大肠癌肝转移灶及其周围正常肝组织中mmp2表达的比较

目的:探讨mmp2基因在大肠癌肝脏转移中的意义?方法:收集手术切除21例大肠癌合并肝脏转移患者的原发病灶?癌旁正常黏膜组织?肝转移病灶及其周边正常肝组织的新鲜组织标本,用实时定量rt－pcr法测定各标本的mmp2 mrna表达,并用western blot方法检测其蛋白表达?结果:在肝转移灶?肝转移灶周边正常肝组织?大肠癌原发灶和正常大肠黏膜之间,全部病例的mmp2 mrna表达均有明显差异,但以肝转移灶表达最高,正常大肠粘膜表达最低?其中18例在正常大肠黏膜中的mmp2蛋白表达低于肝转移灶?肝转移灶周边正常肝组织和原发灶?而所有病例原发灶与肝转移灶中的mmp2蛋白表达无差异,并且这二者的mmp2蛋白表达均高于肝转移灶周边正常肝组织?结论:mmp2在肝转移灶和原发灶中表达增强,有利于肿瘤细胞对基质的降解及其迁移?Mmp2基因上调使得肝转移病灶中mmp2 mrna的表达高于大肠癌原发病灶,可能是肝转移的分子机制之一?而肝转移灶周边正常肝组织中mmp2表达增强,可能与肝脏再转移有关?     

大肠癌肝转移相关的间质差异表达基因的筛选

目的联合应用激光捕获显微切割和基因芯片技术,构建伴有肝转移的大肠癌原发灶间质组织和不伴肝转移的大肠癌间质组织基因表达谱,从间质中筛选与大肠癌肝转移相关的基因。方法分别对上海市第六人民医院于2008年7月至2010年7月收集的4例伴有肝转移的大肠癌原发灶组织和4例不伴肝转移的大肠癌组织行激光捕获显微切割,获取各自的间质组织。提取微量RNA,结合安捷伦人全基因组表达谱芯片(4×44 K 2.0)技术,构建8例间质组织标本全基因组表达谱,筛选出大肠癌肝转移间质相关基因;选择显著上调及下调的前2位基因行实时定量PCR验证。结果在4对新鲜标本的芯片杂交检测中共筛选出1948条基因发生差异表达,其中上调的有1266条,下调的有682条。对骨膜蛋白(Periostin)/胰岛素样生长因子2(IGF-2)/过氧化物酶体增殖活化受体γ共激活因子(PGC-1)/趋化因子配体21(CCL21)这4个基因的实时定量PCR检测结果与基因芯片筛选的检测结果基本一致。结论联合应用激光捕获显微切割和基因芯片技术成功筛选出大肠癌肝转移间质相关基因,为寻找大肠癌肝转移临床早期诊断的分子标志物和靶向治疗提供坚实的理论基础。     

基因芯片技术筛选结直肠癌腹膜转移相关基因

目的筛选和鉴定结直肠癌腹膜种植转移相关基因。方法收集手术切除3例伴有腹膜种植转移的结直肠腺癌病人原发病灶和正常黏膜的新鲜组织标本,提取总RNA,经逆转录合成cDNA后经体外扩增合成aRNA,Cy3荧光分子标记后和人类全基因组表达谱芯片杂交,采用经验贝叶斯方法(P≤0.05)筛选出差异表达基因,并用RT-PCR实验对部分差异表达基因进行验证。结果满足(P≤0.05)的基因共有105个。其中和正常组织相比,在肿瘤组织表达上调的基因有42个,表达下调的基因有63个。通过生物信息学分析,在表达上调基因中选择3条(S100P;PRDX1;SLPI)基因进RT-PCR行验证,结果与芯片结果完全相符。结论基因芯片技术通过筛选结直肠癌腹膜转移过程中发挥关键作用的基因,为寻找结直肠癌腹膜转移的分子标志物提供依据和参考。     

基因芯片技术筛选结直肠癌腹膜转移相关基因

摘要：目的筛选和鉴定结直肠癌腹膜种植转移相关基因。方法收集手术切除3例伴有腹膜种植转移的结直肠腺癌病人原发病灶
和正常黏膜的新鲜组织标本,提取总RNA,经逆转录合成cDNA后经体外扩增合成aRNA,Cy3荧光分子标记后和人类全基因组
表达谱芯片杂交,采用经验贝叶斯方法（P≤0.05）筛选出差异表达基因,并用RT-PCR实验对部分差异表达基因进行验证。结果
满足（P≤0.05）的基因共有105个。其中和正常组织相比,在肿瘤组织表达上调的基因有42个,表达下调的基因有63个。通过生
物信息学分析,在表达上调基因中选择3条（S100P;PRDX1;SLPI）基因进RT-PCR行验证,结果与芯片结果完全相符。结论基
因芯片技术通过筛选结直肠癌腹膜转移过程中发挥关键作用的基因,为寻找结直肠癌腹膜转移的分子标志物提供依据和参考。
     

高密度Oligo基因芯片筛选人永生化成骨细胞恶性转化中印迹基因的研究

目的 探索骨肉瘤发病相关印迹基因,研究印迹基因表达水平对于骨肉瘤发病的重要意义.方法 建立人成骨细胞恶性转化模型,收集转化过程中4个不同时间点(40、55、70、90 d)细胞,以未处理第90天传代细胞为对照,提取总RNA,合成生物素标记的cDNA与博奥生物CAP-F0017芯片杂交.用实时荧光定量PCR对随机选取的2个基因在3组样本(对照,40 d,90 d)中的表达情况进行验证.结果 以表达差异≥2.0或≤0.5为限,共筛选出10个差异表达印迹基因;CD81、GRB10、NDN、MEST在转化过程中表达下调,H19、MKRN3、SLC22A1L、SLC22A3、TSSC3、CDKN1C在转化过程中表达上调,功能分类显示差异表达基因主要与细胞生长/维持和细胞信号转导相关,随机挑选2个差异表达基因的实时RT-PCR结果与芯片结果相符.结论 在人成骨细胞恶性转化过程中发现10个差异表达印迹基因,通过对10个差异表达基因的分析有助于揭示骨肉瘤发生过程中印迹基因的参与机制.     

Telomerase activity and homozygous deletions of the p16 gene in liver metastases of colorectal carcinoma

目的　研究人大肠癌肝转移肿瘤中端粒酶活性和p16基因异常及其相互关系 ,并探讨其临床意义。方法　采用TRAP银染方法和半定量多重PCR分别检测了 2 4例大肠癌肝转移肿瘤组织包括其中 5例原发大肠癌组织端粒酶活性及p16基因的纯合缺失情况 ,并结合临床病理参数 ,进行统计学分析。结果　本组 2 4例大肠癌肿转移肿瘤组织中检测到 19例端粒酶阳性 ,阳性率为 79 2 %。 5例原发大肠癌均检测到端粒酶活性 ,其中 3例在相应的肝转移组织中也检测到端粒酶活性。端粒酶活性与转移瘤大小、肝内转移灶数目、HBsAg是否伴有肝纤维化无关。在 2 4例转移瘤组织中有 9例标本中检测到p16基因纯合缺失 ,缺失率为37 5 %。 5例原发大肠癌有 2例检测p16基因的纯合性缺失 ,其中 1例患者在原发肿瘤和转移瘤均检测到p16基因的纯合性缺失。p16基因的纯合缺失与端粒酶活性相关。结论　大肠癌肝转移肿瘤中端粒酶活性和p16基因异常对阐明大肠癌转移的生物学行为可能有重要的意义。端粒酶的异常激活和p16基因异常在大肠癌肝转移过程中可能不是早期事件。     

C8orf4基因在大肠癌中的表达

目的：筛查大肠癌分化相关分子标志物。方法：应用美国Affymetrix HG-U133寡核苷酸芯片对不同分化程度大肠癌组织和正常大肠黏膜组织的基因表达谱进行检测。采用肿瘤样品分类法（T-class）对各样品进行基因分类。并应用实时荧光定量RT-PCR检测候选基因在不同分化程度大肠癌中的差异表达。结果：T-class分析获得分类精度100%的大肠癌分化差异表达基因＆ ESTs 8个。其中C8orf4基因（chromosome 8 open reading frame 4）经非多元统计分析，在大肠癌组较正常黏膜表达下调。实时荧光定量RT-PCR检测该基因在不同分化程度大肠癌组间表达，其标准化表达值与基因芯片该基因探针组信号值相关性分析，呈线性相关。两种方法检测C8orf4基因在不同分化程度大肠癌组表达趋势相符。结论：C8orf4基因与大肠癌分化密切相关，可作为大肠癌分化的候选分子标志物。     

基质金属蛋白酶组织抑制因子-1表达与Dukes A和B期大肠癌预后的关系

目的研究DukesA和B期大肠癌标本中基质金属蛋白酶组织抑制因子-1（TIMP-1）基因表达与预后的关系。方法62例DukesA和B期大肠癌手术切除标本，采用RT-PCR法测定肿瘤组织中TIMP-1 mRNA表达，所有患者接受5年以上随访。结果在随访期内出现局部复发或远处转移的患者与无复发或转移的患者相比，其TIMP-1基因表达存在显著性差异。结论通过测定肿瘤标本中TIMP-1基因表达可能预测DukesA和B期大肠癌局部复发或远处转移的危险性。     

大肠癌及其肝转移组织骨桥蛋白mRNA的表达

目的　检测骨桥蛋白mRNA在大肠癌及其肝转移灶中的表达差异和蛋白定位 ,并探讨其在大肠癌肝转移发生发展中的意义。方法　提取 4 4例大肠癌及癌旁正常组织及 2 0例大肠癌肝转移组织RNA ,采用实时荧光定量PCR(FQ PCR)法检测其中骨桥蛋白mRNA的表达。用免疫组织化学法行骨桥蛋白的组织学检测。根据FQ PCR以CT 值为标准 ,所得数值与实际表达量对数值呈反比的原理 ,以骨桥蛋白CT GAPDHCT 的比值来评价不同组织骨桥蛋白的表达。结果　骨桥蛋白mRNA表达在大肠癌肝转移灶中表达最高 (1 0 7± 0 10 ) ,在原发大肠癌组织中次之 (1 15± 0 14 ) ,而在癌旁正常大肠组织中表达最低 (1 32± 0 18) ;统计分析差异有显著意义 (t=5 81,P =0 0 0 0及t=2 .12 ,P =0 .0 38)。免疫组织化学结果表明 ,骨桥蛋白定位于大肠癌细胞及肝转移灶旁正常肝细胞的细胞质。结论　骨桥蛋白mRNA在大肠癌中的表达高于正常组织 ,而在大肠癌肝转移组织中表达更高 ,骨桥蛋白定位于大肠癌细胞质。这提示骨桥蛋白与大肠癌的浸润转移有关 ,可作为大肠癌肝转移的预测指标之一。     

Neuritin基因在肺癌及正常肺组织中表达的检测

目的:了解neuritin基因在肺癌组织中的表达情况,探讨neuritin基因表达与肺癌发生发展的相关性.方法:收集肺癌、正常肺石蜡及新鲜组织标本,利用免疫组化检测组织中neuritin的表达情况.利用RT-PCR方法检测新鲜肺癌及正常肺组织中neuritin mRNA表达.结果:肺癌组织中neuritin的表达高于正常肺组织,差异有统计学意义(p＜0.05).结论:neuritin在肺癌组织和正常肺组织表达存在显著差异,提示neuritin表达可能与该肿瘤的发生发展相关.     

APPLICATION OF LORNOXICAM TO PATIENT-CONTROLLED ANALGESIA IN PATIENTS UNDERGOING ABDOMINAL SURGERIES

FOR anesthesiologis s ,treatingpostoperativepainhas alwaysbeen a problem.Althoughopioidshave been provedtobe effective,theirsideeffectscouldnotbeignored.With thedevelopmentofscienceand pharmacology,many drugs with aspectsof satisfactoryanalgesicefficacyand couldbe welltoleratedby patientshave been developed.And lornoxicamisone of them, which isa non-steroidalanti-inflammatorydrug (NSAID ), with analgesic, anti-infl-ammatory,andantipyreticproperties.Itseliminationhalf-time(3 to 5 hours) isle…     

Dr.Zhang Ren''''s Experience in the Acupuncture Treatment of Different Diseases with the Same Therapeutic Principle

Dr.Zhang Ren,the chief physician,is the chairman of Shanghai Acupuncture and Moxibustion Association.Having been engaged in medicine for about 40 years,he is experienced in treating various intractable diseases.In his long years of clinical practice,he advocates taking the TCM differentiation as the basis to seek for the acupuncture method for treatment of modern intractable diseases.The author of this essay had the fortune to follow Dr.Zhang in study.The following is a summary of Dr.Zhang's experience in the acupuncture treatment for different intractable diseases with the same therapeutic principle.     

Luo Lingjie''''s Experience in Treating Chronic Nephropathy

In treating chronic nephropathy,Luo Lingjie,a chief physician,pays attention to regulating the balance between yin and yang,treating infection if present,and removing pathogenic factors.He prescribes gentle drugs and uses carefully strongly warming-tonifying ones,emphasizes the importance of persuading the patient to persist in treatment with medication and nurse one's health for recuperation,and is good at combined use of TCM and western medicine therapy and brings the merits of various therapies into full play,with obvious theraoeutic effects.     

Acupuncture Combined with Spinal Tui Na for Treatment of Primary Dysmenorrhea in 30 Cases

Objective: To observe the therapeutic effects in acupunture treatment of primary dysmenorrhea combined with spinal Tui Na, and study its mechanism. Methods: Thirty cases of the treatment group were treated by acupuncture combined with spinal Tui Na, and thirty cases in the control group were treated by routine acupuncture. Results: The total effective rate was 93.3% in the treatment group, and 73.3% in the control group, with a significant difference between the two groups (P<0.05). Conclusions: Acupuncture combined with spinal Tui Na has good prospects for treatment of primary dysmenorrhea.     

猪肺磷脂注射液联合经鼻持续气道正压通气对呼吸衰竭早产儿的临床疗效及肌酸激酶同工酶活性的影响

目的 探讨猪肺磷脂注射液联合经鼻持续气道正压通气(NCPAP)对呼吸衰竭早产儿的临床疗效及肌酸激酶同工酶活性(CK-MB)的影响.方法 选取呼吸衰竭早产儿80例,分为观察组和对照组各40例.对照组采用NCPAP给氧治疗,观察组给予NCPAP给氧联合猪肺磷脂气管内给药.观察两组患儿治疗前及治疗12h、24 h后PaO2、PaCO2、血氧饱和度(SaO2)、pH的变化情况,检测治疗前及治疗5d后血清CK-MB水平;评估两组患儿的临床治疗效果.结果 两组患儿PaO2、PaCO2、SaO2、pH比较,差异均有统计学意义(P＜0.05),其中观察组治疗后的PaO2、SaO2、pH均高于对照组,PaCO2则低于对照组.两组的PaO2、SaO2、pH均随观察时间延长而升高(P＜0.05),PaCO2均随观察时间的延长而降低(P＜0.05).观察组治疗有效率为87.5％,显著高于对照组的70.0％ (P ＜0.05).治疗5d后两组患儿血清CK-MB水平均较前降低(P＜0.05),且观察组明显低于对照组(P＜0.05).结论 猪肺磷脂注射液气管内给药联合NCPAP可以显著降低呼吸衰竭早产儿CK-MB的含量,提高治疗有效率,起到很好的呼吸循环支持作用.     

Survey and practice of reporting quality of randomized controlled clinical trials on traditional Chinese medicine

Evidence obtained from randomized controlled trials （RCTs） has been generally accepted as the gold standard in the evaluation of clinical effectiveness. Readers need to understand the trial design, implementation, results, analysis and interpretation, so as to fully Jnderstand the results of RCTs. Thus, the investigators of RCTs have to report these items in a complete, accurate and clear manner. Since 1998, we have conducted several evaluations on the reporting quality of RCTs published in Chinese journals on traditional Chinese medicine （TCM） and results have shown that there is an urgent need for higher quality RCTs on TCM.     

TCM Treatment of Ankylosing Spondylitis by Tonifying the Kidney and Strengthening the Governor Vessel

Ankylosing spondylitis is a chronic and progressive disorder with inflammation mainly involving the central axis joints. It mainly affects the cervical spine and the lumbosacral area, with the pathogenesis closely related to the kidney and the Governor Vessel (GV). TCM holds that the syndrome is deficiency in origin and excess in superficiality, which is due to insufficiency of the kidney, deficiency of GV, and blocking of the channels with the invasion of exogenous evil, leading to poor circulation of qi and blood and malnutrition of the bones, muscles and joints. The TCM method of tonifying the kidney and strengthening GV to regulate circulation of qi and blood and check the arthralgia pain should be adopted, with the Kidney-Tonifying and GV Strengthening Decoction (益肾强督汤) prescribed.     

IMPROVING P-gp EXPRESSION IN HUMAN MONONUCLEAR CELLS IN VITRO TRANSFECTED BY MULTIDRUG RESISTANCE-1 mRNA

CHEMOTHERAPY playsa greatrolein the treat- ment of malignanttumors,especiallyingynecolo- gicalones.But inanticancerchemotherapy,leuko-cytopeniaisfrequentlytheprimarydose-limitingsideeffect factor.Moreover,cancersarefrequentlychemoresistantbe-causeof overexpressionof P-glycoprotein(P-gp), which isencodedby multidrugresistancegene (MDR1 ) and detectableinup to50% ofhuman cancersand renderscellsresistancetoanticancerdrugs.The safetyand potentialtherapeuticbenefitof mdr1 gene transferredto h…