来昔布具有明显的抑制Lewis肺癌移植瘤增殖的作用,同时能抑制移植瘤组织中VEGF表达、降低血清MMP-9浓度。结论:塞来昔布可以显著抑制Lewis肺癌细胞的增殖与迁移能力,且对Lewis肺癌移植瘤有明显抑制作用。     

雷公藤内酯醇抑制滑膜成纤维细胞COX-2和iNOS表达

目的:研究雷公藤内酯醇对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞(RASF)增殖和表达环氧化酶-2(COX-2)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)及合成前列腺素E2(PGE2)、一氧化氮(NO)的影响,并探讨其机制.方法:分离培养人类风湿关节炎滑膜成纤维细胞,用TNFα(20 μg/L)刺激,同时加或不加雷公藤内酯醇(TP,0～100 μg/L).分别用3H-TdR法、竞争酶联免疫吸附试验(ELISA)和硝酸酶还原法、半定量逆转录-聚合酶联反应(RT-PCR)法、细胞酶免疫法及蛋白免疫印迹(Western-blot)法,检测滑膜细胞的增殖活性、细胞培养上清液中PGE2和NO的水平,滑膜细胞COX-2和iNOS mRNA表达水平及蛋白表达水平.同时提取各组细胞蛋白,测定其核转录因子NF-κB活性.结果:TP(>20 μg/L)能显著抑制TNFα诱导的RASF COX-2和iNOS表达,并明显减少PGE2和NO的生成,抑制作用与TP浓度呈明显相关性.同时观察到,TP对TNFα激活的RASF核转录因子NF-κB活性有明显的抑制作用(IC50≈35 μg/L),TP对RASF NF-κB活性的抑制程度与其抑制RASF COX-2和iNOS表达的效应相一致.实验未观察到TP对RASF增殖的影响.结论:TP可显著抑制TNFα刺激的RASF COX-2和iNOS的表达及其诱导产物PGE2和NO的生成,这种作用可能通过TP抑制RASF NF-κB的活性而实现.     

缺氧状态下人颞下颌关节滑膜成纤维细胞环氧合酶2的表达及意义

目的研究缺氧对人颞下颌关节滑膜成纤维细胞环氧合酶2(COX2)表达的影响,并探讨其在颞下颌关节紊乱病(TMD)中的生物学作用。方法应用逆转录聚合酶链反应(RTPCR)和Western印迹检测缺氧不同时间段滑膜成纤维细胞COX2基因与蛋白质表达水平。采用酶联免疫吸附实验(ELISA)以及明胶酶谱法分别测定缺氧组、缺氧与COX2特异性抑制剂塞来昔布二者联合作用组前列腺素E2(PGE2),金属基质蛋白酶2、9(MMP2、MMP9)分泌量的变化,以常氧组为对照。结果(1)RTPCR测定细胞缺氧4、8hCOX2mRNA分别为1.51±0.34和1.39±0.57,与常氧组0.65±0.24和0.71±0.15比较,差异有统计学意义(均P<0.05)。(2)Western印迹测定细胞COX2蛋白表达,缺氧6h为0.29±0.06,12h为0.51±0.09,24h为0.68±0.11,而常氧组检测不出COX2蛋白(均P<0.01),表明缺氧条件下,细胞COX2蛋白表达呈时间依赖性增加。(3)ELISA测定细胞缺氧12h,释放的PGE2(7.6ng/ml±0.8ng/ml)显著高于常氧组(2.5ng/ml±0.4ng/ml,P<0.01);联合药物处理组(4.3ng/ml±0.4ng/ml)也显著低于缺氧组(P<0.05),表明细胞PGE2释放受抑制。(4)明胶酶谱法测定细胞缺氧12h,分泌的MMP2、MMP9高于常氧组,但在药物联合作用下,分泌能力减弱。结论组织缺氧是导致TMD的一个重要因素;缺氧状况下,人滑膜成纤维细胞可能通过增加COX2的表达来影响缺氧所致颞下颌关节病变进程。     

Adiponectin receptor 1 mediates the difference in adiponectin-induced prostaglandin E2 production in rheumatoid arthritis and osteoarthritis synovial fibroblasts

Background  The synovial fluid concentrations of adiponectin are significantly higher in patients with rheumatoid arthritis (RA) than in patients with osteoarthritis (OA). Accumulating evidence suggests that adiponectin may be an inducer of inflammation in arthritis, but the mechanism remains unclear. The objectives of this study were to compare the expression levels of adiponectin receptors in rheumatoid arthritis synovial fibroblasts (RASF) and osteoarthritis synovial fibroblasts (OASF), evaluate the roles of adiponectin receptors in adiponectin-induced prostaglandin E₂ (PGE₂) production, and then investigate the effects of a nonsteroidal anti-inflammatory drug (NSAID) and a cyclooxygenase (COX)-2-selective inhibitor on adiponectin-induced PGE₂ release.

Methods  The expressions of adiponectin receptor 1 (AdipoR1) and AdipoR2 mRNA and protein in synovial fibroblasts from seven patients with RA and eight patients with OA undergoing total knee replacement were evaluated by real-time polymerase chain reaction, immunofluorescence microscopy and Western blotting analysis. Adiponectin-induced PGE₂ production was detected by enzyme-linked immunosorbent assay. RNA interference against the AdipoR1 and AdipoR2 genes was performed to investigate the effects of the adiponectin receptors on adiponectin-induced PGE₂ production in both RASF and OASF.

Results  AdipoR1 and AdipoR2 mRNA and protein were expressed by both RASF and OASF. Compared with OASF, RASF exhibited higher levels of AdipoR1, but there was no significant difference for AdipoR2. Adiponectin induced the production of PGE₂ by the synovial fibroblasts in a concentration-dependent manner, and this was more obvious in RASF. RNA interference showed that the difference may be mediated by the diverse distribution of AdipoR1. The adiponectin-induced PGE₂ production was efficiently relieved by the NSAID and COX-2-selective inhibitor.

Conclusion  The present findings suggest that AdipoR1 may mediate the difference in adiponectin-induced PGE₂ production in RASF and OASF.

     

雷公藤单体T4对IL—1刺激引起的类风湿患者关节滑膜成纤 …

目的 探讨雷公藤单体Ｔ４对经ＩＬ－１刺激的体外培养的类风湿关节炎（ＲＡ）患者的关节滑膜成纤维细胞增殖和产生ＩＬ－６的影响。方法 关节滑膜组织来自行关节置换术或滑膜切除术的类风湿患者。滑膜组织经体外消化使细胞分散后,传代培养,以培养３代后的滑膜成纤维细胞为对象,先给予ＩＬ－１刺激,再加入雷公藤Ｔ４单体。结果 Ｔ４可抑制由Ｉ－１刺激的滑膜成纤维增殖,但不影响ＩＬ－６的产生。结论 Ｔ４的上述作用可能是其     

Anti-inflammatory and upper gastrointestinal effects of celecoxib in rheumatoid arthritis: a randomized controlled trial

CONTEXT: In vitro studies have shown that celecoxib inhibits cyclooxygenase 2 (COX-2) but not COX-1, suggesting that this drug may have anti-inflammatory and analgesic activity without adverse upper gastrointestinal (GI) tract effects that result from COX-1 inhibition. OBJECTIVE: To test whether celecoxib has efficacy as an anti-inflammatory and analgesic with reduced GI tract mucosal damage compared with conventional nonsteroidal anti-inflammatory drugs in patients with rheumatoid arthritis. DESIGN: Randomized, multicenter, placebo-controlled, double-blind trial lasting 12 weeks, with follow-up at weeks 2, 6, and 12, from September 1996 thorugh February 1998. SETTING: Seventy-nine clinical sites in the United States and Canada. PATIENTS: A total of 1149 patients aged 18 years or older with symptomatic rheumatoid arthritis who met inclusion criteria were randomized; 688 (60%) of these completed the study. INTERVENTIONS: Patients were randomized to receive celecoxib, 100 mg, 200 mg, or 400 mg twice per day (n = 240, 235, and 218, respectively); naproxen, 500 mg twice per day (n = 225); or placebo (n = 231). MAIN OUTCOME MEASURES: Improvement in signs and symptoms of rheumatoid arthritis as assessed using standard measures of efficacy and GI tract safety as assessed by upper GI tract endoscopy before and after treatment, compared among treatment groups. RESULTS: All dosages of celecoxib and naproxen significantly improved the signs and symptoms of arthritis compared with placebo. Maximal anti-inflammatory and analgesic activity was evident within 2 weeks of initiating treatment and was sustained throughout the 12 weeks. The incidence of endoscopically determined gastroduodenal ulcers in placebo-treated patients was 4 (4%) of 99, and the incidences across all dosages of celecoxib were not significantly different (P>.40): 9 (6%) of 148 with 100 mg twice per day, 6 (4%) of 145 with 200 mg twice per day, and 8 (6%) of 130 with 400 mg twice per day. In contrast, the incidence with naproxen was 36 (26%) of 137, significantly greater than either placebo or celecoxib (P<.001). The overall incidences of GI tract adverse effects were 19% for placebo; 28%, 25%, and 26% for celecoxib 100 mg, 200 mg, and 400 mg twice per day, respectively; and 31 % for naproxen. CONCLUSION: In this study, all dosages of celecoxib were efficacious in the treatment of rheumatoid arthritis and did not affect COX-1 activity in the GI tract mucosa as evidenced by less frequent incidence of endoscopic ulcers compared with naproxen.     

RNA干扰对人环氧化酶-2合成以及对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞生物学活性的影响

目的分析siRNA对前列腺素E2（PGE2）、白介素-1β（IL-1β）、IL-6、肿瘤坏死因子（TNF—α）和血管内皮生长因子（VEGF）合成的影响。方法设计4条（1^#-4^#）环氧化酶-2（hCOX-2）mRNA的小分子干扰RNA（siRNA）,设立空白阴性（CTL）和1条随机序列（NC）对照。应用LipofectAMINE 2000将siRNA转染入滑膜成纤维细胞（RASF）,4h后,再加入100nmol/L的佛波酯。应用RT-PCR和Western印迹分别检测hCOX-2 mRNA和蛋白表达水平。采用ELISA法检测各组上清液中致炎因子水平。结果转染48h后,NC、1^#-4^#siRNA组与CTL组mRNA条带吸光度比值分别为0．72、0,3、0．25、0．4、0．04。转染36和48h后,各组与CTL组hCOX-2蛋白吸光度比值分别为1．04、0、52、0．39、0．9、0和1．05、0．52、0．51、0．9、0．15;4^# siRNA组上清液PGE2、IL-1β、TNF—α、IL-6和VEGF水平较其他各组为低,且与其他处理组相比死亡细胞率差异无统计学意义（P均〉0．05）。结论4^#iRNA组能有效抑制COX-2mRNA和蛋白表达,其上清液中致炎因子水平最低,死亡细胞较苴他各组无明显增加．     

雷公藤单体T4对IL-1刺激引起的类风湿患者关节滑膜成纤维细胞增殖和产生IL-6的影响

目的　探讨雷公藤单体 T4对经 IL- 1刺激的体外培养的类风湿关节炎 (RA)患者的关节滑膜成纤维细胞增殖和产生 IL- 6的影响。方法　关节滑膜组织来自行关节置换术或滑膜切除术的类风湿患者。滑膜组织经体外消化使细胞分散后 ,传代培养。以培养 3代后的滑膜成纤维细胞为对象 ,先给予 IL- 1刺激 ,再加入雷公藤 T4单体。结果　 T4可抑制由 IL- 1刺激的滑膜成纤维增殖 ,但不影响 IL- 6的产生。结论　 T4的上述作用可能是其治疗RA的机制之一 ,本研究结果为 T4早日应用于临床治疗 RA提供了一定的理论依据     

电针治疗CIA大鼠慢性炎症及对COX-2的选择性抑制作用

[目的]探讨电针的抗慢性炎症作用和对环氧合酶的干预作用,明确电针抗慢性炎症疼痛的部分关键机理及优势。[方法]采用大鼠胶原诱导性关节炎(CIA)为慢性炎症动物模型,以关节炎指数、炎症局部肿胀容积和PGE2含量等为指标,观察电针刺激大鼠相当于“足三里”穴对炎症大鼠的治疗作用,并与传统非甾体抗炎药消炎痛(Indomethacin)、选择性COX-2抑制剂罗非昔布(Rofecoxib)治疗进行疗效比较。在此基础上,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测CIA模型大鼠及各治疗组大鼠膝关节滑膜组织和胃粘膜中COX-1、COX-2mRNA表达变化。[结果]电针可有效抑制CIA大鼠关节炎指数、足跖肿胀度以及血清和炎症局部组织中PGE2含量,控制病情的进一步发展。电针对COX-2mRNA表达有选择性抑制作用,对胃粘膜COX-1表达无影响;消炎痛和罗非昔布在抗炎过程中,既抑制关节滑膜组织中COX-2mRNA表达,对胃粘膜COX-1表达也进行抑制。[结论]电针对胶原性关节炎大鼠慢性炎症具有良好的抗炎效应,其抗慢性炎症作用途径可能通过对COX-2进行选择性抑制;电针抗炎无胃肠道副反应。     

类风关1号对佐剂关节炎大鼠滑膜VEGF和COX-2表达的影响

[目的]探讨类风关1号对佐剂关节炎(AA)大鼠滑膜血管内皮细胞生长因子(VEGF)和环氧化酶2(COX-2)表达的影响。[方法]建立AA大鼠模型,并给予类风关1号灌胃4周,以免疫组化法检测滑膜组织中VEGF和COX-2的表达。[结果]灌胃4周后类风关1号组大鼠膝关节滑膜VEGF和COX-2表达水平明显降低,与AA模型组及雷公藤多苷组相比差异意义有显著性(P<0.01)。[结论]类风关1号可明显抑制滑膜组织中VEGF和COX-2的表达,减轻关节病理性血管增生。     

Celecoxib对羟基脲抗K562细胞增殖作用的增敏效应和机制

目的：确定celecoxib对羟基脲的抗K562细胞增殖作用是否存在增敏效应并探讨其分子机制。方法：用低剂量celecoxib(40 μmol/L)、羟基脲(10 mmol/L)以及二者合用分别干预K562细胞,用MTT试验、DNA裂解片段分析、Western印迹及RT PCR技术分析药物对K562细胞增殖、凋亡的影响和机制。结果：40 μmol/L celecoxib与10 mmol/L羟基脲共同干预K562细胞,较之单用低剂量的Celecoxib或羟基脲抑制K562细胞增殖活力和诱导细胞凋亡效应更明显。Celecoxib联合羟基脲可明显抑制K562细胞环氧化酶 2（COX 2）蛋白和 mRNA表达。结论：Celecoxib对羟基脲的抗K562细胞增殖作用具有增敏效应,其机制可能与药物下调K562细胞COX 2表达有关。