抗白介素2受体α链单抗及AK细胞治疗肝癌的实验研究

目的 :探讨一种新的过继免疫治疗肝癌方法。方法 :将肝癌细胞株 (H2 2 )接种于近交系 BAL B/ c小鼠皮下 ,制成荷瘤小鼠模型 ,用 IL - 2 / AK细胞 /抗白介素 2受体α链单抗 (a IL - 2 Rα MAb)治疗 ,以发现其抗肿瘤作用。结果 :荷瘤小鼠脾淋巴细胞 NK活性无明显变化 ,L AK和 CTL活性及淋巴细胞刺激指数在联合治疗组均高于其他各组 (P<0 .0 1) ;肝癌皮下结节在联合治疗明显受到抑制 ,肿瘤小鼠生存期明显延长。结论 :IL- 2 ,a IL- 2 Rα MAb及 AK细胞联合治疗有非常显著的抗肿瘤作用。抗白介素2受体α链单抗及AK细胞治疗肝癌的实…     

恶性肿瘤患者外周血中IL-2、IL-2R的表达以及CD_3、CD_4、CD_8、NK细胞活性的变化观察

目的 :观察恶性肿瘤患者外周血中IL - 2、IL - 2R的表达以及CD3、CD4 、CD8和NK细胞的活性变化 ,探讨IL - 2、IL - 2R以及CD3、CD4 、CD8和NK细胞的活性变化在恶性肿瘤发病机理、疾病转归、预后判断方面的意义。方法 :采用FLISA法检测恶性肿瘤患者外周血IL - 2、IL - 2R的含量 :采用S -P(链亲和素 -过氧化物酶 )一步法测定恶性肿瘤患者外周血中CD3、CD4 、CD8和NK细胞的活性。结果 :恶性肿瘤患者血清中sIL - 2含量是 141.5 6± 77.87pg/ml,sIL - 2R含量 15 9.81± 5 3 .96 pmol/ml,与对照相比 ,sIL - 2含量明显下降 (P <0 .0 1) ,sIL - 2R明显升高 (P <0 .0 1) ;CD3、CD4 、NK细胞与对照组相比活性降低 (P <0 .0 1) ,CD8与对照组相比活性无显著变化 (P >0 .0 5 )。结论 :上述实验结果说明恶性肿瘤患者免疫功能低下 ,尤其是T细胞免疫功能低下与紊乱 ,表现在Th细胞分泌IL - 2的能力减少 ,存在于细胞表面的膜受体 (mIL - 2R)或游离的可溶性受体 (sIL - 2R)表达与释放增多 ,NK细胞的活性降低 ,CD3、CD4 细胞减少 ,CD8细胞数增多。该研究在探讨恶性肿瘤的发病机理、临床治疗和预后判断方面有重要意义     

IL-12对乙型肝炎DNA疫苗诱导小鼠免疫应答的影响

目的　观察编码鼠 IL - 12的真核表达载体对 HBVDNA疫苗诱导 BAL B/ c小鼠免疫应答的影响 .方法　肌肉注射 DNA疫苗 ,EL ISA法检测小鼠血清抗 HBs,4h5 1 Cr释放法检测小鼠脾细胞 CTL杀伤活性 .结果　免疫 8wk后 ,单纯注射 p CR3.1- S及共注射 IL - 12真核表达载体的小鼠血清 45 0 nm A值分别为 0 .87± 0 .1及 1.6 7± 0 .15 .CTL 细胞杀伤活性分别为 (5 0 .5± 6 .4) %及 (73.3± 8.8) % ,两组均有明显差异 (P<0 .0 1) ,脾细胞悬液经抗 CD4+ 单克隆抗体处理后 CTL 细胞杀伤活性分别为 (48.3± 5 .9) % ,(75 . 6±9.1) % ,抗 CD8+单克隆抗体处理后分别为 (10 .6± 1.4) % ,(16 .9± 2 .3) % .结论　 IL - 12的真核表达载体能够提高小鼠对 DNA疫苗的免疫应答 ,CTL细胞杀伤活性主要由 CD8+执行 .基因疫苗可能用于预防及治疗 HBV感染     

杂环化合物九钨三钛硅酸盐对小鼠免疫功能的影响

目的 :探讨杂环化合物九钨三钛硅酸盐 ( α- Ti3 )对小鼠细胞免疫和体液免疫功能的影响。方法 :采用3 H- Td R掺入法测定正常鼠和荷瘤鼠脾细胞对有丝分裂原的增殖反应及 NK和 LAK细胞活性。采用 T淋巴母细胞增殖分析法测定荷瘤鼠脾细胞 IL- 2的产生及其活性。采用单向琼脂扩散法测定血清 Ig G和补体 3含量。结果 :α- Ti3 的 5 0、1 0 0和 2 0 0 mg·kg-1剂量组脾细胞对有丝分裂原的增殖反应、NK和 LAK细胞活性以及脾细胞 IL- 2产生反应性及活性明显高于正常对照组和环磷酰胺 ( CYC)组 ( P<0 .0 5 ) ,而 1 0 0 mg· kg-1 组的作用尤为明显。结论 :α- Ti3 可增强荷瘤鼠的细胞免疫和体液免疫功能     

基因修饰DC与Hepa1-6肝癌细胞融合瘤苗的抗肿瘤作用机制

目的 :探讨腺病毒介导白细胞介素 1 8(interleukin1 8,IL 1 8)基因修饰的小鼠树突状细胞 (dendriticcells,DC)与Hepa1 6肝癌细胞融合后的瘤苗 (IL 1 8 DC Hepa)体内诱导的抗肿瘤免疫应答机制 .方法 :应用 4h51 Cr释放法检测NK细胞杀伤活性 .体内阻断试验观察免疫细胞亚群及免疫分子在IL 1 8 DC Hepa瘤苗诱导抗肿瘤免疫应答中的作用 .建立基因缺陷鼠荷瘤模型 ,观察瘤苗免疫治疗作用 .结果 :IL 1 8 DC Hepa瘤苗与DC Hepa瘤苗比较能更有效地诱导NK细胞活性 [(4 2 .5± 4 .7) %vs (1 3.5± 2 .2 ) % ,q =2 0 .8,P <0 .0 1 ].在抗肿瘤免疫应答的诱导过程中 ,必需有CD4 + T细胞[(6 7.8± 6 .1 )mm2 ,q =2 8.3,P <0 .0 1 ]、CD8+T细胞[(5 8.9± 6 .2 )mm2 ,q =2 4 .4 ,P <0 .0 1 ]、NK细胞 [(30 .6±4 .5 )mm2 ,q=1 2 .0 ,P <0 .0 1 ]、B7/CD2 8的共刺激信号途径[(75 .4± 6 .5 )mm2 ,q =31 .6 ,P <0 .0 1 ]和IFN γ[(6 2 .3±6 .8)mm2 ,q =2 5 .9,P <0 .0 1 ]的参与 ;而在其效应阶段 ,则依赖于CD8+ T细胞 [(6 8.9± 4 .5 )mm2 ,q =4 2 .3,P <0 .0 1 ]、NK细胞 [(38.6± 3.3)mm2 ,q =2 2 .7,P <0 .0 1 ]和IFN γ[(74 .4± 5 .8)mm2 ,q =4 5 .8,P <0 .0 1 ]的参与 ,CD4 + T细胞为非必需的 [(4 .2± 1 .9)mm2 ,q     

绞股蓝总皂苷抑制小鼠Lewis肺癌生长与提高免疫力研究

目的 :研究绞股蓝总皂苷 ( gypenosides ,GPs)对小鼠Lewis肺癌肿瘤生长、脾淋巴细胞数及NK细胞活性的影响。方法 :采用整体动物的抑瘤试验、脾淋巴细胞计数及NK细胞活性测定。结果 :GPs对小鼠Lewis肺癌细胞具有明显的抑制作用 ,在剂量 10、2 0、4 0mg/kg腹腔注射 (ip)给药条件下 ,其瘤重抑制率 (TWI)分别为 ( 2 9.8± 1.3) %、 ( 51.4± 2 .2 ) %和 ( 50 .0± 1.6) %。同时 ,GPsip给药后荷瘤小鼠脾淋巴细胞总数明显增加 ,外周血NK细胞活性明显升高 ,脾NK细胞活性也明显升高。结论 :GPs的抗肿瘤作用与其对荷瘤小鼠免疫功能的增强作用密切相关。     

TNF-α,G-CSF调节CD3AK细胞诱导的HL-60凋亡

目的 :探讨肿瘤坏死因子α(TNF α) ,粒细胞集落刺激因子 (G CSF)对CD3AK细胞诱导HL 6 0细胞凋亡的影响。方法 :用细胞形态学观察 ,DNA琼脂糖电泳 ,原位末端标记法分别检测HL 6 0自然凋亡率、CD3AK细胞诱导的HL 6 0凋亡率、TNF α和CD3AK诱导的HL 6 0凋亡率、G CSF和CD3AK诱导的HL 6 0凋亡率。结果 :HL 6 0细胞自然凋亡率 (4.6 0± 2 .17) % ;CD3AK细胞诱导HL 6 0细胞凋亡率 (2 7.38± 4 .91) % ;TNF α和CD3AK诱导的HL 6 0凋亡率 (33.0 9± 5 .2 2 ) % ;G CSF和CD3AK(7.35± 2 .2 6 ) % (F =96 .80 ,P <0 .0 1)。结论 :TNF α加强CD3AK细胞诱导的HL 6 0凋亡 ,G CSF抑制CD3AK诱导的HL 6 0凋亡     

细胞因子调节脐血CD3AK细胞诱导HL-60细胞凋亡

目的 :探讨重组肿瘤坏死因子α(rhTNF α,TNF α)、重组粒细胞集落刺激因子 (rhG CSF ,G CSF)对脐血CD3AK细胞诱导HL 6 0细胞凋亡的影响。方法 :用细胞形态学观察 ,DNA琼脂糖电泳 ,原位末端标记法检测HL 6 0 ,CD3AK细胞诱导的HL 6 0 ,TNF α诱导的HL 6 0 ,CD3AK与TNF α共同诱导的HL 6 0 ,CD3AK与G CSF共同诱导的HL 6 0进行检查分析。结果 :HL 6 0自然凋亡率 (4.6 0± 1.71) % ,;CD3AK细胞诱导的HL 6 0凋亡率 (15 .6 0±3.2 1) % ;TNF α(5ng/ml)诱导的HL 6 0的凋亡率 (5 .2 0± 2 .0 7) % ;CD3AK与TNF α共同诱导的HL 6 0凋亡率 (36 .70± 4 .4 0 ) % (F =94 ,P <0 .0 1)。CD3AK与G CSF共同诱导的HL 6 0凋亡率 (4.88± 2 .2 3) % (F =5 8,P <0 .0 1)。结论 :TNF α协同CD3AK细胞诱导HL 6 0凋亡 ;G CSF抑制CD3AK细胞诱导HL 6 0凋亡。     

LAK／IL—2联合环磷酰胺增强荷瘤鼠抗瘤活性的作用及其机理

淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK)与环磷酰胺(Cyclophospamide,Cy)联合应用对小鼠H_(22)肝癌模型具有显著协同抗肿瘤作用,但这种协同作用与二者用药的先后次序有显著关系.单独使用KAK/IL一2或Cy仅能轻度抑制实体瘤生长.轻度延长腹水型荷瘤鼠生存期(P>0.05).LAK/IL～2、Cy同时治疗及LAK/IL—2、Cy序贯疗法可中度延长腹水型荷瘤鼠生存(P<0.05),中度抑制实体瘤生长.而Cy、LAK/IL—2序贯疗法的抗肿瘤作用显著增强,可显著抑制实体瘤生长,显著延长腹水型荷瘤鼠生存期(P<0.01),且有25%的荷瘤鼠完全治愈.长期存活.提示Cy、LAK/IL—2序贯疗法为最佳联合治疗方案,可为临床应用提供理论基础.     

腺病毒介导人IL-2基因治疗的抗肿瘤作用及机理分析

目的　观察重组人白介素 2腺病毒 (advh IL- 2 )在小鼠肝癌 H2 2中的转染效率、表达时程、体内抗肿瘤作用及其免疫机理。方法　小鼠皮下接种肝癌 H2 2 ,将肿瘤生长至体积为 10 0～ 2 0 0 mm3的荷瘤小鼠随机分组 ,经肿瘤局部注射给药。用 X- gal染色法检测重组腺病毒载体 adv L ac Z的转染效率 ;用 RT- PCR检测人 IL- 2基因的持续表达时间 ;以 H2 2瘤体生长及荷瘤小鼠存活时间评价 advh IL - 2抗肿瘤作用 ;以 51 Cr 4小时释放法测定治疗小鼠脾细胞的 L AK与 CTL 杀伤活性 ,免疫荧光法分析肿瘤组织内 CD4 +与 CD8+ T细胞浸润情况。结果　肿瘤局部单次注射 1× 10 9pfu重组腺病毒 ,可在肿瘤组织中进行有效的转染及表达 ,人 IL- 2基因的表达时间长于 12 d。AdvhIL- 2的抗肿瘤作用具有剂量依赖性 ,与 PBS组比较 ,2× 10 9pfu advh IL- 2可非常明显地抑制 H2 2皮下瘤的生长、延长荷瘤小鼠的生存时间 (P<0 .0 1) ,同时明显增强脾细胞 L AK与 CTL杀伤活性 (P<0 .0 1) ,增加肿瘤组织内CD4 + 与 CD8+ T细胞的浸润。结论　 Advh IL - 2通过介导人 IL - 2基因在小鼠 H 2 2肿瘤组织中的持续表达 ,产生明显的体内抗肿瘤作用 ,其机理与激活荷瘤小鼠抗肿瘤免疫反应有关     

瘤体注射表皮生长因子受体抗体治疗小鼠宫颈癌

目的 :观察阻断表皮生长因子受体是否治疗小鼠宫颈癌。方法 :将小鼠宫颈癌细胞U14(1× 10 7)移植入近交系 6 15系小鼠皮下 ,待成瘤后将 2 4只小鼠随机分为 4组 ,用表皮生长因子受体单克隆抗体 (EGFR -McAb)瘤体局部注射 (每天 1次 ,连续 2周 )治疗A和B组 ,用生理盐水对照治疗对照A和对照B组。观察治疗A及对照A组小鼠的生存期和肿瘤的抑瘤率。并取治疗后第 4,7,10 ,14,16 ,17d处死的治疗B组及对照B组小鼠瘤体组织作血管内皮标记物CD31免疫组化染色 ,计算肿瘤内平均微血管密度。结果 :用EGFR -McAb治疗A组平均生存期 42 .8d ,较对照组 2 8.3d明显延长 (P <0 .0 1)。治疗A组肿瘤抑瘤率第 4d为 13% ,第 7d为 42 % ,第 10～ 14d达高峰 ,维持在 83% 84%。第 7,10 ,14d治疗A组与对照A组瘤体体积差异显著 (P <0 .0 5 )。治疗组肿瘤内微血管密度明显低于对照组(P <0 .0 5 )。结论 :EGFR -McAb可有效治疗小鼠宫颈癌 ,提示其可作为宫颈癌导向治疗的候选靶分子。     

T-AK细胞在体外和裸鼠体内抗人膀胱癌细胞株(Fen)的实验研究

用可溶性肿瘤抗原和抗ＣＤ３ 单克隆抗体共同刺激外周单个核细胞（ＰＢＭＣ）产生ＣＤ＋８ Ｔ 细胞为主的杀瘤细胞,称为Ｔ－ ＡＫ 细胞。与ＬＡＫ细胞、ＣＤ３ － ＡＫ 细胞比较,Ｔ－ ＡＫ细胞扩增快、低依赖ＩＬ－ ２,培养１４ 天细胞数扩增２４ 倍,比ＣＤ３ － ＡＫ细胞高８ 倍,比ＬＡＫ细胞高１５ 倍,并能维持生长２１ 天。Ｔ－ ＡＫ细胞中含ＣＤ＋３ ８９％ ,ＣＤ＋４ ２１ ％ ,ＣＤ＋８ ９５％ ,ＣＤ＋１６ ２２％ ,ＣＤ＋２５ ４１％ ,ＣＤ＋５６ ４７ ％ ,ＣＤ＋３８ ９０ ％ ,它们是ＣＤ＋８ Ｔ细胞为主的异质性细胞群。体外实验结果表明,Ｔ－ ＡＫ细胞对Ｆｅｎ 的明显的杀伤作用,与ＬＡＫ、ＣＤ３ － ＡＫ细胞比较,差异有高度显著性（ Ｐ＜ ０．００１） 。裸鼠体内试验结果显示,对照组及ＬＡＫ组全部、ＣＤ３ － ＡＫ 组１ 只裸鼠长出瘤结节,而Ｔ－ ＡＫ组无一例长出瘤结节且生存期明显长     

栓塞加门静脉灌输CD_3 AK细胞治疗中晚期肝癌的研究

动态观察肝动脉化疗栓塞加门静脉插管化疗、灌输CD3 AK细胞治疗中晚期肝癌的临床疗效及对机体免疫功能的影响。将 2 0例中晚期肝癌随机分为A、B两组 ,A组 ( 10例 )肝动脉化疗栓塞加门静脉插管化疗、灌输CD3 AK细胞治疗 ,B组 ( 10例 )肝动脉化疗栓塞加门静脉插管化疗。另设C组 ( 10例 )肝良性肿瘤患者作为对照组。结果A组患者的细胞免疫指标 (CD3 、CD4 、CD4 /CD8、NKC、IL -2R、T淋巴细胞转化率 )及体液免疫指标 (sIL -2R、TNF -a)在术后第 1周开始迅速恢复且维持在高水平状态 (P <0 .0 5 ) ,术后第 2周、第 3周、第 4周均呈上升趋势且保持在高水平状态。B组术后细胞免疫及体液免疫功能指标在术后第 1周时较术前明显降低 (P <0 .0 5 ) ,术后第 2周开始逐渐恢复但较缓慢。A、B两组术后同期同指标相比较差异有显著性 (P <0 .0 5 )。C组外周血单个核细胞的分布及体液免疫功能指标在术前、术后相比较差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ,但均比A、B组高。A组的临床有效率为 70 % ,B组为 40 %。结论 :肝动脉化疗栓塞加门静脉插管化疗、灌输CD3 AK细胞治疗能提高中晚期肝癌临床疗效 ,提高肿瘤的Ⅱ期切除率及迅速恢复、提高机体的免疫功能。     

番茄红素对小鼠移植性肿瘤的抑制作用研究

目的研究番茄红素的体内抗肿瘤作用。方法通过S180肉瘤移植建立荷瘤小鼠模型,给予不同剂量番茄红素后观察S180荷瘤小鼠瘤重、脏器指数、带瘤生存天数、脾淋巴细胞增殖活力及自然细胞杀伤活性(NK活性)。结果番茄红素能明显抑制肿瘤生长,平均瘤重低于肿瘤模型组,且能延长荷瘤小鼠生存天数;可提高荷瘤小鼠脾淋巴细胞增殖活力,增强NK活性。结论番茄红素具有较强的抗肿瘤效应,有很好的应用前景,应对其进行深入研究。     

异种黑色素细胞疫苗诱导小鼠抗恶性黑色素瘤免疫反应的机理研究

目的　研究异种黑色素细胞疫苗诱导小鼠抗恶性黑色素瘤免疫反应的机理。方法　制备异种黑色素细胞疫苗 ,免疫小鼠。采用间接 EL ISA法检测小鼠抗肿瘤抗体滴度及抗体亚型 ,纯化免疫球蛋白及进行体外抗肿瘤增殖 ,采用 Western blot法分析交叉抗原蛋白质。接种恶性黑色素瘤 ,观察肿瘤生长 ,采用免疫细胞去除法分析NK细胞及 T细胞亚群对疫苗抑瘤效应的影响。结果　异种疫苗免疫后 2周小鼠体内出现抗自身肿瘤抗体 ,产生的抗体以 Ig G为主 ,抗体认别的猪眼黑色素细胞及恶性黑色素瘤细胞交叉抗原为相对分子质量达 180× 10 3的蛋白质 ,纯化的免疫球蛋白在体外能抑制恶性黑色素瘤细胞增殖。异种疫苗诱导特异性保护性免疫反应使 90 %小鼠恶性黑色素瘤生长受到抑制 ,去除 NK细胞不影响疫苗抑瘤效应 ,去除 CD4 + T细胞使疫苗抑瘤效应消失 ,去除CD8+ T细胞 70 %小鼠恶性黑色素瘤生长仍受到抑制。结论　异种黑色素细胞疫苗诱导特异性体液免疫及细胞免疫反应 ,抑制恶性黑色素瘤的生长 ,CD4 + T细胞在这一过程中发挥了关键性作用。     

核因子-κB抑制剂熊果酸延长小鼠心脏移植物存活时间

目的:研究熊果酸对同种异体小鼠心脏移植排斥反应的作用.方法:体外实验:CD3、CD28单抗刺激B6小鼠T细胞,实验组加入不同浓度的熊果酸.24 h后检测P65核转位程度;48 h后检测T细胞表面CD25、CD69表达情况.体内实验:熊果酸用0.5%羧甲基纤维索钠混悬.行BALB/c到B6的小鼠心脏移植.实验组使用10m...     

脂质体与完全弗氏佐剂预防NOD鼠胰岛炎探讨

目的 :探讨完全弗氏佐剂 (CFA)、不完全弗氏佐剂 (IFA)、大复层脂质体 (LML)、小单层阳离子脂质体(DOTAP)对NOD鼠胰岛炎和糖尿病发病的影响。方法 :①将 3周龄的NOD雌鼠随机分为 3组 ,分别给予CFA后脚板注射 (n =16 ) ,IFA和PBS乳化后腹腔注射 (n =16 ) ,单独PBS后脚板注射 (n =16 )。观察 12周龄胰岛病理及 30周龄糖尿病发病情况。②将 3周龄的NOD雌鼠随机分为 3组 ,分别给予大复层脂质体 (LML) (n =13) ,小单层阳离子脂质体 (DOTAP) (n =13) ,单独PBS腹腔注射 (n =13) ,同上观察胰岛病理及糖尿病发病情况。结果 :①CFA后脚板注射能明显降低胰岛炎计分 ,减少糖尿病的发生。 30周龄时 ,CFA组的发病率明显低于PBS后脚板注射对照组 (分别为9 2 %和 81 8% ,P =0 .0 0 1)。 12周龄时 ,CFA组胰岛炎计分明显低于对照组 [分别为 (0 0 5± 0 0 2 )和 (0 5 4± 0 11) ,P<0 .0 0 1]。②LML腹腔注射能明显降低胰岛炎计分。 12周龄时 ,LML组胰岛炎计分明显低于PBS腹腔注射对照组 [分别为 (0 16± 0 0 2 )和 (0 5 8± 0 0 6 ) ,P <0 .0 0 1]。 30周龄时 ,LML组糖尿病发生率为 6 0 % ,对照组为 90 % ,两组间无统计学差异。③在预防胰岛炎的作用上 ,CFA优于LML。结论 :CFA后脚板注射可预防NOD鼠发生糖尿病并减     

黄芪多糖在宿主抵抗李斯特菌中的作用

目的:观察黄芪提取物注射小鼠后,对小鼠抵抗单核细胞增生李斯特菌能力的影响。方法:水煮法提取黄芪多糖,配成悬液,腹腔注射感染李斯特菌的小鼠,并设对照,每组20只昆明鼠,观察小鼠的生存时间,脾脏的重量指数,脏器菌落计数,检测小鼠血清中抗体IgG水平,利用ELISA法测定小鼠脾脏释放的细胞因子。结果:注射黄芪多糖的小鼠,在30d观察期结束后仍有12只存活,而对照组只有2只存活。黄芪多糖组小鼠脾脏的重量指数(5.2±1.2),菌落计数(4.1±1.5)均比对照组的重量指数(11.0±0.9),菌落计数(8.8±1.3)明显降低。黄芪多糖组小鼠血清中抗体滴度(OD490)为0.38±0.05,对照组的抗体滴度为0.18±0.07。ELISA法测的黄芪多糖组小鼠脾脏细胞分泌IFN-γ为(240±15)ng/L,对照组为(150±19)ng/L。结论:黄芪多糖能够增强宿主的体液免疫和细胞免疫来保护宿主抵抗胞内菌的感染。     

重组鼠白细胞介素12与粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子基因联合治疗小鼠B16黑色素瘤

目的：研究重组鼠白细胞介素12（AdCMVIL-12）与粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（AdCMVGM-CSF）的腺病毒载体联合应用对B16黑色素瘤的抗肿瘤作用。方法：将B16黑色素瘤细胞接种于C57/BL6小鼠右侧背部皮下后,待瘤体直径达5mm时将荷瘤小鼠随机分为4组,分别为AdCMVIL-12组、AdCMVGM-CSF组、AdCMVIL-12加AdCMVGM-CSF组（联合治疗组）和AdC MVLacZ组（对照组）,每组12只,并于肿瘤组织局部分别多点注射相对应剂量的腺病毒载体,观察各组小鼠肿瘤的生长情况及其诱导的细胞免疫反应,检测各组小鼠血清IL-12和GM-CSF表达水平的变化。结果：病理学观察,联合治疗组肿瘤组织内可见大片凝固性坏死,有大量的淋巴细胞、巨噬细胞浸润。治疗30 d后,联合治疗组肿瘤平均体积为（60.73±11.36 ）mm³,与对照组、AdCMVIL-12组和AdCMVGM-CSF组［分别为（675.18±80.59）、（1 86.91±19.15）和（223.45±23.11）mm³］ 比较差异均有显著性（P>0.01）。同时,AdCMVIL-12与AdCMVGM-CSF联合基因治疗可有效延长IL-12和GM-CSF的表达时间,并且对B16黑色素瘤细胞具有很强的特异性杀伤作用,杀伤率为（69.53 ± 9.20）%。 结论：IL-12与GM-CSF联合基因治疗可增强荷B16黑色素瘤小鼠的抗肿瘤免疫反应,并能有效降低单独应用AdCMVIL-12的毒副作用。     

联合应用NK细胞及CTL对黑色素瘤B16细胞的影响

目的探讨联合应用自然杀伤(NK)细胞及细胞毒T细胞(CTL)对黑色素瘤B16细胞的作用。方法提取NK细胞及CTL,分别用白细胞介素-2(IL-2)(6 000、600IU/L)及植物血凝素(8μg/mL)活化,流式细胞仪检测细胞表面受体,将NK细胞及CTL互为靶细胞及效应细胞进行细胞毒性实验;以黑色素瘤B16细胞为靶细胞检测CTL的杀伤率。结果 NK细胞表面受体NK1.1+的百分比在87%以上,NKp46+在90%以上;CTL表面受体CD3+的百分比在99%以上,CD8+在98%以上。NK细胞与CTL相互无细胞毒性,联合应用NK细胞与CTL明显增加对黑色素瘤B16细胞的杀伤作用。结论联合应用NK细胞及CTL对黑色素瘤B16细胞有协同杀伤作用。