AT基因突变与食管癌及结肠癌的关系

目的 :探讨共济失调毛细血管扩张症 (AT)基因突变与食管癌及结肠癌发病的关系。方法 :运用PCR SSCP及DNA同位素测序等技术 ,对 17例食管癌和 15例结肠癌患者的AT基因第 41～ 5 1外显子进行突变检测。结果 :15例结肠癌标本的SSCP带型与正常对照组织无差异 ;17例食管癌标本中有 1例SSCP带型比正常对照组织多一条带 ,测序发现 ,该例标本在AT基因第 49外显子发生单碱基缺失。结论 :AT基因突变可能与某些类型的食管癌发病有关 ,但尚不能判断与结肠癌的相关性     

PCR—SSCP—银染法在基因突变分析中的应用

探讨ＰＣＲ－ＳＳＣＰ－银染法在基因突变检测中的应用。应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ－银染法分析了苯丙酮尿症患者的ＰＡＨ基因外显子４,７,１０,１１和１２,并对部分样中进行ＤＮＡ测序,结果：检出部分已知突变如Ｒ２４３Ｑ,Ｒ４１３Ｐ等,并发现当ＳＳＣＰ带型不同于阳性,阴性对照时,或是外显子其它突变,或内内含子碱基变化引起,也可见于碱基序列正常的样品中,结论：ＰＣＲ－ＳＳＣＰ－银染法在有较好对照,严格控制曩因素条     

食管癌p53基因突变的研究

应用非同位素ＰＣＲ－ＳＳＣＰ方法分析了３０例食管癌患者癌组织及相应癌旁组织Ｐ５３基因第５－９外显子，结果发现８例癌组织存在Ｐ５３基因突变。其中的４例为Ｐ５３基因杂合性丢失。部分癌旁组织检测到Ｐ５３基因突变，实验结果表明，Ｐ５３基因突变可能是分管癌癌变的早期遗传学损害，对食管癌的发生起重要作用。     

食管癌中P^53基因突变和蛋白表达的研究

采用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ－ＥＢ染色法及免疫组化技术检测１４例食管癌手术切除组织中Ｐ＾５３基因５－８外显子基因突变及Ｐ＾５３蛋白的表达。结果：其中７例免疫组化结果阳性,６例检出Ｐ＾５３基因突变。基因及Ｐ＾５３突变。Ｐ＾５３的基因突变和过度表达在食管癌的发生发展中发挥重要作用,Ｐ＾５３基因突变／过度表达可以作为判断食管发生及预后的一个指标。     

大肠癌组织p53基因突变及其与临床病理关系的探讨

应用非同位素标记ＰＣＲ－ＳＳＣＰ技术对３４例大肠癌组织ｐ５３基因第五外显子突变进行了检测。结果：５０％（１１／２２）结肠癌，８．３％（１／１２）直肠癌存在ｐ５３基因突变，低分化腺癌高于高、中分化腺癌（Ｐ＜０．０５），ＤｕｋｅｓＢ、Ｃ期高于ＤｕｋｅｓＡ期（Ｐ＜０．０５），ｐ５３基因第五外显子突变在已发生淋巴转移的大肠癌组织中呈现较强的趋势。提示：检测结肠癌原发灶ｐ５３基因第五外显子突变，对指导结肠癌的诊断、治疗及预后判断具有一定意义     

对非同位素PCR-SSCP检测基因突变方法的探讨

目的：建立适合本实验室条件的非同位素ＰＣＲ－ＳＳＣＰ－ＲＦＬＰ基因突变分析技术。方法：应用银染ＰＣＲ－ＳＳＣＰ技术检测石蜡包埋复发肝细胞癌（Ｈｅｐａｔｏｃｅｌｕｌａｒｃａｒｃｉｎｏｍａ，ＨＣＣ）组织中Ｐ５３基因第七外显子突变。采用系列步骤克服非特异扩增；分析影响ＳＳＣＰ诸参数的优化；并与ＲＦＬＰ结果相印证。结果：检测复发ＨＣＣ标本２２例，ＳＳＣＰ阳性率７７．２７％（１７／２２），２４９位点突变率７２．７２％（１６／２２），ＲＦＬＰ与ＳＳＣＰ分析结果符合率１００％；另有２例发生２４９位点以外的突变。结论：该实验流程可靠、高效，适合大量标本的基因突变筛查     

胸腔积液中脱落细胞p53基因突变的检测及其意义

探讨聚合酶链反应－单链构象多态性分析（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）检测胸胸液脱落细胞Ｐ５３基因突变在恶性胸腔积液（ＭＰＥ）诊断中的可行性及价值。方法用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ分别检测了１９例ＭＰＥ及１２例结核性胸腔积液中新鲜脱落细胞标本的抑癌基因－Ｐ５３基因５－８外显子的突变情况,并与正常胸膜组织进行对照。结果７例ＭＰＥ有Ｐ５３基因突变,突变率为３６．８４％。其中５例发生在第５外显子,２例发生在第７外显子,第６、８     

人原发性肝癌中p15基因第二外显子突变研究

为探讨ｐ１５抑癌基因在人原发性肝癌分子发病机理中所起的作用，采用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ对３５例人原发性肝癌、３５例癌旁肝硬化组织以及１０例正常人白细胞中ｐ１５基因第二外显子的突变进行了初步研究。结果显示：除１例癌旁肝硬化组织中发现迁移率异常的ＳＳＣＰ区带外，其余肝癌及癌旁组织未见异常ＳＳＣＰ区带。对该例异常ＳＳＣＰ区带ＤＮＡ进行克隆和序列分析，显示为３４５ｂｐ野生型的ｐ１５基因第二外显子序列。由此提示：人原发性肝癌中ｐ１５基因第二外显子突变发生率很低或没有突变。     

PCR－SSCP银染法检测胃和结、直肠癌APC基因突变

目的：探讨国人胃癌和结、直肠癌的ＡＰＣ基因突变情况。方法：采用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ银染技术，分析了１４例胃癌和１４例散发性结、直肠癌的ＡＰＣ基因第１５外显子第６段和第７段的突变情况。结果：１４份结直肠癌原发灶样品中有１份ＡＰＣ基因第１５外显子第７段出现异常电泳条带，而１４份胃癌及其６份胃癌转移性淋巴结样品中却未观察到ＡＰＣ基因的异常电泳条带。结论：本组胃癌及淋巴结转移灶中未发现ＡＰＣ基因突变，而结、直肠癌的ＡＰＣ基因突变率为７％。     

胃粘膜肠化生组织中p53、APC、K-ras基因突变的研究

目的：探讨ｐ５３,ＡＰＣ及Ｋ－ｒａｓ基因突变在不同类型肠化生癌变中的作用。方法;用ＰＣＲ－ＳＳＣ冢ＰＣＲ－ＲＦＬＰ技术检测了４７例肠化生组织中ｐ５３基因５－８外显子及ＡＰＣ基因１５－６外显子,Ｋ－ｒａｓ基因第１２位点估变。结果：４７例肠化生组织中ｐ５３突变１４例,占２９．８％,ＡＰＣ及Ｋ－ｒａｓ基因突变各３例,分别占６．８％。肠化生中Ⅰ,Ⅱ型肠化３３例,Ⅲ型肠化１４例,Ⅲ型肠化中ｐ５３突变率为５７     

Charcot-Marie-Tooth病1A型基因重复诊断研究

目的：探察国人Ｃｈａｒｃｏｔ－Ｍａｒｉｅ－Ｔｏｏｔｈ（ＣＭＴ１Ａ）型患者的１７ｐ１１．２－ｐ１２区基因重复及与临床表现型的关系。方法：对１５个ＣＭＴ１家系的２９名成员进行１７Ｐ１１．２－Ｐ１２区的３个短串联重复序列标记物进行多骤酶链反应－３种标记物的杂合率及多态性分析。结果：１６名ＣＭＴ患者检出ＣＭＴ１Ａ重复者９名（５５％）,１３名无症状家属中检出４名基因重复者,ＲＭ－ＧＴ、Ｄ１７Ｓ１３５７、Ｄ１     

p53基因突变与人食管癌转移的关系研究

目的：探讨ｐ５３基因突变与人食管癌淋巴结转移的关系。方法：采用聚合酶链反应－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）结合银染技术,对４７例食管瘤组织中ｐ５３ 基因第５～８外显子进行了突变分析。结果：４７例食管癌标本中,ｐ５３基因第５～８外显子出现突变者２０例,其突变率为４２．６％;其中２２例伴有淋巴结转移的原发癌中１３例出现了突变（５９．１％）,其与无淋巴结转移组（２８．０％,７／２５）相比有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。结论：ｐ５３基因突变与人食管癌的转移可能关系密切。     

食管鳞癌组织中抑癌基因p16突变的检测

应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ银染技术检测了４０例食管鳞状细胞癌及癌旁组织中Ｐ１６莽原突变情况。结果：１１例（２７．５％）癌组织中有Ｐ１６基因突变，其中９例发生在第２外显子，突变率随癌分化程度减低及浆膜浸润和淋巴转移有增高趋势。癌旁粘膜中未发现Ｐ１６基因突变。提示：食管鳞癌中存在Ｐ１６基因突变，是食管癌发生中的晚期事件，并可能与食管癌的进展与转移有关。     

急性非淋巴细胞白血病中MGMT与p53基因突变的研究

目的 探讨肿瘤抑制基因ｐ５３、ＭＧＭＴ在急性非淋巴细胞白血病（ＡＮＬＬ）中的改变。方法 用聚合酶链反应－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）技术对３１例ＡＮＬＬ患者、２２例正常人ｐ５３基因第５、６、７、８外显子和ＭＧＭＴ基因第１、４外显子进行突变分析。结果 ３１例ＡＮＬＬ中５例存在ｐ５３基因突变、４例存在ＭＧＭＴ基因突变,其中２例ｐ５３与ＭＧＭＴ同时发生突变。结论 ｐ５３基因突变在白血病发生中起一定     

应用PCR—SSCP技术检测妊娠滋养细胞肿瘤p53基因突变

应用聚合酶链式反应－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）溴乙锭染色技术检测２０例葡萄胎及４例绒毛膜癌组织石腊标本Ｐ５３基因经５和８外显子基因突变。结果显示：正常绒毛０／０，葡萄胎６－２０（３０％），绒毛膜癌３／４发生Ｐ５３基因突变。提示Ｐ５３基因突变是滋养细胞肿瘤形成和演进过程听一个重要事件，葡萄胎应属于生滋养细胞肿瘤 。     

应用PCR—SSCP方法检测肺癌,肠癌中p53基因突变

目的 研究ＰＣＲ－ＳＳＣＰ检测肺癌、肠癌中Ｐ５３基因突变的方法改进及突变率。方法 用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ,银染技术检测４例肺和７例大肠癌组织标本中Ｐ５３基因外显子５－８。结果 肺癌Ｐ５３基因突变率为７５％,肠癌Ｐ５３基因突变率为４２．９％。结论Ｐ５３基因突变与肺癌、肠的发生密切相关,ＰＣＲ－ＳＳＣ 染技术简便快速、灵敏安全的基因突变检测方法,可应用于肿瘤的临床基本诊断 。     

慢性宫颈炎组织内P53突变的检测

目的：通过对慢性宫颈炎组织内Ｐ５３基因５－９外显子突变的研究，探讨慢性宫颈炎的发生是否与Ｐ５３的突变有关，并为临床妇科实验室建立一种分子生物学的基因检测方法。方法：应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ技术，对慢性宫颈炎活检组织内Ｐ５３ ５－９外显子的突变进行了检测。结果：在１８例慢性宫颈炎组织中，仅有１例在ＰＣＲ后初步判断为可疑结果，但ＳＳＣＰ结果显示无突变，其余１７例ＰＣＲ－ＳＳＣＰ检测结果均无Ｐ５３ ５－９外     

P16基因缺失与各型白血病关系

Ｐ１６基因缺失在人类不同组织来源的细胞株和原发肿瘤中频繁发生，为探讨Ｐ１６基因缺失与各型白血病的关系，采用ＰＣＲ扩增技术检测了３０例白血病，结果显示，１７例ＡＬＬ中有６例Ｐ１６基因缺失，其中８例Ｔ－ＡＬＬ中有５例，９例Ｂ－ＡＬＬ中有１例Ｐ１６基因缺失，而在５例ＣＭＬ８例ＡＭＬ中Ｐ１６基因存在，结果表明：Ｐ１６基因缺失与ＡＬＬ尤其是Ｔ－ＡＬＬ有关，Ｐ１６基因检测对ＡＬＬ发病机制的探讨以及诊断都有一定     

PCR—SSCP银染法检测胃和结,直肠癌APC基因突变

探讨国人胃癌和结，直肠癌的ＡＰＣ基因突变情况。采用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ银染技术，分析了１４例胃癌和１４例散发性结，直肠癌的ＡＰＣ基因第１５外显子第６段和第７段的突变情况。１４份结直肠癌原发灶样品中有１份ＡＰＣ基因第１５外显子第７段出现异常电泳条带，而１４份胃癌及其６份胃癌转移性淋巴结样品中未观察到ＡＰＣ基因的异常电泳条带。     

P16基因缺失与各型白血病关系

Ｐ１６基因缺失在人类不同组织来源的细胞株和原发肿瘤中频繁发生，为探讨Ｐ１６基因缺失与各型白血病的关系，采用ＰＣＲ扩增技术检测了３０例白血病，结果显示：１７例ＡＬＬ中有６例Ｐ１６基因缺失，其中８例Ｔ－ＡＬＬ中有５例、９例Ｂ－ＡＬＬ中有１例Ｐ１６基因缺失，而在５例ＣＭＬ、８例ＡＭＬ中Ｐ１６基因存在。结果表明：Ｐ１６基因缺失与ＡＬＬ尤其是Ｔ－ＡＬＬ有关。Ｐ１６基因检测对ＡＬＬ发病机制的探讨以及诊断都有一定的指导意义