5-烯丙基-7-二氟亚甲基白杨素（C19H14O4F2）诱导人卵巢癌CoC1细胞凋亡

目的 观察5-烯丙基-7-二氟亚甲基白杨素（ADFMChR）诱导人卵巢癌（CoCl）细胞凋亡的作用。方法 以体外培养的人卵巢癌CoCl为研究对象。采用软琼脂克隆测定ADFMChR对细胞集落的影响；流式细胞术（FCM）检测ADFMChR诱导细胞凋亡率；凝胶电泳观察ADFMChR诱导基因DNA梯形条带。Westernblot分析ADFMChR对CoCl细胞PPARγ，NF-κB，Bcl-2，Bax蛋白表达的影响。结果软琼脂克隆显示ADFMChR呈剂量依赖性抑制细胞集落形成；FCM分析发现ADFMChR呈剂量依赖性诱导细胞凋亡；ADFMChR（30μmol／L）孵育CoCl细胞48h后，DNA琼脂糖凝胶电泳呈现典型梯形条带。Westernblot分析结果表明ADFMChR以剂量依赖方式上调CoCl细胞PPARγ和Bax蛋白表达，下调NF-κB和Bcl-2蛋白表达。结论 ADFMChR诱导人卵巢癌CoCl细胞凋亡与其活化PPARγ，抑制NF-κB表达和提高Bax／Bcl-2比值有关。     

5-烯丙基-7-二氟亚甲基白杨素(C19H14O4F2)诱导人卵巢癌CoCl细胞凋亡

目的 观察5-烯丙基-7-二氟亚甲基白杨素(ADFMChR)诱导人卵巢癌(CoCl)细胞凋亡的作用.方法 以体外培养的人卵巢癌CoCl为研究对象.采用软琼脂克隆测定ADFMChR对细胞集落的影响;流式细胞术(FCM)检测ADFMChR诱导细胞凋亡率;凝胶电泳观察ADFMChR诱导基因DNA梯形条带.Western blot分析ADFMChR对CoCl细胞PPARγ,NF-KB,Bcl-2,Bax蛋白表达的影响.结果 软琼脂克隆显示ADFMChR呈剂量依赖性抑制细胞集落形成;FCM分析发现ADFMChR呈剂量依赖性诱导细胞凋亡;ADFMChR(30μmol/L)孵育CoCl细胞48h后,DNA琼脂糖凝胶电泳呈现典型梯形条带.Western blot分析结果表明ADFMChR以剂量依赖方式上调CoCl细胞PPARγ和Bax蛋白表达,下调NF-кB和Bcl-2蛋白表达.结论 ADFMChR诱导人卵巢癌CoCl细胞凋亡与其活化PPARγ,抑制NF-кB表达和提高Bax/Bcl-2比值有关.     

ADFMCHR激活PPARγ抑制人肝癌SMMC-7721细胞生长

目的:研究5-烯丙基-7-二氟亚甲基白杨素(ADFMChR)激活过氧化物酶活化因子受体γ(PPARγ)抑制体外培养人肝癌SMMC-7721细胞增殖作用。方法:体外培养人肝癌SMMC-7721细胞。台盼蓝拒染法检测细胞生长;平皿克隆形成法检测细胞锚定依赖性生长;软琼脂克隆形成法检测细胞集落形成能力。结果:细胞计数结果显示,ADFMChR延长SMMC-7721细胞倍增时间,抑制SMMC-7721细胞生长,呈剂量依赖性。但是对预先用PPARγ阻断剂GW 9662孵育30分钟的SMMC-7721细胞,ADFMChR的生长抑制作用明显降低;平皿克隆、软琼脂克隆形成法结果显示,ADFMChR抑制SMMC-7721细胞的锚定依赖性生长能力和锚定非依赖性生长能力,而GW 9662可以降低ADFMChR对SMMC-7721细胞的增值抑制作用。结论:ADFMChR具有抑制人肝癌SMMC-7721细胞生长作用,其机制与激活PPARγ有关。     

5-烯丙基-7-二氟亚甲基白杨素诱导人肝癌细胞生长抑制和凋亡

目的:研究5-烯丙基-7-二氟亚甲基白杨素(ADFMChR)对人肝癌(SMMC-7721)细胞生长和凋亡的影响.方法:平皿克隆形成法测定细胞锚定依赖性生长能力;吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)染色荧光显微镜观察凋细胞亡形态,计数细胞凋亡;PI染色流式细胞术(FCM)分析细胞周期和凋亡率.结果:平皿克隆形成法显示:ADFMChR抑制人肝癌(SMMC-7721)细胞生长,且呈浓度依赖性.AO/EB染色荧光显微镜观察发现随着ADFMChR浓度的增加SMMC-7721细胞凋亡率依次增加.PI染色FCM结果表明ADFMChR以浓度依赖方式诱导SMMC-7721细胞凋亡,且使细胞周期阻滞于G1期.结论:ADFMChR具有诱导人肝癌SMMC-7721细胞凋亡的作用,其机制可能与细胞周期G1期阻滞相关.     

6,8-二-三氟甲基-7-乙酰氧基白杨素的抗肺癌作用

目的:研究6,8-二-三氟甲基-7-乙酰氧基白杨素(dFMAChR)的抗肺癌作用。方法:MTT比色法、平皿克隆形成法、PI染色流式细胞术(FCM)及DNA断片法检测dFMAChR体外抗肺癌作用;人肺癌(A549)裸鼠异种移植瘤模型治疗实验观察dFMAChR体内抗肺癌作用。Western Blot分析dFMAChR对人肺癌A549细胞pAkt、Caspase3蛋白表达及活性的影响。结果:dFMAChR抑制体外培养A549细胞生长,呈浓度依赖性;dFMAChR能有效诱导A549细胞凋亡;dFMAChR对人肺癌裸鼠异种移植瘤的生长具有抑制作用,呈剂量依赖性;dFMAChR处理的A549细胞pAkt蛋白表达下调,Caspase3蛋白表达上调,呈浓度依赖性。结论:dFMAChR具有抗肺癌作用,其机制可能与抑制pAkt信号传导,激活Caspase3有关。     

5-烯丙基-7-二氟亚甲基白杨素通过活化过氧化物酶体增殖因子激活受体γ诱导人卵巢癌CoC1细胞凋亡的研究

目的探讨5-烯丙基-7-二氟亚甲基白杨素（ADFMChR）通过活化过氧化物酶体增殖因子激活受体（PPARγ）诱导人卵巢癌细胞凋亡作用的分子机制。方法采用MTT法测定ADFMChR对卵巢癌（CoC1）细胞系细胞增殖抑制作用;碘化丙啶染色流式细胞术（FCM）检测ADFMChR诱导CoC1细胞凋亡程度;DNA琼脂糖凝胶电泳证实ADFMChR诱导CoC1细胞凋亡作用。Western印迹检测ADFMChR对CoC1细胞PPA脚,NF-κB,Bcl-2,Bax蛋白表达的影响。结果MTY法显示ADFMChR呈剂量依赖性抑制CoC1细胞增殖作用,IC50值为7．76μmol／L;FCM分析ADFMChR呈剂量依赖性诱导CoC1细胞凋亡,ADFMChR（10．0,30．0μmol／L）处理CoC1细胞48h,凋亡率分别为33．07％和73．70％,均高于相应浓度白杨素诱导凋亡率（21．70％、40．00％）;ADFMChR（30μmol／L）处理CoC1细胞48h的DNA琼脂糖凝胶电泳呈现典型梯形条带,加用PPARγ／阻断剂（GW9662）后条带消失;Western印迹分析ADFMChR以剂量依赖方式上调CoC1细胞PPA脚和Bax蛋白表达,下调NF-κB和Bcl-2蛋白表达。结论ADFMChR通过活化PPARκ抑制NF-κB和Bcl-2表达,上调Bax,诱导CoC1细胞凋亡。     

EVn-50抑制人宫颈癌Hela细胞增殖及诱导凋亡的研究

目的探讨EVn-50对体外培养的人宫颈癌Hela细胞增殖及凋亡的影响。方法体外培养人宫颈癌Hela细胞，台盼蓝拒染法检测EVn-50对人宫颈癌Hela细胞增殖的影响；平皿克隆形成法、软琼脂克隆形成法测定EV-n50对人宫颈癌Hela细胞锚定依赖性生长和锚定非依赖性生长作用的影响；AO／EB染色荧光显微镜观察EVn-50诱导Hela细胞凋亡的形态学改变；DNA凝胶电泳确证EVn-50诱导Hela细胞凋亡作用。结果EVn-50对体外培养人宫颈癌Hela细胞的增殖具有显著抑制作用，呈浓度依赖性。EVn-50可诱导Hela细胞凋亡，AO／EB染色可见典型凋亡小体；DNA凝胶电泳在EVn-50浓度100μg／mL作用48h出现典型“梯形”DNA条带。结论EVn-50具有抑制人宫颈癌Hela细胞增殖并诱导细胞凋亡作用。     

8-溴-7-甲氧基白杨素诱导人肺癌（A549）细胞凋亡及其机制的探讨

目的观察8-溴-7-甲氧基白杨素（BrMChR）诱导人肺癌（A549）细胞凋亡作用,并探讨其与P53基因超甲基化的关系。方法以体外培养的A549细胞为研究对象。PI染色流式细胞术（FCM）分析细胞凋亡率;凝胶电泳观察BrMChR诱导基因DNA梯形条带;甲基化特异性PCR检测A549细胞P53基因甲基化状态及BrMChR对P53基因甲基化的影响。结果 PI染色FCM分析显示0.3,3.0和30.0μmol/L的BrMChR作用于A549细胞48h后,其凋亡率分别为（2.8±0.60）%、（5.1±0.11）%、（19.8±1.74）%,其中30.0μmol/L的BrMChR组的凋亡率明显高于空白对照组（P〈0.01）;琼脂糖凝胶电泳呈现典型＂梯形＂DNA条带;甲基化特异性PCR显示A549细胞P53基因呈现超甲基化状态,BrMchR能逆转P53基因超甲基化。结论 BrMchR具有诱导A549细胞凋亡的作用,其作用机制可能与其逆转P53基因超甲基化作用有关。     

ADFMChR对人肺癌A549细胞移植瘤的抑制作用

目的:研究5-烯丙基-7-二氟亚甲基白杨素(ADFMChR)对人肺癌A549细胞移植瘤生长的抑制作用.方法:建立人肺癌A549裸鼠移植瘤模型,测定荷人肺癌裸鼠的移植瘤大小;HE染色,光学显微镜下观察移植值组织形态学特征.结果:ADFMChR对肺癌移植瘤生长具有显著抑制作用.HE染色镜下观察,ADFMChR处理的人肺癌裸鼠移植瘤组织内细胞退形性变,核固缩,核碎裂.结论:ADFMChR显著抑制人肺癌A549细胞裸鼠移植瘤的生长.呈剂量依赖性.     

5-烯丙基-7-二氟亚甲基白杨素抑制人卵巢癌裸鼠移植瘤生长及促凋亡作用

目的 观察5-烯丙基-7-二氟亚甲基白杨素(ADFMChR)对人卵巢癌CoC1裸鼠移植瘤生长的抑制及促凋亡作用.方法 建立人卵巢癌CoC1裸鼠皮下移植瘤模型,随机分成5组:生理盐水组、顺铂组(2mg/kg)、低剂量ADFMChR组(6 mg/kg)、中剂量ADFMChR组(18 mg/kg)和高剂量ADFMChR组(54mg/kg),每组4只.观察各组裸鼠移植瘤生长情况、裸鼠体重的变化;PI染色流式细胞术(FCM)测定移植瘤细胞凋亡率.结果 ADFMChR对移植瘤的生长有明显抑制作用,低剂量组、中剂量组和高剂量组的瘤重抑制率分别达62.76%、91.76%和77.55%.PI流式细胞术结果 显示ADFMChR诱导移植瘤细胞凋亡,呈剂量依赖性.结论 ADFMChR具有抑制人卵巢癌裸鼠移植瘤生长的作用并能诱导移植瘤细胞凋亡.     

A549细胞转染esp1基因后生物学行为的变化

目的:观察A549细胞转染esp1基因后细胞生物学行为的改变.方法:将IRE-EGFP-esp1质粒用FuGENE 6脂质体转染到肺腺癌细胞A549,经G418筛选获得转染阳性的细胞系(esp1-A549).采用DNA荧光染色流式细胞仪分析转染后细胞DNA含量、倍性及细胞周期,计算S期细胞比率(SPF)和DNA指数(DI);采用细胞表面磷脂酰丝氨酸检测法和闪烁计数法分别检测细胞凋亡和增殖情况,同时检测软琼脂集落形成能力.以未转染(A549)、转染空载体(neo-A549)的细胞作对照.结果:与其他2组比较,esp1-A549细胞的DI、SPF及细胞增殖率降低,细胞凋亡率升高.esp1-A549细胞软琼脂集落形成数为3.5±0.6,克隆形成率为12.5%,低于A549细胞的23.3±0.2(t=4.93,P=0.004)和46%.结论:esp1基因的上调表达对A549细胞部分恶性生物学表型具有一定的抑制作用.     

E1A抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖及其分子机制

Objective To explore the molecular mechanism of proliferation inhibition of human breast cancer cell MCF-7 regulated by E1A gene.Methods E1A gene was transfected into MCF-7 cells by liposome reagents. RT-PCR and Western blot were used to detect E1A mRNA and protein expression and HER-2 mRNA in MCF-7. The proliferation and colony formation of MCF-7 were measured by 3-(4,5-dinmethylthiahiazo-z-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay and soft agar formation assay. The apoptosis of MCF-7 cells regulated by E1A expression was examined by flow cytometry.Results E1A was not endogenously expressed in MCF-7. E1A expression in MCF-7 could significantly decrease HER-2 mRNA and protein expression. Flow cytometry indicated that the apoptosis of MCF-7 could be induced by E1A. Meanwhile, E1A gene could significantly inhibit MCF-7 proliferation and colony formation in soft agar.Conclusion E1A gene can decrease HER-2 expression and induce the apoptosis of human breast cancer cell MCF-7, and inhibit the proliferation and colony formation of MCF-7.     

蛞蝓有效提取物对人肺癌A549细胞增殖的影响

目的:筛选蛞蝓有效提取物,并观察蛞蝓有效提取物EL-3对人肺癌A549细胞增殖的抑制作用。方法:体外培养人肺癌A549细胞和中国仓鼠肺上皮CHL细胞;MTT比色法测定细胞活性;软琼脂集落形成法检测细胞锚定非依赖性生长能力。结果:以不同提取方式获得的6种蛞蝓提取物对人肺癌A549细胞增殖活性具有抑制作用,其中以EL-3抑制作用最强,其IC50值为9.4μg/mL,可作为蛞蝓有效提取物;EL-3选择性抑制A549细胞活性,其选择指数是43.6;EL-3能有效抑制A549细胞锚定非依赖性生长,呈浓度依赖性。结论:EL-3具有选择性抑制A549细胞增殖作用。     

小牛脾提取物注射液对人肺癌细胞增殖 及放射敏感性的影响

目的 探讨小牛脾提取物注射液（CSEI）对人肺癌细胞A549 增殖及放射敏感性的影响。 方法 分别采用不同浓度的CSEI 及不同放射剂量处理A549 细胞48 h 后,用MTT 法和平板克隆实验检测 细胞增殖抑制率、增敏比（SER）及细胞集落形成率;PI 单染和Annexin V-FITC/PI 双染法检测CSEI 和 放射线对细胞周期和凋亡的影响;彗星实验检测细胞核DNA双链损伤;Western blotting检测Bcl-2、Bax、MDR1 及Survivin 的表达。结果 经MTT 法检测,1.0 mg/ml 是CESI 的无毒最高剂量。1.0 mg/ml CESI 预处理后, 可增加不同剂量（2、4、6、8 及10 Gy）放射线对A549 细胞增殖的抑制作用（P <0.05）,SER 为（1.42±0.06）。 克隆形成实验显示,放射线（5 Gy）+CSEI（1.0 mg/ml）组集落形成能力最弱（P <0.05）。彗星实验和流式 细胞术结果显示,放射线（5 Gy）+CSEI（1.0 mg/ml）组细胞核拖尾细胞数、尾长、尾距及凋亡率多于空白 对照组、放射线组及CSEI 组细胞（P <0.05）,而且与空白对照组比较,放射线（5 Gy）+CSEI（1.0 mg/ml） 组G1 期细胞和S 期细胞减少,而G2/M 期细胞增多;同时放射线（5 Gy）+CSEI（1.0 mg/ml）组Bcl-2 和 Survivin 蛋白表达下降,Bax 蛋白表达升高（P <0.05）。结论 1.0 mg/ml CSEI 可增强人肺腺癌细胞系A549 对放射线的敏感性,其作用机制可能与影响肿瘤细胞周期、促进肿瘤细胞凋亡及细胞核DNA 双链损伤等 有关。     

ADFMChR对人肺癌A549细胞增殖活性的影响

目的研究5-烯丙基-7-二氟亚甲基白杨素（ADFMChR）对体外培养人肺癌（A549）细胞、中国仓鼠肺上皮（CHL）细胞增殖活性的影响。方法体外培养A549细胞和CHL细胞,MTT比色法测定细胞增殖活性。结果ADFMChR在终浓度为1.0、2.0、4.0、8.0、16.0μmol/L时,处理A549细48 h,细胞增殖抑制率分别为24.39%、47.66%、62.75%、73.35%、85.94%,其抑制率高于先导化合物（白杨素）,而与顺铂（DDP）相当,且呈浓度依赖性。终浓度为1.0、2.0、4.0、8.0、16.0μmol/L的ADFMChR处理中国仓鼠肺上皮CHL细胞48 h,细胞增殖抑制率为3.95%、7.44%、13.89%、21.60%、27.43%,其对CHL细胞的毒性作用与白杨素相当,而低于DDP。结论ADFMChR对肺癌A549细胞增殖抑制作用强,而对中国仓鼠肺上皮CHL细胞的抑制作用较弱,其抑制A549细胞增殖作用具有选择性。     

黄荆子木脂类化合物对Hela细胞生长的影响

目的:研究4种黄荆子木脂类化合物(VBE-1,2,3,4)抑制人宫颈癌Hela细胞生长作用。方法:溴化标记尿嘧啶(BrdU)掺入法测定细胞核酸合成;平皿集落形成法和软琼脂培养集落形成法检测细胞生长。结果:4种黄荆子木脂类化合物对Hela细胞的核酸合成具有显著抑制作用,呈浓度依赖性;其中VBE-3的BrdU掺入抑制作用最强,IC50是0.93μg/mL。4种黄荆子木脂类化合物明显抑制Hela细胞的集落形成能力,VBE-3的效价强度最大,平皿集落形成法检测的IC50为0.13μg/mL;软琼脂培养集落形成法检测的IC50为0.57μg/mL。结论:黄荆子木脂类化合物具有抑制人宫颈癌Hela细胞生长作用。     

Induction of apoptosis and inhibition of proliferation in Hep-2 by antisense survivin RNA in vitro

Objective.. To study induction of apoptosis and inhibition of proliferation in Hep-2 by antisense survivin RNA. Methods： Antisense survivin RNA expression vector was constructed and then was transfected to human laryngeal carcinoma cell line Hep-2 by lipofectamine. HpEGFP/survivin cells （transfected with the combinant of antisense survivin RNA） were obstained by using G418. The levels of survivin protein before and after transfection were determined by Western-blot. Proliferation activity was measured by MTT assay. The experiment of colony formation in soft agar was carried out for assessing ability of proliferation of Hep-2 cell. Apoptosis was assessed by flow cytometry and acrdine orange（AO）. Results： After antisense survivin RNA plasmids were transfected, the level of survivin protein was inhibited in Hep-2. Compared with control, proliferation of HpEGFP/survivin cells were suppressed significantly. The experiment of colony formation in soft agar showed the ability of colony formation decreased in HpEGFP/survivin cells compared to control （P〈0.05）. Apoptosis rate increased about 1.81-folds compared with control. Conclusion.. The antisense survivin RNA can partly inhibit the level of surviivin protein expression in Hep-2 and can induce apoptosis and inhibit the proliferation of Hep-2 by down-regulating the expression of endogenous survivin in vitro.     

黄荆子乙酸乙酯提取物对HL-60细胞生长和凋亡的影响

目的:观察黄荆子乙酸乙酯提取物(EVn-50)抑制人急性髓性白血病HL-60细胞生长和诱导凋亡作用。方法:体外培养HL-60细胞和人外周血单核细胞(PBMC),MTT法测定细胞增殖;软琼脂培养集落形成法检测细胞生长;PI染色流式细胞术分析细胞凋亡。结果:EVn-50对HL-60细胞增殖具有显著抑制作用,呈浓度依赖性;而对PBMC的增殖活性影响小。EVn-50对HL-60细胞集落形成有抑制效应,呈浓度依赖性。EVn-50有效诱导HL-60细胞凋亡。结论:EVn-50具有抑制HL-60细胞生长和诱导凋亡作用。     

DFOG对A549细胞生长及FoxM1表达的影响

目的:研究7-二氟甲氧基-5,4′-二-正辛烷氧基金雀异黄素(DFOG)抑制人肺癌细胞生长作用及机制.方法:用不同浓度DFOG处理体外培养A549细胞后,流式细胞术(FCM)检测细胞周期分布;平皿集落形成法测定细胞生长;Western blot分析FoxM1蛋白表达.结果:DFOG处理24 h导致A549细胞系G2期细...