健脾中药防治消化道恶性肿瘤的作用原理研究

通过对比观察到健脾中药对5-Fu杀伤胃癌细胞有明显的增效作用,而对被其所杀伤的正常细胞却有一定的保护作用。通过实验还观察到,某些健脾中药有反突变和反启动的作用。上述作用提示健脾中药能增强某些西药的疗效,并减少其副作用;对晚期消化道恶性肿瘤的治疗,健脾中药的运用不可忽略。     

健脾补肾中药对肿瘤成因多阶段学说中起始和启动的影响

本实验以“细胞突变试验”,“细胞介导突变试验”作为肿瘤成因多阶段学说的起始阶段的模型,观察中医中药对它们的影响。结果提示:白术,太四君汤,仙茅,仙灵脾等健脾补肾中药具有反突变作用;太四君汤,四君子汤,枸杞子等中药具有反启动作用;从而说明某些中药对肿瘤成因多阶段学说中的起始与启动阶段有明确的阻断作用。     

健脾中药复方胃肠安对人胃癌裸小鼠原位移植瘤生长和转移的影响

目的:观察以健脾为基础的中药复方胃肠安对人胃癌裸小鼠原位移植瘤生长和转移的抑制作用.方法:采用人胃癌细胞SGC-7901,裸小鼠66只,其中41只制作原位移植瘤模型,另25只制作皮下移植瘤模型.两种模型的裸小鼠分别随机分为3组:胃肠安组,5-FU组和生理盐水对照组.胃肠安组予以含生药0.12 g/ml的胃肠安煎剂0.5 ml灌胃,1次/d;5-FU组以5-FU 50 mg/kg行腹腔化疗,1次/周;生理盐水对照组予以生理盐水0.5 ml/d灌胃.原位移植瘤裸小鼠于造模后第64天处死;皮下移植瘤裸小鼠于造模后第41天处死.观察各组的抑瘤率,原位移植瘤各组肿瘤的转移情况,皮下移植瘤各组增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)和细胞凋亡情况.结果:原位移植瘤模型中,胃肠安组和5-FU组抑瘤率分别为40.82%和37.92%;皮下移植瘤模型中两组的抑瘤率则分别为48.70%和60.10%.原位移植瘤模型中,胃肠安组和5-FU组裸小鼠胃周淋巴结转移、肝转移、肝门淋巴结转移、横膈转移和腹膜转移比生理盐水对照组明显减少,3组的总转移率分别为30.77%、28.57%和71.43%(P ＜0.05).皮下移植瘤模型中,胃肠安组和5-FU组的PCNA总阳性率低于生理盐水对照组,细胞凋亡指数高于生理盐水对照组,差异有统计学意义(P ＜0.05或P ＜0.01).胃肠安组和5-FU组瘤重、总转移率和PCNA总阳性率比较,差异无统计学意义,但胃肠安组细胞凋亡指数明显高于5-FU组(P＜0.05).结论:健脾中药复方胃肠安具有抑制人胃癌裸小鼠原位移植瘤生长和转移的作用.胃肠安对胃癌细胞的体内抑制作用可能通过抑制增殖、诱导肿瘤细胞凋亡而实现,对其抑制转移的机制尚需作进一步的研究.     

颅内肿瘤引起颅内高压的证治

颅内肿瘤,发展到一定阶段大多可以产生颅内高压和压迫症状,西医通过切除肿瘤等方法来解除压迫和减低颅内压从而取得症状的缓解。可是有的病员,包括某些颅内良性肿瘤的患者,手术等西医手段并不能达到预期的目标,或者根本不宜手术,有时会使医生有束手无策之感。我们经过不断的临床探索和观察,感到应用以芳香化浊、软坚化     

中药的反突变作用研究

肿瘤成因的二步学说目前已为大家所接受。其中“起始”与突变密切有关,有人更提出了“起始子”即是突变剂,而“启动子”是非突变基因的调变剂。这种说法导致世界各国对突变进行广泛研究,以期揭示致癌机制。许多证据表明:致变与致癌有十分深刻的内在联系,有的致变物质本身就是致癌物质。有致变作用的物质很多。为了探讨中药在防治恶性肿瘤方面的潜在力量,我们以哺乳类细胞V_(79)作材     

中药胃肠安诱导裸鼠胃癌移植瘤细胞凋亡的途径及基因调控的研究

目的:观察以健脾类中药为基础的复方“胃肠安”(Weichang'an,WCA)对人胃癌细胞SGC-7901裸小鼠皮下移植瘤生长的抑制作用和体内诱导胃癌细胞凋亡的作用和途径。方法:用高效液相色谱法监测WCA的制备,保证研究制剂的稳定性;用人胃癌细胞SGC-7901裸小鼠皮下移植瘤模型评价WCA对胃癌细胞的体内抑瘤作用;链霉素抗生物素-过氧化酶法(streptavidin peroxidase,SP)检测增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)表达,末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated deoxyuridine triphosphate fluorescence nick end labeling,TUNEL)法检测凋亡指数以及SP法检测活化caspase-3、caspase-8和caspase-9的表达;SYBR green dye I实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-PCR)检测bcl-2等5条凋亡调控相关基因的表达;SP法比较有差异表达基因在细胞内的蛋白表达。结果:WCA组的平均瘤质量为(0.99±0.76)g,低于模型组的(1.93±0.58)g,差异有统计学意义(P=0.011 7),WCA组对皮下移植瘤生长的抑制率为48.70%;WCA组移植瘤PCNA阳性表达率为(35.73±6.01)%,强阳性表达率为(3.39±1.48)%,总阳性率为(39.03±7.37)%,均低于模型组的(53.48±9.34)%、(8.78±5.43)%和(62.26±13.80)%,差异有统计学意义;凋亡指数为(9.72±4.51)%,高于模型组的(2.45±1.37)%(TUNEL法);WCA组活化caspase-3表达阳性率为(5.20±2.26)%,较模型组的(2.82±1.84)%高(P=0.036 7);caspase-8表达阳性率为(4.44±2.67)%,而模型组为(3.94±2.10)%,差异无统计学意义(P=0.682 7);caspase-9表达阳性率为(8.87±6.08)%,较模型组的(2.25±0.79)%高(P=0.0144);与模型组相比,WCA组bcl-2等5条与凋亡调控相关基因的表达量差异有统计学意义的为Stat3(2-ΔΔCT=0.16)和bcl-2(2-ΔΔCT=0.10),均为下调表达作用;WCA组P-Stat3阳性表达率为(35.93±12.67)%,强阳性表达率为(3.64±1.72)%,总阳性率为(39.57±13.31)%,均分别低于模型组的(56.49±9.34)%、(13.16±7.06)%和(69.65±10.80)%,差异有统计学意义;bcl-2蛋白阳性表达率为(1.62±0.82)%,低于模型组的(7.53±3.73)%,差异有统计学意义。结论:中药复方WCA在体内可抑制胃癌细胞增殖,诱导凋亡;WCA在体内诱导胃癌细胞凋亡可通过caspase-9和caspase-3的活化实现。诱导胃癌细胞凋亡的机制与下调stat3和bcl-2的mRNA表达,抑制P-stat3和bcl-2蛋白在细胞内的表达有关。     

胃肠安对人胃癌细胞SGC-7901原位移植瘤细胞增殖和凋亡的影响

背景:以健脾类中药为基础的复方胃肠安可抑制人胃癌细胞SGC-7901裸小鼠皮下移植瘤细胞的增殖,并诱导细胞凋亡,提高进展期胃癌的3年生存率。目的:通过观察胃肠安对人胃癌细胞裸小鼠原位移植瘤生长和凋亡的影响,探讨其抑制肿瘤的作用机制。方法:以高效液相色谱(HPLC)法监测复方胃肠安制剂的稳定性;采用胃小囊法,予45只雄性BALB/c-nu/nu裸小鼠接种人胃癌细胞SGC-7901移植瘤模型,造模第28天,选出扪及胃部肿块直径为3mm左右的裸小鼠共43只,随机分为胃肠安组(14只)、5-氟尿嘧啶(5-FU)组(14只)和对照组(15只);采用免疫组化SP法检测增殖细胞核抗原(PCNA)的表达;采用缺口末端标记(TUNEL)法检测细胞凋亡指数。结果:胃肠安组原位瘤抑制率为40.8%,肝转移率(7.7%)和总转移率(30.8%)显著低于对照组(50.0%和71.4%)(P<0.05);胃肠安组原位移植瘤PCNA阳性率和总阳性率(51.0%±11.4%和60.4%±13.3%)显著低于对照组(61.6%±11.6%和74.4%±7.9%)(P=0.0287和P=0.0029);胃肠安组细胞凋亡指数(17.3%±8.9%)显著高于对照组(7.8%±3.0%)(P=0.0010)。结论:复方胃肠安可抑制人胃癌细胞裸小鼠原位移植瘤的生长和转移,并可抑制人胃癌细胞原位移植瘤的细胞增殖和诱导凋亡。     

不同容器熬煎中药对胃癌细胞集落形成的影响

为解释应用同一中药煎剂治疗病情、证候基本相同的肿瘤患者所出现的不同效果,是否与熬煎中药的容器不同有关,作者做了七种不同容器的中药煎液对人体胃癌细胞集落形成影响的实验。作者发现这七种不同容器的中药煎液,其对人体胃癌细胞集落形成的抑制作用,以玻璃器皿、搪瓷锅和砂锅者为最好,生铁锅、不锈钢锅和紫铜锅者较差,而以铝锅的中药煎液为最差。作者观察到各容器自身对照液和生理盐水对人体胃癌细胞集落形成无明显差异,因此认为不同容器中药煎液所造成的上述差异,并非单纯是容器材料的微量溶解,很可能是因容器在中药熬煎过程中发生了某些化学反应所造成。不同容器的中药煎液,其吸收光谱的峰值各不相同,似也可说明这一点。     

中药WCA对人胃癌细胞SGC-7901体内作用基因的筛选与验证

目的：探讨以四君子汤等健脾中药为基础的复方胃肠安(WCA)对胃癌细胞的体内作用分子机制。方法：采用人胃癌细胞SGC-7901裸小鼠皮下移植瘤模型系统评价WCA对胃癌细胞的体内抑瘤作用；链霉素抗生物素-过氧化酶法(SP法)检测增殖细胞核抗原PCNA表达,末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL法)检测凋亡指数以及SP法检测caspase-3的活化表达；cDNA array筛选出WCA组N.S.对照组差异表达2倍以上基因,Real-time Quantitative PCR验证与增殖、凋亡、分化及信号转导密切相关的19条基因的表达；SP法检测部分有差异表达的基因在细胞内的蛋白表达。结果：与对照组比较,WCA组对皮下移植瘤生长的平均抑制率为(44.32+5.67)%,3次实验WCA组的平均瘤重分别为(0.99±0.76),(1.02±0.16),(0.88±0.47) g,分别低于对照组的(1.93±0.58),(1.65±0.46),(1.63±0.52) g(P<0.05)；WCA组移植瘤PCNA阳性表达率(35.73±6.01)%、强阳性表达率(3.39±1.48)%和总阳性率(39.03±7.37)%均分别低于对照组的(53.48±9.34)%,(8.78±5.43)%,(62.26±13.80)%(P<0.05)；凋亡指数为(9.72±4.51)%高于对照组的(2.45%±1.37)%(TUNEL法)；WCA组活化caspase-3表达阳性率为(5.20±2.26)%,较对照组的(2.82±1.84)%高(P=0.0367)；与对照组比较,全基因表达谱芯片筛选出WCA组共45个2倍以上差异表达基因,其中上调表达24个,下调表达21个。35个已克隆基因,10个表达序列标签(expression sequence tag,EST)；2^-ΔΔCT法对19条目标基因的表达量进行评估,与对照组比较,表达量显著差异4倍以上的有Stat3(2^-ΔΔCT=0.16),RIPX(2^-ΔΔCT=0.18),ROD1(2^-ΔΔCT=0.23),bcl-2(2^-ΔΔCT=0.10),均为下调表达作用；WCA组P-Stat3阳性表达率(35.93±12.67)%、强阳性表达率(3.64%±1.72)%和总阳性率(39.57±13.31)%均分别低于对照组的(56.49±9.34)%,(13.16±7.06)%,(69.65±10.80)%,差异有显著性；bcl-2蛋白阳性表达率(1.62±0.82)%低于对照组的(7.53±3.73)%(P<0.05)。结论：健脾中药复方WCA在体内可抑制胃癌细胞增殖,诱导凋亡；WCA对胃癌细胞SGC-7901在核酸层次上有影响作用的已知基因主要为Stat3,RIPX,ROD1,bcl-2,均为下调表达作用；在蛋白表达水平的作用机制与抑制磷酸化的Stat3,bcl-2蛋白在细胞内的表达,上调活化caspase-3的表达有关。     

人胃癌原位移植模型中宿主脾虚证的探讨

目的：探讨人胃癌裸小鼠原位移植模型的脾虚证及该模型用于中药抗胃癌作用研究的可行性。方法：所有动物随机分为对照组,单纯造模组和健脾为主中药SRRS复方治疗组,建立人胃癌裸小鼠原位移植模型,观察肿瘤生长,转移及宿主体重、进食、自然杀伤（NK）细胞活性、红细胞免疫的变化,并观察健脾复方SRRS干预后肿瘤的进展情况,结果：经病理证实所有造模动物均形成腺胃部位的人胃癌移植瘤,单纯造模组出现较多肝脏、胰腺、横膈等脏器部位的肿瘤转移,动物进食量减少,体重明显下降,NK细胞活性降低,免疫复合物花环率较造模前显著增加,而在健脾为主中药SRRS复方治疗组,动物进食量稍减少,无体重下降,NK细胞活性较单纯造模组提高,原位肿瘤生长受到抑制,肿瘤转移灶少,结论：人胃癌裸小鼠原位移植可造成宿主消化,免疫功能低下等脾虚证表现。该模型作为病证结合的胃癌模型值得进一步研究,健脾为主SRRS复方对人胃癌原位移植瘤有抑瘤和改善其脾虚状态的作用。