叶酸偶联5-氟尿嘧啶-白蛋白对肿瘤细胞的毒性及靶向性研究

目的研究叶酸偶联5-氟尿嘧啶-白蛋白在体外对肿瘤细胞的毒性及经叶酸受体介导的靶向性。方法选用叶酸受体表达阳性FR（＋）宫颈癌HeLa细胞及叶酸受体表达阴性FR（-）肺癌A549细胞进行实验。用MTT法观察叶酸偶联物对细胞的毒性作用,同时利用游离叶酸能与叶酸偶联物竞争性结合叶酸受体的原理,考察叶酸偶联物是否具有经叶酸受体介导的靶向性。结果叶酸偶联物对FR（＋）HeLa细胞具有比5-氟尿嘧啶原料药更高的抑制率,能有效的靶向FR（＋）HeLa细胞,且细胞毒性作用能被过量的外源性游离叶酸所抑制,而叶酸偶联物对FR（-）A549细胞作用很弱。结论叶酸偶联的5-氟尿嘧啶-白蛋白能经叶酸受体介导靶向于叶酸受体丰富的肿瘤细胞。     

蒜氨酸+蒜酶抗肿瘤功效的实验研究

目的：观察蒜氨酸 蒜酶体外抗肿瘤功效的活性，研究其可能的作用机制。方法：将不同浓度的蒜氨酸 蒜酶作用于MGC—803和HeLa细胞，测定细胞存活量和活细胞蛋白含量，确定蒜氨酸 蒜酶对肿瘤细胞的抑制作用；通过流式细胞仪观察蒜氨酸 蒜酶对肿瘤细胞增殖的影响；利用光镜和荧光显微镜观察细胞凋亡的形态学变化；利用琼脂糖凝胶电泳观察DNA梯状带形成。结果：蒜氨酸 蒜酶可抑制MGC—803和HeLa细胞．中低剂量的蒜氨酸 蒜酶有促进蛋白合成的作用；蒜氨酸 蒜酶使MGC—803和HeLa细胞于S期阻滞．其中以对MGC—803细胞的S期阻滞明显；蒜氨酸 蒜酶可诱导MGC—803和HeLa细胞凋亡。结论：蒜氨酸 蒜酶体外具有抗肿瘤的活性．其机理可能在于诱导肿瘤细胞的凋亡和促进肿瘤细胞的分化。     

两种叶酸偶联物的合成及体外靶向性研究

合成叶酸偶联物并将其应用于叶酸靶向脂质体制备，考察其在体外肝癌HepG2细胞中的靶向性。通过酰胺反应将叶酸、胆固醇琥珀酸单酯与两种不同相对分子质量的聚氧乙烯二胺材料连接，合成两种两亲性的叶酸-聚乙二醇-胆固醇琥珀酸单酯（Folate-PEG₂₀₀₀-CHEMS和Folate-PEG₄₀₀₀-CHEMS），并利用核磁共振氢谱（¹H NMR）和超高分辨率复杂体分离鉴定质谱系统对其进行了结构表征。选取钙黄绿素为模型药物，采用薄膜分散法分别利用Folate-PEG₂₀₀₀-CHEMS和Folate-PEG₄₀₀₀-CHEMS制备了钙黄绿素脂质体FA-PEG₂₀₀₀-L与FA-PEG₄₀₀₀-L。利用激光粒度仪检测FA-PEG₂₀₀₀-L与FA-PEG₄₀₀₀-L的粒径、Zeta电位；利用流式细胞仪和激光共聚焦扫描显微镜，考察了脂质体FA-PEG₂₀₀₀-L与FA-PEG₄₀₀₀-L在HepG2细胞体外摄取实验中的药物递送效果。结果显示，钙黄绿素脂质体的平均粒径为（205.8 ± 10.2） nm，经电位测试脂质体的Zeta电位为-（1.19 ± 0.31） mV。FA-PEG₄₀₀₀-L靶向脂质体的荧光强度分别约为普通脂质体、FA-PEG₂₀₀₀-L的3.6和3.1倍（P < 0.01），FA-PEG₄₀₀₀-L在HepG2细胞中的递送效率明显高于FA-PEG₂₀₀₀-L与非靶向组，说明Folate-PEG₄₀₀₀-CHEMS可应用于脂质体制备，并可促进体外HepG2细胞对脂质体的摄取。     

基于叶酸受体的靶向性钆造影剂的制备及弛豫性能的研究

目的 制备基于叶酸受体的靶向大分子磁共振造影剂--叶酸-壳聚糖-(Gd-DTPA)n,并研究其体外弛豫性能.方法 在EDC的催化下,将壳聚糖与DTPA反应,制得壳聚糖-DTPA偶联物,然后将该偶联物与叶酸活性酯反应所得产物与GdCl3螯合得到叶酸-壳聚糖-(Gd-DTPA)n.在磁共振仪上测定配合物的体外弛豫时间T1,并分析其弛豫性能R1.结果 制得的叶酸-壳聚糖-(Gd-DTPA)n配合物中叶酸的偶联率约为4,Gd-DTPA与壳聚糖的偶联率随着EDC的加入量增大而增大,体外弛豫性能R1约为6.2&#215;10-3L&#183;mmol-1&#183;ms-1,比小分子Gd-DTPA的弛豫性能提高了2.3倍左右.结论 成功地制备了叶酸介导的高弛豫效能的靶向性磁共振造影剂.     

蒜氨酸/蒜酶二元催化体系配比研究

为确定蒜氨酸/蒜酶二元释药体系的配比以便在体内产生大蒜辣素,考察天然来源大蒜中提取的高含量蒜氨酸和蒜酶催化裂解反应的比例关系。分别采用蒜氨酸含量测定(外标法)和大蒜辣素含量测定(内标法)方法,通过HPLC测定反应体系中蒜氨酸的转化率以及大蒜辣素生成率。当蒜氨酸(含量≥90%)与蒜酶质量比为1∶1且蒜酶活力≥1 000 U/g时,蒜氨酸转化率为(95.7±1.2)%,大蒜辣素生成率为(87.4±1.3)%。研发蒜氨酸/蒜酶二元释药制剂时,可采用蒜氨酸(≥90%)与蒜酶(≥1 000 U/g)质量比为1∶1的配比。对于不同活力的蒜酶可采用蒜氨酸与蒜酶1 mg∶1.3 U的配比。     

靶向叶酸受体的蟾酥提取物长循环脂质体的制备及其体外抗肿瘤活性

目的 制备具有靶向叶酸受体的蟾酥提取物长循环脂质体,并对其进行表征,再进一步考察其体外抗肿瘤活性.方法 合成叶酸-聚乙二醇单硬脂酸酯并用红外光谱和质谱进行表征,采用薄膜分散法制备靶向叶酸受体的蟾酥提取物长循环脂质体,用透射电镜、激光粒度仪、高速离心法分别测定脂质体的形状、粒径、电位、包封率,MTT法考察脂质体对肿瘤细胞的抑制作用.结果 经红外光谱及质谱分析证实,成功合成了靶向材料叶酸-聚乙二醇单硬脂酸酯;制备的靶向叶酸受体的蟾酥提取物长循环脂质体在透射电镜视野中粒径大小均一,约160 nm,Zeta电位约4.0 mV,包封率达90%以上;体外细胞毒性显示,叶酸修饰的蟾酥提取物长循环脂质体的IC50值为0.46μg/mL,普通长循环脂质体的IC50值为0.76μg/mL.结论 成功合成叶酸-聚乙二醇单硬脂酸酯靶向材料并构建了靶向叶酸受体的蟾酥提取物长循环脂质体,可靶向性抑制肿瘤细胞生长.     

2-甲氧基雌二醇-RGD肽缀合物的合成及其抗血管生成作用

以2-甲氧基雌二醇为先导物,将其3位和17位通过连接基团与RGD肽偶联,合成了一系列2-甲氧基雌二醇-RGD肽缀合物,其中13个化合物未见文献报道,结构经IR,MS及¹H NMR确证,并采用细胞迁移划痕试验初步测定了6个目标缀合物的抗血管生成活性。结果显示,化合物26c表现出较强的活性,强于先导物2-甲氧基雌二醇,从而证明了其潜在的抗血管生成作用。     

罗丹宁衍生物的合成及抗肿瘤活性

在罗丹宁衍生物WL-276的基础上设计并合成一系列新的罗丹宁衍生物,并对这些化合物的抗肿瘤活性进行测定。以氨基酸为原料,经环合和缩合反应,合成了化合物Ⅱ_1-4,然后分别与硫化氢供体ADT-OH偶联得到化合物Ⅲ_1-4,共合成了8个目标化合物,其中4个未见报道,其结构均经¹H NMR、IR和HR-MS确证。然后用MTT法筛选其抗肿瘤活性。初步研究表明,化合物Ⅱ_1,3,4和Ⅲ_1-4对HepG2肿瘤细胞和DU145肿瘤细胞的增殖均具有较强的抑制作用,且化合物Ⅲ的活性比Ⅱ强;化合物Ⅲ_2,4对HepG2细胞和化合物Ⅲ_1,2,4对DU145细胞的抗增殖活性均高于阳性对照5-氟尿嘧啶。     

新型熊果酸衍生物与查耳酮缀合物的合成及其抗肿瘤活性初步评价

以天然产物熊果酸为先导化合物,将查耳酮通过酯化反应拼接到熊果酸衍生物得到10个熊果酸衍生物-查耳酮缀合物,其结构均通过¹H NMR,¹³C NMR和HRMS加以确认。初步的生物活性结果表明,这些缀合物对CNE2、KB、MCF-7、A549和HepG2细胞均有抑制活性。特别是对MCF-7细胞的抑制活性强于熊果酸和临床上应用的药物他莫昔芬,其中化合物11e(IC₅₀=4.7 μmol/L)的抗乳腺癌活性最强,是他莫昔芬(IC₅₀=15.2 μmol/L)的近3倍;同时,这些缀合物对正常的MCF-10A和VERO细胞没有毒性,安全性较他莫昔芬高。     

HPLC定量测定大蒜的蒜辣素和蒜氨酸

蒜辣素(allicin)及其前体蒜氨酸(alliin)已被认为是大蒜及其制品评价的标志成分。我们根据文献(1)和(3)改进了蒜辣素的合成和纯化方法,并用反相HPLC硅胶吸附物作为内标进行蒜辣素的含量测定。另外我们还建立了两种洗脱系统以缩短分析时间而获得相同的分析数据。蒜辣素的保留时间原为6.7min,而现在的保留时间分别减少到3.5和3.9min。为了建立蒜氨酸的内标,我们改进了氨基酸的合成方法,异构体反复重结晶进行分离,用HPLC进行蒜氨酸定量测定。     

麻疹的双相移位研究进展

近年新生儿、婴儿、成人麻疹患者逐年增加,临床表现一般仍较典型,成年人麻疹患者全身中毒症状较重。麻疹抗体检测结果阳性是主要的诊断依据。麻疹发病的双相移位的机理可能是,免疫保护力不足,婴儿出生时麻疹抗体力低。孕期母传胎的麻疹抗体减弱,母经乳汁传给婴儿的抗体减弱,成人麻疹抗体水平逐年下降。预防措施是怀孕前给予育龄妇女麻疹疫苗接种,鼓励母乳喂养,麻疹疫苗计划免疫适当提前,在成人追加麻疹疫苗的免疫,加强病毒变异的研究等。     

87株幽门螺旋杆菌VacA等位基因的分析

目的以研究方法LiPA（Line Probe Assay）分析VacA等位基因的表达,了解幽门螺旋杆菌致病机理的理解。方法从三个不同城市87位进行胃镜检查患者的胃粘膜中培养出幽门螺旋杆菌,提取DNA,用LiPA方法分析VacA等位基因。结果（1）87位患者以sic（88．5％）和m2a（63．2％）分布为主,未发现s1b和s2;（2）混合菌株感染率为41．4％,远远高于西方国家,其中上海的混合感染率最高（62．5％）,与北京（41．0％）和南宁（20．8％）相比具有显著性差异,P〈0．01;（3）北京、海、南京三个不同城市s1、m等位基因亚型分布率存在差异;（4）溃疡病和非溃疡病患者m1和m2的分布率没有显著性差异。结论我国幽门螺旋杆菌多重菌株感染率较高,不同的m基因型与消化性溃疡的发生无显著性相关。     

扩张兔皮肤超微结构的变化

目的：动态观察扩张兔皮肤超微结构的变化。方法：选用2--3kg新西兰大白兔64只，分为2大组，快速扩张组和常规扩张组，每组32只，每大组再分为4组，为扩张完成后即时、1周、12周、24周组。每组8只，其中4只为实验组，另4只植入扩张器不扩张作为对照组。透射电子显微镜观察各组皮肤超微结构的变化。结果：表皮扩张后经历--由扩张刺激引起的创伤至完全修复的过程。扩张后即时真皮中成纤维细胞大量增生，功能由静止转向活跃，胶原纤维碎裂成片，弹力纤维部分断裂，炎症细胞浸润；扩张后1周常规扩张组基底膜连续性基本恢复。显示成纤维细胞合成功能活跃。扩张后12周、24周，成纤维细胞趋于稳定、形态狭长，部分胶原排列紊乱，部分有似癜痕样改变。结论：扩张刺激可致兔皮肤创伤。扩张后真皮不可完全修复。     

腰椎间盘突出症再次手术的原因分析

目的解决腰椎间盘突出症手术中神经压迫。方法对1980～1998年再手术资料进行统计分析,讨论分析再手术原因,再次手术前影像学检查,观察病理变化以确定再手术方法。结果对11例随访6个月～1年,优7例(68．4％),良3例(36．8％),差1例(2．8％)。结论初次手术前详细查体和分析X线片,术中用导尿管和神经剥离探查,尽量避免髓核遗留,手术范围不宜太大,尽量减少对软组织和脊柱结构的破坏,避免形成硬膜囊与神经根粘连而致单纯形疤痕。     

芹黄素对大鼠缺血视网膜功能恢复的作用

目的观察芹黄素对大鼠缺血视网膜功能恢复的作用。方法30只Long-Evans大鼠用动脉结扎法造成视网膜缺血模型,其中治疗组20只腹腔注射芹黄素,对照组10只注射溶媒二甲基亚酚。用视觉电生理仪检查视网膜功能恢复情况。结果芹黄素治疗组视网膜功能恢复明显好于对照组(P<0.05)。结论芹黄素能促进大鼠缺血视网膜的功能恢复。      

降钙素原变化率的测定对细菌性肺炎的评估价值

目的 探讨降钙素原变化率的测定对细菌性肺炎的评估价值.方法 选取住院治疗的细菌性肺炎患者72例,根据治疗效果分为治疗有效组(有效组)47例和治疗无效组(无效组)25例,对治疗有效组和无效组中的降钙素酶原变化及影响肺炎治疗效果的危险因素进行分析.结果 有效组治疗后3天及治疗后7天的降钙素酶原显著低于无效组的患者(P＜0.05);年龄＞65岁、心功能≥3级、COPD、糖尿病、肺部双侧受累(X线示)、菌血症、感染性休克和3天内降钙素酶原变化率＜30％是影响细菌性肺炎治疗效果的危险因素;感染性休克、肺部双侧受累、3天内降钙素酶原变化率＜30％及心功能≥3级是影响细菌性肺炎治疗效果的独立危险因素.结论 测定降钙素原变化率对细菌性肺炎的疗效评估具有重要临床意义,可在临床推广应用.     

人体寄生虫学多媒体教学效果的初步评估

通过分析多媒体辅助教学方法与传统教学方法在人体寄生虫学教学中的应用,指出多媒体辅助教学对于提高教学质量效果显著,受到了绝大部分同学的赞同和欢迎.     

上颌骨牙源性囊肿刮除手术的疗效观察

目的探讨对上颌骨牙源性囊肿患者进行囊肿彻底刮除手术的临床疗效。方法对我科在2010年1月～2017年9月收治的73例上颌骨牙源性囊肿患者行囊肿彻底刮除手术治疗,对患者术区肿胀消退、术后伤口感染、伤口愈合、牙龈再附着、术后复发、骨质改建、骨质修复等情况随访观察。结果 73例患者术后肿胀消退时间为1～4 d。73例患者术后均未发生伤口感染,伤口均一期愈合。所有患者牙龈再附着情况好,术后均未见复发。术后未见并发症。骨质改建效果好,骨质修复的效果因影像学资料过少,缺乏客观依据,暂不下有效结论。结论对上颌骨牙源性囊肿患者进行囊肿彻底刮除手术,术后患者的恢复情况良好,值得在临床治疗上进行推广。     

头孢他啶用于胸外科感染的疗效分析

目的 观察和评价头孢他啶（泰得欣）应用于普通胸外手术的临床疗效和安全性。方法 采用对比试验，观察2005年8-10月96例普胸手术预防和治疗的疗效和不良反应。结果 泰得欣在预防和治疗术后感染中总有效率95．9％，不良反应发生率为5．2％。结论 泰得欣临床效果满意，使用安全，值得在普胸手术中选用。     

骨淋巴管瘤病1例报告

患者女,19岁,体检发现全身多处固执破坏4个月。影像学检查：平片及CT平扫检查：双侧髂骨、耻骨、股骨颈及股骨上段均可见多发大小不等的低密度影,略呈膨胀性,边界清楚,部分可见硬化边。双侧肱骨上段、肩胛骨近关节盂处骨质及股骨下段、右胫骨近端、左腓骨中上段可见多个囊性骨及右侧锁骨亦可见多发局限性低密度减低区、略呈膨胀性（图1、5）。MRI平扫：脊柱可见多个囊状长T1长T2信号,部分略呈膨胀性。（图2～4）