塞来昔布对实验性结肠癌原位移植瘤生长及环氧化酶-2表达的影响

目的 探讨塞来昔布对实验性结肠癌原位移植瘤生长及环氧化酶-2(COX-2)表达的影响.方法 将对数生长期的人结肠癌细胞(HT-29)接种于裸鼠皮下,4周后形成稳定的皮下移植瘤,再将皮下移植瘤组织原位接种于24只裸鼠盲肠浆膜下,制作原位移植瘤模型.术后随机分为对照组(C组)及塞来昔布高、中、低剂量组(H、M、L组)共4组.饲养42 d后处死裸鼠,观察各组原位移植瘤的瘤体积和瘤体质量,计算抑瘤率.采用放射免疫法(RIA)测定瘤组织匀浆上清中前列腺素E2(PGE2)含量,免疫组化检测肿瘤组织COX-2的表达.结果 24只裸鼠实验期间无死亡,成瘤率为100%,比较各组原位移植瘤体积和瘤体质量差异有统计学意义(均P＜0.05).L组、M组和H组的抑瘤率分别为25.30%、38.80%、76.92%,与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05),且存在明显的剂量依赖.干预组瘤组织中COX-2的表达和匀浆上清中PGE2含量与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05或＜0.01);随着剂量的增加,瘤组织中COX-2的表达和PGE2含量逐渐降低.瘤组织中PGE2含量与瘤体质量及COX-2表达存在显著正相关性(分别为1=0.881,P＜0.01和r=0.825,P＜0.05).结论 塞来昔布通过抑制人结肠癌裸鼠原位移植瘤的COX-2表达,抑制PGE2合成,从而抑制对结肠癌的生长.     

塞来昔布对实验性结肠癌原位移植瘤生长及环氧化酶-2表达的影响

目的探讨塞来昔布对实验性结肠癌原位移植瘤生长及环氧化酶-2（COX-2）表达的影响。方法使用对数生长期的人结肠癌细胞（HT-29）于裸鼠皮下接种4周形成皮下移植瘤，再将皮下移植瘤组织原位接种于24只裸鼠盲肠浆膜下，制成原位移植瘤模型。术后随机分为对照组（C组）及塞来昔布高、中、低剂量组（H、M、L组）四组，分别给予纯水及含有不同浓度（1．5、1．0和0．5mg／ml）塞来昔布的饮水。饲养42d后处死裸鼠，观察各组原位移植瘤的瘤体积和瘤重，计算抑瘤率。RIA测定瘤组织匀浆上清中前列腺素E2（PGE2）含量，免疫组化检测肿瘤组织COX-2表达。结果24只裸鼠实验期间无1只死亡，成瘤率为100％，比较各组原位移植瘤体积和瘤重差异有统计学意义（P值均〈0．05）。L组、M组和H组的抑瘤率分别为25.30％、38．80％、76．92％，与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05），且存在明显的剂量依赖。干预组瘤组织中COX-2的表达和匀浆上清中PGE2含量与对照组比较差异有统计学意义（P分别〈0．05和〈0．01），随着剂量增加，瘤组织中COX-2的表达和PGE：含量逐渐降低。瘤组织中PGE：含量与瘤重以及COX-2表达存在显著正相关性（分别为r=0．881，P〈0．01和r=0．825，P〈0．05）。结论塞来昔布通过抑制人结肠癌裸鼠原位移植瘤的COX-2，抑制PGE2合成，从而对结肠癌的生长有抑制作用。     

塞来昔布对人结肠癌裸鼠移植瘤的抑制作用及其机制

目的 研究不同剂量环氧化酶-2(COX-2)抑制剂塞来昔布对人结肠癌裸鼠移植瘤生长的影响及机制.方法 将人结肠癌HT-29细胞注射于裸鼠背部皮下建立移植瘤模型,16 d后,将裸鼠以随机数字表法分为5组:对照组、塞来昔布1组(25 mg·kg-1·d-1)、塞来昔布2组(50 mg·kg-1·d-1)、塞来昔布3组(75 mg·kg-1·d-1)、塞来昔布4组(100 mg·kg-1·d-1),并给予相应剂量的塞来昔布.每周测量肿瘤体积,给药35 d后,处死裸鼠,切取移植瘤组织检测COX-2,survivin表达, VEGF mRNA表达和微血管密度(MVD).结果 塞来昔布1、2、3、4组的抑瘤率分别为34.94%、39.20%、53.50%、59.20%,与对照组比较移植瘤体积明显缩小(P<0.05).与对照组比较,塞来昔布各组COX-2、survivin的表达水平均明显降低(P<0.05),并且抑制程度呈药物剂量依赖性.低剂量(25 mg·kg-1·d-1)塞来昔布可明显抑制VEGF mRNA表达和结肠癌移植瘤微血管生成(P<0.05,vs对照组),其抑制作用并未随用药剂量的增加而增强.结论 不同剂量的塞来昔布均能明显抑制结肠癌移植瘤的生长,其抑制作用呈用药剂量依赖性,这种作用可能是通过抑制survivin的表达实现的.低剂量塞来昔布可抑制人结肠癌裸鼠移植瘤微血管生成,可能对防止肿瘤转移起到重要作用.     

塞来昔布联合厄罗替尼对人肺癌裸鼠移植瘤生长及血管生成的影响

目的 探讨厄洛替尼和塞来昔布联合阻断表皮生长因子受体(EGFR)和环氧合酶-2(COx-2),对人肺腺癌裸鼠移植瘤生长及血管形成的影响.方法 人肺癌细胞A549接种于裸鼠皮下,成瘤后随机分为4组:对照组、厄洛替尼组、塞来昔布组、塞来昔布和厄洛替尼联合用药组,给予灌胃处理,观察裸鼠生长状况,每周两次测量肿瘤大小,绘制肿瘤生长曲线.40 d后处死裸鼠,称取移植瘤质量.采用免疫组化检测肿瘤微血管密度(MVD),ELISA法检测裸鼠血清中血管内皮生长因子(sVEGF)的含量,Western Blot法检测Bcl-2、Bax蛋白的表达情况并计算Bcl-2/Bax的值.结果 联合用药组肿瘤明显小于塞来昔布组、厄洛替尼组和对照组(P＜0.05).联合用药组微血管数目、sVEGF的含量明显小于塞来昔布组、厄洛替尼组和对照组(P＜0.05).厄洛替尼组Bcl-2的表达明显小于对照组(P＜0.05),塞来昔布组Bcl-2的表达与对照组相比差异无统计学意义(P＞0.05),联合用药组Bcl-2的表达与对照组、塞来昔布组、厄洛替尼组相比均明显降低(P＜0.05).Bax的表达在各组之间差异无统计学意义(P＞0.05).联合用药组Bcl-2/Bax较塞来昔布组、厄洛替尼组明显降低(P＜0.05).结论 塞来昔布联合厄洛替尼相对厄洛替尼或塞来昔布明显抑制人肺癌移植瘤的生长.其中减少微血管生成、增加肿瘤细胞的凋亡可能为其抗肿瘤机制.     

非甾体类抗炎药塞来昔布对肺腺癌抑制作用的实验研究

目的观察选择性环氧合酶-2(COX-2)抑制剂塞来昔布在体内及体外对肺癌细胞的抑制作用.方法噻唑蓝(MTT)比色法检测肺癌细胞的增殖抑制,流式细胞仪检测塞来昔布处理后肺癌细胞周期变化,通过裸鼠移植瘤实验,比较移植瘤重量检测塞来昔布对肺癌细胞体内抑制作用,TUNEL法染色检测移植瘤癌细胞凋亡.结果塞采昔布对肺癌细胞增殖有抑制作用,且呈剂量依赖关系,IC 50为50umol/L.塞来昔布可将细胞阻滞在G0/G1期,阻碍G1期细胞进入S期.称量裸鼠移植肿瘤的瘤结节重量,对照组平均瘤重(2 1567±0.9750)g,药物组平均瘤重(0.9783±0.5423)g,两组有显著性差异(P＜0.05),抑瘤率为54.64%.TUNEL法移植瘤凋亡细胞染色,对照组凋亡指数(AI)为(1.58±0.61),用药组(9.50±2.51),二组有显著性差异(P＜0.05).结论塞来昔布在体内及体外均对肺癌细胞表现出抑制作用,其将细胞周期阻滞在G1期并诱导肿瘤细胞凋亡可能是抑制肺癌细胞增殖的重要机制.     

人结肠癌裸鼠原位移植瘤模型的建立

目的 建立人结肠癌裸鼠原位移植瘤模型.方法 使用对数生长期的人结肠癌细胞(lovo)在8只裸鼠结肠浆膜至黏膜逐层注射,以完成原位移植瘤模型的制备,同时皮下种植8只裸鼠作为对照组.分别于第4、6、8、12周各组分别处死裸鼠2只,观察原位种植肿瘤的成瘤率、生长情况、转移率和腹水出现率.结果 16只裸鼠实验期间无1只死亡,成瘤率为100%, 原位种植成瘤率为100%(8/8),区域淋巴结转移率100%(8/8),肝转移率为100%(8/8),肺脏转移率为75.0%(6/8),腹膜转移率为75.0%(6/8),腹水出现率为27.5%(3/8).皮下种植组未见转移.结论 本实验成功建立了人结肠癌裸鼠原位移植瘤模型,该模型的生物学行为与临床病程非常相似,为研究人结肠癌转移机制和干预措施提供了较为理想的动物模型.     

塞来昔布对裸鼠人肝癌细胞株SMMC-7721移植瘤增殖的影响

目的 探讨环氧化酶-2(COX-2)抑制剂塞来昔布对裸鼠人肝癌细胞皮下移植瘤生长抑制作用及其相关机制.方法 用人原发性肝癌细胞株SMMC-7721接种BALB/C(nu/nu)裸鼠背部皮下,建立裸鼠人肝癌细胞皮下移植瘤动物模型(n=20)并分成实验组(n=10)和空白对照组(n=10).实验组接种前3 d开始在饮水中添加塞来昔布,对照组给予正常饮水,观察肿瘤生长曲线和质量,并应用免疫组化法对肿瘤组织的细胞凋亡情况、血管内皮生长因子(VEGF)和肿瘤微血管密度(MVD)表达程度进行观察.结果 实验组肿瘤出现的时间显著晚于对照组,肿瘤的体积、质量显著小于对照组,两组差异有高度统计学意义(P＜0.01);塞来昔布处理后肿瘤组织的细胞凋亡明显强于对照组,而VEGF、MVD表达明显弱于对照组.结论 COX-2抑制剂塞来昔布可通过诱导凋亡及抑制肿瘤新生血管生成而抑制裸鼠人肝癌细胞SMMC-7721株移植瘤的生长,其作用途径是抑制了COX-2的表达.     

塞来昔布对Lewis肺癌细胞增殖及移植瘤的抑制作用

目的:探讨选择性环氧化酶-2(COX-2)抑制剂塞来昔布对Lewis肺癌细胞株增殖及小鼠皮下移植瘤的影响。方法:常规培养Lewis肺癌细胞,实验分为对照组和塞来昔布用药组。MTT法检测细胞增殖水平,损伤修复实验检测细胞迁移能力;将Lewis肺癌细胞接种于12只C57BL/6小鼠皮下,对照组隔日腹腔注射生理盐水;塞来昔布用药组隔日腹腔注射塞来昔布30 mg/kg,24 d后处死,计算抑瘤率,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测移植瘤组织中VEGF mRNA表达水平,同时酶联免疫检测小鼠血清中MMP-9浓度。结果:塞来昔布对Lewis肺癌细胞增殖的抑制作用呈时间-剂量依赖性效应(P<0.05)。20μmol/L塞来昔布组细胞迁移速度(0.37±0.03)μm/h明显减慢,与对照组(3.17±0.22)μm/h相比具有显著性差异(P<0.01);在体实验显示,塞来昔布具有明显的抑制Lewis肺癌移植瘤增殖的作用,同时能抑制移植瘤组织中VEGF表达、降低血清MMP-9浓度。结论:塞来昔布可以显著抑制Lewis肺癌细胞的增殖与迁移能力,且对Lewis肺癌移植瘤有明显抑制作用。     

塞来昔布抑制荷人肺癌裸鼠肿瘤的实验研究

【目的】研究塞来昔布对荷人肺癌裸鼠肿瘤的抑制作用。【方法】采用人肺癌A549细胞系体外培养后进行裸鼠移植瘤实验。通过移植瘤重、微血管密度和癌细胞凋亡指数比较,观察塞来昔布干预对荷人肺癌裸鼠肿瘤的抑制作用。【结果】对照组瘤重平均(2.1567±0.9750)g,实验组平均(0.9783±0.5423)g,两组有显著性差异(P<0.05),抑瘤率为54.64%;移植瘤微血管密度对照组为(42.82±10.25)个/HP,实验组为(22.24±5.62)个/HP(P<0.05),癌细胞凋亡指数对照组为1.58±0.61,实验组9.50±2.51(P<0.05)。【结论】塞来昔布对荷人肺癌裸鼠肿瘤有抑制作用,其作用与抑制肿瘤血管生成和促进肿瘤细胞凋亡相关。     

抗黏附药物对人结肠癌细胞裸鼠肝转移模型sICAM-1表达的影响

目的　探讨术后早期给予抗黏附药物丹参、蛇毒对人结肠癌细胞裸鼠肝转移模型sICAM 1表达的影响。方法　采用Balbc/c裸鼠 2 4只 ,用保脾法建立人结肠癌细胞裸鼠肝转移模型 ,随机分为 4组 ,分别自腹腔注射生理盐水 (A组 ) ,丹参 0 .7ml/只 (B组 )、蛇毒 3.12 5× 10 2 单位 /只 (C组 )、丹参 0 .7ml和蛇毒 3.12 5× 10 2 单位 /只 (D组 )。 5周时处死小鼠 ,观察原位移植瘤生长情况、肝转移情况 ,计数各肝脏表面转移结节数 ,并经病理组织学证实。测定血清和腹水中sICAM 1的含量。肝脏表面转移结节数采用秩和检验、sICAM 1的含量采用t检验。结果　实验各组均有脾内原位移植瘤生长 ,生理盐水组、丹参加蛇毒组各有 5只裸鼠发生肝转移 (5 / 6 )、丹参、蛇毒组各有 4只裸鼠发生肝转移 (4/ 6 )。对照组血清和腹水中sICAM 1的含量均高于丹参组 (P <0 .0 1)、蛇毒组 (P <0 .0 1)及丹参加蛇毒组 (P <0 .0 1)。结论　抗黏附药物可降低血清和腹水中sICAM 1的含量 ,抗黏附治疗可能是治疗恶性肿瘤转移的一个新方向。     

人胃癌裸鼠胃原位种植转移模型的建立和改进

目的：建立人胃癌裸鼠胃原位种植转移模型。方法：用人胃癌细胞SGC-7901悬液接种于裸鼠皮下，形成稳定传代的皮下移植瘤。将皮下移植瘤组织再接种于裸鼠胃浆肌层，观察移植肿瘤的生长状况、移植成功率和自发转移的发生率及组织学变化等生物学特性。结果：肿瘤组织块保留了人胃腺癌的组织学特点，人胃癌裸鼠原位移植模型成瘤率为100％(20／20)，肝脏转移率为45％(9／20)。结论：人胃癌裸鼠原位移植瘤模型的生物学行学与人胃癌自然生长和转移过程相似，为研究人胃癌转移机制提供了理想的模型。     

健脾中药复方胃肠安对人胃癌裸小鼠原位移植瘤生长和转移的影响

目的:观察以健脾为基础的中药复方胃肠安对人胃癌裸小鼠原位移植瘤生长和转移的抑制作用.方法:采用人胃癌细胞SGC-7901,裸小鼠66只,其中41只制作原位移植瘤模型,另25只制作皮下移植瘤模型.两种模型的裸小鼠分别随机分为3组:胃肠安组,5-FU组和生理盐水对照组.胃肠安组予以含生药0.12 g/ml的胃肠安煎剂0.5 ml灌胃,1次/d;5-FU组以5-FU 50 mg/kg行腹腔化疗,1次/周;生理盐水对照组予以生理盐水0.5 ml/d灌胃.原位移植瘤裸小鼠于造模后第64天处死;皮下移植瘤裸小鼠于造模后第41天处死.观察各组的抑瘤率,原位移植瘤各组肿瘤的转移情况,皮下移植瘤各组增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)和细胞凋亡情况.结果:原位移植瘤模型中,胃肠安组和5-FU组抑瘤率分别为40.82%和37.92%;皮下移植瘤模型中两组的抑瘤率则分别为48.70%和60.10%.原位移植瘤模型中,胃肠安组和5-FU组裸小鼠胃周淋巴结转移、肝转移、肝门淋巴结转移、横膈转移和腹膜转移比生理盐水对照组明显减少,3组的总转移率分别为30.77%、28.57%和71.43%(P ＜0.05).皮下移植瘤模型中,胃肠安组和5-FU组的PCNA总阳性率低于生理盐水对照组,细胞凋亡指数高于生理盐水对照组,差异有统计学意义(P ＜0.05或P ＜0.01).胃肠安组和5-FU组瘤重、总转移率和PCNA总阳性率比较,差异无统计学意义,但胃肠安组细胞凋亡指数明显高于5-FU组(P＜0.05).结论:健脾中药复方胃肠安具有抑制人胃癌裸小鼠原位移植瘤生长和转移的作用.胃肠安对胃癌细胞的体内抑制作用可能通过抑制增殖、诱导肿瘤细胞凋亡而实现,对其抑制转移的机制尚需作进一步的研究.     

环氧化酶-2抑制剂塞来昔布对胰腺癌荷瘤裸鼠的治疗作用

目的探讨环氧化酶-2（COX-2）抑制剂塞来昔布对胰腺癌荷瘤裸鼠的治疗作用。方法构建胰腺癌荷瘤裸鼠模型，将成瘤裸鼠随机分为4组，分别给予纯水（对照组）和含有不同浓度（0．05％、0．1％、0．15％）的塞来昔布饮水，观测裸鼠肿瘤生长情况并测量不同时间的体积变化，于治疗28d后处死裸鼠，测瘤体重量，应用caspase-3试剂盒检测caspase-3活性，免疫组织化学法检测肿瘤增殖指数（PI）和微血管密度（MVD）。结果治疗组裸鼠肿瘤体积的变化呈浓度依赖性和时效性；治疗28d后，治疗组瘤重量均明显低于对照组[（0．96±0．09）g、（0．78±0．06）g、（0．64±0．07）gvs（1．16±0．12）g，P〈0．01）]；治疗组caspase-3相对活性明显高于对照组（0．021±0．002、0．026±0．003、0．031±0．002VS0．006±0．001，P〈0．01）。0．1％组、0．15％组的PI和MVD均明显低于对照组（P〈0．05）；0．05％组的PI和MVD虽均低于对照组。但差异无统计学意义（P〉0．05）。结论COX-2抑制剂塞来昔布可显著抑制荷胰腺癌裸鼠的肿瘤生长，其作用机制可能是通过提高caspase-3活性来诱导细胞凋亡，通过抑制肿瘤细胞的增殖和新生血管的形成来发挥抗肿瘤效应，在临床上具有潜在的应用价值。     

酪酪肽对荷人肝癌裸鼠皮下移植瘤的影响

目的 研究酪酪肽(PYY)对荷人肝癌裸鼠皮下移植瘤生长的影响并初步探讨其作用机制.方法 用含1×107/ml的HepG2人肝癌细胞悬液0.2 ml打人裸鼠皮下,待其长出的肿瘤直径约1cm时将瘤块取出,在无菌PBS液中剪成大小1 min×1 mm×1mm的小块,用组织插块法制作裸鼠皮下肝癌模型.选取成瘤的32只裸鼠平均分为4组:PYY大、小剂量组,阳性对照组给与腹腔注射氟尿苷,阴性对照组给与皮下注射生理盐水.实验过程中观察裸鼠的一般情况.结果 PYY大、小剂量组在肿瘤体积、血清AFP、瘤重及瘤组织cAMP中均低于阴性对照组(P＜0.05).结论 PYY可以抑制裸鼠肝癌皮下移植瘤的生长,其机制可能与抑制肝癌细胞内cAMP的含量有关.     

裸大鼠人肝癌原位模型的建立及其生物学特性的初步观察

目的 探讨人肝癌原位移植后肿瘤在裸大鼠（rnu/rnu）生长和转移等生物学特性.方法 Huh-7细胞株接种于裸小鼠皮下成瘤组织块移植于裸大鼠皮下成瘤,之后将裸大鼠皮下肿瘤移植至其肝脏以建立原位移植模型,观察所建立模型原位成瘤率、移植瘤生长、侵袭和转移情况,同时进行病理组织学、超微结构、细胞增殖周期和异倍体的观察.结果 原位移植瘤模型裸大鼠成瘤率高达90.0%,其肺转移率形成率为50.0%.结论 应用裸大鼠建立肝癌原位移植模型,为探讨肝癌转移的生物学机制和抗转移治疗提供了理想的实验动物模型.     

三氧化二砷对人胃癌裸鼠皮下移植瘤的作用机制

目的:探讨不同剂量As203对人胃癌细胞株SGC-7901裸鼠皮下移植瘤的体内抑瘤作用及作用机制.方法:建立人胃癌裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为实验组即As203低(1.0 mg/kg)中(2.5 mg/kg)高(5.0 mg/kg)剂量组、空白对照生理盐水组及阳性对照5-FU组(20 mg/kg),腹腔连续给药10 d,计算抑瘤率,检测用药后裸鼠的肝肾功能及血常规,观察用药前后裸鼠体重改变,实时定量RT-PCR检测移植瘤内caspase-3基因相对表达量.结果:低剂量As203组及5-FU组抑瘤率分别为60.6%和78.2%,与生理盐水组比较有统计学差异(P＜0.05),中高剂量组及5-FU组差异无统计学意义(P＞0.05).用药后低剂量As203组caspase-3的基因表达显著增高,与生理盐水组比较有统计学意义(P＜0.05),中高剂量组在数值上caspase-3表达增高,但无统计学差异(P＞0.05).各剂量组均出现白细胞抑制,但较5-FU组轻,肝肾功能未见异常.结论:低剂量As203表现出抑制肿瘤生长的作用,其机制可能与上调caspase-3基因的表达有关;As203对肝肾无明显毒性.     

塞来昔布对人三阴性乳腺癌裸鼠体内白细胞介素6和白细胞介素8水平的影响

目的探讨塞来昔布对人三阴性乳腺癌(TNBC)裸鼠体内白细胞介素6(IL-6)和IL-8水平的影响.方法 人TNBC细胞MDA-MB-231接种于裸鼠背部皮下,建立人TNBC裸鼠移植瘤模型.随机分为对照组和塞来昔布低、中、高剂量组.42 d后观察裸鼠一般状况的变化、用药前后肿瘤生长情况及肿瘤质量变化;ELISA法检测各组裸鼠血清中IL-6和IL-8含量的变化;RT-PCR检测肿瘤组织中IL-6和IL-8 mRNA的变化;免疫组化法检测肿瘤组织中IL-6和IL-8蛋白表达的变化.结果 塞来昔布各组肿瘤大小和瘤重较对照组均明显减小,差异均有统计学意义(P＜0.05).经塞来昔布治疗后,塞来昔布低、中、高剂量组裸鼠血清中IL-6和IL-8的含量明显降低,与对照组相比差异有统计学意义(P＜0.05),肿瘤组织中IL-6和IL-8 mRNA及蛋白的表达均较对照组明显减少.结论 塞来昔布可以抑制人TNBC裸鼠体内IL-6和IL-8的分泌及表达,进而影响肿瘤发展的进程.