双袖套法大鼠原位肝移植模型的技术改进

目的探讨双袖套法大鼠原位肝移植模型的手术技术及其改进方法。方法在Kamada方法基础上进行改良,供体取肝前应用经腹主动脉双灌注法,肝上下腔静脉用缝合法吻合,受体门静脉及肝下下腔静脉采用袖套吻合法,加强围手术期处理。结果行大鼠原位肝移植术160次,供体手术时间35 min,受体手术时间45min,无肝期12 min;2天存活率97%,1周存活率95%。结论改良的双袖套法技术具有手术操作简便、无肝期短的优点,可以显著提高模型的稳定性及成功率。     

双套袖法大鼠原位肝移植术中操作方式的改进

目的探讨双套袖法大鼠肝移植手术操作方式的改进。方法经腹主动脉冷灌洗获得供肝,受者肝上下腔静脉行直接缝合,肝下下腔静脉和门静脉行套管吻合,胆总管行胆管支架吻合;手术分别在双人操作和自行设计的横杆支架帮助下单人操作完成,比较2组完成的模型存活率。结果双人操作行大鼠原位肝移植术60例,其中,稳定模型50例,稳定模型期手术存活率约94.0%,1周存活率88.0%,1月存活率82.0%;单人操作行大鼠原位肝移植120例,其中,稳定模型80例,稳定模型期手术存活率约95.0%,1周存活率86.3%,1月存活率81.3%,2组存活率无明显差别(P>0.05)。结论在自行设计的横杆支架的协助下,单人可独立完成大鼠原位肝移植术,其效果与双人操作效果相同。     

大鼠肾下型腹主动脉瘤模型的建立及方法改良

目的 建立稳定的大鼠肾下型腹主动脉瘤模型,提高大鼠存活率及成瘤率,使成瘤过程及病理学特征更符合人腹主动脉瘤。方法 健康成年SD大鼠24只,按雌雄比例1∶1随机分为A、B两组,每组12只。设立A组为生理盐水灌注组,B组为弹力蛋白酶灌注结合氯化钙涂抹组,两组均采用开腹腹主动脉穿刺插管加压灌注法,所有大鼠均术后饲养4周后开腹收集腹主动脉标本。术中术后均采用小血管测量尺测量腹主动脉直径,以术后4周腹主动脉扩张50%以上作为诊断腹主动脉瘤的标准。两组腹主动脉标本均行HE染色,观察其病理学变化。 结果 A组大鼠存活率为83.33%,手术成功率为91.67%,成瘤率为0%;B组大鼠存活率为91.67%,手术成功率为100%,成瘤率为90.91%,两组成瘤率差异具有统计学意义 （P<0.05）。两组大鼠灌注时腹主动脉扩张率分别为50.82%±4.11%和48.19%±3.89%,灌注后即时腹主动脉扩张率分别为29.55%±4.69%和27.89%±4.28%,两组间扩张率差异无统计学意义。术后28 d两组腹主动脉扩张率分别为27.89%±4.28%和88.98%±42.33% （P<0.05）。B组腹主动脉呈梭形扩张,灌注段腹主动脉周围粘连较为明显,部分小鼠血管壁周围出现肉眼可见的钙化斑。镜下可见内膜明显增厚,中膜结构紊乱,基质降解,弹力纤维失去连续性,中膜有核平滑肌细胞减少,透壁性炎性细胞浸润。A组没有上述表现。 结论 弹力蛋白酶加压灌注法结合氯化钙涂抹法建立的大鼠腹主动脉瘤模型,可通过术中手术细节的改进获得良好的手术成功率和成瘤率,适用于腹主动脉瘤发病机制及治疗等方面的实验研究。     

大鼠原位肝移植的围手术期处理

目的 探讨大鼠原位肝移植实验的围手术期处理的特点。方法 在Kamada用“二袖套法”吻合血管的基础上进行改良。供体改经腹主动脉进行肝脏冷灌注，肝上下腔静脉用缝合法吻合，门静脉和肝下下腔静脉用袖套法吻合，胆总管采用单管内支架胆管端吻合法。结果 共施行大鼠原位肝移植360次，手术成功率为91．3％。非干预组中同系移植大鼠1周存活率为86．5％，3个月存活率达80．7％。结论 积极手术前准备，手术中熟悉步骤、主动配合、手术后耐心细致护理、密切观察、可以保证大鼠原位肝移植实验顺利进行、减少并发症的发生、提高动物的长期存活率。     

不同体积大鼠原位肝移植的试验研究

目的探讨三种不同体积(100%、50%和30%)大鼠原位肝移植术后生存时间,肝功能变化等情况。评估移植物体积对于大鼠原位肝移植的影响。方法建立100%、50%和30%体积的大鼠原位肝移植模型,观察术后生存时间,术后肝功能改变及肝脏组织病理改变。结果术后14d生存率分别为:85%、70%和10%。术后肝功能变化表明30%肝移植组术后损伤较重。病理显示50%及30%肝移植组术后肝脏损害严重,30%组尤为明显。结论移植物的体积对于术后存活率具有明显影响,但外科技术的改进可能提高小移植物受体的术后存活率。     

大鼠原位肝移植模型建立方法的若干问题探讨

目的探讨建立大鼠原位肝移植模型的方法与技术。方法用改进的二袖套法行100例Lewis→BN大鼠原位肝移植,术中门静脉、肝下下腔静脉用袖套法吻合,肝上下腔静脉用缝合法吻合,胆管内支架法完成胆道重建。结果供体手术时间(30.9±5.0)min,供肝修整时间(10.0±3.0)min,受体手术时间(50.0±5.5)min,无肝期为(23.0±2.5)min。手术成功率为92%(术后存活2 d以上),1周存活率为87%,1个月存活率为84%。结论通过提高手术技巧,熟悉各种并发症的原因和预防处理措施,可以减少并发症的发生,提高手术成功率,延长大鼠术后存活时间。     

大鼠原位肝移植的手术技巧及常见并发症的防治

目的:探讨大鼠原位肝移植的手术技巧及常见并发症的处理和预防。方法:采用改良二袖套法进行50例大鼠原位肝移植。结果:移植大鼠术后24小时存活率92%,术后1周存活率84%。结论:改良二袖套法大鼠原位肝移植术操作简便,手术成功率高,术后并发症少,模型稳定性好。     

泡状棘球蚴感染大鼠肝移植模型的建立

目的研究泡状棘球蚴感染大鼠原位肝移植模型的手术技巧及术后并发症的预防与处理。方法 50只BN大鼠作供体,50只泡状棘球蚴感染的Lewis大鼠为受体,通过"二袖套法"施行大鼠原位肝移植。用改进的二袖套法对大鼠行原位肝移植,移植中门静脉、肝下下腔静脉用袖套法进行吻合,肝上下腔静脉用缝合法吻合,胆道采用支架法进行胆道重建。结果建立大鼠原位肝移植模型共50例,术中未出现死亡,存活时间最短为5h,48h存活率为96%(48/50)。结论只有熟练地掌握手术技巧,细致耐心的操作,最大程度减少各种并发症的发生,才能得到良好的肝移植模型。     

大鼠原位肝移植围手术期的处理

目的:探讨大鼠原位肝移植术的围手术期处理.方法:采用改良的二袖套法行大鼠原位肝移植,观察术前、术中及术后处理等因素对大鼠存活率的影响.结果:用改良的二袖套法行50例大鼠原位肝移植,手术成功率为98%,1周存活率为94%.结论:大鼠的术前状态和精细的手术操作及完善的术前、术后管理是影响大鼠原位肝移植成功的主要因素.     

胆道持续外引流大鼠原位肝移植模型的建立

目的建立稳定的胆道外引流和胆汁收集的大鼠原位肝移植模型。方法在"双袖套法"技术基础上,引入大鼠躯干"马甲"式外固定器保护胆道引流管和胆汁收集装置。结果大鼠胆道外引流原位肝移植手术60次,手术成功率93.3%(56/60)。术后1d、1周和4周存活率分别为86.7%(52/60)、76.7%(46/60)和68.3%(41/60)。因胆瘘和胆道梗阻死亡各3例(10.0%)。结论本大鼠肝移植模型胆道外引流稳定,胆道并发症发生率低,可为肝移植后胆汁生物学分析研究提供技术支持。     

Experience with orthotopic rat liver transplantation.

300 orthotopic liver transplantations in rats were performed for a variety of reasons. Male rats including Lewis, ACI, Wistar, and SD, with a body weight of 150 to 400 g, were used as liver donors and recipients. A midline abdominal incision was performed in both donor and recipient animals. The donor's liver was perfused through the aorta abdominalis. The recipient's liver was flushed via the protal vein (PV) with 2 ml of lactated Ringer's solution immediately after occlusion of the PV to make intrahepatic blood enter the circulation. The bile duct was reconstructed by end-to-end anastomosis via a Teflon catheter. The cuff technique was applied to anastomoses of the infrahepatic vena cava (VC) and PV. The suprahepatic VC was anastomosed using either suture or cuff technique. The operative success rate was 92.7% (278/300) on the average and 1-week survival rate 88.4% (199/225) in isografting. The model proved reliable for studies of liver transplantation.

     

Research of combined liver-kidney transplantation model in rats

Objective： To set up a simple and reliable rat model of combined liver-kidney transplantation. Methods： SD rats served as both donors and recipients. 4℃ sodium lactate Ringer＇s was infused from portal veins to donated livers,and from abdominal aorta to donated kidneys, respectively. Anastomosis of the portal vein and the inferior vena cava （IVC） inferior to the right kidney between the graft and the recipient was performed by a double cuff method, then the superior hepatic vena cava with suture. A patch of donated renal artery was anastomosed to the recipient abdominal aorta. The urethra and bile duct were reconstructed with a simple inside bracket. Results： Among 65 cases of combined liver-kidney transplantation, the success rate in the late 40 cases was 77.5%. The function of the grafted liver and kidney remained normal. Conclusion： This rat model of combined liver-kidney transplantation can be established in common laboratory conditions with high success rate and meet the needs of renal transplantation experiment.     

双套管法大鼠肝移植模型的建立

目的探讨大鼠原位肝移植实验中细节和要点,建立一种更高效、稳定的动物模型．方法原二袖套法基础上,综合各种改良术式,经腹主动脉灌注,单线连续外翻缝合吻合肝上下腔静脉,袖套法吻合门静脉和肝下下腔静脉,单管内支架端端吻合胆总管,术中改进细节,减少出血,合理地复温、补液,缩短手术时间和无肝期;观察术后成活率和存活期、结果共制作120例大鼠原位肝移植（不包括预实验）,供体手术时间（17±1．5）min,受体手术时间（37±2．5）min,无肝期为（19±1．5）min．手术成功率94．2％,周存活率90％．结论娴熟的外科操作并精简术式,改进细节,可提高原位肝移植大鼠的成活率和存活期,为实验研究制作高效、稳定的动物模型．     

大鼠原位肝移植及术后肝细胞超微结构观察

用５１只Ｗｉｓｔａｒ大鼠建立了新的大鼠原位肝移植手术模型,手术成功率为９２．１％,周存活率为８６．２７％。手术要点是术前供肝冷灌注;受体肝只建立门静脉血供,静脉吻合分别采用“双袖套”式吻合和“８”字外翻缝合;胆管重建采用单管支架总胆管对端吻合法。移植术后肝细胞超微结构动态观察表明：术后２周是控制免疫排斥反应的关键时期,术后８周实验鼠产生免疫耐受性,移植肝脏成活。     

骨髓干细胞在大鼠移植肝中的诱导分化

目的 研究骨髓干细胞在大鼠移植肝中的诱导分化情况及对大鼠长期存活的影响.方法 雌性受体大鼠随机分3组:空白对照组(A组)、D-hanks液组(B组)、骨髓干细胞组(C组).观察大鼠的中位生存时间、肝组织病理变化,基因Sry原位杂交和甲胎蛋白免疫组化双检测观察骨髓干细胞的分化情况.结果 C组中位生存时间大于180 d(P＜0.05);C组无明显的急性排斥反应.基因Sry原位杂交阳性,并且表达甲胎蛋白.结论 骨髓干细胞门静脉输注能减轻急性排斥反应,诱导大鼠肝移植术后长期存活;并能在移植肝的环境中诱导分化为肝细胞,表达甲胎蛋白,并逐渐替代移植肝本身的细胞.     

改进的大鼠原位肝移植术与相关手术技巧

目的：改进大鼠原位肝移植的手术方式，并总结出相关手术技巧。方法：用改进的二袖套法共建立160例大鼠原位肝移植模型。术中门静脉、肝下下腔静脉用袖套法吻合，肝上下腔静脉用缝合法吻合，胆管内支架法完成胆道重建。结果：采用改进的二袖套法进行大鼠原位肝移植，平均供体手术时间46min，修整供肝时间24min，受体无肝期21min，肝上下腔静脉缝合时间13min，门静脉套管时间3min，肝下下腔静脉套管时间4min．胆管插管时间3min。术中和术后24h内主要死亡原因是气胸、麻醉意外、出血，手术成功率92．5％。存活超过24h者，主要死亡原因为感染、胆道梗阻以及移植肝功能失活。结论：制作大鼠原位肝移植模型需要娴熟的显微外科基本功和耐心细致的手术操作。改进的二袖套法具有无肝期短、手术成功率高的优点，是建立该模型的理想术式。     

小体积肝移植动物模型的建立

目的 模拟建立大鼠40％小肝移植大鼠动物模型.方法 通过肝周骨骼化去神经效果解剖,原位灌注和肝切除术建立大鼠原位40％小肝移植动物模型.结果 40％小肝原位部分肝移植1d生存率为90.0％（18/20）,2 d生存率为85.5％ （17/20）,4d生存率为65.0％（13/20）,7d生存率为60.0％ （12/20）.结论 通过技术改进,提高了手术成功率及模型的稳定性,成功建立小肝移植大鼠动物模型。     

老年大鼠供肝应用的实验研究

目的 研究老年大鼠供肝的应用,并探讨老年大鼠肝移植供体年龄限制.方法 采用肝动脉重建二袖套原位肝移植技术,建立大鼠原位肝移植模型,供受体均为雄性Wistar大鼠,受体鼠龄均为5月,根据供体鼠龄分组,A～E组供体鼠龄分别为5、17、20、23、26月,每组12例.检测术后第1、3、7天血清丙氨酸转氨酶(ALT)水平,并观察组织病理学变化和术后3月存活率.结果 B、C和D组肝移植术后第1天和第3天ALT与A组比较差异均有显著性(P<0.05),第7天差异无显著性(P>0.05),肝功能恢复延迟,肝功能于术后第7天趋于稳定.老年大鼠移植肝植入前组织病理学表现存在轻度肝纤维化,老年大鼠肝细胞数目减少,脂褐素数量增加.E组术后ALT增高(P<0.05),肝功能损伤不可恢复,3月存活率为0.结论 供体年龄是影响老年供肝移植疗效的重要因素之一,鼠龄低于23月的老年大鼠移植肝可恢复功能.

Abstract：

Objective To investigate the application of donor livers from aging rats, and discuss the age limit of the donor rats liver transplantation. Methods Arterialized, two-cuff technique orthotopic liver transplantation was performed in male Wistar rats. All the recipient rats were 5 months old, and the ages of the donor rats were 5 (group A), 17 (group B), 20 (group C), 23 (group D), and 26 (group E) months (n=12). The postoperative function recovery and pathological changes of the liver grafts were evaluated by serum alanine aminotransferase (ALT) detection and histopathological examination, and the 3-month survival rate of the rats was observed. Results Aging liver grafts in groups B, C, and D caused early elevation of ALT peak level and aggravation of liver tissue damage, and the liver graft recovery was delayed until postoperative day 7. Mild liver fibrosis, reduced hepatocytes and pigment deposition were observed in the liver grafts before the transplantation. Compared with the other groups, the rats in group E showed significantly increased ALT levels after the transplantation (P<0.05), with failure of liver graft function recovery and significantly reduced 3-month survival rate (0%, P<0.05). Conclusion The donor age of the rats is a crucial factor to affect the outcome of the liver grafts. Grafts obtained from rats younger than 23 months allow better functional recovery of the liver.     

大鼠原位异体胃移植模型的实验研究

目的应用显微外科技术,建立大鼠原位异体胃移植模型.方法70只SD大鼠,行35例次的胃移值手术.供体手术,先切除脾脏,经腹主动脉行原位胃冷灌洗.将胃及其所属血管,包括腹腔干和门静脉干等一并切取.受体手术,先切除胃和脾脏,分别行供、受体间门静脉的端侧吻合,供体腹腔干与受体胃左动脉的端端吻合,然后开放血流.再行供体和受体十二指肠间端端吻合,贲门与食管端端吻合.结果在施行的35例手术,后20例中有16例成功,成功率为80%.最长存活者达3个月.结论成功地建立了大鼠原位异体胃移植类型.该模型可用于腹部多脏器移植中移植胃的相关研究及全胃切除术后代胃的研究.     

特利加压素联合FK-409在大鼠减体积肝移植模型中对移植肝的保护作用

目的 在大鼠减体积肝移植模型中联合应用特利加压素和FK-409探究其对受体移植肝的保护作用.方法 使用30%体积供肝行SD大鼠同系肝移植, 监测术后门静脉压力、血谷丙转氨酶 (ALT) 、总胆红素水平和术后生存时间, 构建有效的减体积肝移植模型.利用减体积肝移植模型作为载体, 根据不同的干预手段将受体大鼠分为特利加压素处理组、FK-409处理组、特利加压素处理联合FK-409处理组和对照组, 监测术后各组门静脉压力、血谷丙转氨酶 (ALT) 、总胆红素水平和术后生存时间, 统计并分析特利加压素处理联合FK-409处理对减体积肝移植移植肝的保护作用.结果 在减体积肝移植模型中, 特利加压素联合FK-409处理组与对照组比较, 术后门静脉压力显著小于对照组, 差异有统计学意义 (P<0.05) , 术后血清ALT、总胆红素显著低于对照组, 差异有统计学意义 (P<0.05) , 术后生存时间较对照组明显延长, 差异有统计学意义 (P<0.05) , 在减体积肝移植模型中联合使用特利加压素、FK-409可有效保护移植肝脏.结论 特利加压素联合FK-409可有效保护大鼠减体积肝移植中移植肝, 特利加压素联合FK-409方案可能成为减体积肝移植术后小肝综合症防治的潜在药物处理方案.