双酚A对体外大鼠睾丸支持细胞闭锁蛋白Occludin表达的影响

目的 观察双酚A (BPA)对体外大鼠睾丸支持细胞增殖能力与闭锁蛋白Occludin (OCLN)表达的影响,探讨BPA对精子发生的损伤机制.方法 体外分离培养雄性Wistar大鼠睾丸支持细胞,油红O染色鉴定.实验分为BPA染毒组(25 μM、50 μM和100 μM分别处理细胞24h)、溶剂对照组(无血清DMEM/F12+DMSO+细胞悬液)和空白对照组(无血清DMEM/F 12).CCK-8法测支持细胞增殖活性,Western Blot法检测OCLN表达水平.结果 分离培养大鼠睾丸支持细胞纯度＞90％.CCK-8实验结果显示:BPA对支持细胞增殖活性具有抑制作用,BPA浓度＞103μM时,存活率明显降低,细胞存活率＜44％,其差异有统计学意义(P＜0.05).Western Blot法检测结果显示,OCLN蛋白表达随着BPA染毒剂量的增加而降低,呈剂量依赖性,不同染毒剂量组与对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 BPA可抑制睾丸支持细胞增殖活性和OCLN的表达,干扰支持细胞正常的生精过程.     

硫普罗宁联合奥沙利铂对抗肿瘤作用的影响

目的探讨硫普罗宁（Tio）联合奥沙利铂（L-OHP）在人胃癌裸鼠模型中对抗肿瘤作用的影响。方法建立人胃癌裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为6组,每组10只动物。A组腹腔注射50 g/L葡萄糖注射液;B组腹腔注射L-OHP 6 mg/kg;C组腹腔注射Tio 30 mg/kg;D组腹腔注射L-OHP 6 mg/kg＋Tio 30 mg/kg;E组腹腔注射L-OHP 6 mg/kg＋Tio 45 mg/kg;F组腹腔注射L-OHP 6 mg/kg＋Tio 60 mg/kg,连续用药14 d。测裸鼠体质量、瘤体积,计算抑瘤率;处死动物,查血常规,肝、肾功能,行肝、肾、肿瘤病理组织学检查。结果用药后B、D、E、F组裸鼠体质量均出现了不同程度的下降,与用药前比较差异有显著性（t=5.52~9.74,P〈0.01）。B、D、E、F组表现出了明显的抗肿瘤作用,瘤质量与A组比较差异有显著性（F=130.77,t=8.58~18.94,P〈0.01）;而D、E组之间,E、F组之间的抗肿瘤作用差异无显著性（P〉0.05）。B组血白细胞降低,D、E、F组白细胞较B组出现不同程度的升高,差异有显著性（F=13.07,t=4.32~12.20,P〈0.05）。各组肝、肾功能未见明显损害。结论 Tio可能降低了L-OHP的抗肿瘤作用,但表现出了明显的肝、肾保护作用。     

Transwell侵袭实验测定M受体对胆管癌细胞侵袭的影响

目的 探讨Transwell体外侵袭模型适用于胆管癌侵袭性研究的实验条件和方法.观察M受体兴奋剂及拈抗剂对胆管癌侵袭力的影响.方法 将不同浓度(0.5×105/mL、1.0×105/mL、1.5×105/mL、2.0×105/mL)的胆管癌细胞200μL置入Transwell小室侵袭模型,分别培养12 h、24 h、3...     

血清肌抑素水平与胃癌恶病质的关系

目的 观察胃癌恶病质患者血清肌抑素水平变化,并初步探讨肌抑素与肿瘤坏死因子-α的相关性.方法 根据整体营养状况主观评估(PG-SGA)分级将80例胃癌患者分成胃癌恶病质组(PG-SGAC级,32例)和胃癌非恶病质组(PG-SGA A+B级,48例),采用ELISA法测定血清肌抑素和肿瘤坏死因子-α水平,并记录身高、体质量、总蛋白、白蛋白、血红蛋白、C-反应蛋白等指标.对照组为健康体检者80例,同法测定并记录上述指标.结果 胃癌恶病质组的血清肌抑素水平为(1.36±0.50) μg/L,显著高于胃癌非恶病质组的(0.91 ±0.49) μg/L(x2=14.67,P=0.00);对照组的血清肌抑素水平为(0.70±0.37) μg/L,显著低于胃癌非恶病质组(x2=36.45,P=0.00).对照组(r=-0.16,P=0.16)、胃癌非恶病质组(r=0.08,P=0.58)及胃癌恶病质组(r=0.18,P=0.31)中血清肌抑素与肿瘤坏死因子-α浓度均不具有相关性.结论 胃癌恶病质患者血清肌抑素水平升高;血清肌抑素与肿瘤坏死因子-α无相关性.     

Ras与NIS在甲状腺乳头状癌癌旁组织中的表达

目的探讨甲状腺乳头状癌（PTC）癌旁组织Ras及钠碘同向转运体（NIS）蛋白的表达及意义。方法收集2008年1月1日-2011年12月1日我院病理科PTC石蜡包埋切块62例,其中PTC癌旁组织为正常甲状腺组织者34例（G正常组）,癌旁组织为结节性甲状腺肿组织者28例（G结甲组）。采用免疫组化方法检测两组癌旁组织中Ras及NIS蛋白表达,结果以免疫组化评分（IHS）表示。结果Ras蛋白在G正常组和G结甲组IHS得分分别为（5．65±3．45）和（4．52±2．28）分,两组比较无统计学差异（t=0．192,P〉0．05）;NIS蛋白在G正常组和G结甲组IHS得分分别为（7．78±3．97）和（4．93±2．05）分,两组比较差异有显著性（t=2．128,P％0．05）。结论伴有不同周围组织背景的PTC在术后清甲治疗中对放射碘治疗敏感性可能有所不同,伴有结节性甲状腺肿的PTC病人清甲治疗效果相对较差。     

核转录因子κB信号通路在应力调控成肌细胞分化中的作用

背景:NF-κB信号通路在细胞生长分化、炎症反应、肿瘤生长等过程中发挥重要的调节作用,也参与成肌细胞分化的调控。目的:分析NF-κB信号通路在应力介导的C2C12成肌细胞分化中的作用及其作用机制。方法:成功构建大鼠C2C12成肌细胞体外培养-力学刺激模型,采用多通道细胞牵张应力加载系统,以0.5Hz的加载频率和10%的细胞拉伸变形幅度对细胞进行拉伸培养2,6,12,24h。结果与结论:①C2C12成肌细胞在周期性机械拉伸力作用下,NF-κB信号通路被激活。当细胞受到应力刺激6h后,胞核NF-κBp65亚基蛋白表达水平开始增强,24h内NF-κBp65亚基蛋白表达水平达到峰值。加力12,24h组与未加力对照组之间差异有显著性意义(P<0.05)。②IκBα蛋白表达水平在加力6h后表达显著下降,24h内IκBα蛋白表达水平减弱达到最低。加力12,24h组与未加力对照组之间差异有显著性意义(P<0.05)。③周期性张应力促进C2C12成肌细胞分化过程中Myogenin的表达,加入NF-κB信号通路特异性抑制剂吡咯烷二硫氨基甲酸(20μmol/L)后再加力,Myogenin的表达明显降低。以上结果提示:①NF-κB信号通路可能参与应力介导的C2C12成肌细胞分化的调控过程。②当细胞受到应力刺激时,胞质IκBα发生磷酸化并降解。③NF-κB信号通路在应力介导的C2C12成肌细胞分化过程中发挥重要作用,但不是这一调控过程的惟一通路。     

兔ADSCs与NPCs共培养后再移植对椎间盘退变影响

目的探讨兔脂肪间充质干细胞(ADSCs)与髓核细胞(NPCs)共同培养后再植入兔腰椎间盘对Ⅱ型胶原和蛋白多糖的影响。方法体外分别提取分离培养兔ADSCs与NPCs。诱导分化兔ADSCs向成骨、成脂方向分化,鉴定兔ADSCs。将兔ADSCs与NPCs共同培养,诱导兔ADSCs向NPCs方向分化。新西兰大白兔30只,分为实验组和对照组,分别将兔ADSCs与NPCs共同培养后的细胞悬液、PBS缓冲液注入针刺抽吸后的椎间盘。4、8周后,采用间苯三酚分光光度法检测两组兔椎间盘髓核蛋白多糖表达的变化,采用反转录-聚合酶链反应对Ⅱ型胶原和蛋白多糖的基因表达进行半定量分析。结果 ADSCs可诱导向成骨、成脂方向分化,与NPCs共同培养后由梭形、多角形变为成纤维细胞样。对照组髓核Ⅱ型胶原和蛋白多糖表达低于实验组,差异有显著性(t=6.50～13.04,P<0.05)。结论兔脂肪组织可成功提取分离ADSCs,ADSCs与NPCs共同培养后移植可延缓兔椎间盘退变。     

人脂肪干细胞对大鼠带真皮下血管网皮片移植的影响

目的探讨人脂肪干细胞(ADSCs)对大鼠带真皮下血管网皮片移植成活的影响及其机制。方法体外培养增殖ADSCs,流式细胞术鉴定,应用EdU标记ADSCs。于大鼠背部设计术区,实验组(n=10)局部注射EdU标记ADSCs PBS悬液,对照组(n=10)注射PBS。术后7d处死大鼠,比较两组移植皮片的成活率;取移植皮片组织行苏木精-伊红染色,光镜下观察微血管数目;免疫组织化学染色观察组织中CD31及血管内皮生长因子(VEGF)的表达;EdU标记检测ADSCs在移植皮片内的分布及分化。结果实验组大鼠移植皮片成活率、组织单位面积内微血管数目、VEGF表达均高于对照组,差异有显著性(t=3.870～14.729,P<0.05)。实验组EdU标记ADSCs阳性细胞分化为部分小血管内皮细胞,对照组检测不到EdU阳性ADSCs细胞分布。结论局部移植的ADSCs可以在组织内分化成血管内皮细胞,并促进VEGF等生长因子的分泌,从而促进大鼠带真皮下血管网皮片移植成活。     

运动训练对局灶性脑缺血大鼠神经功能及Sema3A表达的影响

目的探讨运动训练对局灶性脑缺血大鼠神经功能及Sema3A表达的影响。方法选取健康雄性SD大鼠30只,随机分为假手术组、对照组、训练组,每组10只。训练组采用线栓法建立左侧大脑中动脉阻塞2h再灌注动物模型,假手术组造模方法同训练组但不阻塞大脑中动脉血流。训练组大鼠于再灌注24h后游泳训练30min,共计3d;假手术组和对照组大鼠不行游泳训练。3d后对各组大鼠进行受损神经功能(MENZIES评分)、抓握力及平衡功能评定;处死大鼠,取缺血侧大脑皮质和海马,均用RT-PCR方法检测Sema3A-mRNA表达。结果训练组大鼠MENZIES评分低于对照组,而高于假手术组,差异均有显著意义(F=177.75,q=19.49、6.00,P<0.05);训练组大鼠抓握力及平衡功能评分高于对照组,而低于假手术组,差异均有统计学意义(F=57.63、117.00,q=7.25～12.46,P<0.05)。训练组Sema3A-mRNA的表达量低于对照组,高于假手术组,差异均有统计学意义(F=62.873、78.095,q=8.35～9.10,P<0.05)。结论运动训练能降低轴突抑制因子Sema3A-mRNA的表达,从而促进轴突再生、改善受损神经功能。