HBeAg阳性慢性乙型肝炎外周血T淋巴细胞上CD28表达初步研究

目的分析HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞CD28表达特点。方法采集健康人、HBeAg阳性乙肝病毒携带者、HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者的外周血,抗体标记,采用流式细胞技术检测CD4+T细胞、CD8+T细胞、CD4+CD28+T细胞、CD8+CD28+T淋巴细胞,同时检测肝功能、HBVDNA。结果慢性乙型肝炎组、乙肝病毒携带组CD4+CD28+T细胞、CD8+CD28+T细胞、CD28+T细胞明显低于健康对照组(P<0.05);高病毒载量组(HBVDNA≥107组)CD8+CD28+T细胞低于低病毒载量组(HBVDNA<107组)(P<0.05)。结论所有结果显示乙型肝炎病毒持续感染状态与CD8+T细胞上共刺激分子CD28的表达低下有关,而CD8+T细胞上CD28的低表达与高病毒载量有关。     

HBeAg阳性与HBeAg阴性慢性乙型肝炎患者多项病情指标的比较

目的 探讨HBeAg阳性和HBeAg阴性患者外周血和肝组织多项病情相关指标的差异情况。方法 采集49例HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者和32例HBeAg阴性慢性乙型肝炎患者，分离外周血单核淋巴细胞并通过流式细胞术分析CD8＋T和CD4＋CD25＋T细胞的水平，并对部分HBeAg阳性和HBeAg阴性患者的肝脏病理分期进行比较。所有病例均经酶联免疫吸附试验（ELISA）检测HBV血清标记物水平，荧光定量PCR检测血清HBV DNA载量，同时进行肝功能检测。结果 慢性HBeAg阳性乙型肝炎组外周血CD8＋T和CD4＋CD25＋T细胞占总T细胞的平均比率均高于HBeAg阴性组患者，但差异无显著性。而慢性HBeAg阳性组外周血CD4＋CD25high T细胞比率明显高于HBeAg阴性组（P〈0．05）。HBeAg阳性组患者血清HBV病毒载量的平均水平与HBeAg阴性组相比有统计学差异（P〈0．05），且HBeAg阳性组患者肝脏的病理炎症程度要低于HBeAg阴性组（P〈0．05）。结论 慢性HBeAg阳性乙型肝炎患者可能由于HBeAg的长期刺激而诱导了机体的免疫耐受，进而引起HBV的长期慢性感染状态，影响治疗与疾病的预后。     

慢性乙型肝炎患者外周恤T淋巴细胞PD-1表达的研究

目的探讨CD4^＋和CD8^＋T淋巴细胞上PD-1的表达与慢性乙型肝炎患者的关系。方法采用流式细胞技术测定66例慢性乙型肝炎患者、17例HBV携带者外周血CD4＋．CD8^＋T淋巴细胞PD-1,并与19例健康人群对照。结果慢性乙型肝炎患者外周血CD4^＋T淋巴细胞PD-1的荧光强度较对照组明显增强,而慢性乙型肝炎患者CD8^＋T淋巴细胞和HBV携带者CD4^＋T淋巴细胞PD-1的表达量和荧光强度都高于对照组。CD4^＋和CD8^＋T淋巴细胞PD-1表达与血清中乙肝病毒载量无明显关系。慢性乙型肝炎轻度组患者CD4^＋和CD8^＋T淋巴细胞PD-1表达的荧光强度明显高于重度组,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论慢性乙型肝炎患者存在细胞免疫功能紊乱和淋巴细胞异常激活现象,CD4＋和CD8＋T淋巴细胞PD-1的表达与其病情发展和转归相关。     

慢性乙肝病毒携带者外周血T细胞亚群的变化及其与血清HBVDNA的关系研究

目的研究慢性乙肝病毒携带者（AsC）的细胞免疫功能变化及临床意义，探讨其与血清HBVDNA的关系。方法对120例慢性乙肝病毒携带者和60例健康人应用流式细胞仪直接免疫荧光法检测外周血T淋巴细胞亚群的百分率，并进行比较。结果乙肝病毒携带者外周血CD3^＋、CD4^＋细胞数百分率及CD4／CD8与健康对照组比较明显降低（P〈0．01）；CD8^＋细胞数百分率较健康对照组明显升高（P〈0．01）；血清HBVDNA（＋）组与HBVDNA（-）组相比，CD3^＋细胞数百分率无统计学差异（P〉0．05），CD4^＋细胞数百分率及CD4^＋／CD8^＋比值明显降低（P〈0．01），CD8^＋细胞数百分率明显升高（P〈0．01）。将HBVDNA（＋）组按高、中、低病毒载量分组进行比较，各项指标均无统计学意义（P〉0．05）。但CD4^＋、CD4^＋／CD8^＋在数值上呈下降趋势，CD8^＋呈上升趋势。结论HBV感染后可导致乙肝病毒携带者细胞免疫功能降低，HBVDNA复制进一步加重紊乱。     

乙型肝炎患者CD4＋CD25＋调节性T细胞检测及意义

目的探讨CD4＋CD25＋调节性T细胞在乙型肝炎患者发病机制中的作用。方法利用免疫荧光法检测20例携带者、10例慢性乙型肝炎、5例慢性重症乙型肝炎患者的CD4＋CD25＋调节性T细胞水平,分析与HBV基因型的关系。结果（1）重型乙型肝炎组外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞的百分率为（2．52±0．94）％,较慢性乙型肝炎组的（5．25±2．17）％差异有统计学意义（P〈0．05）,比乙肝病毒携带者组及健康对照组则差异有统计学意义（P均〈0．01）;（2）慢性乙型肝炎组外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞的百分率与无症状乙肝病毒携带者组及健康对照组相比,差异具有统计学意义（P〈0．05）;（3）乙肝病毒携带者组外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞的百分率为（8．51±2．82）％,与健康对照组的（8．51±2．82）％比较差异无统计学意义（P〉0．05）。（4）HBV基因型C型组外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞的百分率为（6．42±2．36）％,较HBV基因型B型组的（7．64±2．87）％稍为下降,但差异无统计学意义（P〉0．05）。结论CD4＋CD25＋调节性T细胞能抑制T细胞对乙肝病毒的免疫反应,从而抑制乙型肝炎的发生;CD4＋CD25＋调节性T细胞的水平与病情轻重有一定的关系。     

乙肝患者外周血HBV抗原抗体表达及病毒载量与T细胞亚群检测分析

目的探讨临床中乙肝患者外周血的HBV抗原抗体的表达及病毒载量情况,并分析其与T细胞亚群之间的关系。方法选取我院2010年1～12月间的80例乙肝患者为研究组,另选取同期在我院体检的80例健康对象为对照组,然后采取荧光定量法检测HBV—DNA含量,微粒子酶免疫法检测HBV原抗体的表达,流式细胞术检测外周血T细胞亚群。结果HBV抗原抗体含量分为HBeAg阳性和HBeAg阴性,例数分别为50例、30例,对照组的CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋含量均明显高于HBeAg阳性组及HBeAg阴性组的CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋的含量（P〈0．05）。HBeAg阳性组及HBeAg阴性组的CD3^＋、CD4~．CD8^＋的含量比较无明显的差异（P〉0．05）。HBV—DNA含量分为三个亚组,〈104IU／mL组、（104--106）IU／mL组和（107--10。）IU／mL组,例数分别为20例、25例、35例。对照组、〈104IU／mL组和（104—10‘）U／mL组以及（10’～10。）U／mL组的CD3^＋比较具有明显差异（P〈0．05）;对照组和（107～10s）U／mL组的CD4^＋含量比较具有明显的差异（P〈0．05）,有统计学意义;对照组和（10^4—10^6）IU／mL组以及（10^7-10^8）IU／mL组的CD8^＋比较差异有统计学有意义（P〈0．05）。（10L106）IU／mL组和（10^7-10^8）IU／mL组的CD8啥量均明显高于〈104IU／mL组,差异有统计学有意义（P〈0．05）。结论临床中乙肝患者的HBV抗原抗体和病毒载量均与T细胞亚群之间存在联系,并且其不同含量的T细胞亚群也存在差异,均异于常人。因此,临床中可以通过测定病毒载量与T细胞亚群,并有效了解患者的机体免疫状况,从而更好地指导临床治疗。     

慢性乙型肝炎病毒感染者外周血T细胞亚群变化与血清HBV DNA水平分析

目的 探讨慢性乙型肝炎T细胞亚群与HBV DNA的关系.方法 用流式细胞仪直接免疫荧光法测算318例慢性乙型肝炎及22例正常对照者的外周血T细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+)百分率,用荧光定量PCR法检测慢性乙型肝炎HBV DNA,比较不同HBV DNA载量慢性乙型肝炎外周血T细胞亚群的变化.结果 慢性乙型肝炎外周血CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+比正常对照组降低(P＜0.05).HBV DNA高载量的慢性乙型肝炎者CD4+T细胞百分率及CD4+/CD8+较低载量者减少(P＜0.05),CD8+T细胞百分率增加(P＜0.05).结论 HBV DNA复制增加可加重慢性乙型肝炎T细胞亚群的紊乱,CD4+/CD8+的动态变化可提示HBV感染者细胞免疫功能的变化.     

病毒含量不同的慢性乙型肝炎患者T淋巴细胞亚群比较

[目的]研究慢性乙型肝炎患者外周血乙肝病毒量与外周血T淋巴细胞亚群变化的关系,探讨患者体内病毒含量与患者免疫功能状态的关系。[方法]用流式细胞仪检测60例慢性乙型肝炎患者和15名体检的健康人外周血T淋巴细胞亚群CD3^＋,CD4^＋,CD8^＋及CD4^＋／CD8^＋,荧光定量PCR法检测血清HBV-DNA。[结果]慢性乙肝患者CD4^＋,CD4^＋／CD8^＋下降,CD8^＋升高。高病毒量的患者比低病毒量患者T淋巴细胞亚群变化更明显。从HBV-DNA阴性组、低病毒量组到高病毒量组随病毒量增加,CD4^＋细胞减少,而CD8^＋升高,CD4^＋／CD8^＋下降。HBV—DNA阴性组,低病毒量组患者CD3^＋,CD4^＋,CD8^＋及CD4^＋／CD8^＋数值与正常对照比较无显著差异。[结论]高病毒量的患者比低病毒量患者T淋巴细胞亚群变化更明显。HBV-DNA阴性组,低病毒量患者CD4^＋,CD8^＋,CD4^＋／CD8^＋,与正常对照比较数量无显著差异,提示细胞功能低下。     

慢性乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群变化

目的研究慢性肝炎外周血淋巴细胞亚群的变化。方法健康医护人员10例，乙肝病毒携带11例，慢性乙型肝炎21例通过流式细胞术进行外周血CD3^＋CD4^＋、CD3^＋CD8^＋、CD3^＋检测。结果CD3^＋CD4^＋／CD3^＋CD8^＋比值、CD3^＋CD8^＋百分率在三组间有显著性差异（P〈0．01，P〈0．05）。CD3^＋CD4^＋百分率，CD3^＋百分率在慢性乙型肝炎组，乙肝病毒携带组与对照组无统计学意义。结论慢性乙型肝炎患者体内存在细胞免疫功能障碍，外周血CD3^＋CD8^＋百分率升高，CD3^＋CD4^＋／CD3^＋CD8^＋比值降低，无CD3^＋CD4^＋百分率变化，可能与其功能变化有关。     

CD4^＋CD25^＋Foxp^3＋Treg细胞在HBV感染所致慢加急性肝衰竭中作用

目的：探讨CD4^＋CD25^＋Foxp^3＋Treg细胞在HBV感染所致慢加急性肝衰竭发病过程中的表达。方法：采用流式细胞仪检测36例慢加急性肝衰竭患者、38例慢性乙型肝炎患者、40例无症状乙肝病毒携带者及40例健康对照者外周血CD4^＋CD25^＋Foxp^3＋Treg细胞水平,并追踪慢加急性肝衰竭组患者转归,评价好转组与未恢复组CD4^＋CD25^＋Foxp^3＋Treg细胞百分率差异。结果：慢加急性肝衰竭组、慢性乙型肝炎组、无症状乙肝病毒携带组及健康对照组外周血CD4^＋CD25^＋Foxp^3＋Treg细胞分别为（5．14±1．03）％、（9．86±1．72）％、（7．93±1．67）％及（7．06±1．61）％,慢加急肝衰竭组外周血Treg细胞百分率显著低于慢性乙型肝炎组、无症状乙肝病毒携带组和健康对照组（P〈0．01）。慢性乙型肝炎组外周血Treg百分率明显高于慢加急肝衰竭组及健康对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）,而无症状乙肝病毒携带组与健康对照组外周血Treg百分率比较差异无统计学意义（P〉0．05）。各组CD4^＋CD25^＋Foxp^3＋Treg细胞的百分率与患者血清HBVDNA呈正相关。慢加急性肝衰竭好转组与未恢复组CD4^＋CD25^＋Foxp^3＋Treg细胞水平比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：慢加急性肝衰竭患者发病可能与CD4^＋CD25^＋Foxp^3＋Treg细胞表达过低有关,Treg细胞表达水平不能预示慢加急性肝衰竭患者预后。     

乙型肝炎患者肝组织中乙型肝炎病毒抗原与CD8+CD28+T细胞表达的关系及其临床意义

目的:探讨乙型肝炎患者肝组织中乙型肝炎病毒(HBV)抗原与CD8+CD28+T细胞表达的关系及其临床意义.方法:应用免疫组织化学法和核酸原位杂交法检测轻、中、重度乙型肝炎肝组织中HBV抗原及核酸的表达,同时应用免疫组织化学法检测肝组织CD28T细胞表达并比较.结果:重度、中度、轻度乙型肝炎中HBsAg(+)HBcAg(...     

急、慢性乙型肝炎患者CD8^＋ T细胞PD-1分子表达的变化及临床意义

目的探讨急、慢性乙型肝炎患者病程中程序性死亡因子（PD-1）在CD8＋T细胞上的表达及临床意义。方法收集急性乙型肝炎（AHB）和慢性乙型肝炎（CHB）患者治疗前后的外周血样本,以正常体检者外周血样本作对照组（HC）,应用流式细胞术检测外周血CD8＋T淋巴细胞表面PD-1分子的表达情况,荧光定量PCR检测血清HBV DNA载量,同时检测血清ALT水平。统计分析PD-1在急慢性HBV感染过程中的表达变化,并分析其与HBV DNA载量及ALT的相关性。结果发病期的AHB、CHB患者外周血CD8＋T细胞的PD-1均明显高于HC组（P均〈0.01）,且两组病人在治疗后PD-1表达与治疗前相比均降低（P均〈0.05）。发病期AHB组PD-1的表达与ALT水平正相关（r=0.378,P=0.0395）,与HBV DNA水平无相关性（r=0.0468,P=0.477）;发病期CHB组PD-1的表达与HBV DNA水平正相关（r=0.441,P=0.0148）,与ALT水平无相关性（r=0.135,P=0.477）。结论急、慢性乙型肝炎患者外周血CD8＋T细胞上PD-1的表达水平均被上调,急性乙肝患者PD-1的上调与肝脏损伤相关,而慢性乙肝患者PD-1的上调与病毒的复制水平相关。     

慢性乙型肝炎中医虚实辨证与机体特异性细胞免疫及病毒复制的关系探讨

目的：通过对虚实不同证型的慢性乙型肝炎患者体内HBV特异性的细胞毒性T淋巴细胞（CTL）及T淋巴细胞亚群及病毒复制水平的检测,探讨慢性乙型肝炎中医虚实辨证分型与机体特异性细胞免疫及病毒复制的关系。方法：抗原特异性CTL及T淋巴细胞亚群采用流式细胞仪检测;HBV病毒学指标由ABBOTT I2000检测;HBVDNA由ABI荧光定量PCR仪完成。结果 （：1）虚实两组患者特异性CTL细胞的阳性率存在差异（P〈0.05）,实证组患者特异性CTL细胞阳性率较虚证组患者高,差异有统计学意义（P〈0.05）。（2）虚实两组CD3＋、CD4＋以及CD4＋/CD8＋值均较正常对照有所下降,其中虚证组患者CD4＋、CD4＋/CD8＋水平下降较正常组明显,有统计学意义（P〈0.05）,虚实两组之间CD4＋水平有显著性差异（P〈0.05）,但实证组与正常对照组相比,二者无显著性差异（P〉0.05）,虚实两组患者CD8＋水平均高于正常组,虚证组升高更明显,差异有统计学意义（P〈0.05）。（3）虚实两组患者病毒复制程度不同,实证组中高病毒载量患者所占比例较大,约为62.2%,虚证组高病毒载量患者所占比例仅为40%,较前者明显减少,虚证组患者病毒复制处于低复制水平,二者有统计学意义（P〈0.05）。结论：虚实两组患者的外周血特异性CTL细胞阳性率、T淋巴细胞亚群及病毒复制水平存在有统计学差异,可以为指导临床辨证分型提供一定的客观参考价值。     

慢性乙型肝炎患者外周血IL-7与细胞免疫的关系

目的研究慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血IL-7含量与T淋巴细胞亚群、调节性T细胞百分比的关系,探究IL-7对慢性乙型肝炎细胞免疫作用的影响。方法慢性乙型肝炎患者组、慢性乙型肝炎病毒(HBV)携带组、健康对照组,采用ELISA法检测受试者外周血IL-7含量,流式细胞仪技术检测外周血T淋巴细胞亚群和CD4+CD25+调节性T细胞百分比。结果 CHB组、HBV携带组、健康对照组外周血IL-7含量分别为(1.68±0.58)ng/mL、(3.83±0.62)ng/mL和(6.25±0.32)ng/mL,3组间存在显著性差异(P0.05);CHB组、HBV携带组、健康对照组外周血T细胞亚群CD4+T淋巴细胞分别为(31.3±3.3)%、(38.1±6.8)%、(43.2±9.4)%,CD8+T淋巴细胞分别为(24.8±5.2)%、(28.1±3.4)%、(30.5±8.6)%;CD4+CD25+调节性T细胞分别为(10.9±1.3)%、(7.4±1.0)%、(4.2±1.1)%。CHB组外周血IL-7明显低于HBV携带组及健康对照组,且与CD4+T细胞百分比呈负相关(r1=-0.58,P0.05),与CD8+T细胞百分比呈正相关(r2=0.63,P0.05),与CD4+CD25+调节性T细胞百分比呈负相关(r3=-0.43,P0.05)。结论 CHB患者外周血IL-7负调控调节性T细胞,对CD8+T细胞的细胞免疫有促进作用。     

乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群变化及临床意义

目的 观察不同类型乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）感染者外周血T淋巴细胞亚群变化特点.方法 对我院2013年6-11月门诊及住院的200例乙肝患者和50例健康对照者采用流式细胞术（flow cytometry,FCM）检测外周血淋巴细胞（CD45＋）、T淋巴细胞（CD45＋CD3＋、CD45＋CD3＋CD4＋、CD45＋CD3＋CD8＋）、B淋巴细胞（CD45＋CD3-CD19＋）、NK淋巴细胞（CD45＋CD3-CD16＋56＋）百分比和细胞绝对计数.结果 急性乙型肝炎组T淋巴细胞总数、CD4＋和CD8＋T淋巴细胞数较健康对照组显著升高（P＜0.01）.慢性乙型肝炎组、肝硬化组和肝衰竭组：T淋巴细胞总数、CD4＋和CD8＋T淋巴细胞数、CD4＋/CD8＋比值均较健康对照组降低,其中肝衰竭组＜肝硬化组＜慢性乙型肝炎组.慢性乙型肝炎组CD4＋淋巴细胞百分比较健康对照组显著降低（P＜0.01）.肝硬化组CD4＋淋巴细胞百分比较慢性乙型肝炎组显著降低（P＜0.01）,CD8＋T淋巴细胞百分比显著升高（P＜0.01）.肝衰竭组T淋巴细胞和CD4＋T淋巴细胞百分比较肝硬化组显著降低（P＜0.01）.结论 乙型肝炎患者CD4＋T淋巴细胞持续降低,与疾病病程发展密切相关.     

乙型肝炎病毒携带者T细胞亚群检测及其与肝组织病变程度的关系

目的观察乙型肝炎病毒(HBV)携带者T细胞亚群的变化及其与肝组织病变程度的关系。方法HBV携带者79例进行肝组织病理检查,应用流式细胞仪检测T细胞亚群,与HBsAg阴性的健康者22例比较分析。结果(1)非活动性HBV携带者与对照组比较,CD4+百分率和CD4+/CD8+比值下降,CD8+百分率升高,差异有统计学意义(P<0.05)。慢性HBV携带者与对照组比较,CD4+、CD4+/CD8+明显下降,CD8+明显升高,差异有统计学意义(P<0.01)。(2)非活动性HBV携带者与慢性HBV携带者CD4+、CD8+百分率与CD4+/CD8+比值比较,差异无统计学意义(P>0.05)。(3)慢性HBV携带者CD4+百分率在G3～4亚组明显高于G0～2亚组(P<0.05),非活动性HBV携带者2亚组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论HBV携带者细胞免疫功能紊乱,导致慢性HBV携带。     

慢性乙肝患者淋巴细胞亚群水平与肝纤程度关系的研究

目的观察HBV病毒水平和淋巴细胞亚群变化在肝纤维化进程中的价值。方法采用荧光定量PCR、流式细胞术及放射免疫法(RIA)方法检测100例慢性乙型肝炎患者淋巴细胞亚群和肝纤维化指标,同期选取健康对照组并进行统计学处理。结果与健康对照组相比,DNA阴性组淋巴细胞分型的差异无统计学意义,但肝纤指标则明显增加(PCⅢ:118.43±17.83 vs 79.43±6.08;Ⅳ-C:98.26±10.23vs48.66±6.26;LN:112.48±13.63vs87.04±6.73;HA:98.28±15.68vs33.00±6.66;P均0.05);低病毒载量组与DNA阴性组相比,CD8+T细胞增多(36.18±6.88vs28.13±5.11,P0.05),高病毒载量组与DNA阴性组相比,CD4+T细胞显著减少(33.54±4.99vs38.38±5.81,P0.05)、CD8+T细胞明显增多(38.15±7.92vs28.13±5.11,P0.05)、CD4+/CD8+下降(1.06±0.41vs1.42±0.39,P0.05),但肝纤四项均明显增高(P0.05)。结论慢性HBV感染患者在疾病进展中选择合适的时机联合检测,将为早期干预和抗病毒治疗提供科学依据。