视网膜母细胞瘤易感基因在人肺癌中的缺失和突变研究

目的研究视网膜母细胞瘤易感基因(Rb基因)在人肺癌中的缺失和突变情况。方法采用PCR和限制性内切酶分析技术,对20例人肺癌组织DNA样品和3例正常人肺组织DNA样品Rb基因外显子14~16、22~23区域进行分析。结果2例样品存在外显子14~16区域的缺失。结论Rb基因在人肺癌,特别是小细胞肺癌中存在缺失,此为肺癌发病机制的研究积累了资料。     

免疫技术在蛋白质定性定量上的应用 二、放射免疫测定法

1959年yalow及Berson在研究胰岛素免疫特性的基础上,利用标记及未标记抗原与一定量抗体竞争性结合的原理,创立了放射免疫测定法。这种方法把放射性同位素示踪法的高灵敏度和抗原-抗体反应的高度特异性结合起来,可测定10~(-9)-10~(-12)克/毫升的多肽、蛋白质及其它活性物质。放射免疫测定法具有专一性强、灵敏度高、标本用量少、方法简便及可成批大量测定等优点,为多肽、蛋白质类及其它生理活性物质的超微量测定开辟了广阔道路,极大地推动了多肽、蛋白质和激素的理论研究与实际应用。放射免疫是超微量分析方法上的一次革命,是定量分析方法发展史上的一个重要里程碑。yalow及Berson因此而获得诺贝尔奖金。近20     

人脑胶质瘤cDNA文库的构建

作者用异硫氰酸胍－酚－氯仿一步法提取人脑胶质瘤总ＲＮＡ，Ｏｌｉｇｏ（ｄＴ）纤维素亲和层析分离ｐｏｌｙ（Ａ￣＋）ＲＮＡ为模板，合成的ｃＤＮＡ长度为０．２～５ｋｂ。胶质瘤ｃＤＮＡ插入片段克隆到λｇｔ１１载体，所获得的重组子在体外进行包装。该ｃＤＮＡ文库滴度为１．１２×１０￣５，克隆效率为４．８×１０￣３／ｎｇｃＤＮＡ。本文库为研究人脑胶质瘤的基因结构与功能提供了重要基础。     

人原发性肝癌中p16基因表达及CpG岛甲基化状态的研究

目的　进一步探讨人原发性肝癌中 p16基因 m RNA转录水平变化与其基因启动子区 Cp G岛甲基化的关系 ,及其在肝癌发生中的意义。方法　采用狭缝印迹杂交检测 2 0例人原发性肝癌及相应的癌旁、远癌组织及 2例正常人肝组织中 p16基因 m RNA表达水平 ,以甲基化特异性 PCR分析各组织中 p16基因启动子区 Cp G岛的甲基化状况 ,并进行统计分析。结果　 2 0例人原发性肝癌中 14例 (70 % ) p16 m RNA水平比远癌组织显著降低 ;13例 (6 5 % )显示 p16基因启动子区 Cp G岛甲基化 ,其中 84 .6 % (11例 )伴 p16 m RNA转录水平降低。结论　人原发性肝癌中存在高频率的 p16基因表达失活 ,其主要机制可能是启动子区 Cp G岛甲基化抑制了基因的转录 ,在人原发性肝癌的发生发展中有重要作用。其临床诊断和治疗意义有待进一步深入研究。     

RNA聚合酶Ⅱ的一种刺激因子的抗体对细胞核RNA合成的抑制作用

真核细胞基因特定的活化机制几乎不知道,但一般认为RNA聚合酶Ⅱ催化的转录作用是基因表达的最基本过程,因而这个酶对RNA合成的调节作用是真核细胞基因表达的一个重要研究课题。本实验从艾氏腹水瘤细胞中纯化了一种蛋白质,即蛋白因子S-Ⅱ,是一种碱性蛋白质,分子量40500,具有刺激RNA聚合酶Ⅱ的活性。用S-Ⅱ制备了抗S-Ⅱ血清,按Marluft法分离艾氏腹水瘤细胞核进行研究。已经知道细胞核中有三种RNA聚合酶(Ⅰ～Ⅲ),聚合酶Ⅰ合成核糖体RNA,聚合酶Ⅲ合成小分子量RNA,这两种酶的活性不受α-鹅膏蕈碱(α-amanitin)的影响。RNA聚合酶Ⅱ合成mRNA,它的活性可被α-aminitin抑制,实验观     

桥粒斑蛋白研究进展

桥粒斑蛋白(DP)Ⅰ和Ⅱ是桥粒的主要蛋白质,也是上皮性肿瘤优秀的标记物。可利用其抗体进行肿瘤分类,研究细胞的分化程度。本文对国外近年来在DPⅠ和DPⅡ方面的研究进展,包括DP 的提取、DP 的生化特性、DP 在桥粒形成中的作用及抗DP 抗体在肿瘤诊断中的应用,作了较系统的综述。     

血清IgG定量电泳免疫扩散法

作者用戊二醛处理血清,血清IgG与白蛋白形成交联分子,其电泳迁移度稍大于白蛋白,可对IgG顺利地进行电泳免疫扩散定量。本法操作简单,快速,血清IgG最低检出量为3.15—6.30μg/ml,变异系数为5.71～4.91％。测定了53例正常人血清IgG含量为12.05±3.0mg/ml。     

615系小鼠可移植性肝癌基因表达产物——蛋白质的研究

作者对615系小鼠可移植性肝癌H615(原发性)和H22(OAAT诱发)的肝癌细胞基因组表达的蛋白质进行了分析研究。SDS-PAGE 扫描显示肝癌组织的蛋白质较正常肝组织的蛋白质有特征性差异。高分辨IF-SDS-PAGE 双相电泳分析发现:H615新出现 6个蛋白质斑点,消失 4个斑点,有7个斑点的蛋白质含量升高,21个斑点含量下降;H22新出现7个斑点,消失12个斑点,有15个斑点的含量升高,17个斑点含量下降。结果表明,实验性肝癌组织H615和H22的细胞基因表达发生了一定变化,这些改变可能是肝细胞癌变的部分原因。     

癌症患者血清核糖核酸酶活性变化的初步观察

作者对血治核糖核酸酶活性测定的某些实验条件进行了观察,并测定了癌症治疗前、后、其他疾病患者及正常人共202例的血清核糖核酸酶活性。正常人为0。20±0.05单位。47例癌症患者治疗前为0.42±0.14单位,阳性率为87.7％,治疗后的血清核糖核酸酶活性阴转。其他疾病组假阳性率为14.9％。此法操作简单,不需特殊仪器和试剂,重复性较好,适用于临床常规,可作为诊断癌症和疗效观察的生物化学指标之一。