核因子NF—κB、TNF-α在不同程度胆源性疾病中的作用

目的本实验通过研究急性化脓性胆管炎、胆源性急性胰腺炎和胆结石患者血清（血液）、胆汁中TNF-α的含量、NF—κB mRNA的表达的意义及相互关系，来探讨二者在不同程度胆源性疾病中的作用。方法实验分为急性梗阻性化脓胆管炎组（Acute Obstructive Suppurative Cholangitis，AOSC）10例，胆源性急性胰腺炎组（Biliary Acute Pancreatitis，BAP）15例，胆结石组（G）12例；采用ELISA法测定血液及胆汁中TNF—α的含量，采用RTPCR法测定血液及胆汁中NF—κB mRNA的表达。结果急性梗阻性化脓胆管炎组血清TNF-α含量为192．25±26．70Pg．ml^-1，胆汁中TNF—α含量为136．18±25．98Pg．ml^-1；胆源性急性胰腺炎组血清中TNF-α含量为135．16±28．02Pg．ml^-1，胆汁中含量为89．40±12．69Pg．ml^-1；胆结石组血清TNF—α含量为87．66±11．02Pg．ml^-1，胆汁中TNF—α含量为64．22±14．06Pg．ml^-1。急性梗阻性化脓胆管炎血液中NF—κBm RNA的光密度比值为2．64±0．64，胆汁中NF—κBm RNA的光密度比值为1．31±0．24；胆源性急性胰腺炎组血液中NF—κBm RNA的光密度比值为2．11±0．54，胆汁中NF-κB mRNA的光密度比值为1．05±0．21；胆结石组血NF-κB mRNA的光密度比值为0．94±0．31，胆汁中NF—κB mRNA的光密度比值为0．51±0．26。胆源性胰腺炎组中TNF—α的含量及NF-κB mRNA的表达水平均高于胆结石组（P〈0．01），而低于急性化脓胆管炎组（P〈0．01）。结论（1）胆源性胰腺炎组、急性化脓性胆管炎组血及胆汁中TNF—α均有升高；（2）胆源性胰腺炎组、急性化脓性胆管炎组血及胆汁中NF—κB mRNA均有表达；（3）炎性介质TNF-α及NF—κB可能参与了胆源性胰腺炎及急性化脓性胆管炎的病理生理过程。     

胆囊胆固醇结石仓鼠胆囊平滑肌及Oddi括约肌中Caveolins、P450arom及黏蛋白的表达研究

目的探讨胆囊胆固醇结石仓鼠胆囊平滑肌及Oddi括约肌中Caveolins、P450arom及黏蛋白的表达情况。方法将100只仓鼠随机分为A组（常规饮食组）20只、B组（致石饮食2周组）20只、C组（致石饮食4周组）20只、D组（致石饮食6周组）20只和E组（致石饮食8周组）20只,检测5组仓鼠的胆囊平滑肌及Oddi括约肌Caveolin1、Caveolin3、P450arom及黏蛋白1、黏蛋白2、黏蛋白3的阳性表达率并进行比较。结果 E组胆囊平滑肌及Oddi括约肌中Caveolin1、Caveolin3、P450arom及黏蛋白1、黏蛋白2的阳性表达率均高于其他4组,D组高于A、B、C组,C组高于A、B组,差异均有统计学意义（P〈0.05）。E组胆囊平滑肌及Oddi括约肌中黏蛋白3阳性表达率低于其他4组,D组低于A、B、C组,C组低于A、B组,差异均有统计学意义（P〈0.05）。上述指标均与胆囊胆固醇结石有明显的相关性（均P〈0.05）。结论胆囊胆固醇结石仓鼠胆囊平滑肌及Oddi括约肌中Caveolins、P450arom及黏蛋白的表达呈现异常,对了解胆囊胆固醇结石的形成有一定意义。     

钙调神经磷酸酶在兔胆囊切除术后早期Oddi括约肌改变中的作用

目的观察胆囊切除术后早期Oddi括约肌超微结构改变、肌球蛋白重链（MHC）及钙调神经磷酸酶（CaN）催化亚单位α、β（CnAα、CnAβ）2种亚型的表达变化,探讨胆囊切除术后Oddi括约肌的改变及其可能的机制。方法52只新西兰大白兔,分为4组,A、D组各14只,B、C组各12只;A组仅行开腹术暴露胆囊,术后4周取Oddi括约肌标本;B、C、D组行胆囊切除术,分别于术后2、4、8周切取标本。A、D组各取2只行透射电镜检测。余行RT-PCR、Western blot检测CnAα、CnAβ mRNA和蛋白表达变化,Western blot检测MHC蛋白表达变化。结果①Western blot检测到术后2周、4周、8周MHC蛋白表达逐渐增加（P〈0.01）;透射电镜示术后8周平滑肌细胞内密体增多。②RT-PCR检测到术后4周、8周与对照组比CnAβ mRNA表达增加,8周比4周降低（P〈0.01）。③Western blot检测到术后2周、4周、8周CnAβ蛋白表达逐渐增加（P〈0.01）。④CnAα mRNA及蛋白表达均无显著变化。结论兔胆囊切除术可致Oddi括约肌组织超微结构发生改变、肌球蛋白重链表达增加;肌球蛋白重链表达增加可能与CnAβ表达增高有关,这可能是Oddi括约肌功能紊乱（SOD）多发生于胆囊切除术后患者的分子机制之一,可能在胆囊切除术后SOD的发病过程中起一定的作用。     

调宁蛋白在胆固醇结石形成中的表达及养肝柔肝中药的干预作用

目的：观察实验豚鼠胆囊组织调宁蛋白（Cap）表达水平的变化．探讨养肝柔肝中药防治胆石病的作用机制。方法：将受试豚鼠随机分为4组，即正常组、模型组、养肝柔肝中药组（中药组）、熊去氧胆酸西药组（西药组）。后3组采用高胆固醇致石食饵诱发法建立豚鼠胆结石动物模型，其中中药组、西药组在造模的同时分别给予相应药物干预；连续7周后，分别对实验豚鼠胆结石生成情况，胆囊组织Cap蛋白的表达进行观察。结果：养肝柔肝中药组能有效防止胆结石的生成，与模型组比较有显著性差异（P〈0．01），并且其效果优于熊去氧胆酸西药组（P〈0．05）。模型组动物胆囊组织CaD蛋白表达水平较正常组显著升高（P〈0．01）；养肝柔肝中药组和熊去氧胆酸西药组胆囊组织Cap蛋白表达水平虽均高于正常组（分别为P〈0．05，P〈0．01），但较模型组明显降低（均P〈0．01），且养肝柔肝中药组Cap蛋白表达水平较低，但与熊去氧胆酸西药组无显著性差异（P〉0．05）。结论：养肝柔肝中药能显著降低胆结石的形成，其作用机制可能与下调胆囊平滑肌组织Cap蛋白的水平，提高胆囊平滑肌收缩能力有关。     

孕期膳食补锌上向调控胎盘及母鼠小肠IGF-Ⅱ mRNA的表达

目的探讨孕期膳食补锌对胎盘及母鼠小肠中IGF—Ⅱ mRNA表达的影响。方法18只SD孕鼠随机分为正常对照组（ZC）和补锌组（ZS）。两组进食常规饲料，ZC组（n=9）饮用去离子水，ZS组（n=9）饮用补锌水（含锌1．26mmol／L）。分别于孕9．5d和孕17．5d时取胎盘和小肠。以半定量聚合酶链反应（RT-PCR）测定胎盘和母鼠小肠中IGF-Ⅱ mRNA的相对表达量。结果ZC组孕17．5d时，胎盘IGF-Ⅱ mRNA的相对表达量明显高于孕9．5d（P〈0．05），呈现出发育性增高。孕9．5d和孕17．5d时，ZS组胎盘及小肠IGF-Ⅱ mRNA相对表达量均显著高于ZC组（P〈0．05）。结论妊娠不同时期膳食锌摄入水平增高显著上向调控胎盘和母体小肠中IGF-Ⅱ mRNA的表达。     

宫内感染致胎鼠脑TNF-α表达及脑细胞凋亡变化的研究

目的：研究孕鼠腹腔注射内毒素（LPS）胎鼠脑肿瘤坏死因子α（TNF-α）的表达及胎鼠脑细胞凋亡的变化。方法：妊娠18d孕鼠随机分为对照组、LPS组，分别腹腔注射盐水和LPS。免疫组化法及RT-PCR法观察不同剂量、不同时间点的LPS腹腔注射后，两组胎鼠脑TNF-α的表达；采用原位末端标记法测定孕鼠腹腔注射LPS 0．4mg／kg后48h胎鼠脑细胞凋亡的变化。结果：胎鼠脑组织中TNF-α蛋白水平及mRNA表达，LPS组均显著高于对照组（P〈0．05），随着LPS剂量的增大，差异更为显著（P〈0．01）；LPS以4mg／kg腹腔注射后，胎鼠脑组织的TNF-α蛋白含量及mRNA表达增加，1h即显著高于对照组（P〈0．01），4h达高峰，至8h仍显著高于对照组（P〈0．05）；LPS组注药后48h胎鼠脑海马区见大量棕褐色核染的凋亡细胞。与对照组比较差异显著（P〈0．01）。结论：TNF-α可能是LPS致胎鼠脑损伤的关键的细胞因子。     

孕期膳食锌缺乏下向调控胎盘IGF-Ⅱ和GLUT-1 mRNA的表达

目的探讨孕期膳食锌缺乏对胎盘IGF-Ⅱ和GLUT-1 mRNA表达的影响。方法36只SD孕鼠随机分为喂饲AIN93G配方饲料的正常对照组（ZC）、锌缺乏组（ZD）、配对喂养组（PF）以及国产商业饲料对照组（GC）。分别于孕9．5d、孕13．5d和孕17．5d取母鼠血清、肝脏及胎盘，以半定量聚合酶链反应测定胎盘中IGF-Ⅱ和GLUT-1 mRNA以及肝脏MT-1 mRNA的相对表达量，以原子吸收法测定血清锌浓度。结果孕9．5d和孕13．5d时，ZD组血清锌浓度显著低于PF组、ZC组和GC组。孕17．5d时，ZD组血清锌与PF组和ZC组相比无统计学差异。孕9．5d和孕13．5d时，ZD组母鼠肝脏MT-1 mRNA的相对表达量均显著低于PF组、ZC组和GC组。孕9．5d、孕13．5d和孕17．5d时，ZD组胎盘IGF—Ⅱ和GLUT-1 mRNA相对表达量均显著低于ZC组、PF组和GC组。胎盘GLUT-1 mRNA的表达呈现出随着孕龄延长而增高的趋势。孕17．5d时，PF组GLUT-1 mRNA的表达量与ZC组（P〈0．05）和GC组（P〈0．01）相比差异显著。结论孕期膳食锌缺乏显著下向调控胎盘IGF-Ⅱ和GLUT-1 mRNA的表达。     

胆汁中各主要有机成分在胆囊结石形成过程中的作用

目的：进一步明确胆汁各主要有机成分在胆囊结石形成过程中的作用．方法：分别用正常饲料、致石饲料饲养对照组和致石组豚鼠．在饲养过程中的不同阶段动态观测豚鼠胆囊胆汁中总胆固醇、粘蛋白、总磷脂和总胆汁酸含量的变化，并在偏光显镜下观察各阶段成石情况．结果：对照组豚鼠胆囊胆汁中的总胆固醇、粘蛋白、总磷脂和总胆汁酸的含量在整个饲养过程中基本保持不变，且胆汁中未见有形结石晶体出现；而致石组豚鼠胆囊胆汁中总胆固醇和粘蛋白含量逐渐升高，总磷脂和总胆汁酸含量却逐渐降低，与对照组相比，饲养10d后就有显著性差异（P〈0．02，P总胆崮醇〈0．001，P粘蛋白〈0．02），饲养25d后就有非常显著性差异（P〈0．001），且随着饲养天数的增加，致石组豚鼠胆汁中结晶物增多变大并最终形成大量微结石晶体．结论：在胆囊结石形成过程中胆固醇起到了成核的作用，粘蛋白起到了促成核的作用，而磷脂和胆汁酸起到的则是抗成核作用．     

pcDNA3-KiSS-1质粒致孕鼠妊娠高血压综合征样病变的实验研究

目的探讨肿瘤转移抑制基因KiSS-1表达增高抑制滋乔细胞绽删及具征大鼠妊娠鬲血压综合征（妊高征）发病中的作用。方法妊娠Wistar大鼠随机分为A、B、C三组，每组10只，A组（实验组）于妊娠0．5、7．5、14．5d腹腔注射脂质体包埋的pcDNA3-KiSS-1质粒，B组（空质粒转染组）于同期腹腔注射脂质体包埋的pcDNA3空质粒，C组（对照组）同期腹腔注射生理盐水，观测血压、尿蛋白。于妊娠21．5d剖宫产，计数幼仔数量，并分别称取幼仔体重及胎盘重量，RT-PCR检测胎盘KiSS-1mRNA、基质金属蛋白酶9（MMP-9）mRNA表达，并取大鼠胎盘、胎盘附着处子宫壁、肾、心、肝等脏器进行病理检查。结果（1）A组妊娠大鼠于妊娠15．5d起血压增高（P〈0．05），并于妊娠17．5d及19．5d最为明显（P〈0．01），与B组、C组同期相比差异有统计学意义（P〈0．01）；（2）A组大鼠于妊娠14．5d出现尿蛋白升高并持续至分娩，显著高于B组及C组（P〈0．01）；（3）A组孕鼠所产仔鼠总数及体重均较B组及C组降低（P〈0．05），并且A组中有2例剖宫产时发现有流产胚胎；（4）经RT—PCR检测到A组10例大鼠中有7例其胎盘KiSS-1 mRNA表达阳性，而B组及C组均为阴性，A组胎盘MMP-9 mRNA表达显著低于B组及C组（P〈0．05）：（5）病理学检查结果提示A组大鼠肾小球肿胀，血管壁内皮细胞增生，肾小囊腔缩小，肾小动脉管壁增厚，管腔狭窄。三组胎盘、胎盘附着处子宫壁、心、肝等脏器未见明显差别。结论脂质体包埋的pcDNA3-KiSS-1质粒经整合至妊娠Wistar大鼠可在胎盘表达，出现血压升高、尿蛋白增高等妊高征样变化，并且胎盘MMP-9mRNA表达下降，提示KiSS-1基因表达增高导致滋养细胞浸润不足影响胎盘血管的生理性重铸，在妊高征发病中起重要作用。     

Syncytin及其受体ASCT2在子(癎)前期胎盘的表达以及缺氧对其表达的影响

目的研究syncytin及其受体ASCT2在胎盘发育、子癎前期胎盘中的表达以及缺氧对两者表达的影响。方法实时PCR检测syncytin及ASCT2 mRNA的表达。比较25例正常妊娠胎盘（分妊娠7～12周、30～36周和37～40周三组）syncytin和ASCT2表达的不同；比较8例子癎前期胎盘与正常妊娠胎盘syncytin及ASCT2表达的不同；比较正常和缺氧条件下forskolin诱导BeWo细胞分化成合体滋养细胞时，syncytin及ASCT2表达的变化。结果①与妊娠7～12周相比，syncytin mRNA的表达在妊娠30～36周显著增加（P〈0．05），妊娠37周后减少，但仍高于妊娠7～12周（P〈0．05），ASCT2 mRNA妊娠30～36周起减少（P〈0．05），以后一直维持较低水平。②将对照组胎盘和子癎前期组胎盘孕周匹配后比较发现，子痴前期组胎盘syncytin mRNA表达减少（P〈0．01），ASCT2mRNA表达无明显变化。③BeWo细胞分化成合体滋养细胞时，伴syncy—tinmRNA表达增加和AScT2mRNA表达降低（P〈0．05），缺氧抑制syncytin mRNA的表达（P〈0．05），对ASCT2 mRNA的表达无明显影响。结论Syncytin及其受体ASCT2在胎盘的表达与孕周有关，并参与合体滋养细胞形成的调控，子癎前期合体滋养细胞异常可能与缺氧导致syncytin表达异常有关。     

小儿耳鼻喉手术麻醉的新进展

因小儿耳鼻喉手术刺激强,时间短,且常与气道相关,故麻醉的控制有一定难度,现对国内外现阶段小儿耳鼻喉手术麻醉的改良方法及新观点进行评述,以期对临床工作有较好的指导意义。     

大鼠脑出血灶周围星形胶质细胞内糖原含量的变化

目的：研究脑出血后局部超微结构的变化，探讨脑出血的病理生理过程，为临床治疗提供理论依据．方法：健康雄性SD大鼠4只，随机等分为实验组和对照组．实验组采用细菌胶原酶注射制作纹状体脑出血模型，对照组采用相同方法在相应部位注入等体积生理盐水，采用透射电镜观察脑出血后24h病变局部及其周围和对照组超微结构的变化和糖原的水平变化．结果：电镜观察到在脑出血动物出血灶周围区，不同类型的细胞内均可见到各种各样的超微结构改变．最为醒目的是在脑内血肿周围星形胶质细胞胞质和突起内有大量的糖原颗粒聚集，尤其在毛细血管周围的胶质细胞突起内非常明显；小胶质细胞和少突胶质细胞内均未发现明显糖原颗粒存在．在生理盐水对照组动物，相应部位的各种细胞的超微结构正常；而且神经元、各种胶质细胞和毛细血管内皮细胞内均无明显糖原颗粒聚集．结论：脑出血周围糖原含量增高，局部存在明显的糖代谢障碍．     

云南省2006年登革热监测分析

目的了解云南省登革热的疫情动态、人群抗体水平、媒介伊蚊种群（包括成幼虫孳生和密度变化）的动态变化、为登革热流行趋势的预测、预警和制定防治对策、措施提供科学依据。方法各级医疗、卫生、检疫机构的医务人员对疑似、临床病例进行及时发现和诊断;在流行季节前随机抽取正常人群血清,-20℃保存,用ELISA方法进行血清学检测;在6～10月采用定时、定点调查法,对登革热的主要传播媒介白纹伊蚊、埃及伊蚊的种群、孳生环境、伊蚊幼虫指数和成蚊密度进行监测,每月1次。结果2006年云南省发生输入性登革热病例18例;健康人群登革热IgG抗体阳性率8．09％。伊蚊幼虫密度布雷图指数（BI）、容器指数（Cl）分别在14～98、4．7～73．68之间,白纹伊蚊成蚊密度在3．5～34只,人工小时之间。结论云南省输入性登革热疫情有不断上升的趋势;人群抗体水平登革热IgG抗体阳性率较高,提示当地人群中可能存在该病毒的既往感染或隐性感染;媒介伊蚊幼虫布雷图指数、容器指数和白纹伊蚊成蚊密度均较高。对登革热传播具有极高的危险性,应引起高度注意。     

黄芪在体内抗氧化作用的实验研究

目的:探讨黄芪水提物抗氧化、清除体内自由基的生物活性。方法:将昆明种小鼠随机分为对照组和黄芪低、中、高剂量组,每组10只。连续灌胃给药7天,采血后,迅速取出肝组织,制成匀浆。测定超氧化物歧化酶(SOD)的活力及丙二醛(MDA)含量。结果:黄芪可减少MDA含量,增强SOD活力。结论:黄芪可有效清除体内的氧自由基,具有减少氧化应激引起的器官损伤和延缓机体衰老的作用。     

2005年汕头市登革热定点监测结果分析

目的 通过定点监测为汕头市登革热流行趋势的预测、预警和制定防治对策、措施提供科学依据。方法收集监测点的登革热疫情、人群抗体水平和媒介伊蚊等监测资料，用EPI2002软件统计分析。结果2005年汕头市无登革热疫情，抗登革热病毒IgG、IgM阳性率低，伊蚊幼虫孳生密度高峰在6、8、9、10月份，低谷在4、7、11月份，孳生情况随着月平均降水量、平均气温变化而变化；孳生场所以农村、暂时性容器为主。结论汕头市有登革热流行的自然、社会环境条件，人群普遍对登革热易感，8～10月是发动爱国卫生运动，清除伊蚊孳生地，预防、控制登革热流行的适当时机。     

莪术中姜黄素在大鼠体内的药动学研究

目的研究莪术中姜黄素在大鼠体内的药动学。方法采用高效液相色谱法测定姜黄素的血药浓度。色谱柱:L ichrospher-5-C18(250 mm×4.6 mm,5μm);柱温:25℃;流动相:乙腈-5%醋酸水(45∶55);体积流量:1 mL/m in;检测波长:420 nm。结果姜黄素在6.5~104μg/mL与峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 5)。平均回收率为98.5%,RSD为2.41%(n=5)。采用药动学计算程序处理,姜黄素的药动学参数:ka为0.53/h、ke为0.10/h、t1/2ka为1.32 h、t1/2k为6.89 h、tpeak为3.89 h、Cm ax为93.15 ng/mL、AUC为1 369.38 ng/mL。结论本法稳定、简单、可靠,可用于姜黄素的血药浓度分析及其药动学研究。     

癫痫发病中突触机制的研究进展

反复的癫痫发作可导致突触蛋白的表达异常、突触重塑和异常神经元网络的形成,这是难治性癫痫的病 理生理学机制之一。近年来发现突触蛋白在原发性癫痫的发病机制中同样发挥重要的作用。多个突触调控蛋白以及 突触后膜受体蛋白表达异常可导致癫痫发作。绝大多数的抗癫痫药物是以离子通道为作用靶点,但卡马西平及唑尼 沙胺可通过影响突触融合蛋白及可溶性N-乙基马来酰亚胺敏感因子附着蛋白受体复合物的功能而发挥抗癫痫作用。 突触囊泡蛋白2A是新型抗癫痫药物左乙拉西坦、布瓦西坦和seletracetam的作用靶点。     

麻醉学双语教学体会

麻醉学双语教学在高校中的开展和推进具有重要性和迫切性。重庆医科大学麻醉学教研室通过近10年对双语教学的尝试,取得了一定的效果。同时体会到需要正确认识双语教学,采用高效的教学方法,注重提高学生学习的主动性,重视师资力量的培养及营造良好的双语学习氛围,以便更好地推进麻醉学双语教学的开展。