京尼平苷对大鼠前列腺成纤维细胞增殖的影响

【目的】研究京尼平苷对大鼠前列腺成纤维细胞增殖的影响,并探讨其机制。【方法】培养SD大鼠前列腺成纤维细胞,取对数生长期的细胞随机分成4组：对照组、京尼平苷10mg/L、20mg/L和40mg/L组。不同浓度的京尼平苷孵育大鼠前列腺成纤维细胞48h后,采用MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,ELISA法测定Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原与转化生长因子β1（TGF-β1）蛋白的含量。【结果】与对照组比较,京尼平苷20mg/L和40mg/L可显著抑制大鼠前列腺成纤维细胞的增殖（P〈0.01）,促进其凋亡（P〈0.01）,同时减少TGF-β1的分泌和胶原的合成（P〈0.05或P〈0.01）。【结论】京尼平苷可抑制大鼠前列腺成纤维细胞的增殖,可能与其减少TGF-β1的分泌和胶原的合成、促进前列腺成纤维细胞的凋亡有关。     

补中益气汤含药血清对Lewis肺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的：观察补中益气汤含药血清对Lewis肺癌细胞增殖的抑制作用及其对细胞凋亡的影响,探讨补中益气汤治疗肿瘤的机制。方法：以补中益气汤给大鼠灌胃,腹主动脉采血并制备血清。MTT法检测含药血清对肺癌细胞增殖的抑制作用,流式细胞仪测定肺癌细胞细胞凋亡。结果：补中益气汤不同浓度含药血清组与空白对照组比较均可明显抑制肺癌细胞体外增殖,差异有统计学意义（ P<0.05）;补中益气汤不同浓度含药血清组Lewis肺癌细胞凋亡率与空白对照组比较,明显升高,且随着含药血清浓度的增加,细胞凋亡率明显上升,具有浓度依赖性。结论：补中益气汤含药血清对肺癌细胞体外增殖有明显的抑制作用,且可促进肿瘤细胞凋亡。     

黄芪解毒汤对乳腺癌细胞凋亡及Notch1基因表达的影响

目的:观察黄芪解毒汤对人乳腺癌细胞MCF-7凋亡及Notch1基因表达的影响,探讨该方抑制乳腺癌复发转移的可能机制。方法:制备含药血清,分为黄芪解毒汤血清组、阿霉素血清组、参一胶囊血清组,另设生理盐水血清组。常规培养细胞,MTT法检测不同浓度含药血清对MCF-7细胞增殖的影响;选择最佳抑制浓度的含药血清分别干预乳腺癌细胞,干预3 d后流式细胞仪检测各组MCF-7细胞凋亡率,实时荧光定量PCR检测各组MCF-7细胞Notch1基因的表达。结果:MTT法检测结果显示,3种含药血清均可抑制MCF-7细胞增殖(P0.05)且对细胞抑制最佳浓度为20%含药血清。流式细胞检测结果显示,与生理盐水血清组比较,黄芪解毒汤血清组、参一胶囊血清组、阿霉素血清组均可明显诱导MCF-7细胞凋亡(P0.05);实时荧光定量PCR结果显示,与生理盐水血清组比较,黄芪解毒汤血清组、参一胶囊血清组、阿霉素血清组Notch1基因表达均明显降低(P0.05)。结论:黄芪解毒汤可能通过诱导MCF-7凋亡、降低Notch1基因表达起到抑制乳腺癌复发转移的作用。     

尿激酶对大鼠肺成纤维细胞凋亡的影响

目的:探讨尿激酶(Urokinase,UK)对大鼠肺成纤维细胞凋亡的影响。方法:5只SD雄性大鼠气管内灌注博莱霉素造肺纤维化模型,将模型组肺成纤维细胞与不同浓度的尿激酶培养24~96h,流式细胞术测定细胞凋亡。结果:尿激酶以时间和浓度依赖的方式抑制肺成纤维细胞生长,流式细胞术检测到凋亡小体。结论:尿激酶能抑制肺成纤维细胞增殖,与凋亡有关。     

复方五仁醇胶囊抗氧化及抑制肝细胞凋亡的血清药理学研究

目的:研究复方五仁醇胶囊保肝作用的机理。方法:大鼠灌胃给予复方五仁醇胶囊制备含药血清,CCl4诱导原代培养大鼠肝细胞损伤模型,测定含药血清作用后细胞培养液中丙二醛(MDA)含量和超氧化物岐化酶(SOD)活性,Annexin Ⅴ-FITC/PI双染色流式细胞仪定量检测细胞凋亡率。结果:与模型对照组比较,含药血清组MDA含量显著降低(P<0.01)、SOD活力显著增强(P<0.01),细胞早期凋亡率、晚期凋亡及坏死率显著降低(P<0.01或P<0.05)。结论:复方五仁醇胶囊具有抗氧化和抑制肝细胞凋亡作用。     

肼对大鼠心肌成纤维细胞增殖和凋亡影响的实验研究

目的:不同浓度的肼处理体外培养的心肌成纤维细胞,观察其增殖和凋亡情况。方法:用MTT法检测对细胞增殖的影响;光学倒置相差显微镜和Hochest33258荧光染色观察细胞处理前后的形态学变化,AnnexinⅤ/PI双染流式细胞仪检测细胞凋亡率和坏死率。结果:MTT检测显示细胞增殖受到抑制;荧光染色后观察到明显的细胞凋亡的核浓缩、核聚集形态;流式细胞仪检测显示细胞凋亡率和坏死率与对照组比较差异均有显著性。结论:肼可抑制心肌成纤维细胞增殖,其作用随浓度增加而加强,低浓度(2mmol·L-1以下)的肼可导致心肌成纤维细胞凋亡,浓度大于2mmol·L-1则导致细胞坏死。     

芝麻素含药血清对血管紧张素Ⅱ诱导的心肌成纤维细胞增殖和胶原分泌的影响

目的：观察芝麻素含药血清对血管紧张素Ⅱ（ Ang Ⅱ）诱导的心肌成纤维细胞增殖及胶原分泌的影响,探讨其可能机制。方法应用血清药理学方法制备大鼠含药血清,采用复合酶消化和差速贴壁法原代培养心肌成纤维细胞,MTT法测定芝麻素对AngⅡ诱导的心肌成纤维细胞增殖的影响, ELISA法测定Ⅰ、Ⅲ型胶原含量与转化生长因子β1（ TGF－β1）水平,比色法测定细胞总抗氧化能力（ T－AOC）及丙二醛（ MDA）含量,Western blot法测定Smad3活化水平。结果芝麻素含药血清可明显抑制AngⅡ诱导的心肌成纤维细胞增殖及胶原分泌（ P＜0.05,P＜0.01）,降低TGF－β1含量及Smad3活化水平（P＜0.05,P＜0.01）。此外,芝麻素含药血清可明显提高成纤维细胞抗氧化能力,减少脂质过氧化产物MDA生成（ P＜0.05,P＜0.01）。对照血清对上述各项指标均无明显影响。结论芝麻素含药血清可明显抑制AngⅡ诱导的心肌成纤维细胞增殖与胶原分泌,其机制可能与改善氧化应激状态、调节TGF－β1／Smad信号通路有关。     

草仙乙肝胶囊含药血清诱导大鼠肝星状细胞凋亡及机制研究

目的 观察草仙乙肝胶囊含药血清对肝星状细胞株HSC -T6凋亡的影响及调控机制.方法 制备草仙乙肝含药血清,MTT法和流式细胞仪检测草仙乙肝药物血清对HSC-T6细胞增殖和诱导凋亡影响;采用Western blot检测Bax、Caspase-3表达.结果 草仙乙肝药物血清与对照组比较可抑制HSC -T6细胞的增殖(P＜...     

藤珠胃康颗粒含药血清对小鼠胃癌MFC细胞增殖和凋亡的影响

目的 研究藤珠胃康颗粒含药血清对小鼠胃癌MFC细胞增殖和凋亡的影响.方法 MFC细胞经不同浓度藤珠胃康颗粒含药血清处理后,采用MTT法检测藤珠胃康颗粒含药血清对细胞增殖的影响;采用倒置显微镜观察细胞形态变化;采用流式细胞仪及AnnexinV/PI染色的方法检测对细胞凋亡的影响.结果 与对照组比较,藤珠胃康颗粒含药血清中、高剂量组细胞增殖抑制率显著增高(P＜0.05);显微镜下观察,贴壁细胞逐渐脱落、缩成圆形;与对照组比较,给药组细胞凋亡率均显著增高(P＜0.05),并呈现剂量依赖性.结论 藤珠胃康颗粒含药血清对小鼠胃癌MFC细胞增殖有抑制作用,并能诱导细胞凋亡.     

软坚散结胶囊含药血清调控VEGF-ERK信号通路诱导胃癌细胞凋亡机制研究

目的研究VEGF-ERK信号通路在软坚散结胶囊含药血清诱导胃癌SGC7901细胞凋亡过程中的变化,探讨软坚散结胶囊含药血清调控胃癌细胞凋亡的机制。方法制备软坚散结胶囊含药血清;激光共聚焦显微镜观察软坚散结胶囊含药血清处理后胃癌SGC7901细胞形态变化;流式细胞仪检测软坚散结胶囊含药血清处理后胃癌SGC7901细胞凋亡率;Western Blot检测软坚散结胶囊含药血清对人胃癌SGC7901细胞ERK、P-ERK及VEGF蛋白表达影响。结果软坚散结胶囊含药血清处理细胞后,激光共聚焦显微镜下见:阴性对照组以正常活性细胞为主,Annexin V和PI均为低染,细胞膜完整,细胞形态正常;低剂量组可见Annexin V高染、PI低染,细胞膜呈绿色荧光,细胞核着色浅或不着色;中剂量组可见Annexin V高染、PI低染,细胞膜呈绿色荧光,细胞核呈桔红色荧光;高剂量组PI高染,细胞核呈红色荧光,出现部分细胞的细胞膜破裂、细胞核呈大小不等形态不规则的碎片状,为典型的细胞凋亡形态特征。流式细胞仪检测经阴性对照组及低中高剂量组含药血清处理的SGC7901细胞后,各组细胞凋亡率分别为:(6.053±0.223)%、(9.117±1.583)%、(23.663±3.428)%、(37.707±1.328)%,细胞凋亡率随软坚散结胶囊含药血清剂量的增加而升高。Western Blot检测发现SGC7901细胞中VEGF蛋白水平随含药血清剂量的增加而降低(P0.05);ERK蛋白表达无明显变化(P0.05),P-ERK(ERK磷酸化)蛋白水平随含药血清剂量增加而降低(P0.05)。结论软坚散结胶囊含药血清能诱导人胃癌SGC7901细胞凋亡;其作用机制可能是通过抑制VEGF蛋白表达,调控ERK信号通路,抑制ERK磷酸化(p-ERK)表达进而促进胃癌细胞凋亡。     

前癃通胶囊抑制良性前列腺增生基质细胞TGF-β1表达的体外实验研究

目的研究前癃通胶囊干预下,TGF-β1mRNA在良性前列腺增生基质细胞中的表达的变化。方法:采用MTT比色法检测前癃通胶囊对体外培养良性前列腺增生前列腺基质细胞增殖的抑制作用;应用逆转录-多酶链反应(RT-PCR)技术,观察前癃通胶囊干预下TGF-β1mRNA在良性前列腺增生基质细胞中的表达的变化。结果 3种浓度的前癃通胶囊能抑制前列腺基质细胞的增殖,且随着时间的延长抑制作用增强,高浓度组在不同时段对前列腺基质细胞增殖有明显的抑制作用,与中浓度组比,组间比较差异有统计学意义(P<0.01);中浓度组在不同时段对前列腺基质细胞增殖有抑制作用,与低浓度组比,组间比较差异有统计学意义(P<0.01)。前列腺基质细胞中的TGF-β1mRNA表达随着前癃通胶囊(药液)浓度的增高呈现下降趋势。TGF-β1mRNA在高浓度组的表达最低,空白组的表达最高。高、中、低浓度组分别与空白组比较差异有统计学意义(P<0.01);高、中浓度组与低浓度组比较TGF-β1mRNA的表达明显减弱,差异有统计学意义(P<0.01)。结论前癃通胶囊对前列腺基质细胞的增殖有较强的抑制作用,能降低TGF-β1mR-NA在基质细胞中的表达。     

腹透液对大鼠腹膜间皮细胞凋亡和增殖的影响

目的探讨腹透液对腹膜间皮细胞凋亡和增殖的影响。方法采用MTT比色法测定腹透液对体外培养的大鼠腹膜间皮细胞增殖的影响．同时应用流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率。结果腹透液刺激1h后，体外培养的大鼠腹膜问皮细胞增殖抑制率、G0/G1期细胞比例、早期凋亡率均增高；腹透液中糖浓度越高，刺激时间越长，以上3个指标增高越明显。含4．25％葡萄糖的腹透液刺激3h后，细胞增殖抑制率达44．12％，G0/G1期细胞占71．95％，早期凋亡率达23．59％，远远高于不含糖的阴性对照组和含1．5％糖腹透液组（P〈0．001），也高于4．25％甘露醇组（P〈0．05）。结论高糖腹透液诱导体外培养的腹膜间皮细胞凋亡．抑制其增殖。     

大肠埃希菌提取物和LPS对单核巨噬细胞增殖与凋亡的影响

目的探讨不同浓度大肠埃希菌提取物（菌胞质蛋白）对单核细胞增殖和凋亡的影响。方法采用MTT法测定不同浓度的胞质蛋白和LPS作用72 h后,对U937细胞的细胞抑制率,并用流式细胞术检测胞质蛋白作用24 h U937细胞凋亡率。结果大肠埃希菌胞质蛋白对U937细胞增殖有显著抑制作用,并可诱导细胞凋亡。低浓度的LPS不能抑制U937细胞增殖,高浓度LPS可以明显抑制U937细胞增殖。结论大肠埃希菌提取物对单核巨噬细胞有显著的增殖抑制和诱导凋亡作用。     

黄芩素对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨黄芩素对人体瘢痕疙瘩成纤维细胞在增殖、凋亡的影响,为临床瘢痕疙瘩的治疗提供实验基础。方法 MTT法测定黄芩素干预后瘢痕疙瘩成纤维细胞的活力和乳酸脱氢酶的含量;Annexin V-FITC分析成纤维细胞在干预后的细胞凋亡率;蛋白印迹实验检测凋亡蛋白表达水平的变化。结果黄芩素对体外培养的瘢痕疙瘩成纤维细胞的增殖有抑制作用(P0.01),抑制效应呈剂量依赖性,作用24 h后,黄芩素50μM组抑制率为65%,IC50值为(31.34±0.29)μM;黄芩素还可诱导瘢痕疙瘩成纤维细胞凋亡,黄芩素25μM组凋亡率达22.7%,和对照组相比,差异有统计学意义(P0.01);但不影响乳酸脱氢酶的含量。黄芩素作用后明显降低线粒体膜电位,上调凋亡蛋白裂解半胱天冬酶3和裂解半胱天冬酶9的表达,裂解半胱天冬酶8的表达不受影响。结论黄芩素通过抑制细胞增殖和促进细胞凋亡来抑制瘢痕疙瘩生长。     

3,6-二羟基黄酮对多种肿瘤细胞的增殖抑制及凋亡诱导作用

目的 观察3,6-二羟基黄酮对乳腺癌细胞株MCF-7(雌激素受体阳性ER+)、MDA-MB-231(雌激素受体阴性ER-)、直肠癌细胞株LoVo、DLD-1和前列腺癌细胞株PC3增殖和凋亡的影响.方法 MTT法检测3,6-二羟基黄酮对不同肿瘤细胞生长存活的影响,计算半数抑制浓度(IC50);DAPI染色观察3,6-二羟基黄酮对肿瘤细胞生长状态及形态的影响,Annexin V/PI双染流式细胞仪检测细胞凋亡变化.结果 增殖检测结果表明,3,6-二羟基黄酮对于MCF-7、MDA-MB-231、LoVo、DLD-1和PC3细胞增殖均表现出显著抑制作用,48 h IC50值分别为16.1、15.7、29.8、12.8和17.8μmol/L;细胞形态观察和凋亡检测结果表明,10 μmol/L的3,6-二羟基黄酮作用24 h,5种肿瘤细胞的生长状态和形态均发生显著变化,大量细胞表现出凋亡或死亡细胞的形态特征,细胞凋亡率均显著升高.结论 3,6-二羟基黄酮具有显著的抗肿瘤效应,对于多种肿瘤细胞具有很强的增殖抑制和凋亡诱导作用.     

雌/雄激素比例变化对大鼠前列腺基质细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨雌/雄激素比例变化对前列腺基质细胞增殖和凋亡及雌激素受体表达的影响.方法:体外培养大鼠前列腺基质细胞,加入不同比例雌激素和雄激素,采用MTT法检测细胞增殖,以流式细胞术检测细胞凋亡,以细胞免疫荧光法检测雌激素受体亚型(ERα,ERβ)的表达.结果:雌激素(雌二醇,E2)和雄激素(双氢睾酮,DHT)联合应用时,可以促进基质细胞增殖,高比例的雌/雄激素可使基质细胞增殖增加(P＜0.05)及凋亡减弱(P＜0.05),且可以上调ERα的表达(P＜0.05).结论:雌/雄激素比例升高使雌激素的促增殖作用增强而促凋亡作用减弱,这种作用是通过上调ERα的表达实现的.     

半边旗5F对瘢痕成纤维细胞增殖和凋亡的影响

目的通过对天然药物半边旗5F对瘢痕成纤维细胞凋亡作用的研究,以期探寻新的治疗病理性瘢痕的有效药物。方法以四甲基偶氮唑(MTT)法、流式细胞术和原位末端标记技术检测半边旗5F对成纤维细胞增殖和凋亡的影响。结果半边旗5F对成纤维细胞的增殖具有显著的抑制作用,且呈现浓度和时间依赖性。采用流式细胞术和TUNEL法检测凋亡指数,均呈剂量依赖性增高(P<0.05)。结论半边旗5F对瘢痕成纤维细胞的增殖具有显著的抑制作用,并且能够诱导其发生凋亡,为寻找有效治疗增生性瘢痕的药物进行了新的尝试。     

牛黄参含药血清对肝干细胞WB-F 344增殖和凋亡的影响

目的研究牛黄参含药血清对大鼠肝干细胞WB-F344增殖及凋亡的影响,探讨益气解毒法诱导肝干细胞的作用机制。方法采用中药血清药理学方法,以不同浓度的牛黄参含药血清（5%、10%、20%）作用于WB-F344,以正常大鼠血清（5%、10%、20%）处理的WB-F344为空白对照组,以单纯培养体系处理的WB-F344为正常对照组;四甲基偶氮唑盐（methyl thiazolyl tetrazolium,MTT）比色法检测细胞的增殖,取药物血清的最佳增殖浓度,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果经牛黄参含药血清干预后,MTT检测结果显示10%、20%浓度的牛黄参含药血清均能促进WB-F344的增殖（P〈0.01）,且10%为增殖的最佳浓度梯度;10%牛黄参含药血清作用的WB-F344细胞凋亡率与空白、正常对照组相比显著下降（P〈0.01）,且以10%牛黄参含药血清成分组效果最佳。结论牛黄参含药血清可在一定程度上促进WB-F344细胞的增殖,抑制其凋亡,这可能是益气解毒法作用于肝干细胞的机制之一。     

复方黄黛片灭活兔血清对人红白血病细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响

目的:探讨复方黄黛片(Compound Realgar and Natural Indigo Tablet,CRNIT)灭活兔血清对人红白血病(Human Erythroleukemia,HEL)细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响;方法:制备复方黄黛片、羟基脲片、生理盐水三组灭活含药兔血清,用不同浓度的血清处理HEL细胞,通过CCK-8检测细胞增殖-毒性,通过Annexin V/PI双染色流式细胞分析检测细胞凋亡,Cell Cycle Staining Kit流式细胞分析检测细胞周期。结果:1.在一定浓度范围内,复方黄黛片灭活兔血清对HEL细胞增殖的抑制作用呈浓度依赖性,且强于羟基脲片组、生理盐水组(P0.05);2.对比复方黄黛片灭活兔血清处理HEL细胞24 h、48 h抑制率,提示其抑制作用呈时间依赖性;3.在一定浓度范围内,复方黄黛片灭活兔血清对HEL细胞凋亡的促进作用呈浓度依赖性,且优于羟基脲片组和生理盐水组(P0.05);4.经复方黄黛片灭活兔血清处理24 h,处于G1期的HEL细胞较对照孔增多。结论:复方黄黛片灭活兔血清能有效的抑制HEL细胞增殖,促进细胞早期凋亡,并影响HEL细胞周期。     

胃祺饮全方挥发油对AGS细胞增殖活性的影响

目的：胃祺饮是对慢性萎缩性胃炎具有良好临床疗效的中药复方。本实验研究胃祺饮挥发油的主要成分及其对AGS细胞增殖的抑制作用。方法：采用气相色谱-质谱联用法测定胃祺饮全方挥发油的化学成分,采用四甲基偶氮唑蓝法测定细胞活性,流式细胞分析检测细胞周期分布,使用Hoechst33342和碘化丙啶双染法测定细胞凋亡和坏死。结果：化学分析显示胃祺饮挥发油的主要成分是冰片烯和3-正丁基苯酞。当归的有效成分藁本内酯在胃祺饮挥发油中没有检测到。胃祺饮挥发油能呈剂量和时间依赖性地抑制胃癌细胞的增殖,阻滞细胞周期于G2/M期,并能够诱导细胞的凋亡和坏死。结论：胃祺饮挥发油含有多种对于慢性萎缩性胃炎和功能性消化不良具有良好疗效的化学成分,具有显著的抗AGS细胞增殖的作用,其作用通过细胞周期阻滞和诱导细胞凋亡实现。因此在胃祺饮的煎煮过程中,应尽量避免挥发油的损失。