维生素E琥珀酸酯联合三苯氧胺对乳腺癌荷瘤裸鼠的治疗作用

目的:检测维生素E琥珀酸酯(VES)联合三苯氧胺(TAM)对荷乳腺癌裸鼠的体内肿瘤的抑制作用,并探讨其可能的作用机制.方法:40只裸鼠皮下接种MCF-7乳腺癌细胞建立荷瘤裸鼠模型,分为空白对照组(不予治疗)、TAM治疗组(予5 mg/kg TAM治疗)、VES治疗组(予150 mg/kg VES治疗)、联合治疗组(5 mg/kg TAM 150 mg/kg VES),每组10只,治疗4周后测量各组肿瘤大小,流式细胞仪检测细胞周期变化和细胞表面Fas和FasL表达,免疫组化法检测肿瘤组织Fas和FasL表达,TUNEL法检测细胞凋亡指数的变化.结果:VES联合TAM对荷乳腺癌裸鼠体内肿瘤具有明显的增殖抑制作用,较单用VES或TAM抑制作用增强(P<0.05).细胞周期分析显示,联合药物治疗后肿瘤细胞表现为明显的G0/G1期阻滞,肿瘤组织和细胞表面的Fas和FasL表达上调,同时细胞的凋亡率升高.结论:VES联合TAM对荷乳腺癌裸鼠体内肿瘤具有协同抑制作用,其机制可能与上调肿瘤细胞Fas/FasL表达,促进细胞凋亡有关.     

白藜芦醇联合阿糖胞苷对人白血病K562细胞Fas/FasL、survivin表达影响

目的:探讨白藜芦醇及其联合阿糖胞苷对K562细胞凋亡的影响及相关机制.方法:采用免疫组织化学法和RT-PCR法分别检测白藜芦醇及其联合阿糖胞苷处理K562细胞48h后Fas、FasL和Survivin表达情况.结果:K562细胞分别经白藜芦醇、阿糖胞苷处理48h后白藜芦醇组和阿糖胞苷组Fas表达光密度值较对照组升高(P<0.05),FasL表达上调较对照组有显著性变化(P<0.05),两药联合作用Fas表达较单用白藜芦醇无显著性变化(P>0.05),而FasL表达上调较单用白藜芦醇或阿糖胞苷有显著性变化(P<0.05).白藜芦醇、阿糖胞苷单独及联合作用48h后,K562细胞的Survivin mRNA表达较细胞对照组下降(P<0.05、P<0.01),两药联合作用Survivin mRNA表达较单用白藜芦醇无显著性变化(P>0.05).结论:白藜芦醇单独及联合阿糖胞苷能通过上调Fas/FasL的表达,激活Fas/FasL凋亡途径,诱导人白血病K562细胞凋亡,同时下调survivin的表达促进凋亡的发生.     

硒酸酯多糖诱导人骨肉瘤细胞凋亡作用的有效成分

目的 探讨硒酸酯多糖诱导骨肉瘤细胞凋亡作用的有效成分。方法 MTT法检测细胞活力，荧光显微镜观察凋亡细胞形态，流式细胞仪分析凋亡峰及细胞周期，比较硒酸酯多糖和卡拉胶对骨肉瘤细胞的不同作用。结果 硒酸酯多糖组抑瘤率、癌细胞凋亡率明显强于卡拉胶组，且两者对细胞周期的调控不同。结论 硒酸酯多糖可诱导人骨肉瘤细胞凋亡，且主要是硒作用的结果。     

硒化麒麟菜多糖对肝癌细胞株生长和凋亡的影响

 【目的】 探讨硒化麒麟菜多糖在体外对肝癌HepG2.2.15细胞株生长和凋亡的作用及机制?【方法】 处于生长期的人肝癌细胞HepG2.2.15分为3组,对照组?硒化麒麟菜多糖组和顺氨氯铂组?用MTT法检测各组肿瘤细胞增殖的情况,流式细胞仪检测细胞周期?细胞调亡以及凋亡基因Fas的表达情况?【结果】 硒化麒麟菜多糖在体外可抑制肿瘤细胞的增殖,最高抑制率为97.2%,并且有时间依赖性?硒化麒麟菜多糖可阻滞肝癌HepG2.2.15细胞的生长使之停留在S和G2/M期,从而抑制了肿瘤细胞的增殖,同时通过促进Fas表达14.4% ± 0.11%,明显高于对照组1.5% ± 0.01% (P < 0.05),从而诱导HepG2.2.15细胞凋亡?【结论】 硒化麒麟菜多糖可能是通过阻滞肿瘤细胞的生长及诱导细胞凋亡等机制,从而对肝癌细胞的增殖有一定的抑制作用?     

大枣水提取物和有机硒化合物抗白血病作用的实验研究

本研究采用ＭＴＴ比色分析法和集落形成法观察了大枣水溶性提取物对人白血病Ｋ５６２细胞的增殖抑制作用，以及有机硒化合物硒酸酯多糖与大枣水提物的协同抗白血病效应。发现大枣水提物对Ｋ５６２细胞的增殖和集落形成能力有显著的抑制作用，呈良好的线性相关关系（Ｐ＜０．００１），半数抑制量（ＩＤ５０）分别为２２．５０ｍｇ／ｍｌ和９．４６ｍｇ／ｍｌ（相当于生药）；硒酸酯多糖≤５０μｇ／ｍｌ相对Ｋ５６２细胞几乎无作用，但若与大枣水提物联合，则促进其对Ｋ５６２细胞的增殖抑制作用，呈协同效应，抑制作用提高约２倍。提示大枣水溶性提取物中含抗白血病有效成份，硒酸酯多糖对其作用有协同效应     

白毛藤多糖抑制人卵巢癌细胞增殖作用及其机制研究

目的：探讨白毛藤中多糖成分对人卵巢癌SKOV3细胞的生长抑制作用。方法：将不同浓度白毛藤多糖作用SKOV3细胞后,通过MTT法检测细胞增殖抑制率,RT-PCR法检测bcl-2、caspase-3基因mRNA表达量的变化,荧光显微镜检测细胞凋亡情况。结果：白毛藤多糖明显抑制SKOV3细胞增殖,诱导细胞凋亡,并抑制bcl-2表达,上调caspase-3表达。结论：白毛藤多糖能通过激活caspase-3、抑制bcl-2表达从而抑制SKOV3细胞增殖,促进凋亡达到抗癌的目的。     

红景天多糖对骨髓抑制小鼠表达凋亡相关蛋白的影响

目的观察红景天多糖对骨髓抑制小鼠表达凋亡相关蛋白的影响，并探讨其造血调控作用部分机制。方法用免疫组化SABC法分别检测骨髓抑制小鼠骨髓细胞凋亡相关蛋白Caspases-3及Fas／FasL的表达。结暴经过射线照射及化疗药物造模后，小鼠骨髓细胞表达Fas／FasL、caspase-3明显增加，用药后各组小鼠骨髓细胞Fas／FasL、caspase-3蛋白表达有不同程度的减少，以高剂量组减少明显（P〈0．01）。结论红景天多糖可通过影响骨髓抑制小鼠骨髓细胞死亡受体Fas介导的Fas／FasL-caspase-3凋亡信号通路，减少骨髓细胞凋亡，促进骨髓造血功能的恢复。     

Fas途径参与大黄酸诱导HK-2细胞凋亡

探讨大黄酸对人肾小管上皮细胞系HK-2的毒性作用及毒性作用机制。以HgCl₂为阳性对照,通过MTT法检测细胞活力,LDH释放实验检测细胞毒性,Annexin Ⅴ-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率,Real-Time qPCR检测Fas,FasL,FADD,caspase-3,caspase-8的mRNA表达,Western blot检测Fas,FasL,胞浆Cyt-c,caspase-3,caspase-8,caspase-9蛋白表达。实验结果显示:大黄酸可剂量依赖性地抑制HK-2细胞活力,增加LDH释放和细胞凋亡率,使Fas,FasL,FADD,caspase-3,caspase-8的mRNA表达显著性上调,Fas,FasL,胞浆Cyt-c蛋白表达量显著升高,caspase-8原型表达显著降低,caspase-3,caspase-8裂解片段表达显著增加,caspae-9表达无变化。结果证明:大黄酸体外对HK-2细胞具有毒性作用,其毒性作用机制可能是通过Fas途径诱导HK-2细胞凋亡。     

大蒜素诱导THP-1细胞凋亡的作用及机制

目的:探讨大蒜素对急性单核细胞白血病细胞株THP-1凋亡及凋亡基因Fas/FasL表达的影响。方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定大蒜素对THP-1细胞增殖抑制率;AO/EB染色观察细胞凋亡形态;Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术(FCM)检测凋亡率的变化;FCM检测细胞凋亡率和细胞周期分布;免疫细胞化学法和Western blot观察细胞Fas、FasL蛋白表达。结果:MTT显示大蒜素能抑制THP-1细胞增殖,呈时间-剂量依赖性,72h中效浓度(IC50)为12.8mg/L。Annexin V-FITC/PI检测凋亡率随大蒜素浓度增加而增加。6.4、12.8mg/L大蒜素作用THP-1细胞72h后,FCM检测G0/G1期细胞比率明显上升,而S期比率明显下降,均出现凋亡峰,凋亡率分别为(22.93±2.93)%和(36.73±2.88)%,呈剂量依赖性,与对照组比较有显著差异(P<0.01)。在荧光显微镜下可区分早、晚期凋亡细胞、活细胞和坏死细胞。免疫组化显示大蒜素作用后Fas/FasL蛋白上调,主要分布在细胞浆和细胞膜。Western blot结果显示Fas/FasL蛋白表达量随大蒜素浓...     

肺纤维化大鼠模型中细胞凋亡及Fas/FasL mRNA的表达

目的探讨细胞凋亡及Fas/FasL mRNA的表达在肺纤维化过程中的作用。方法通过博来霉素复制大鼠肺纤维化模型,同时设立正常对照组,采用TUNEL法、RT-PCR法检测肺组织细胞凋亡以及Fas/FasL mR-NA表达。结果肺纤维化模型复制成功。模型组肺组织细胞凋亡上调可持续至第28d,于第14d前后达高峰。Fas/FasL mRNA表达与细胞凋亡呈同步改变。结论细胞凋亡及Fas/FasL mRNA表达的上调可能是博来霉素致大鼠肺纤维化发生、发展的重要原因。     

香菇多糖的体外抗肿瘤活性研究

目的:研究香菇多糖体外抗肿瘤活性.方法:MTY法观察香菇多糖对胃癌细胞株SGC-7901增殖的影响,流式细胞术分析其对SGC-7901细胞周期的影响,Western blot法检测其对ERK1/2蛋白激酶磷酸化的作用.结果:香菇多糖能够显著抑制SGC-7901胃癌细胞的生长.香菇多糖作用于SGC-7901胃癌细胞后能够...     

PUVA诱导HL-60细胞凋亡时对Fas、FasL表达的影响

[目的]探讨补骨脂素（PSO）加长波紫外线（UVA）光化学疗法（PUVA）诱导人白血病细胞HL-60凋亡时对Fas、FasL表达的影响。[方法]以HL-60细胞为研究对象。以细胞凋亡率、电镜下细胞超微结构改变以及细胞Fas、FasL在基因、蛋白水平的表达为检测指标，观察中药补骨脂中提取的PSO加波长为360nm的UVA对人白血病细胞诱导凋亡的作用以及部分作用途径，并采用多因素方差分析法进行统计学处理。[结果]（1）PSO、UVA照射及PUVA均可诱导HL～60细胞发生凋亡，对照组、80μg／mL PSO组、5min UVA组及PUVA（80μg／mL PSO＋5min UVA）组凋亡率分别为（10．60±0．31）％、（26。94±0．26）％、（28．53±0．05）％、（37．72±0．09）％，各组间P〈0．01，PUVA的作用明显强于前两者。（2）电镜下观察经PUVA处理后的HL-60细胞超微结构，可见明显的凋亡形态学改变。（3）PSO、UVA照射及PUVA均可上调HL-60细胞Fas在基因、蛋白水平的表达，下调FasL在基因、蛋白水平的表达。上述四组FasmRNA的表达量分别为（8．40±0．59）×10^3、（1．62±0.36）×10^5、（1.50±0.26）×10^5、（7．88±0．38）×10^6拷贝数／μg；Fas蛋白的表达量分别为（3．29±0．39）％、（18．73±1．22）％、（18．17±1．07）％、（47．03±1．36）％；FasL mRNA的表达量分别为（8．69±0．44）×10^7、（2．71±0．29）×10^7、（2.64±0．31）×10^7、（2．61±0.33）×10^5拷贝数/μg；FasL蛋白的表达量分别为（58．67±1．75）％、（37．40±1.73）％、（33．90±1．90）％、（15．60±1．42）％，各组间P〈0．01，PUVA的作用明显强于前两者。[结论]（1）PUVA可诱导白血病细胞HL-60发生凋亡，作用强于PS0及UVA照射。（2）PUVA诱导HL-60凋亡的途径之一为上调HL-60细胞FasmRNA表达水平，下调FasL mRNA表达水平。     

The effect of the Fas/FasL pathway during chemotherapeutic drug-induced apoptosis of leukameic cells

Chemotherapeutic drugskill tumor cellsnotonlyby direct acting on their respective targets,but alsoespecially by inducing cells apoptosis.The mecha-nism of chemotherapeutic drug- induced apoptosis re-mains to be fully elucidated.The Fas/Fas L pathwayis one of the essential ones for receptor/ligand sys-tems- mediated apoptosis.Recently several reportshave demonstrated thata variety of human leukaemiccell lines expressed Fas antigen and showed sensitivi-ty to apoptosis induced by Fas/Fas L pat…     

幽门螺杆菌cagA蛋白及其疫苗候选抗原对T细胞Fas Ligand介导凋亡的调节作用

目的　评价幽门螺杆菌 (Hp)多种功能蛋白致T细胞凋亡的能力 ,以探求它们在Fas/FasL介导的机体T细胞耐受中的作用 ,为Hp疫苗研制寻求安全有效的免疫原。方法　应用JAM技术对cagA阳性Hp及同源基因突变株、重组尿素酶、粘附素HpaA及外膜蛋白Hop2 5、35、38致T细胞系凋亡的能力进行了比较 ;应用流式细胞术对上述因素特别是cagA阳性菌株诱导T细胞FasL表达的能力进行了检测 ;应用金属蛋白酶抑制剂和蛋白合成抑制剂分别提高和降低Hp介导的T细胞凋亡 ,以证实其与FasL合成的关系。结果　HpcagA阳性株无论在提高T细胞表达FasL还是在诱导T细胞凋亡方面的作用均强于同源基因突变株。Hp抗原制品中尿素酶对T细胞无杀伤能力 ,而Hop38毒性最强 ,Hop2 5、Hop35和HpaA等作用较弱。金属蛋白酶抑制剂提高了cagA阳性Hp致T细胞凋亡的能力 ,而蛋白合成抑制剂Emetine则通过抑制T细胞FasL表达而抑制了Hp介导的T细胞凋亡。结论　cagA蛋白及Hop38能通过调节FasL表达造成T细胞耐受 ;尿素酶、外膜蛋白Hop2 5、Hop35和HpaA不会通过抑制T细胞而导致耐受机制的发生 ,因而可安全应用于疫苗研制。     

补骨脂素加长波紫外线光化学疗法诱导HL-60、K562细胞凋亡及对Fas、FasL表达的影响

目的探讨补骨脂素(PSO)加长波紫外线(PUVA)光化学疗法(UVA)诱导人白血病细胞HL-60、K562凋亡及对Fas、FasL表达的影响。方法以HL-60、K562细胞为研究对象,以细胞凋亡率、电镜下细胞超微结构改变以及细胞Fas、FasL在基因、蛋白水平的表达为检测指标,观察PSO加波长为360 nm的UVA对人白血病细胞诱导凋亡的作用以及部分作用途径,并采用多因素方差分析法进行统计学处理。结果PSO、UVA照射及PUVA均可诱导HL-60、K562细胞发生凋亡,PUVA的作用显著强于前两者。电镜下观察经PUVA处理后的HL-60、K562细胞超微结构,可见明显的凋亡形态学改变。PSO、UVA照射及PUVA均可上调HL-60、K562细胞Fas在基因、蛋白水平的表达,下调FasL在基因、蛋白水平的表达,PUVA的作用显著强于前两者。结论PUVA可诱导白血病细胞HL-60、K562发生凋亡,作用强于PSO及UVA照射。PUVA诱导HL-60、K562细胞凋亡的途径之一为上调细胞Fas基因表达水平,下调FasL基因表达水平。     

缺氧预处理对 L02肝细胞Bcl-2、Bax、Fas及FasL表达的影响

目的:研究缺氧预处理对正常肝细胞株L02缺血再灌注损伤的抗凋亡机制.方法:将体外培养的L02细胞分为3组:正常对照组(A组)、缺氧复氧损伤组(B组)、缺氧预处理组(C组).各组细胞缺氧复氧处理1、6、1 2、18、24 h后,使用流式细胞术检测细胞凋亡率,各组细胞分别缺氧复氧、缺氧预处理后12 h检测细胞Bcl 2、Bax、Fas及FasL蛋白表达,同时对细胞结构进行电镜观察.结果:C组和B组比较,细胞凋亡率明显降低(P＜0.05),细胞Bcl-2蛋白表达明显升高(P＜0.05),Bax、Fas及FasL蛋白表达量显著降低(P＜0.05),透射电镜观察到缺氧预处理组细胞结构基本正常.结论:缺氧预处理明显减轻了缺氧复氧所导致的L02肝细胞损伤,降低了细胞凋亡率,缺氧预处理保护机制和Bcl-2、Bax、Fas及FasL蛋白表达有关.     

补骨脂素加长波紫外线对HL-60细胞凋亡的影响

目的：探讨补骨脂素（psoralen,PSO）加长波紫外线（ultraviolet-A,UVA）的光化学疗法（PUVA）对人急性髓细胞白血病（FAB-M2）细胞株HL-60细胞凋亡的作用及部分作用途径。方法：以HL-60细胞株为研究对象,以0、10、20、40、80μg/ml PSO加波长为360nm的UVA,作用于HL-60细胞,通过流式细胞仪检测HL-60细胞在PUVA后的凋亡情况;电镜下观察细胞超微结构改变;荧光定量聚合酶链式反应（polymerase chainreaction,PCR）及流式细胞技术检测Fas配体（Fasligand,FasL）在基因和蛋白水平的表达情况。结果：单纯PSO、单纯UVA照射及PUVA均可诱导HL-60细胞发生凋亡,PUVA的作用显著强于前两者。电镜下观察经PUVA处理后的HL-60细胞超微结构,可见明显的凋亡形态学改变。PSO、UVA照射及PUVA均可下调FasL在基因、蛋白水平的表达,PUVA的作用显著强于前两者。结论：PUVA可诱导白血病细胞HL-60发生凋亡,作用强于PSO及UVA照射。HL-60被PUVA诱导凋亡后FasL基因表达水平下调。     

移植肾AR时病理诊断与细胞凋亡和Fas/FasL的表达

目的:探讨移植肾急性排斥(AR)时细胞凋亡与Fas和Fas配体(FasL)表达的作用及其临床意义。方法:分别用原位末端标记技术(TUNEL法)和免疫组织化学方法检测26例移植肾AR标本中细胞凋亡和Fas/FasL表达情况。结果:细胞凋亡和Fas/FasL表达主要在AR移植肾小管上皮发生,且凋亡指数和Fas/FasL表达与肾组织病理损伤程度平行,与正常肾对照组和移植肾功能稳定组比较差异显著。结论:肾小管上皮细胞凋亡在AR所致的移植肾损伤中起重要作用,Fas/FasL系统可能参与移植肾AR,是造成肾小管上皮细胞凋亡的重要因素。TUNEL法检测细胞凋亡可作为判断移植肾病理变化和预后的重要指标。