钙化性主动脉瓣疾病瓣膜间质细胞的生物学特征分析

目的初步分析钙化性主动脉瓣疾病(calcific aortic valve disease,CAVD)瓣膜间质细胞的生物学特征,为后续研究奠定基础。方法采用组织块接种和免疫磁珠法分选正常主动脉瓣和CAVD瓣膜间质细胞,观察其形态学和行为学特征。通过免疫细胞化学染色和流式细胞术分析CAVD瓣膜间质细胞免疫表型的改变。结果与正常主动脉瓣瓣膜间质细胞相比,CAVD瓣膜间质细胞呈肌纤维母细胞和成骨细胞形态,当细胞达到一定密度后细胞自发性收缩、聚集样生长并形成钙化结节。体外培养的CAVD瓣膜间质细胞表达肌纤维母细胞标志物α-SMA和成骨细胞标志物碱性磷酸酶(ALP)。结论 CAVD瓣膜间质细胞生物学特征的改变可能是导致主动脉瓣增厚、钙化和交界融合的重要因素。     

退行性主动脉瓣疾病的分子学机制

近50年来随着人口老龄化程度的不断加深以及人们生活习惯的改变,退行性主动脉瓣疾病的发病率在全球范围内不断增加。该病是最常见的心脏瓣膜病,晚期主要表现为瓣膜钙化,其病理过程与动脉粥样硬化性血管疾病类似。到目前为止,引起主动脉瓣退行性变的分子机制还不是很清楚,但相关研究进展迅速。例如3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶抑制剂、血管紧张素转换酶、基质金属蛋白酶被众多学者认为是此类疾病的调节剂。参与瓣膜胚胎起源的信号因子Wnt,TGF-β1,BMP和Notch等也被认为参与了主动脉瓣的退行性改变。血管形成在该疾病中发挥重要作用。本文对退行性主动脉瓣疾病可能的分子致病机制进行综述,以期为进一步明确病因提供参考。     

老年男性心脏瓣膜钙化相关因素分析

目的探讨老年男性(≥60岁)心脏瓣膜钙化发生的相关因素.方法收集近5年来96例经超声心动图诊断的主动脉瓣、二尖瓣、瓣膜或瓣环钙化者为钙化组,无心脏瓣膜钙化的105例为对照组.比较两组老年男性主要临床特征及并发症.结果瓣膜钙化组体质指数、高血压及冠心病与对照组比较有非常显著性差异(P＜0.01);糖尿病、高脂血症有显著性差异(P＜0.05).结论高血压、冠心病及体质指数可能增加老年男性心脏瓣膜钙化的发生,而糖尿病、高脂血症也参与其中.     

老年钙化性主动脉瓣狭窄：从病理到经导管主动脉瓣置入术

1定义及其流行病学
　　“老年钙化性主动脉瓣狭窄”( senile calcific aortic stenosis),又称“主动脉瓣退行性变”( degenerative aortic stenosis)、“老年性主动脉瓣狭窄”( senile aortic stenosis)、“钙化性主动脉瓣狭窄”( calcific aortic steno-sis),是与年龄相关、以主动脉瓣及其周围组织纤维化、硬化、钙盐沉积为主要改变,主动脉瓣狭窄为主要功能损害的疾病。瓣叶钙化是老年性瓣膜疾病的突出改变。虽然瓣叶钙化亦见于风湿性和先天性二瓣化畸形的主动脉瓣,但习惯上“钙化性主动脉瓣狭窄”一词等同于“老年性主动脉瓣狭窄”一词[1]。国内也有用“主动脉瓣老年钙化病”一词命名该疾病,它强调了其功能损害不仅限于瓣膜狭窄,因部分病例合并轻度主动脉瓣关闭不全[2]。它与二尖瓣环钙化( mitral annu-lar calcification)同属退行性的老年性疾病,可统称为“老年钙化性瓣膜病”[3]。     

退行性主动脉瓣 ATP 结合盒转运蛋白 A1表达的特点

目的：探讨ATP结合盒转运蛋白A1（ ABCA1）在退行性主动脉瓣组织中表达的特点。方法收集因退行性主动脉瓣病变行手术切除的主动脉瓣标本30例及因夹层动脉瘤行Bentall手术切除的正常主动脉瓣标本7例。经HE和免疫组化染色,观察退行性主动脉瓣的病理组织学改变,通过其病理特征的改变了解退行性主动脉瓣ABCA1表达的特点。结果退行性主动脉瓣瓣膜增厚,钙化灶形成;钙化灶周围有炎细胞浸润、新生血管、泡沫细胞以及脂肪细胞生成,ABCA1在正常主动脉瓣膜几乎阴性表达,而在病变瓣膜中则显示强阳性表达。结论与正常主动脉瓣相比,在退行性主动脉瓣出现炎症细胞浸润、泡沫细胞和脂肪细胞生成、新生血管和钙化形成,ABCA1表达明显上调。     

老年钙化性心瓣膜病临床观察

目的：回顾性分析老年钙化性心瓣膜病患者的临床特点。方法：分析90例55岁以上老年钙化性心瓣膜病患者超声心动图及临床表现资料。结果：该病主要累及主动脉瓣及二尖瓣,其中90%患者出现主动脉瓣环或瓣叶受累,其可导致瓣膜区返流、狭窄,引发心脏功能受损。结论：老年钙化性心瓣膜病临床缺乏特异性,超声心动图具有诊断价值。     

利用导管损伤制备钙化性主动脉瓣疾病小鼠模型的最优时间选择

目的 探讨利用导管损伤制备钙化性主动脉瓣疾病小鼠模型的最优时间。方法 通过向8周龄小鼠右颈总动脉插入导管,在超声引导下将导管送至主动脉瓣口处损伤主动脉瓣膜,对导管损伤主动脉瓣膜后不同时间段的C57BL6小鼠主动脉瓣膜进行比较,将小鼠分为对照组、造模后4周、造模后8周与造模后16周组,从适应性喂养至造模结束取材均给予普通饲料饮食。使用超声检测小鼠心脏短轴缩短率、主动脉瓣膜峰值流速及主动脉瓣口面积,使用苏木素-伊红染色观察小鼠主动脉瓣膜厚度变化及瓣膜组织结构变化,利用茜素红染色检测小鼠主动脉瓣膜钙盐沉积情况,使用免疫荧光方法检测瓣膜成骨相关蛋白碱性磷酸酶表达。结果 小鼠从造模8周后开始出现心脏短轴缩短率明显下降。导管损伤4周、8周、16周后小鼠主动脉瓣膜明显增厚（P=0.002）,4周、8周和16周比较无统计学差异;导管损伤4周、8周、16周后钙盐沉积明显增多（P<0.0001）,4周、8周和16周比较无统计学差异;4周、8周、16周后成骨相关蛋白ALP指标表达量明显升高（P=0.0016）。导管损伤4周、8周和16周ALP表达量相比无统计学差异。结论 在保证小鼠生存率的情况下,导管损伤主动脉瓣膜4周后的小鼠模型即可模拟钙化性主动脉瓣膜疾病病理生理改变。     

二叶式主动脉瓣中miRNA-195调控瓣膜钙化的机制研究

目的：探究二叶式主动脉瓣中miRNA-195调控瓣膜钙化的可能机制。方法：收集35例接受主动脉瓣置换术患者狭窄的二叶式或三叶式主动脉瓣,通过PCR及Western blot分别检测miRNA-195的表达量、果蝇母源抗皮肤生长因子（drosophila mothers against decapentaplegic 7,SMAD7）的mRNA及蛋白表达量。双荧光素酶法预测miRNA-195的靶基因。在猪瓣膜间质细胞中分别沉默和过表达miRNA-195,检测SMAD7的mRNA表达水平并探究两者的相互关系。在人类瓣膜组织上通过免疫组化染色检测基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase,MMP）-2、MMP-9蛋白水平,通过天狼星红染色检测胶原蛋白水平,通过Von Kossa染色比较钙化程度差异,进而研究钙化相关的功能改变。结果：与狭窄的三叶式主动脉瓣相比,狭窄的二叶式主动脉瓣中miRNA-195表达降低,SMAD7的mRNA和蛋白水平升高。双荧光素酶实验提示SMAD7是miRNA-195的直接靶标。在猪瓣膜间质细胞中沉默miRNA-195引起SMAD7 mRNA水平升高,过表达miRNA-195引起SMAD7 mRNA水平降低。狭窄钙化的二叶式主动脉瓣组织中MMP-2、MMP-9及胶原的表达较狭窄钙化的三叶式主动脉瓣升高。结论：在二叶式主动脉瓣中,下调的miRNA-195促进了SMAD7表达,进而促进细胞外基质的纤维化并最终促进其钙化。     

AQ技术观察老年人瓣膜钙化程度变化及对左室射血分数的影响

目的利用AQ技术观察老年人瓣膜钙化程度对左室射血分数的影响。方法对265例60～83岁老年人行超声心动图及AQ技术检查。常规切面观察瓣膜钙化程度,选择心尖四腔心启动AQ功能,自动检测左室射血分数（EF）和左室舒张末期容积（EDV）等心功能指标。结果瓣膜钙化程度分轻、中、重3种程度。轻度主动脉瓣和二尖瓣钙化引起瓣膜关闭不全,分别占98%和100%;中度钙化导致主动脉瓣轻中度关闭不全,占91%,二尖瓣关不闭全占76%,狭窄占24%;重度钙化导致主动脉瓣狭窄及关闭不全各占50%,二尖瓣关闭不全占60%,狭窄占40%。轻、中度瓣膜钙化时EF和EDV略有改变,但仍在正常范围内;重度瓣膜钙化,EF下降,EDV增大。结论AQ技术能够直接、准确地观察老年人瓣膜钙化程度对左室射血分数的影响。     

难治性继发性甲状旁腺功能亢进患者腹主动脉钙化与心脏瓣膜钙化相关性研究

目的 总结难治性继发性甲状旁腺功能亢进症(secondary hyperparathyroidism,SHPT)患者腹主动脉钙化与心脏瓣膜钙化情况,分析其相关性.方法 选择50例难治性SHPT患者,分别行腹部侧位X线和心脏彩超检测腹主动脉钙化和心脏瓣膜钙化情况,并分析其相关性.结果 心脏瓣膜钙化分级越高者,腹主动脉钙化积分(abdominal aorta calcification score,AACS)相应越高.二尖瓣和主动脉瓣均钙化组AACS较单纯二尖瓣或主动脉瓣钙化组高,无钙化组AACS相对最低.AACS≤5分组与AACS＞5分组二尖瓣钙化和主动脉瓣钙化情况差异有统计学意义(P值分别为0.007、0.001).结论 难治性SHPT患者腹主动脉钙化及心脏瓣膜钙化发生率高,且腹主动脉钙化与心脏瓣膜钙化有明显相关.     

Pathogenetic mechanism of senile calcific aortic stenosis: the role of apoptosis

ｅｎｉｌｅｃａｌｃｉｆｉｃａｏｒｔｉｃｖａｌｖｅｉｓｔｈｅｃｏｍｍｏｎｅｓｔｖａｌｖｅｄｉｓｏｒｄｅｒｅｎｃｏｕｎｔｅｒｅｄｉｎｔｈｅｅｌｄｅｒｌｙｐａｔｉｅｎｔｓ．１８Ｎｏｗａｄａｙｓ,ｃａｌｃｉｆｉｃａｏｒｔｉｃｓｔｅｎｏｓｉｓｒｅｐｒｅｓｅ...     

钙化性主动脉瓣疾病发病机制及临床诊治研究进展

随着人口的老龄化和风湿热发病率的降低,钙化性主动脉瓣疾病(calcific aortic valve disease,CAVD)的发病率在我国呈逐年上升的趋势,已成为老年人最常见的心脏瓣膜病.CAVD以往被视为是一种与瓣膜退行性变、钙盐沉积相关的被动过程,但最新研究发现CAVD的发生实际是一个涉及内皮损伤、脂质浸润、慢性炎症、基质重塑、细胞分化、进展性钙化及新生血管形成等复杂变化的主动过程,一些基因的变异在其发生发展中也扮演重要角色.CAVD的临床诊治措施目前也取得了一系列进展,包括一些延缓或阻断CAVD进展干预靶点的发现以及经导管主动脉瓣置换术(transcatheter aortic valve implantation,TAVI)的临床应用,都为防治CAVD提供了新思路.本文主要就CAVD发病机制的最新研究进展进行综述,并展望了CAVD未来的诊治方向.     

老年人退行性心脏瓣膜病临床观察

对186例病人常规进行心脏超声检查,确诊老年退行性心脏瓣膜病(DCVD)病人46例,检出率为24.7%,50岁以上、60岁以上和70岁以上检出率分别为28.6%,43.0%和60.5%,随着年龄增加,检出率亦增加,统计学处理,P<0.005,瓣膜钙化主动脉瓣多于二尖瓣(P<0.005),亦有联合瓣膜病变。受累瓣膜近半数发生启闭异常,多为主动脉瓣关闭不全。超声检查可显示瓣膜钙化的特征性改变。并对DCVD的发病情况、病理特点、临床表现及诊断进行初步探讨。     

人脐静脉内皮细胞用于构建组织工程心脏瓣膜的实验研究

目的：以人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)为种子细胞，体外构建组织工程心脏瓣膜(TEHV)，并对其分泌纤溶物质——组织型纤溶酶原激活物(t-PA)及其抑制物(PAI-1)的作用进行观察。方法：获取并扩增HUVECs，种植在猪脱细胞主动脉瓣叶上，体外静态构建TEHV。观察内皮细胞的形态学变化和生长状况。收集瓣膜培养液，采用发色底物法检测瓣膜内皮细胞分泌的t-PA和PAI-1活性。结果：以猪脱细胞主动脉瓣叶作支架，HUVECs做种子细胞，体外成功构建TEHV，种植的HUVECs在瓣膜表面长成一层连续的细胞层，生长状态良好。瓣膜表面的内皮细胞能够分泌纤溶物质t-PA和PAI-1。结论：HUVECs种植在猪脱细胞瓣膜支架上可以构建TEHV，且瓣膜内皮细胞能够分泌t-PA和PAI-1。     

老年钙化性主动脉瓣狭窄10例

对10例老年钙化性主动脉瓣狭窄进行了分析。指出本病早期可无症状,晚期以心衰、心律失常为主。诊断依据X线和超声检查,超声心动图是检出主动脉瓣钙化和狭窄的一种敏感可靠的方法,其特征为主动脉瓣钙化、增厚,瓣膜活动受限,瓣膜口面积减小。当主动脉瓣口面积小于0.75cm~2时,应考虑手术治疗。     

应用骨髓干细胞和自制胶原-壳聚糖构建组织工程心瓣膜

目的探讨应用骨髓基质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)诱导分化的内皮细胞为种子细胞,以胶原-壳聚糖复合物为支架材料,运用组织工程学的原理和方法体外构建组织工程心脏瓣膜(tissue engineering heart valve,TEHV)的可行性。方法兔主动脉壁体外分离、培养、传代平滑肌细胞、成纤维细胞,将培养的成纤维细胞、平滑肌细胞与兔骨髓基质干细胞诱导分化的内皮细胞按顺序种植在预湿处理的胶原-壳聚糖复合支架上,通过组织学及倒置显微镜、扫描电镜观察内皮细胞、成纤维细胞、平滑肌细胞在支架上生长、增殖和基质分泌情况。结果 HE染色示内皮细胞能够在胶原-壳聚糖复合支架黏附、伸展、增殖,在TEHV表面长成连续的细胞层;扫描电子显微镜示TEHV表面光滑,细胞生长良好,细胞层完整,且瓣膜表面的内皮细胞具有合成和分泌前列环素(PGI2)的功能。结论以兔主动脉壁体外分离、培养、传代的平滑肌细胞、成纤维细胞和BMSCs诱导分化的内皮细胞为种子细胞,依次种植在胶原-壳聚糖复合支架上可以构建TEHV,且内皮细胞能够分泌PGI2。     

退行性心脏瓣膜病的临床观察

目的　了解退行性心脏瓣膜病在国人中的患病情况及其临床意义。方法　回顾分析 14 2 5例 50岁以上人群的超声心动图资料。结果　检出退行性心脏瓣膜病 114例 (8.0 % ) ,且随年龄增长而增加 ,主动脉瓣受累率高 (92 .1% ) ,临床中常合并冠心病 (76.0 % )。高脂血症 (3 6% )及高血压病 (2 0 % )。结论　退行性心脏瓣膜病是引起老年心衰和心律失常的重要因素。