PTEN核转位的研究进展

PTEN是1997年发现的第一个具有磷酸酶活性的抑癌基因,其缺失、突变和表达减少广泛存在于多种进展期肿瘤中,核内外的PTEN通过细胞凋亡和诱导细胞周期停滞抑制肿瘤的发生发展.最近研究发现,PTEN可以通过泛素化进入细胞核内,并通过诱导细胞周期停滞和维持染色体完整性在核内起到肿瘤抑制作用.本文就PTEN的核转位及其在核内的多种功能作一综述.     

GSK-3β抑制剂对结肠癌SW480细胞增殖和凋亡的影响

目的: 探讨糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)抑制剂(2'Z,3'E)-6-溴靛'-3'-肟(BIO)对结肠癌SW480细胞β-catenin 、Bcl-2蛋白表达及细胞周期、凋亡的影响。方法: 应用不同浓度BIO作用于结肠癌SW480细胞,采用流式细胞术检测细胞周期及凋亡,Western blotting检测β-catenin 和Bcl-2蛋白表达,免疫细胞化学检测β-catenin 及cyclin D1的表达,HE染色观察细胞形态。结果: 与BIO处理前SW480细胞相比,BIO处理组SW480细胞β-catenin蛋白表达明显上调并出现部分细胞核移位,cyclin D1蛋白表达及S期和G₂/M期细胞不同程度增多,Bcl-2蛋白表达有所下调,细胞凋亡率明显下降,并出现细胞形态改变。结论: GSK-3β抑制剂BIO作用于结肠癌SW480细胞呈现促增殖及抑凋亡作用,其机制主要与β-catenin信号转导通路激活以及与Bcl-2调控通路的平衡有关,其中β-catenin上调可能是影响结肠癌SW480细胞转归的主要因素。     

Nestin在CDA-2诱导人胶质瘤细胞分化中的变化

目的： 研究nestin（巢蛋白）在人尿萃取物细胞分化剂CDA-2（又名尿多酸肽）诱导SWO-38人胶质瘤细胞分化中表达的变化及其意义。方法: 采用光镜观察和鉴定CDA-2对SWO-38细胞的分化作用;RT-PCR、细胞免疫荧光、Western blotting分析CDA-2诱导前后SWO-38细胞nestin表达的变化。 结果: 光镜观察发现经CDA-2诱导后SWO-38细胞胞体变大、核浆比减小、突起增多,表现出向成熟的星形细胞分化的现象;Nestin表达在细胞浆,呈丝状着色;Nestin在CDA-2诱导SWO-38细胞分化中表达下调。结论: Nestin在CDA-2诱导SWO-38细胞分化中表达下调,进一步验证nestin与细胞分化的关系,nestin有可能成为胶质瘤诱导分化治疗领域新的标志物。     

基底细胞癌Sexton病理亚型标准与其生物学行为的关系

目的 探讨基底细胞癌（BCC）Sexton病理亚型划分标准与其生物学行为的关系。方法 按该标准将46例BCC划分为6个亚型，并据此分为非侵袭性和侵袭性BCC组。采用免疫组化SP法检测Bcl-2蛋白在石蜡切片上的表达，并进行图像分析以比较两组BCC Bcl-2蛋白的表达差异。结果 46例BCC中结节型、混合型和浸润型所占比例最高，分别为39％、28％、17％，非侵袭性BCC组21例，侵袭性组25例；前者Bcl-2蛋白表达水平高于后者，P值为0．005。结论 对BC作出病理亚型的诊断是必要的；Sexton病理亚型标准反映了BCC生物学行为的差异，采用该标准可区分非侵袭性和侵袭性BCC，有利于治疗方法的选择。     

诱发口腔鳞癌细胞凋亡嵌合基因表达载体的构建

目的：获取含凋亡基因fas表达调控元 件cdc25A片段和fas开放阅读框架的cdc25A -fas嵌合基因，构建和鉴定真核表达载体pAdTrack-CMV-cdc25A -fas和pAdTrack-cdc25A-fas，为将口腔鳞癌细胞固有的 促细胞增殖信号转变为促细胞凋亡信号的研究奠定基础。方法:根据fa s基因、cdc25A已知序列设计合成引物，采用PCR技术从pBLF58-1质 粒中扩增得到嵌合基因cdc25A-fas；然后定向克隆至真核表达载 体pAdTrack-CMV和pAdTrack，分别转化大肠杆菌E.coli DH5α感受态细胞；卡那霉素筛 选阳性克隆；进行PCR、酶切鉴定和序列分析。结果：PCR扩增得到特异 的 1 603 bp的cdc25A-fas片段；筛选并鉴定得到含pAdTrac k-CMV-cdc25A-fas和pAdTrack-cdc25A- fas的大肠杆菌E.coli DH5α阳性克隆。结论:成功构建了真核表 达载体pAdTrack-CMV-cdc25A-fas和pAdTrack-cdc25 A-fas,为下一步研究其在肿瘤基因治疗中的作用奠定基础。     

肾肉瘤样癌伴横纹肌样分化1例

患者女性,48岁.无明显诱因出现上腹疼痛1个月入院.B超、CT及MRI提示右肾肾门层面下方皮质部位见一大小4 cm×2 cm肿物,侵入右肾包膜,脾见多个大小不等的实性病变.遂行手术治疗,术中右肾中部见直径4 cm大小肿物;腹腔内大网膜可触及多个肿物,直径2～5 cm;右肝及左肝也可触及多个结节;脾充满结节,切除右肾、脾及部分大网膜送病检.临床诊断:后腹膜肿物(右肾占位病变).     

ATP竞争性GSK-3抑制剂对人食管鳞癌细胞多药耐药的影响

目的: 研究ATP竞争性糖原合成酶激酶3(GSK-3)抑制剂6-溴靛玉红-3'-肟(BIO)作用于食管鳞癌细胞后, 对ATP结合盒(ABC)转运蛋白——P-糖蛋白(P-gp)和多药耐药相关蛋白2(MRP2)、凋亡抑制蛋白Bcl-2以及β-catenin表达的影响,探讨它们表达的相互关系,以及对细胞内游离ATP水平和P-gp、MRP2转运功能的影响,进而初步探讨GSK-3抑制剂对食管鳞癌细胞多药耐药的影响。方法: BIO作用于食管鳞癌EC-109细胞后,运用免疫荧光细胞化学法、流式细胞术以及ATP检测试剂盒分别检测细胞内 MRP2、P-gp、β-catenin和Bcl-2表达的改变、ABC转运蛋白的转运功能以及细胞内游离ATP水平的改变。结果: BIO作用食管鳞癌EC-109细胞后,加药组与对照组相比,β-catenin和Bcl-2在胞浆中的表达增强,并且β-catenin出现胞核内累积,MRP2在胞浆和胞膜中表达增强,P-gp在胞浆和胞膜中表达减弱;细胞内游离ATP水平增加;ABC转运蛋白的转运功能增强。结论: BIO处理食管鳞癌细胞后增强了细胞的多药耐药。     

miR-21通过下调PTEN增强人脑胶质瘤细胞对卡莫司汀耐药

目的:探讨微小RNA-21(miR-21)在增强人脑胶质瘤细胞对卡莫司汀(BCNU)耐药中的作用及其可能的作用机制。方法: 用jetPRIME将miR-21mimics及阴性对照序列转入人脑胶质瘤细胞SWOZ2,用实时荧光定量PCR法检测BCNU敏感株SWOZ2与BCNU耐药株SWOZ2-BCNU、SWOZ2-miR-21mimics细胞与对照组细胞中miR-21表达差异,用CCK-8检测这两对细胞对BCNU敏感度的差异,用Westernblotting检测这两对细胞中第10号染色体同源缺失性磷酸酶及张力蛋白(PTEN)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)和P-糖蛋白(P-gp)表达的差异。结果:SWOZ2-BCNU细胞miR-21的表达水平明显高于SWOZ2细胞,转染组SWOZ2-miR-21mimics细胞中miR-21的表达量明显高于对照组;SWOZ2-BCNU细胞BCNU的半数抑制浓度(IC₅₀)明显高于SWOZ2细胞,转染组细胞BCNU的IC₅₀明显高于对照组;与SWOZ2细胞相比,SWOZ2-BCNU细胞中PTEN蛋白的表达明显降低,p-Akt和P-gp蛋白的表达都明显升高;转染后,与对照组相比,转染组细胞中PTEN蛋白的表达明显降低,而p-Akt和P-gp蛋白的表达皆明显升高。结论:miR-21可能通过下调PTEN蛋白表达,增强人脑胶质瘤细胞对BCNU耐药。     

胎儿肺多灶性浆细胞肉芽肿一例

患者，23岁，孕34^ 2周，因下腹痛5h，自觉胎动消失2h入院。入院常规检查正常。产科检查：腹围90cm，官高耻上29cm，官口开2^ cm，胎先露S-2，胎膜未破，未闻及胎心音。B超检查：胎心消失，胎死官内。立即行人工破膜，羊水浅黄，娩出一死婴。孕妇平素体健，G3P1，人工流产2次，本次妊娠第20周和第25周B超检查胎儿均未发现异常。     

阿糖胞苷对白血病细胞K562凋亡抑制基因Survivin的作用研究

目的 了解人类白血病细胞在化疗药物阿糖胞苷作用下的Survivin凋亡抑制基因表达情况,探讨阿糖胞苷治疗耐药的可能机制.方法 用MTT比色法检测K562细胞对阿糖胞苷的敏感性,以阿糖胞苷的IC50药物浓度处理K562细胞.应用RT-PCR和Western blotting的方法 检测各组细胞Survivin基因的mRNA表达情况和蛋白质的表达情况.结果 K562细胞经阿糖胞苷作用24、48 h后,细胞的Survivin mRNA表达较加药前分别增加1.92、3.38倍(P<0.05);24、48 h阿糖胞苷作用组细胞的Survivin的蛋白表达较对照组分别增加1.92、2.64倍(P<0.05).结论 阿糖胞苷作用白血病细胞后,细胞的Survivin基因mRNA和蛋白质表达升高,且具有时间效应.化疗药物作用后Survivin基因表达升高可能是白血病细胞治疗耐药的又一机制.