三氧化二砷诱导人卵巢癌耐药细胞系3AO/cDDP细胞凋亡及机制的研究

目的：探讨三氧化二砷（As2O3）对人卵巢癌耐药细胞系3AO／cDDP细胞生长的影响及其机制。方法：采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法,检测不同浓度As2O3作用后,3AO／cDDP细胞的生长抑制率;采用流式细胞技术检测细胞凋亡率,细胞周期变化,以及Fas、FasL基因表达的变化。所有结果均与人卵巢癌细胞系3AO细胞相比较;采用细胞骨架染色法观察3AO／cDDP细胞凋亡细胞形态变化,通过吖啶橙染色,荧光显微镜观察As2O3作用后3AO细胞的形态变化。结果：As2O3能明显抑制3AO／cDDP细胞的增殖,抑制作用呈时间和剂量依赖性（P＜0．05）;在定一浓度范围内,3AO／cDDP细胞凋亡率与As2O3的浓度和作用时间呈依赖关系,诱导凋亡的最适浓度是3μmol/L;As2O3低浓度时,3AO／cDDP细胞周期S期通过受阻,高浓度时诱导S期细胞凋亡;As2O3作用后,两种细胞系Fas基因的表达均呈升调节,FasL基因的表达无变化;与3AO细胞相比,差异无显著意义（P＞0．05）;As2O3作用后3AO及3AO／cDDP形成典型的凋亡小体。结论：As2O3通过Fas/FasL系统,诱导S期细胞凋亡,有效地抑制人卵巢癌耐药细胞系细胞的生长。     

三氧化二砷诱导卵巢癌细胞株SKOV3和COC1凋亡

目的：对比研究三氧化二砷(As2O3)诱导卵巢癌细胞株SKOV3和COC1凋亡的作用．方法：用不同浓度的As2O3溶液作用人卵巢癌细胞株SKOV3及COC1,于不同时间点收集细胞,MTT法检测细胞生长抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡率及分析细胞周期的变化,原位末端标记法观察细胞凋亡形态学特征．结果：不同浓度的As2O3溶液对卵巢癌细胞株SKOV3及COC1均有不同程度的生长抑制作用．随着药物浓度的升高、作用时间的延长,As2O3对COC1细胞的生长抑制率升高．15．0μmol/L(10ppc)浓度组的As203对SKOV3的生长抑制效应最显．低于15．0μmol/L的浓度组对SKOV3细胞株的抑制率之间没有显性差异．As2O3对COC1细胞的生长抑制作用比SKOV3强．6．0μmol/L As2O3作用48 h SKOV3细胞出现凋亡形态学改变,COC1细胞在1．5μmol/L As2O3作用48h就出现了凋亡形态学改变,且随着作用时间的延长凋亡细胞增多．15．0和6．0μmol/L As2O3作用下SKOV3细胞周期的变化出现了随着药物作用时间的延长G1期细胞比例逐渐上升,S期、G2／M期细胞的比例同时降低的现象．在3．0和1．5μmoL／L As2O3作用下COC1细胞周期也出现了相同的改变．结论：As2O3可以诱导卵巢癌细胞株SKOV3和COC1发生凋亡,COC1比SKOV3对砷剂更敏感．诱导细胞发生G1期阻滞是As2O3抑制卵巢癌细胞生长作用的可能机制之一。     

三氧化二砷抑制人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤生长及机制的研究

目的 :探讨三氧化二砷 (As2 O3 )对人卵巢癌细胞株 3AO细胞裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用及作用机制。方法 :4× 10 6个 3AO细胞接种于裸鼠皮下 ,采用不同浓度As2 O3 腹腔注射治疗 ,与顺铂 (cDDP)进行对比 ,计算移植瘤的体积、瘤重、抑瘤率及Fas、FasL基因表达水平的变化。结果 :As2 O3 对移植瘤生长的抑制作用明显优于cDDP ,且具有剂量低赖性 ;As2 O3 作用后Fas基因的表达呈升调节 ,而FasL基因的表达无明显变化。结论 :As2 O3 对人卵巢癌移植瘤的生长具有明显的抑制作用 ,其机制与Fas基因的过度表达有关。     

As2O3诱导人膀胱癌BIU-87细胞株凋亡及其对细胞周期的影响

目的:观察三氧化二砷(As2O3)对人膀胱癌BIU-87细胞株生长抑制作用,并探讨对细胞周期及凋亡的影响.方法:CellTiter 96 Aqueous One 试剂检测BIU-87细胞株增殖活力;荧光染色观察凋亡细胞的形态学变化;流式细胞术分析细胞周期及凋亡.结果:As2O3与BIU-87细胞株生长抑制率之间有明显的浓度依赖关系 (P<0.01),IC50为28.92 μmol/L;荧光显微镜下观察到经As2O3作用的BIU-87细胞核膜消失,核染色质呈大小不等的小圆形碎片;流式细胞术结果表明30 μmol/L的As2O3处理BIU-87细胞株48 h后,G0/G1期细胞比例下降,S期细胞比例增加,凋亡率为47.37%.结论:As2O3能显著抑制BIU-87细胞株增殖;使细胞阻滞在S期,并进一步诱导细胞凋亡.     

三氧化二砷诱导喉癌Hep—2耐药细胞凋亡的研究

目的 :观察三氧化二砷 (As2 O3 )对喉癌Hep -2细胞株和长春新碱诱导的多药耐药Hep -2r细胞的作用和对细胞周期的影响。方法 :用长春新碱(VCR)递增药物浓度法筛选耐药细胞Hep -2r,体外培养的细胞与不同浓度的As2 O3 作用 2 4、48、72h,通过MTT还原法检测细胞的生长抑制率 ,用光学显微镜、流式细胞仪、荧光显微镜研究细胞凋亡的形态学改变 ,检测细胞凋亡率并进行细胞周期分析。结果 :As2 O3 可有效抑制Hep -2细胞和Hep-2r细胞的生长 ,呈时间和浓度依赖性特点。形态学观察发现 ,As2 O3 诱导Hep-2和Hep-2r细胞凋亡 ,Hep -2和Hep -2r细胞对As2 O3 的敏感性无显著差异。2 μmol/LAs2 O3 作用 2 4h时 ,S期细胞比例增高 ,72h后 ,S期细胞明显下降 ,细胞大量凋亡。As2 O3 在作用早期 ,阻滞细胞通过S期 ,随着时间的延长 ,诱导S期细胞凋亡。结论 :As2 O3 可诱导Hep -2细胞和Hep-2r细胞凋亡 ,与细胞周期阻滞有关     

γ-干扰素对姜黄素抑制人卵巢癌细胞株3AO增殖的影响

目的 :研究γ 干扰素 (IFN γ)对姜黄素抑制人卵巢癌细胞株 3AO增殖的影响。方法 :采用MTT法计算细胞存活率、Giemsa染色观察细胞形态变化及凋亡情况、流式细胞术检测细胞周期变化。结果 :姜黄素可明显抑制 3AO细胞的生长 ,其半数生长抑制率 (IC50 )约为 1 8.5 μmol/L;姜黄素将肿瘤细胞聚集在S期和G2 /M期并可诱导细胞凋亡。IFN γ与姜黄素联用后 ,使上述作用明显增强 ,与两药单用组相比有统计学差异(P <0 .0 5 )。结论 :IFN γ可协同姜黄素抑制人卵巢癌细胞株 3AO增殖     

三氧化二砷对人卵巢癌细胞株体外作用的研究

目的：探讨三氧化二砷（As2O3)对卵巢癌细胞株体外生长的影响。方法：以As2O3处理卵巢癌细胞株SKOV3，采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法，测定As2O3对SKOV3生长的抑制作用，并绘制剂量－效应曲线；通过透射电镜观察细胞超微结构的变化；应用流式细胞仪分析DNA含量和细胞周期并测定凋亡特征酶caspase-3的活性变化。结果：0．5－4．0μmol/L三氧化二砷明显抑制SKOV3细胞的增殖，并呈剂量和时间依赖性；透射电镜观察可看到较为典型的细胞凋亡的形态学改变；细胞核固缩，染色质凝集，呈新月状紧贴于核膜周边，凋亡小体形成等；流式细胞仪检测出现DNA含量小于G1峰的亚二倍体凋亡峰，同时出现G2／M期阻滞；SKOV3在As2O3作用下，caspase-3是实现凋亡的效应因子，它的激活必然导致凋亡细胞最终的各种表型变化。结论：As2O3对卵巢癌细胞株SKOV3的生长有明显的抑制作用，诱导凋亡是其主要作用机制之一。     

As2O3对卵巢癌耐顺铂细胞珠的诱导凋亡作用

目的研究三氧化二砷(As2O3)对卵巢癌耐顺铂细胞株COC1/DDP的作用,探讨As2O3抑制肿瘤细胞生长的作用机制。方法①用MTT法检测不同浓度、不同作用时间的As2O3对COC1/DDP的生长抑制率。②用Annexin V-FITC/PI双染色流式细胞术检测As2O3作用于COC1/DDP发生的细胞凋亡。③用cDNA基因芯片筛查与As2O3诱导凋亡发生相关的基因,并用实时定量PCR技术验证结果。结果①As2O3对COC1/DDP有生长抑制作用,其生长抑制作用随着药物浓度的升高和作用时间的延长逐渐增强。②As2O3对COC1/DDP有凋亡诱导作用,随时间延长和剂量加大,凋亡发生率增加(P<0.05)。2.0μmol/LAs2O3作用24 h开始出现凋亡细胞,72 h达高峰,96 h细胞出现坏死。③COC1/DDP细胞在As2O3作用前后上调基因15个,下调基因10个,其中凋亡相关基因Bax、p53、c-Myc的上调,以及耐药基因LRP的下调与As2O3诱导COC1/DDP发生凋亡有关。基因芯片的结果与实时定量PCR验证结果相符合。结论As2O3对卵巢癌耐药细胞株COC1/DDP有生长抑制作用,发生机制与As2O3诱导细胞凋亡发生有关。促凋亡基因和耐药相关基因参与As2O3诱导卵巢癌耐药细胞株凋亡的作用。     

肿瘤坏死因子相关细胞凋亡诱导配体对人卵巢癌细胞株体外作用的实验研究

目的:探讨肿瘤坏死因子相关细胞凋亡诱导配体(TRAIL)对人卵巢癌细胞株体外生长抑制作用。方法:采用RT-PCR技术,检测正常人卵巢上皮细胞及人卵巢癌细胞株3AO、SKOV3、OV-CAR3TRAIL受体DcR1、DcR2、DR4、DR5的表达。MTT法测定不同浓度TRAIL对3AO、SKOV3、OVCAR3的生长抑制率,并以顺铂做对照;采用流式细胞技术观察TRAIL作用于3AO后的细胞凋亡率及细胞周期的变化;扫描电镜及HE染色,观察TRAIL及顺铂作用3AO后的细胞形态学变化。结果:①TRAIL能有效抑制3AO、SKOV3、OVCAR3的生长,并具有时效性和量效性(P<0.05);②不同浓度的TRAIL作用于3AO后,在细胞周期G1期前出现明显的亚二倍体细胞凋亡峰,并呈现典型的细胞凋亡形态。结论:①TRAIL可有效的抑制卵巢癌细胞株的生长,并具有量效性、时效性;②TRAIL可通过不同的途径诱导细胞凋亡。     

细胞分化剂增强三氧化二砷诱导肝癌细胞的凋亡效应

【目的】探讨细胞分化剂 (CDA Ⅱ )在三氧化二砷 (As2 O3 )诱导肝癌细胞凋亡效应中的作用。【方法】应用CDA Ⅱ和As2 O3 共同处理肝癌细胞株BEL 74 0 2、HepG2 ,通过四唑蓝比色法检测细胞存活率 ;用活细胞荧光染色观测细胞凋亡及形态学变化、流式细胞术分析细胞周期变化及凋亡率。【结果】CDA Ⅱ毒性作用很低 ,但可以显著增强As2 O3 对肝癌细胞生长的抑制作用 ,1 0 g/LCDA Ⅱ便可使As2 O3 对两株细胞的半数抑制浓度由 5 0 μmol/L降低至 1 0 μmol/L(P <0 0 1)。形态学可观察到CDA Ⅱ明显加强了As2 O3 诱导的细胞凋亡 ,且与剂量有关 ;流式细胞术分析 ,低质量浓度的CDA Ⅱ (<2 0 g/L)细胞生长阻滞于G2 期较对照组多 ,而随着剂量的增加则凋亡细胞和滞留于G1期的细胞增多 ,低剂量CDA Ⅱ与As2 O3 共同处理肝癌细胞后 ,凋亡率明显高于单独用As2 O3 。【结论】CDA Ⅱ可增强As2 O3 诱导肝癌细胞的凋亡效应 ,两药具有协同作用。     

氟哌利多在术后镇痛中的临床观察

目的评价氟哌利多复合芬太尼、布比卡因用于下腹部手术后病人硬膜外镇痛的临床效果。方法ASAⅠ—Ⅱ级下腹部手术后病人50例，随机分两组，每组25例。A组：镇痛药为0．25％布比卡因含4μ／mL芬太尼；B组：0．125％布比卡因含4μg／mL芬太尼、50μg／mL氟哌利多。使用PCA泵持续泵入硬膜外腔，并进行临床观察。结果两组镇痛效果均满意，B组镇静效果明显优于A组，B组恶心呕吐发生率明显低于A组。结论镇痛液中加入氟哌利多产生了明显的镇静、镇吐作用，而且镇痛效果无明显改变。     

整体铸造在可摘局部义齿中的运用

目的探讨整体铸造在可摘义齿修复中,尤其在双侧游离缺失,对胎异常、邻牙,缺失间隙均异常情况下修复的效果.方法对临床1558例病人采取整铸支架式可摘局部义齿的设计,设计合理的卡环类型,设计为混合支持式或者牙支持式.结果整体铸造式的可摘义齿,符合可摘局部义齿的设计原则,有良好的固位,良好的稳定性,良好的支持,高质量的恢复牙的形态和功能.结论整体铸造在可摘局部义齿运用中,对口腔软硬组织健康的恢复有良好的作用,由于使用的带模铸造这一精密的铸造技术,加上义齿自身的优点,能够恢复牙的形态和功能.     

游泳对新生儿健康的探讨

目的 :探讨新生儿游泳对新生儿生理性体重下降 ,生理性黄疸的影响。方法 :将 15 0例正常足月新生儿作游泳组 ,同期分娩的孕母年龄、孕周、分娩时间、分娩方式、出生时体重相近的 15 0例作为对照组。测定两组新生儿出院时体重、经皮胆红素测定情况。结果 :两组出生时体重无明显差异 (P >0 0 5 ) ,出院时两组体重有显著差异。剖宫产儿游泳组平均体重 (3134± 35 6 )g ,对照组平均体重 (3170± 4 10 )g ,P <0 0 0 1;阴道分娩儿游泳组平均体重 (330 4± 335 )g ;对照组平均体重 (312 3± 4 0 0 )g ,P <0 0 0 5。产后 4d经皮胆红素测定游泳组为 (7 6 1± 2 2 )mg/L ,对照组为 (8 13± 2 4 )mg/L ,有明显差异 (P <0 0 0 5 )。结论 :新生儿游泳有助于新生儿生长发育 ,是一项值得推广的健康保证活动     

基于“肺与大肠相表里”理论探讨痤疮与肠道菌群的相关性及其中医治疗

痤疮的病位在皮，肠腑损伤，腑病及肺，肺主皮毛，故肠道菌群失调会参与或加重痤疮的发病。皮生痤疮，内合于肺，肺病及肠，又会引起肠道菌群失调。二者紧密联系，存在相关。本文基于 “肺主皮毛”、“肺与大肠相表里”理论，探讨痤疮与肠道菌群的相关性以及肠道菌群在中医中药干预痤疮治疗中的作用，为痤疮的中医临床治疗提供新的思路。     

姜黄素对免疫抑制小鼠免疫功能的影响实验研究

目的观察姜黄素对免疫抑制小鼠免疫功能的调控作用。方法制备免疫抑制模型的小鼠,分5组给药7天后,处死测定小鼠体重,小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能,溶血空斑实验,外周血淋巴细胞转化实验。结果姜黄素对免疫抑制小鼠的体重无影响,提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬指数,增加B细胞产生抗体能力,姜黄素能够增强免疫抑制小鼠脾淋巴细胞的增值。结论姜黄素具有调节免疫功能,对固有免疫和适应免疫均有一定的增强作用。     

秋水仙素对染色体制备的影响研究

目的探究秋水仙素的浓度和处理时间对淋巴细胞染色体制备的影响。方法研究不同秋水仙素终浓度(0. 2μg/ml,0. 3μg/ml,0. 4μg/ml)在不同秋水仙素处理时间(6 h,8 h,10 h)作用下对染色体中期分裂相的影响。结果秋水仙素终浓度和秋水仙素处理时间的交互作用对分裂指数(F=11. 982,P=0. 000 0. 05)和分裂相合格率(F=4. 632,P=0. 004 0. 05)影响差异有统计学意义。通过简单效应分析和事后多重比较分析,0. 3μg/ml秋水仙素处理8 h后,染色体分裂指数和分裂相合格率均较高,分别为58. 8%和55. 8%。结论对秋水仙素终浓度和处理时间定量控制,试验重现性良好,染色体中期分裂相数目充盈,形态良好,染色体畸变分析更准确客观。     

基于网络环境下的教学改革研究

在现代教育理论指导下,充分利用网上资源进行教学改革,努力构建新的医学教学模式。组织学生利用网上资源,以问题为中心自主探究,协商讨论,解决问题。积极探索医学教育现代化的途径、手段、方式、方法,注重培养学生适应信息时代的学习方法。学会利用信息资源进行专题归纳探究的学习,学会面对网上资源进行自主发现、研究性学习,学会利用网络通讯进行协商合作、讨论式的学习,学会利用信息工具进行重构知识、创新实践和问题解决的学习。在医学教学上创造一个在功能上、空间上及时间上交互的崭新环境,促进师生教学互动。     

福辛普利对兔动脉粥样硬化形成的干预作用观察

目的:研究福辛普利对兔动脉粥样硬化形成的干预作用。方法:24只新西兰大白兔(雌雄各半),按体重和性别随机分为3组。对照组给予正常饮食,模型组给予高脂饲料,干预组在给予高脂饲料的同时灌胃给予福辛普利(1mg/kg/d)。上述动物于第12周取血,测血清总胆固醇(TC)、丙二醛(MDA)、NO水平以及SOD活性,并在光镜和电镜下对胸、腹主动脉血管进行形态学观察。结果:给药组动物血清TC、MDA含量明显低于模型组(P<0.05或P<0.01),而NO水平以及SOD活性则明显高于模型组(P<0.01);光镜和电镜下观察到给药组动物主动脉损伤轻于模型组。结论:福辛普利可降低胆固醇,缓解自由基损伤作用,对动脉粥样硬化的形成有一定的干预作用。     

曹县小学生HBV感染情况的调查

目的了解曹县小学生HBV感染状况,为防治提供科学依据;方法空腹收集肘静脉血2．5ml,分离血清,用单克隆血凝法对该县2992名小学生HBV感染情况进行捡测调查;结果该人群HBsAg阳性率为6．22％．低于全国平均水平;结论男生HBsAg携带率显高于女生．4-9岁组HBsAg阳性携带率低于10～14岁组,差异显。