Rho激酶抑制剂对慢性阻塞性肺疾病气道重塑的干预作用

目的建立慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠模型,观察Rho激酶抑制剂Y-27632对COPD大鼠模型气道重塑的干预作用。方法将45只雄性Wistar大鼠随机分为COPD模型组和Y-27632干预组和正常对照组。模型组和干预组采用烟熏及气管滴入内毒素脂多糖(LPS)法建立COPD大鼠模型,在试验的第1、8、15、23天将LPS 200μg/200μL(用生理盐水配成1 g/L溶液)注入大鼠气管内,在注入LPS 1 h后,干预组腹腔内注射Y-27632溶液0.1 mL,模型组和对照组同一时间腹腔内注射等量生理盐水代替,3组大鼠饲养至第91天处死。对各组大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)进行细胞分类计数和肺组织病理学检测。结果 (1)动物造模情况:模型组及干预组大鼠早期出现躁动不安,先后出现精神萎靡、行动迟缓,进食进水量减少,之后逐渐出现体重减轻,咳嗽、气促等表现;对照组未出现上述表现。(2)BALF细胞总数及分类计数:与模型组相比,干预组和对照组BALF细胞总数和细胞分类中肺泡巨噬细胞(AM)的比例明显下降(P<0.05)。(3)病理形态学观察:光镜下观察对照组大鼠支气管肺组织上皮结构和肺泡结构完整,支气管纤毛排列整齐;模型组肺组织支气管纤毛柱状上皮细胞部分剥脱,杯状细胞增生,黏膜下层及肌层大量炎性细胞浸润,管腔内大量炎症细胞浸润,肺泡过度扩大融合。支气管组织病理分级比较显示,模型组较其余两组病理改变严重(P=0.028、P=0.031),干预组与对照组比较差异无统计学意义(P=0.576);肺泡组织病理分级比较显示,模型组较其余两组病理改变严重(P=0.025,P=0.033),干预组与对照组比较,差异无统计学意义(P=0.523)。病理图像分析提示模型组气管壁明显增厚,细支气管伴行肺小动脉壁亦明显增厚;与模型组相比,干预组的气道壁厚度及腺体厚度/气道壁厚度、血管壁厚度等均较模型组有所改善(P<0.05)。结论 Rho激酶抑制剂Y-27632抑制Rho/ROCK信号通路,可能通过减少COPD大鼠的肺组织AM在气道的聚集,减轻气道的慢性炎症,从而改善气道重塑。     

Rho／Rho激酶在COPD大鼠气道的表达及其对气道重塑的影响

目的探讨Rho／Rho激酶信号通路在慢性阻塞性肺疾病大鼠气道中的表达及其对气道的影响。方法清洁级相同重量级Wistar大鼠60只,随机分为正常对照组、COPD组、Y-27632干预组,每组20只。分析各组大鼠的支气管壁厚度（War）和平滑肌厚度（Warn）,以及RhoA,ROCKlImRNA的表达。结果与对照组相比,COPD组大鼠RhoA,ROCK1ImRNA表达明显增高,wat、wam也明显增加（P〈0．05）;与C（）PD组相比,Y-27632干预组大鼠RhoA,ROCKIImRNA的表达明显降低,Wat、wam也明显降低（P〈0．05）。结论COPD组大鼠RhoA,ROCKⅡmRNA表达明显增高;应用ROCKⅡ特异性拈抗剂Y一27632能够明显控制RhoA,ROCKⅡmRNA的表达,从而抑制慢性阻塞性肺疾病大鼠的气管壁增厚和平滑肌增殖。     

用气道内滴入脂多糖和被动吸烟建立慢性阻塞性肺病大鼠模型

目的建立一种能反映人类慢性阻塞性肺病(COPD)自然发病过程的动物模型.方法通过多次气道内滴入脂多糖(1iPopolysaccharide,LPS)和被动吸烟的方法来制作C0PD大鼠模型,用小动物肺功能仪检测肺功能及对支气管肺泡灌洗液(BALF)、血液细胞进行分类计数.作常规病理检查.结果模型组大鼠各级支气管上皮细胞明显损伤,支气管壁杯状细胞增生(P＜0.01),气道内分泌物增多;气道壁及肺组织有大量炎细胞浸润,气道壁增厚,细支气管伴行肺小动脉管壁亦明显增厚;肺泡过度扩大融合,动态肺顺应性下降,气道阻力明显增大(均P＜0.01);BALF中性粒细胞数量较对照组增多近27倍(P＜0.01),血液中性粒细胞是对照组的近3倍(P＜0.01),且两者呈正相关(r=0.581,P＜0.01).结论通过气道内滴入脂多糖和被动吸烟方式能够建立较符合人类COPD病变的大鼠模型,为进一步研究提供了参照资料.     

The expression of receptor tyrosine kinase RON in lung tissue of rats with chronic obstructive pulmonary disease

目的:探讨酪氨酸激酶受体RON在慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)大鼠气道炎症中的作用.方法:单纯熏香烟法建立COPD大鼠模型;支气管肺泡灌洗计数支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数与肺泡巨噬细胞( alveolar macrophage,AM)数,培养正常和COPD大鼠AM,采用逆转录-聚合酶链式反应法检测大鼠肺组织中酪氨酸激酶受体RON mRNA的表达情况,免疫组化法观察大鼠气道和离体培养的AM中RON蛋白的表达水平,图像分析系统测定肺平均内衬间隔(MLI)、平均肺泡数(MAN)和肺泡腔面积与总面积比(PAA).结果:COPD组MLI、PAA较正常对照组明显增高[MLI:(111.451±49.334) ×10-6m vs (44.803±10.624) ×10-6m;PAA:(79.653±7.594)％ vs (48.352±13.063)％],而MAN则明显低于正常对照组[(81.621±20.394)×106/m2 vs( 170.098±42.398)×106/m2],差异均有统计学意义(P＜0.01).COPD组BALF中细胞总数和AM计数均明显高于正常对照组[细胞总数:(6.029±0.420)×108/L vs(1.463±0.0692)× 108/L;AM数:(5.752±0.571)×108/Lvs (1.387±0.105) ×108/L,P＜0.01)].COPD组大鼠肺组织RON mRNA表达较正常对照组明显上调[ (0.892±0.088) vs (0.353 +0.080),P＜0.01],COPD组大鼠气道上皮及AM中RON蛋白水平也较正常对照组显著增加[气道RON蛋白:(0.171±0.027)vs(0.073±0.009);AM RON蛋白:(0.310 +0.101) vs(0.110±0.006),P＜0.01].结论:RON与COPD气道炎症调节密切相关.     

细胞粘附分子在慢性阻塞性肺疾病大鼠气道炎症中的作用

目的:制备慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠模型,探讨细胞间粘附分子-1(ICAM-1)、E-选择素在COPD气道炎症中的作用.方法:Wistar大鼠20只随机分为对照阻(A组,10只)、模型组(B组,10只);采用两次气管内注入脂多糖(LPS)和反复烟熏的方法制作COPD大鼠模型;采用免疫组化法检测ICAM-1、E-选择素在COPD大鼠支气管肺组织中的表达.结果:所建大鼠模型的病理及病理生理学改变基本符合人类COPD的特点;模型组支气管上皮细胞、肺泡上皮细胞及支气管肺组织微小血管内皮细胞ICAM-1表达强度显著高于对照组(P＜0.01),且与支气管肺泡灌洗夜(BALF)中白细胞总数及中性粒细胞数成显著正相关(分别为:r=0.76,P＜0.01;r=0.65,P＜0.05);模型组支气管肺组织微小血管内皮细胞E-选择素的表达强度显著高于对照组(P＜0.01),且与BALF白细胞总数及中性粒细胞数成显著正相关(分别为:r=0.82,P＜0.001;r=0.79,P＜0.001).结论:ICAM-1、E-选择素可能参与了COPD气道炎症过程.     

E-选择素和巨噬细胞炎症蛋白2在慢性阻塞性肺疾病大鼠气道炎症中的作用

目的 探讨E-选择素和巨噬细胞炎症蛋白2(MIP-2)在慢性阻塞性肺疾病(COPD)气道炎症中的作用.方法 24只健康雄性SD大鼠随机分为COPD组和正常对照组,每组12只.COPD组大鼠采用单纯烟熏法制备COPD模型.采用免疫组织化学方法检测COPD组和对照组大鼠支气管肺组织中E-选择素的表达,ELISA方法检测血清、支气管肺泡灌洗液(BALF)、肺组织匀浆中MIP-2的含量.结果 所建大鼠模型的病理及肺功能测定基本符合人类COPD的特点.COPD组大鼠模型中E-选择素在支气管肺组织血管内皮细胞的表达明显高于对照组(P＜0.05),与BALF中的中性粒细胞数呈正相关(r=0.809,P＜0.01);MIP-2在BALF及肺组织匀浆含量显著高于对照组(P均＜0.05),且均与BALF中的中性粒细胞数呈正相关(r值分别为0.893和0.716,P值分别＜0.01和＜0.05).结论 E-选择素和MIP-2可能参与了COPD气道炎症过程.     

慢性阻塞性肺疾病大鼠模型气道炎症与重塑的实验研究

目的：动态观察及评价慢性阻塞性肺疾病（COPD）大鼠模型的气道炎症及重塑的特点.方法：雄性Wistar大鼠,随机分为正常组、模型组,在不同时间点分批处死,进行肺泡灌洗液（BALF）中炎细胞计数和分类;观察肺组织的病理形态学改变;半定量图像分析法测量小气道管壁和平滑肌层厚度.结果：（1）造模第20d左右,动物模型出现慢性支气管炎和肺气肿的病理形态学改变,第20～40d期间炎症反应最重,第40d之后炎症反应呈慢性过程.（2）模型组管壁及平滑肌层均较正常对照组显著增厚（P＜0.01）,模型组小气道管壁厚度与平滑肌层厚度成显著正相关（r=0.87813,P＜0.01）.（3）BALF中炎细胞总数：M20、M30组较正常对照组显著增多（P＜0.01,P＜0.01）;BALF中炎细胞分类：M20组中性粒细胞比例较正常对照组显著增高（P＜0.01）,巨噬细胞比例显著下降（P＜0.01）.结论：本实验所制备的COPD大鼠模型符合人类COPD的病理形态学特点.慢性气道炎症的发复刺激引起管壁纤维性增生增厚及平滑肌层增厚,即气道重塑,最终导致气流受限.     

单核细胞趋化蛋白-1在慢性阻塞性肺疾病大鼠气道的表达状况的研究

目的　探讨单核细胞趋化蛋白 - 1 (MCP 1 )在慢性阻塞性肺疾病 (COPD)发病机制中的作用及糖皮质激素的干预作用。方法　 2 4只Wistar大鼠随机分为 3组 :正常对照组、COPD模型组和泼尼松干预组。采用单纯熏香烟法建立COPD模型 ,干预组隔日泼尼松灌胃。支气管肺泡灌洗计数支气管肺泡灌洗液 (BALF)中细胞总数与肺泡巨噬细胞 (AM)数 ,酶联免疫吸附法 (ELISA)测定BALF和血清中的MCP 1及肿瘤坏死因子- α(TNF- α)浓度。肺组织切片观察形态学改变 ,采用图像分析系统测定肺平均内衬间隔 (MLI)、平均肺泡数 (MAN)和肺泡腔面积与总面积比 (PAA)。结果COPD模型组MLI、PAA较正常对照组增高 ,而MAN低于对照组 (P <0 . 0 1 )。COPD模型组BALF中MCP 1、TNF α浓度、细胞总数和AM计数均高于正常对照组 (P <0 . 0 1 )。血清中MCP 1的升高与正常对照组相比无统计学差异 (P >0 . 0 5 )。泼尼松干预组MLI和PAA较COPD模型组降低 ,而MAN高于COPD模型组 (P <0. 0 1 ) ,BALF中MCP 1及TNF α浓度 ,细胞总数及AM计数与COPD模型组比较均有下降 (P <0 . 0 1 )。BALF中MCP 1浓度与AM数目和TNF α浓度 (r =0 . 86 1 ,P <0 . 0 1 ;r =0 . 86 8,P <0 . 0 1 ) ,以及TNF- α浓度与AM数目 (r=0 . 84 ,P <0 . 0 1 )均呈密切正相关 ,血清中M     

Rho／Rho激酶在哮喘小鼠气道的表达及其对气道重塑的影响

目的研究Rho／Rho激酶（ROCK）信号通路在哮喘小鼠气道中的表达及其对气道重塑的作用。方法清洁级BALB／c雄性小鼠39只,随机分为对照组、哮喘组、Y-27632干预组、地塞米松干预组,每组10只（其中对照组9只）。建立哮喘小鼠模型,并应用ROCKⅡ特异性拮抗剂Y-27632进行干预,光镜观察肺组织结构,Image—proplus图像分析软件测量支气管壁厚度（Wat）和平滑肌厚度（Wam）,免疫组化法测定肺组织ROCKⅡ蛋白含量,RT—PCR法测定RhoA、ROCKⅡ mRNA含量。结果（1）哮喘组小鼠RhoA、ROCKⅡ表达明显增高,应用ROCKⅡ特异性拮抗剂Y-27632能够下调RhoA、ROCKⅡ的表达。（2）Y-27632干预组小鼠Wat和Wam均明显低于哮喘组小鼠。结论哮喘小鼠肺组织RhoA及ROCKⅡ表达增多,ROCKll受体拮抗剂Y-27632能够下调RhoA、ROCKⅡ的表达,明显抑制哮喘小鼠Wat和Wam。     

冬虫夏草对COPD模型大鼠肺功能及Th1/Th2的影响

目的：探讨冬虫夏草对大鼠慢性阻塞性肺病（COPD）模型的肺功能及Th1／Th2的影响。方法：42只大鼠随机分为模型、治疗和对照三组，各14只。前两组采用SD大鼠反复被动吸烟和气道内注入脂多糖的方法建立COPD模型。8周后每组随机取7只做肺功能测定，观察肺组织病理变化。每组剩下的7只行支气管肺泡灌洗。取支气管肺泡灌洗液（BALF）做细胞计数及分类；用ELISA法测定BALF中的IL-2、IL-4及Th1／Th2的水平。结果：光镜下，对照组大鼠肺组织结构正常：模型组大鼠的肺组织支气管壁柱状纤毛倒伏、粘连，杯状细胞增生，支气管壁及周围组织有大量炎症细胞浸润，部分肺泡间隔破坏，肺泡孔扩大；治疗组大鼠的肺组织支气管及其周围组织损伤明显减轻。与对照组比较，模型组大鼠BALF中的炎症细胞数明显升高，气道阻力增加，肺顺应性下降：BALF中IL-2水平和IL-2／IL-4比值显著降低；与模型组比较，治疗组BALF中的炎症细胞数明显降低，气道阻力下降，而肺顺应性上升，BALF中IL-2／IL-4比值升高。结论：冬虫夏草有抑制COPD气道炎症反应、改善肺功能及纠正气道Th1／Th2比例失衡的作用。     

Rho/ROCK信号转导通路在哮喘大鼠气道重塑中的作用及干预

目的 观察法舒地尔对慢性哮喘大鼠镜下气道重塑改变及肺组织RhoA和ROCKⅠ表达的影响,探讨Rho/ROCK信号转导通路在哮喘气道重塑中的作用。方法 雄性SD大鼠分为3组,建立慢性哮喘大鼠型,统计支气管肺泡灌洗液（BALF）中细胞计数,观察肺组织病理及超微结构的变化,测定肺内支气管壁厚度（WTt）和支气管平滑肌厚度（WTm）,免疫组化法和real-timePCR法分别检测肺组织中RhoA及ROCKⅠ表达情况。结果（1）哮喘组BALF中细胞总数、嗜酸性粒细胞占细胞总数百分比均明显高于正常对照组（均P＜0.01）;法舒地尔干预后明显抑制炎症细胞浸润,该组BALF中细胞总数较哮喘组不同程度降低（P＜0.01）。（2）哮喘组肺组织镜下可见明显炎症性和结构性病理变化,法舒地尔组肺组织炎症反应及重塑改变较哮喘组改善。（3）哮喘组WTt和WTm较正常对照组明显增加（均P＜0.01）,法舒地尔组WTt和WTm较哮喘组明显降低（均P＜0.01）。（4）哮喘组大鼠肺组织RhoA和ROCKⅠ蛋白和mRNA的表达水平明显高于正常对照组（均P＜0.01）,法舒地尔组明显低于哮喘组（均P＜0.01）。（5）WTt、WTm均与大鼠肺组织中ROCKⅠ蛋白水平呈明显正相关（r=0.743、0.974,均P＜0.01）。结论哮喘大鼠RhoA和ROCKⅠ表达增高,法舒地尔可能通过影响RhoA和ROCKⅠ的表达,减轻气道炎症及改善气道重塑,表明Rho/ROCK信号转导通路参与哮喘气道重塑的形成。     

加味小柴胡汤对哮喘大鼠Rho/Rcok信号传导通路的影响

目的观察加味小柴胡汤对哮喘大鼠气道重建中小G蛋白/Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶(Rho/Rcok)信号通路的影响,探讨其作用机制。方法 60只雄性SD大鼠随机分为空白对照组、模型对照组、西药组、中药低剂量组、中药高剂量组、中西药组,每组10只。除空白对照组外,其余组别均采用以卵蛋白(OVA)致敏激发法制备大鼠哮喘模型,在OVA雾化激发的同时,各组分别给予相应药物灌胃治疗,西药组给予地塞米松注射液,中药低、高剂量组分别给予不同浓度(0.90 g生药/ml、1.80 g生药/ml)的加味小柴胡汤,中西药组给予地塞米松注射液+高剂量加味小柴胡汤。HE染色法观察大鼠肺组织病理学及嗜酸性粒细胞(EOS)计数变化,RT-PCR法测定肺组织RhoA、Rock2mRNA表达情况。结果 HE染色显示模型对照组大鼠肺组织中出现大量以EOS为主的炎症细胞浸润,支气管平滑肌增厚。上述病理改变在各药物治疗组中均有减轻,同时大鼠肺组织中EOS计数均较模型对照组有不同程度的减少(P0.05,P0.01)。RT-PCR法测定结果显示模型对照组肺组织中RhoA、Rock2 mRNA表达量明显高于空白对照组(P0.05),各药物治疗组与模型对照组比较,肺组织中RhoA、Rock2 mRNA的表达明显下降(P0.05,P0.01)。结论加味小柴胡汤能够降低哮喘大鼠气道炎症细胞的浸润,对哮喘大鼠气道重塑中Rho/Rock信号通路有良好的调控作用。     

吸烟大鼠支气管肺组织中Gq的表达及其影响

目的探讨Gq在COPD大鼠模型支气管肺组织中的表达变化及其在COPD大鼠模型气道炎症中的作用.方法将Wistar大鼠44只随机分为4组:①非吸烟对照组;②吸烟1个月组;③吸烟2个月组;④干预(地塞米松 吸烟2个月)组.观察肺组织病理学变化和支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞记数和分类.支气管肺组织Gq表达检测采用免疫组织化学和Western blot 分析.结果吸烟大鼠的支气管粘膜和肺实质均有大量炎细胞浸润,BALF中白细胞总数和中性粒细胞数均显著高于对照组,吸烟2个月大鼠出现明显肺气肿改变.Gq在对照组大鼠支气管肺组织有弱表达,在模型组和干预组均有过度表达,Gq阳性细胞主要为气道上皮细胞、炎细胞和毛细血管内皮细胞.模型组大鼠Gq阳性细胞百分比和BALF中白细胞总数、中性粒细胞数呈显著正相关.Western blot 分析显示模型组和干预组Gq表达水平显著高于对照组,而药物干预后Gq表达水平显著下降,却仍高于对照组.结论 Gq的强表达可能在吸烟大鼠的气道炎症中发挥作用,干预其过度表达可能是治疗气道炎症的有效方法,糖皮质激素有可能通过抑制Gq的过度表达而减轻气道炎症的作用.     

冬虫夏草对COPD大鼠肺功能及肺泡灌洗液基质金属蛋白酶-9的影响

目的探讨冬虫夏草对慢性阻塞性肺病(COPD)大鼠肺功能及肺泡灌洗液基质金属蛋白酶-9含量的影响。方法 42只SD大鼠采用反复被动吸烟和气道内注入脂多糖的方法建立慢性阻塞性肺病模型,大鼠被随机分为模型组、治疗组和对照组,各14只。8周后每组随机取7只做肺功能测定,观察肺组织病理变化。每组剩下的7只行支气管肺泡灌洗,支气管肺泡灌洗液(BALF)做白细胞计数,用ELISA法测定BALF中的基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的含量。结果光镜下对照组大鼠肺组织的结构正常;模型组大鼠的肺组织支气管壁及周围组织有大量炎症细胞浸润,部分肺泡间隔破坏,肺泡孔扩大;治疗组大鼠的肺组织支气管及其周围组织损伤明显减轻。与对照组相比,模型组大鼠BALF中的白细胞总数及MMP-9的水平显著升高,气道阻力增加,肺顺应性下降;与模型组相比,治疗组BALF中白细胞总数、MMP-9的水平明显降低(均<0.05),气道阻力下降,而肺顺应性上升。结论冬虫夏草对肺功能的保护作用可能是通过降低气道炎症反应减少BALF中MMP-9的表达来实现。     

阿奇霉素对哮喘大鼠瘦素表达及气道炎症的影响

目的探讨阿奇霉素对肥胖哮喘大鼠气道炎症肺组织内及气道平滑肌细胞(ASMC)内瘦素表达的变化及抗炎作用。方法将大鼠随机分为正常对照组、正常哮喘组、正常干预组和肥胖对照组、肥胖哮喘组、肥胖干预组,建立肥胖、哮喘模型以及体外培养大鼠ASMC,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定血清、支气管肺泡灌洗液(BALF)及细胞上清液中瘦素浓度,Westernblot法检测肺组织和ASMC内瘦素蛋白的表达。结果肥胖对照组、肥胖哮喘组和肥胖干预组BALF白细胞总数及中性粒细胞数,肺组织瘦素蛋白表达及血清、BALF和细胞上清液中瘦素浓度与体质量正常相应组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论肥胖哮喘大鼠气道炎症肺组织内瘦素表达增加,阿奇霉素能抑制气道炎症并部分降低哮喘大鼠瘦素的表达。     

ICAM-1在慢性阻塞性肺疾病大鼠气道炎症中的作用

目的 :制备慢性阻塞性肺疾病 (COPD)大鼠模型 ,探讨细胞间粘附分子 - 1(ICAM - 1)在COPD气道炎症中的作用。方法 :采用两次气管内注入脂多糖 (LPS)和反复烟熏的方法制作COPD大鼠模型 (B组 ) ;采用免疫组化法检测ICAM - 1在COPD大鼠支气管肺组织中的表达。结果 :大鼠模型的病理及病理生理学改变基本符合人类COPD的特点 ;模型组支气管上皮细胞、肺泡上皮细胞及支气管肺组织微小血管内皮细胞ICAM - 1表达强度显著高于对照组 (A组 ) (P <0 .0 1) ,且与支气管肺泡灌洗夜 (BALF)中白细胞总数及中性粒细胞数成显著正相关 (分别为 :r=0 .76 ,P <0 .0 1;r=0 .6 5 ,P <0 .0 5 )。结论 :ICAM - 1可能参与了COPD气道炎症过程。     

核因子-κB在慢性阻塞性肺疾病大鼠肺内的表达及泼尼松对其的影响

目的 探讨核因子κB(NF-κB)在慢性阻塞性肺疾病(COPD)发病机制中的作用及糖皮质激素在COPD中的治疗价值.方法 Wistar大鼠24只随机分为3组:对照组、COPD组和激素组,每组8只大鼠.采用单纯熏香烟法建立COPD模型,激素组于熏香烟前予泼尼松隔日灌胃.支气管肺泡灌洗(BAL),测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数、中性粒细胞绝对计数和百分比,并对肺组织切片行HE染色观察形态学改变,采用图像分析系统定量测定肺平均内衬间隔(MLI)、平均肺泡数(MAN)和肺泡腔面积与总面积比(PAA).对大鼠肺组织切片采用免疫组织化学法观察3组大鼠肺组织NF-κB表达的变化.结果 COPD组MLI和PAA均较对照组增高,差异有统计学意义(P＜0.01),泼尼松干预后下降(与COPD组比较,P＜0.01或0.05),而COPD组MAN低于对照组,治疗后增高,差异有统计学意义(P＜0.01或0.05).与对照组比较,COPD组BALF中白细胞总数[(1.64±0.12)×108/L比(5.76±0.29)×108/L]、中性粒细胞绝对计数[(0.099±0.065)×108/L比(1.26±0.25)×108/L]均增高,差异有统计学意义(P＜0.01).泼尼松干预后上述指标均下降(P＜0.01).COPD组细支气管上皮细胞NF-κB核染色阳性细胞百分比为(29.02±1.25)%,与正常组[(12.17±1.13)%]比较,差异有统计学意义(P＜0.01);激素组为(19.23±1.18)%,与COPD组比较,差异亦有统计学意义(P＜0.01).结论 NF-κB与COPD的气道炎症密切相关,泼尼松治疗可以通过调节NF-κB的表达,抑制粒细胞趋化和脱颗粒,增加中性粒细胞弹性蛋白酶的抑制活性,从而减轻气道炎症及其对气道的损害,延缓COPD的进展.     

慢性阴塞性肺疾病大鼠模型体内TNFα及P65含量变化及意义

目的:探讨下NFα及P65在慢性阻塞性肺病(COPD)大鼠肺组织中的含量变化及其在发病中的作用.方法:香烟熏吸复合脂多糖(LPS)气道内滴注法复制COPD模型.将20只雄性清洁级Sprague-Dawley大鼠随机分为对照组和COPD模型组,每组各10只.肺组织切片行苏木精-伊红染色,测定两组支气管肺泡灌沈液(BALF)中TNFα含量,免疫组化法测定两组大鼠气道上皮中P65表达,运用Image-Proplus6.0软件行半定量分析.结果:模型组大鼠BALF中TNFα及肺组织中P65表达较对照组明显升高(P<0.05).结论;TNFα及P65参与了大鼠COPD的发病过程且在炎症反应中起重要作用.     

酪氨酸激酶受体RON在慢性阻塞性肺疾病大鼠肺内表达的研究

目的:探讨酪氨酸激酶受体RON在慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)大鼠气道炎症中的作用。方法:单纯熏香烟法建立COPD大鼠模型;支气管肺泡灌洗计数支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数与肺泡巨噬细胞(alveolar macrophage,AM)数,培养正常和COPD大鼠AM,采用逆转录-聚合酶链式反应法检测大鼠肺组织中酪氨酸激酶受体RON mRNA的表达情况,免疫组化法观察大鼠气道和离体培养的AM中RON蛋白的表达水平,图像分析系统测定肺平均内衬间隔(MLI)、平均肺泡数(MAN)和肺泡腔面积与总面积比(PAA)。结果:COPD组MLI、PAA较正常对照组明显增高[MLI:(111.451±49.334)×10-6m vs(44.803±10.624)×10-6m;PAA:(79.653±7.594)%vs(48.352±13.063)%],而MAN则明显低于正常对照组[(81.621±20.394)×106/m2vs(170.098±42.398)×106/m2],差异均有统计学意义(P<0.01)。COPD组BALF中细胞总数和AM计数均明显高于正常对照组[细胞总数:(6.029±0.420)×108/L vs(1.463±0.0692)×108/L;AM数:(5.752±0.571)×108/L vs(1.387±0.105)×108/L,P<0.01)]。COPD组大鼠肺组织RON mRNA表达较正常对照组明显上调[(0.892±0.088)vs(0.353±0.080),P<0.01],COPD组大鼠气道上皮及AM中RON蛋白水平也较正常对照组显著增加[气道RON蛋白:(0.171±0.027)vs(0.073±0.009);AM RON蛋白:(0.310±0.101)vs(0.110±0.006),P<0.01]。结论:RON与COPD气道炎症调节密切相关。     

泼尼松对MCP-1及IL-8在COPD大鼠气道表达的影响

目的研究单核细胞趋化蛋白-1（MCP—1）及白细胞介素8（IL-8）在慢性阻塞性肺疾病（COPD）大鼠气道的表达及泼尼松对其的影响。方法Wistar大鼠随机分为3组：正常对照组（A组）、COPD模型组（B组）和泼尼松干预组（C组）。采用单纯熏香烟法建立COPD模型,泼尼松隔日灌胃,计数支气管肺泡灌洗液（BALF）中细胞数,以酶联免疫吸附法（ELISA）测定BALF和血清中的MCP-1及IL_8浓度。肺组织切片观察形态学改变,采用图像分析系统分析肺气肿程度。结果B组气管及支气管的慢性炎症改变及肺气肿改变较C组明显。B组BALF中MCP-1、IL-8浓度、细胞计数及血清中IL-8浓度均高于A组,但血清MCP-1的升高无统计学差异。与B组相比,C组BALF中MCP—1、IL-8浓度及细胞计数均下降,但血清中MCP-1及IL_8的浓度下降无统计学意义。B组BALF中MCP-1浓度与肺泡巨噬细胞（AM）数日及BALF中IL_8与中性粒细胞数目呈正相关（r=0．861,P〈O．01;r=0.735,P〈O．05）,但血清中MCP-1、IL-8浓度与BALF中的细胞数目均无相关性。结论MCP-1和IL-8与COPD的气道炎症密切相关。泼尼松早期干预可通过对MCP-1、IL-8及AM、中性粒细胞的抑制而减轻COPD气道炎症。