血清25-羟维生素D与精液质量相关性研究

目的探讨血清25-羟维生素D(25-OHD)水平与精液参数之间的关系。方法测定2 023例行体外受精-胚胎移植助孕的健康男性血清25-OHD水平,按其水平分为5组:A组109例,25-OHD 50 nmol/L; B组485例,50 nmol/L 25-OHD≤70 nmol/L; C组664例,70 nmol/L 25-OHD≤90 nmol/L; D组434例,90 nmol/L 25-OHD≤110 nmol/L; E组331例,25-OHD≥110 nmol/L。禁欲3～7 d后手淫法获取精液标本,应用精子质量分析仪(CASA)检测精子,按《WHO人类精液检查与处理实验手册》第5版要求检测精子形态。比较各组年龄、精子浓度、前向运动精子总数、存活率、精子正常形态百分率。结果各组年龄、精子浓度、前向运动精子总数、存活率、精子正常形态百分率差异无统计学意义(P均 0. 05)。结论在柳州地区,血清25-OHD水平可能与精液质量无关。     

黄芩苷调节IL-33/ST2信号通路对糖尿病视网膜病变大鼠视网膜新生血管生成的影响北大核心

目的探讨黄芩苷调节白细胞介素(IL)-33/基质裂解素2(ST2)信号通路对糖尿病视网膜病变(DR)大鼠视网膜新生血管生成的影响。方法SD大鼠随机分为对照组(正常大鼠,灌胃生理盐水)、DR模型组(大鼠建立DR模型后,灌胃生理盐水)和黄芩苷低、中、高剂量组(大鼠建立DR模型后,分别灌胃75 mg·kg^(-1)、150 mg·kg^(-1)、300 mg·kg^(-1)黄芩苷),所有大鼠均以右眼为实验眼。FFA检查各组大鼠视网膜血管生成情况,ELISA检测各组大鼠血清血管内皮生长因子(VEGF)、Ang-1、IL-6、IL-33、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,Western blot检测各组大鼠视网膜组织中IL-33、ST2蛋白表达水平。结果与对照组相比,DR模型组大鼠血清VEGF、Ang-1、IL-6、IL-33、TNF-α水平及视网膜组织中IL-33、ST2蛋白表达水平均显著升高(均为P<0.05),右眼眼底新生血管增多,荧光素渗漏明显;与DR模型组相比,黄芩苷低、中、高剂量组大鼠血清VEGF、Ang-1、IL-6、IL-33、TNF-α水平及视网膜组织中IL-33、ST2蛋白表达水平均显著降低(均为P<0.05),右眼视网膜新生血管生成减少,荧光素渗漏减少;随着黄芩苷剂量的升高,大鼠血清VEGF、Ang-1、IL-6、IL-33、TNF-α水平及视网膜组织中IL-33、ST2蛋白表达水平均逐渐降低(均为P<0.05)。结论黄芩苷能抑制IL-33/ST2信号通路激活,减轻DR大鼠体内炎症水平,减少视网膜新生血管生成。     

外泌体miRNA在心血管疾病中作用的研究进展

心血管疾病是有着高患病率和高死亡率,对成年人特别是中老年人身体健康有着严重威胁的常见疾病.每年因心血管疾病死亡的人口占全球死亡总人数的30 ％以上,目前已成为临床着重关注研究的领域.有研究表明心血管疾病与微小RNA(microR-NA,miRNA)的调节关系紧密.近年来更是有研究证实了miRNA作为外泌体细胞间信息传递过程中重要的信号分子,参与相关信号通路的调节,并涉及心血管疾病的生理病理机制[1 -2].     

外泌体miRNA在心血管疾病中作用的研究进展

<正>心血管疾病有着高患病率和高死亡率,是对成年人特别是中老年人身体健康产生严重威胁的常见疾病。每年因心血管疾病死亡的人口占全球死亡总人数的30%以上,目前已成为临床重点关注研究的领域。有研究表明心血管疾病与微小RNA（microRNA,miRNA）的调节关系紧密。近年来更是有研究证实了miRNA作为外泌体细胞间信息传递过程中重要的信号分子,参与相关信号通路的调节,并涉及心血管疾病的生理病理机制[1,2]。?     

腹腔镜全直肠系膜切除术治疗低位直肠癌的疗效观察

目的探讨腹腔镜全直肠系膜切除术(TME)治疗低位、超低位直肠癌的临床疗效。方法将86例低位直肠癌患者随机分为观察组和对照组,每组各43例,观察组患者行腹腔镜TME,对照组患者行开腹TME,术后观察两组患者的手术相关指标、肿瘤根治性指标、术后恢复指标、费用、术后并发症。结果观察组术中出血量少于对照组(P0.05);观察组的手术时间、术后肛门排气时间、留置导尿时间、术后住院时间均短于对照组(P0.05);观察组术后的切口感染、肠粘连、尿潴留明显少于对照组(P0.05);观察组的肿瘤大小、切除标本长度、吻合口瘘发生率、清扫淋巴结数目、肿瘤远端切缘长度及肿瘤分期等方面与对照组比较差异无显著统计学意义(P0.05);但观察组的手术费用、住院总费用高于对照组(P0.05)。结论腹腔镜TME治疗低位、超低位直肠癌疗效确切,具有创伤小、疼痛轻、出血量少、肛门恢复排气时间快、术后并发症发生率低、疗程短及预后好等优点,整体上较为安全可靠,值得临床广泛应用。     

银杏黄酮对骨骼肌抗疲劳能力的影响

目的:分析银杏黄酮对大鼠背斜方肌微动脉血液循环、腓肠肌收缩能力及小鼠运动能力的影响。方法:实验于2004-02在广西师范大学体育学院完成。银杏黄酮由桂林思特新技术公司天然植物制品厂生产,银杏黄酮含量24%,银杏内酯含量6%,符合国际标准。①大鼠背斜方肌微动脉血液循环的观察:选用SD大鼠40只,随机数字表法分为空白对照组、银杏黄酮2.0,3.0,4.0g/L浓度组,10只/组。各组大鼠均制备游离肌肉标本,游离面固定于特制灌流盒上,用林格氏液灌流,连续观察管径为15～20μm的横向微动脉30min,分别于观察处滴注0.1g/L的去甲肾上腺素障碍液50μL。当血管出现收缩时,银杏黄酮2.0,3.0,4.0g/L浓度组分别滴注对应的银杏黄酮溶液1mL,空白对照组则滴注等量的生理盐水。测量微动脉血管口径的变化以及血管流态的变化。②大鼠腓肠肌肌肉收缩的观察:所选动物的基本情况及分组与背斜方肌微动脉血液循环观察实验相同,共36只大鼠,9只/组。麻醉后于腓肠肌跟腱处结扎剪断,将悬浮电极尖端插入腓肠肌内,通过生理刺激器以1次/s、电压0.8V分别给予各组腓肠肌标本以连续刺激,至肌肉停止收缩时停止刺激,作为肌肉疲劳时间。然后银杏黄酮2.0,3.0,4.0g/L浓度组分别注射相应浓度的银杏黄酮溶液1mL,空白对照组注射等量生理盐水。5min后继续给予刺激,记录肌肉收缩的情况及肌肉疲劳后恢复正常状态的时间。③运动实验:选用健康雄性昆明种小白鼠60只,随机数字表法分为安静对照组、安静服药组、单纯训练组、服药训练组,15只/组。安静服药组、服药训练组每天早晚各灌胃给药1次,剂量为2.4mL/kg体质量;安静对照组、单纯训练组每天灌予等量的白开水。单纯训练组、服药训练组小鼠每天在规格为100cm×50cm×80cm的透明玻璃泳池内进行1次尾部负重游泳训练,30min/次,6d为1个周期,然后休息1d,共训练6周;安静对照组、安静服药组小鼠每天进行15min的无负重游泳适应性训练。各组小鼠第5周进行爬绳实验,测量静止耐力。第6周进行力竭性游泳实验。结果:背斜方肌微动脉血液循环的观察实验选用SD大鼠40只,腓肠肌肌肉收缩的观察实验选用SD大鼠36只,运动实验选用昆明种小白鼠60只,3个实验各自独立,所有动物均进入结果分析。①银杏黄酮对微动脉血管口径的影响:与空白对照组比较,而给药5min后,银杏黄酮各浓度组微动脉血管口径均明显增大(P<0.05或0.01)。②银杏黄酮对微动脉血管流态的影响:与空白对照组比较,银杏黄酮各浓度组微动脉血管流态3级评定、血流停止时间和血流恢复正常条数均有明显差异(P<0.05或0.01)。③银杏黄酮对腓肠肌肉收缩的影响:与空白对照组比较,银杏黄酮各浓度组肌肉疲劳时间无明显变化(P>0.05),但肌肉疲劳恢复时间均明显降低(P<0.05或0.01)。④各组小鼠爬绳及负重游泳能力的比较:安静服药组小鼠的爬绳静止时间明显长于安静对照组(P<0.05),服药训练组小鼠的负重游泳时间显著强于单纯训练组(P<0.01)。结论:银杏黄酮具有促进血液循环、提高新陈代谢速率和缩短肌肉疲劳的恢复等功效,在运动训练的协同作用下,能显著提高小鼠的运动能力,延缓疲劳的发生。     

稳定表达EGFP-LC3蛋白SH-SY5Y细胞系的构建

目的:建立稳定表达微管相关蛋白1轻链3(microtubule associated protein 1 light chain 3,LC3)与绿色荧光蛋白(EGFP)形成的融合蛋白(EGFP-LC3)的人神经母细胞瘤株SH-SY5 Y细胞系,验证EGFP-LC3点状聚集物能够实时直观地反映自噬小体和自噬流.方法:以人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y细胞)的cDNA为模板,克隆LC3,并连接EGFP绿色荧光蛋白.将EGFP-LC3连接入慢病毒载体GV348中,构建慢病毒表达载体EGFP-LC3-GV348.慢病毒转染人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5 Y细胞),使用3μg/mL嘌呤霉素筛选并处理细胞1月,筛选得到EGFP-LC3稳转系.诱导自噬后,用共聚焦显微镜观察LC3荧光斑点并定量分析.Western blot检测目的蛋白表达情况.结果:经酶切证实,EGFP-LC3-GV348慢病毒表达载体构建正确.在激光共聚焦显微镜下,可以观察到细胞内的绿色荧光EGFP代表的自噬小体,活体染料LysoTracker Red DND-99将溶酶体染成红色荧光,红色荧光与绿色荧光重叠代表自噬溶酶体.无血清诱导自噬后,自噬小体(绿色荧光斑点)明显增加,差异有统计学意义(P<0.001).Western Blot免疫印迹可见EGFP-LC3融合蛋白表达条带.结论:成功构建了稳定表达EGFP-LC3的SH-SY5 Y细胞系,EGFP-LC3荧光斑点可以直观实时反映自噬囊泡,为进一步探讨神经退行性疾病的自噬机制提供了实验基础.     

FGF2的生物信息学分析及其在低氧神经保护中的作用研究*

目的: 观察FGF2在低氧及低氧预适应条件下小鼠海马神经元细胞中的表达变化,探究FGF2是否参与低氧耐受神经保护作用。方法: 使用生物信息学方法进行搜索和鉴定FGF2基因家族成员。在细胞层面建立低氧和低氧预适应模型,通过Western-blot、qRT-PCR检测细胞中FGF2表达情况。结果: FGFs家族分为7个亚家族,其中FGF2含有一个由17个氨基酸组成的FGF受体结合域,能够与特定的FGF受体结合进行信号的转导。在细胞层面,相比于空白对照组(C),低氧组(H)和低氧预适应组(HPC)FGF2在mRNA水平和蛋白水平的表达均有所下降(P＜0.05),而与H组相比,HPC组FGF2 mRNA水平和蛋白水平的表达有所升高(P＜0.05)。结论: FGF参与低氧预适应的神经保护作用。     

外侧延长切口切开复位跟骨解剖钛板治疗跟骨骨折32例

目的探讨外侧延长切口切开复位跟骨解剖钛板治疗跟骨骨折的临床效果。方法对32例36足Sanders Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型跟骨骨折患者采用外侧延长切口切开复位跟骨解剖钛板治疗,采用Maryland足部评分系统评价术后功能,分析其临床疗效。结果随访时间12~24个月,平均15个月,其中优27足,良7足,可2例。术后1例原有糖尿病患者出现切口延迟愈合,1例切口转角处皮缘部分坏死,经换药5周后切口愈合。1例出现距下关节炎,无1例出现腓肠神经损伤。所有患者随访时骨折均正常愈合。结论外侧延长切口切开复位跟骨解剖钛板是治疗跟骨骨折一种有效的治疗方法。