桑黄多糖缓解日本血吸虫感染小鼠氧化应激及 肝纤维化的实验研究

目的　探讨桑黄醇提多糖（PPI）对日本血吸虫感染小鼠氧化应激、肝肉芽肿和肝纤维化的改善作用。方法　采用日本血吸虫尾蚴玻片贴腹感染法建立日本血吸虫肝病小鼠模型。设健康对照组（A组）、感染对照组（B组）、PPI单独治疗组（C组）、吡喹酮单独治疗组（D组）和PPI加吡喹酮混合治疗组（E组），每组各10只小鼠；除A组外，其他各组每只小鼠感染（30 ± 2）条尾蚴。自感染后42 d开始，D、E组小鼠灌胃给予500 mg/kg吡喹酮，连续2 d；C、E组给予400 mg/kg PPI灌胃，连续给药30 d。HE染色观察小鼠肝组织病理学改变，测定小鼠血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、透明质酸（HA）、层黏连蛋白（LN）及小鼠肝组织匀浆中丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH?PX）、谷胱甘肽还原酶（GSH?R）、谷胱甘肽（GSH）含量，采用免疫组化技术检测小鼠肝组织中转化生长因子?β（TGF?β）、α?平滑肌肌动蛋白（α?SMA）表达水平，采用实时荧光定量PCR检测Nrf2、Gsta4基因表达水平。结果　日本血吸虫感染但未予治疗小鼠出现典型血吸虫病肝病病理改变，PPI干预后能有效减轻小鼠肝虫卵肉芽肿及胶原沉积。血吸虫病肝病小鼠肝脏脂质过氧化加剧，诱导了氧化应激，小鼠血清中MDA含量增加，GSH和各种抗氧化酶含量下降。与B组相比，PPI治疗抑制了脂质过氧化，提高了GSH含量，恢复了抗氧化酶活性。此外，PPI治疗可抑制TGF?β信号通路，提升Nrf2、Gsta4基因表达水平。结论　PPI在治疗血吸虫病肝纤维化方面发挥重要作用，其内在机制可能是通过上调Nrf2和Gsta4基因表达、改善氧化应激损伤，从而抑制肝脏虫卵肉芽肿形成和肝纤维化。     

佐剂对日本血吸虫31／32kDa蛋白保护性免疫力的影响

本实验用纯化的日本血吸虫３１／３２ｋＤａ蛋白辅以ｐｏｌｙａｌｐｈａｏｌｅｆｉｎ（ｐａｏ）佐剂免疫小鼠，同时比较了Ｓｊ３１／３２蛋白辅以福氏完全佐剂对小鼠保护性免疫力的影响。     

感染日本血吸虫小鼠CD4^＋,CD8^＋T细胞凋亡相关基因转录水平

探讨日本血吸虫感染过程中，宿主ＣＤ４＾＋和ＣＤ８＾＋细胞凋亡的相关基因ＴＧ－β在转录水平上的变化。方法：用地高辛标记的探针作原位杂交，观察促凋亡基因ＴＧＦ－β在ＣＤ４＾＋和ＣＤ８＾＋细胞的ＴＧＦ－βｍＲＮＡ的表达随感染时间的延长而升高，感染后１０周起ＣＤ４＾＋Ｔ细胞ＴＧＦ－βｍＲＮＡ的表达明显高于ＣＤ８＾＋细胞，差异有显著性意义。结论在日本血吸虫感染过程中，ＣＤ４＾＋细胞凋亡比率超过ＣＤ８＾＋细胞     

水环境中壬基酚搅拌棒吸附萃取法测定

壬基酚(nonylphenol,NP)是一种环境内分泌干扰物。研究发现,水中NP浓度达10μg/L时会使虹鳟发生生殖异常。搅拌棒吸附萃取(SBSE)技术是集采样、萃取和浓缩于一体的样品前处理技术,最大的优点是高灵敏度。对壬基酚的检测一般采用气相色谱-质谱法和液相色谱-质谱法,样品预处理有液-液萃取,固-液萃取,固相萃取,固相微萃取     

Survivin特异性siRNA诱导胰腺癌细胞凋亡的研究

目的 观察survivin特异性siRNA对胰腺癌细胞株Panc-1细胞增殖和凋亡的影响.方法 体外构建Survivin特异性siRNA表达载体p-Survivin-siRNA,转染胰腺癌细胞株Panc-1细胞系,RT-PCR和Western印迹法检验其对胰腺癌细胞株Panc-1细胞的RNA干扰(RNAi)效果.采用MTT法分析其对细胞增殖的影响,流式细胞仪检测其对细胞周期的影响.同时,采用Western印迹法检测半胱氨蛋白酶 3(caspase 3)的表达变化.结果 p-survivin-siRNA表达质粒高效而特异地剔降胰腺癌细胞株Panc-1细胞中survivin的表达,抑制肿瘤细胞增殖(P<0.01),阻断胰腺癌细胞株Panc-1细胞在G1期.随着survivin基因被沉默,caspase 3表达升高(P<0.01).结论 靶向survivin基因的siRNA表达载体可以显著抑制胰腺癌细胞株Panc-1细胞增殖,促进细胞凋亡.     

肿瘤坏死因子对日本血吸虫雌虫产卵影响的体外试验研究

研究肿瘤坏死因子对日本血吸虫雌虫产卵的影响。方法：日本血吸虫蚴尾感染家兔，收集５０天龄雌虫，在含不同浓度的ＴＮＦ－α的ＤＭＥＭ培养液中培养７２ｈ，观察其产卵情况。结果：ＴＮＦ－α具有刺激雌虫产卵的作用，在１０－４０ｍｇ／ｍｌ范围内产卵量随ＴＮＦ－α剂量增加而增高。当ＴＮＦ－α４０ｍｇ／ｍｌ时，雌虫产卵量达高峰。     

日本血吸虫31／32kDa循环免疫复合物的检测及其在疾病 …

检测血吸虫循环免疫复合物（ＣＩＣ）有助于提高疾病的检出率。利用抗血吸虫单克隆抗体Ｈ２２６和碱性磷酸酶标记的羊抗人ＩｇＧ（Ｆｃ）作捕捉ＥＬＩＳＡ，检测Ｅ要血吸虫病患者血清ＣＩＣ，其阳性检出率为９２．２％，其中，ＥＰＧ〈１００的病人阳性检出主继９０．０％，ＥＰＧ〉１００的病人阳性检出率为９５．５％，两者无显著性差异。由于羊抗人ＩｇＧ Ｆｃ段能与ＣＩＣ中人ＩｇＧ的Ｆｃ段特异性结合，因此不驻省去了常规分离     

异源性蠕虫感染对抗日本血吸虫IgE小鼠单克隆抗体被动免疫转移的影响

为了解异种寄生虫感染是否会增强抗日本血吸虫IgE单克隆抗体(Sj18ε.1)被动免疫转移的作用,选用可引起嗜酸粒细胞增多和在IgE依赖性杀伤血吸虫量虫方面能激     

多元化考核方式在病原生物学与免疫学综合实验考核中的应用

目的培养学生自主学习性,增强学生实际动手操作能力。方法在病原生物学与免疫学实验整合的基础上,建立了包括实验技能操作、实验报告评估、设计性实验、标本考试及实验理论考试等在内的多元化考核方式。结果实践成功证明了其可行性,取得了预期成效。结论多元化考核方式的建立对培养具有创新精神和创新能力的高素质人才、提高课程教学质量具有极其重要的作用。