滇藏荨麻提取物的5α-还原酶抑制活性的研究

目的研究滇藏荨麻提取物各极性部位的5α-还原酶抑制活性。方法基于酶联免疫方法，建立抑制5α-还原酶体外模型，从大鼠前列腺组织中提取5α-还原酶，与底物睾酮以及供氢体NADPH共同组成了一种微量反应体系。利用酶标仪检测双氢睾酮（DHT）的含量。以DHT的含量来判断5α-还原酶的活性，用非那雄胺做阳性对照药。结果滇藏荨麻根95％乙醇提取物的正丁醇萃取物具有显著的抑制5α-还原酶的活性。结论滇藏荨麻根95％乙醇提取物的正丁醇萃取物为抗BPH的有效部位。     

荨麻提取物对5α-还原酶抑制活性的研究

目的 研究荨麻提取物中水溶性成分的5a-还原酶抑制活性.方法 基于荧光测定的方法,建立一种5a-还原酶抑制剂体外模型,从大鼠前列腺组织中提取5α-还原粗酶,与底物睾酮(Testosterone)以及供氢体还原型辅酶Ⅱ(NADPH)共同组成了一种微量反应体系.利用荧光测定仪检测NADPH的含量,以荧光的强弱来判断5a-还原酶的活性,以非那雄胺作为阳性对照.结果 同对照组相比,反应体系中加入荨麻提取物后荧光值有显著升高.结论 荨麻根的水溶性成分在体外能够抑制5a-还原酶的活性.     

应用体外模型从植物提取物中筛选治疗雄激素源性脱发的5a-还原酶抑制剂

目的应用5a-还原酶抑制剂体外筛选模型,寻找植物提取物中天然5a-还原酶抑制剂,用于雄激素源性脱发的治疗。方法通过HPLC测定底物睾酮(T)在酶促反应中的下降速率计算酶活力,建立5a-还原酶抑制剂体外筛选模型。采用此体外模型对多种植物提取物进行酶抑制作用筛选,继而对筛出的植物提取物采用制备液相进行组分分离制备,测定各段组分酶抑制活性,最终找出具有酶抑制作用的活性成分。结果通过体外模型筛选发现有酶抑制活性的咖啡提取物,并找到其活性成分咖啡鞣酸。结论通过体外模型筛选5a-还原酶抑制剂,结合制备液相分离植物提取物组分,是发现新活性物质的有效手段     

应用α-葡萄糖苷酶抑制剂高通量筛选模型筛选降血糖中药

 目的建立筛选α-葡萄糖苷酶抑制剂的体外高通量筛选模型,并对30味常用清热解表中药进行筛选。方法应用大鼠小肠上段提取的α-葡萄糖苷酶,以蔗糖作为底物,通过测定反应体系中葡萄糖的生成量来检测α-葡萄糖苷酶的活性。通过优化酶促反应条件,建立检测α-葡萄糖苷酶活性的比色测定法及其抑制剂体外筛选的方法,并对30味中药共72个样品进行高通量筛选。结果阿卡波糖对α-葡萄糖苷酶的抑制活性与文献报道相近;筛选发现鸭跖草、山慈菇和桑叶等3味中药的不同极性提取物对α-葡萄糖苷酶有可重复的抑制作用。结论应用比色法建立的筛选模型可进行α-葡萄糖苷酶抑制剂的高通量筛选及中药相关活性物质的发现。     

以睾酮5α-还原酶抑制作用为指标筛选对前列腺肥大有效的生药

伴随老化而增加的前列腺肥大,已成为老龄化社会进程中的严重问题。因此以雄激素为活性型酶的睾酮5-α还原酶的抑制作用为指标,对有效生药进行了筛选。 用5倍量的稀乙醇分别加热环流提取各生药,减压浓缩并冷冻干燥得提取物。底物为睾酮,以大鼠肝脏微粒体组分(S-9mix)为酶,辅酶用NADPH,通过GLC分析酶反应后转换生成的睾酮衍生物,计算IC_(50)。     

五种中药对两种不同来源α-葡萄糖苷酶活性的抑制作用比较

目的：比较大鼠小肠黏膜α-葡萄糖苷酶提取液和市售α-葡萄糖苷酶建立的α-葡萄糖苷酶抑制剂微量筛选模型;筛选对α-葡萄糖苷酶抑制作用较强的中药。方法：采用葡萄糖氧化酶法比较两种来源的α-葡萄糖苷酶活性,确立最优反应条件,并对五倍子等五种中药水煎液的α-葡萄糖苷酶抑制作用进行比较。结果：五种中药对两种不同来源的α-葡萄糖苷酶均有抑制作用,其中五倍子的作用最强。结论：一定浓度下,两种不同来源α-葡萄糖苷酶活性有一定差异,但对体外筛选α-葡萄糖苷酶抑制剂研究结果无显著的影响。     

10味中药提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用

目的:观察10味中药对α-葡萄糖苷酶的抑制作用,筛选对α-葡萄糖苷酶抑制作用较强的中药。方法:提取大鼠小肠α-葡萄糖苷酶,以麦芽糖为底物,筛选10味中药水提取物体外对α-葡萄糖苷酶活性的抑制作用;选择体外对α-葡萄糖苷酶活性有较强抑制作用的中药提取物,一次性灌胃后对餐后60min血糖的影响;以阿卡波糖(ACAR)作为阳性对照药物。结果:赤芍、山茱萸和桑白皮3味中药对α-葡萄糖苷酶的活性有较强的抑制作用,显示明显的浓度-效应关系,其中桑白皮抑制作用最强,当桑白皮浓度达到10mg/ml时,其对α-葡萄糖苷酶的抑制率已达80%,相当于浓度1mg/ml的ACAR的作用;3种中药体内实验结果表明,3者均可抑制大鼠一次性灌胃麦芽糖60min后血糖水平的升高(P<0.05或P<0.01),与对照组比较,对血糖升高的抑制率以桑白皮组最高(62.09%),并且与ACAR(69.31%)组没有统计学差异(P>0.05)。结论:赤芍、山茱萸和桑白皮3味中药体内、外对α-葡萄糖苷酶活性均有较强的抑制作用。     

新疆金鸡菊提取物体外对α-葡萄糖苷酶的影响

目的：研究新疆金鸡菊五种提取物体外对α-葡萄糖苷酶活性的影响。方法：用醇提法并有机溶剂萃取法制备新疆金鸡菊5种提取物,用体外α-葡萄糖苷酶抑制模型对5种新疆金鸡菊提取物进行α-葡萄糖苷酶抑制活性筛选。结果：新疆金鸡菊的5种提取物体外对α-葡萄糖苷酶的活性均有抑制作用,其中提取物Ⅲ的IC50最低,活性最强。结论：在体外,新疆金鸡菊提取物在一定浓度下有抑制α-葡萄糖苷酶活性的作用。     

复方贞术调脂方调节HMG-CoA还原酶活性成分的快速筛选

目的优化快速筛选影响羟甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMG-CoA还原酶)活性成分的方法,并筛选复方贞术调脂方(FTZ)中抑制HMG-CoA还原酶的活性成分。方法利用纯化的猪肝HMG-CoA还原酶,从HMG-CoA还原酶浓度、HMG-CoA和NADPH底物浓度三方面优化HMG-CoA还原酶筛选方法,评价FTZ和FTZ中不同药物成分对HMG-CoA还原酶活性的影响。结果猪肝HMG-CoA还原酶粗酶制剂具有明显的酶促动力学特性,反应体系中30μgHMG-CoA还原酶粗酶、200mmol/LNADPH、6μmol/LHMG-CoA是检测HMG-CoA还原酶活性和筛选影响酶活性成分的优化条件;FTZ和人参皂苷Rb2、三七总皂苷和阳性对照普伐他汀对HMG-CoA还原酶活性有显著的抑制作用,最大抑制率分别为23.7%、44.6%、35.5%、45.7%(P0.05或P0.01)。结论 HMG-CoA还原酶是FTZ调节脂代谢的靶点之一,人参皂苷Rb2、三七总皂苷是FTZ中抑制HMG-CoA还原酶的活性成分。     

雄激素源性脱发中医辨证论治及实验研究进展

雄激素源性脱发（androgenetic alopecia，AGA），又称脂溢性脱发、男性型脱发，是一种多基因遗传性疾病，其发病与雄激素代谢有一定关系，即患者血清和头皮中双氢睾酮（DHT）水平高于正常人，双氢睾酮由睾酮在5α-还原酶的作用下转化而来，头皮额顶部头发在DHT的长期作用下，     

石榴皮提取物对小鼠实验性前列腺增生的影响

目的 研究石榴皮提取物(Pomegranate peel extracts,PPE)对丙酸睾酮诱发小鼠实验性前列腺增生(Benign prostatic hyperplasia,BPH)的影响.方法 采用皮下注射丙酸睾酮诱发小鼠实验性前列腺增生模型,以250及500 mg/kg两种不同剂量的石榴皮提取物灌胃给药,连续12 d,测定小鼠前列腺湿重及前列腺指数,光镜下观察前列腺组织形态学变化,并测定血清睾酮(T)水平,前列腺组织中一氧化氮(NO)含量、丙二醛(MDA)含量、抗氧化能力指数(ORAC)水平,HPLC法测定石榴皮提取物体外对5α-还原酶活性的影响.结果 与模型组相比,石榴皮提取物可显著降低前列腺指数并改善其病理状态,同时降低血清T水平、血清NO含量和前列腺组织中MDA含量,提高抗氧化能力指数(P<0.05或P<0.01).此外,体外实验证明石榴皮提取物对5α-还原酶活性具有一定的抑制效果.结论 石榴皮提取物对丙酸睾酮引起的小鼠实验性前列腺增生具有一定的抑制作用,其作用机制可能与抑制5α-还原酶活性及调节机体氧化应激状态有关.     

11味中药提取物中α-葡萄糖苷酶抑制剂的筛选

目的 观察11味中药对α-葡萄糖苷酶的抑制活性,筛选出抑制作用较强的中药.方法 以麦芽糖为底物,采用α-葡萄糖苷酶活性测定方法,观察这11味中药醇提液对α-葡萄糖苷酶的抑制作用.结果 11味中药均对α-葡萄糖苷酶有一定的抑制作用,其中山茱萸、桑白皮、葛根3味中药对α-葡萄糖苷酶有较强的抑制作用,当浓度为1000mg/ml时,抑制率分别为84.3％,97.1％,72.7％.结论 山茱萸、桑白皮和葛根3味中药体外对α-葡萄糖苷酶有较强的抑制作用.     

5α-还原酶抑制剂对过度训练大鼠雄激素作用的影响

目的探讨非甾体类5α-还原酶抑制剂DQI对大运动量游泳训练大鼠血清雄激素水平、EPO水平及肾脏组织EPO合成能力的影响.方法以渐增游泳训练为大鼠运动应激模型,运用酶免和放免分析法观察了血睾、血清EPO及血清5α-双氢睾酮的含量,以及运用RT-PCR法观察了肾脏组织EPOmRNA的表达水平.结果本运动模型可提高靶组织睾酮向5α-双氢睾酮的转化,而DQI可以显著抑制这一过程,并可以提高肾脏组织EPO的合成能力及血清EPO含量.结论非甾体类5α-还原酶抑制剂DQI对维持及恢复运动能力有一定作用.其机制与整合内源性睾酮及增加内源性EPO有关.     

二氢杨梅素对醛糖还原酶的抑制作用

目的:研究二氢杨梅素体外对醛糖还原酶(AR)的影响。方法:取正常SD大鼠晶状体制备醛糖还原酶,以依帕司他1×10-7mol/L为阳性对照,观察二氢杨梅素1.0×10-5、4.0×10-5、1.4×10-4、6.4×10-4mol/L四个浓度体外对醛糖还原酶的抑制作用。结果:随着二氢杨梅素浓度的增加,醛糖还原酶的活性逐渐降低,且呈一定的剂量-效应关系,在终浓度为6.4×10-4mol/L时,其对醛糖还原酶活性的抑制率为54.3%。结论:二氢杨梅素在体外有抑制醛糖还原酶的作用。     

AKR1C3酶抑制剂筛选模型的建立及在中药五环三萜类活性成分筛选中的应用

目的:建立与优化AKR1C3抑制剂类抗去势抵抗性前列腺癌药物筛选模型,并运用此模型对中药五环三萜类化合物进行体外活性筛选和构效关系分析。方法:优化酶催化反应的辅酶NADPH浓度、底物9,10-菲醌浓度、酶浓度、反应温度、预孵育时间等因素,建立AKR1C3酶抑制剂筛选模型,采用阳性对照药物甲氯酚那酸及雷公藤红素等6种五环三萜化合物验证模型的可靠性。结果:优化后的反应体系为:0.15 mmol/L辅酶NADPH、8μmol/L底物9,10-菲醌、0.33μmol/L酶,反应温度为30℃,预孵育时间和反应时间均为10 min。运用该模型测定的甲氯酚那酸的IC_(50)值为0.516μmol/L,与文献报道值相符。6种五环三萜类化合物中,雷公藤红素和甘草次酸对AKR1C3酶的抑制活性最强。结论:建立的模型可应用于AKR1C3抑制剂的筛选,并为靶向AKR1C3的抗去势抵抗性前列腺癌中药及中药复方活性成分的筛选和作用机制研究提供良好的技术平台。     

桑叶提取物抑制α-葡萄糖苷酶活性体系的优化及动力学研究

目的研究桑叶提取物抑制α-葡萄糖苷酶活性反应体系的条件优化及酶动力学。方法采用酶-抑制剂模型法,优化底物浓度、酶用量和反应时间,确定最佳反应体系,研究桑叶提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用,并采用双倒数作图法研究桑叶提取物的酶抑制动力学特性。结果当蔗糖浓度为40 mg/mL,酶用量为0.2mL(约1.6 U/mL),反应时间为25 min时为最佳反应体系;酶抑制动力学实验表明,桑叶提取物的抑制类型为混合型竞争性抑制,阳性对照为非竞争性抑制。结论桑叶提取物对α-葡萄糖苷酶活性有抑制作用;桑叶提取物对α-葡萄糖苷酶抑制活性为混合性竞争性抑制,可以用于开发降糖药物。     

植物中抑制5α-还原酶的活性成分研究进展

5α-还原酶活性筛选是抑制前列腺增生和抑制前列腺癌药物筛选过程中的一个重要指标。综述了近10年来植物中抑制5α-还原酶的活性成分研究概况,结果发现具有5α-还原酶抑制活性的化学成分在植物中广泛存在,其中脂溶性成分以苯丙素类、萜类、醌类、三萜及甾体类为主,水溶性化合物主要包括鞣质类、黄酮类化合物。不同类别的5α-还原酶抑制剂的活性参差不齐,其中三萜类化合物、甾体类化合物和鞣质类化合物的活性相对较强。     

5α-还原酶抑制剂对过度训练大鼠雄激素作用的影响

 目的探讨非甾体类5α-还原酶抑制剂DQI对大运动量游泳训练大鼠血清雄激素水平、EPO水平及肾脏组织EPO合成能力的影响。方法以渐增游泳训练为大鼠运动应激模型，运用酶免和放免分析法观察了血睾、血清EPO及血清5α-双氢睾酮的含量，以及运用RT PCR法观察了肾脏组织EPOmRNA的表达水平。结果本运动模型可提高靶组织睾酮向5α-双氢睾酮的转化，而DQI可以显著抑制这一过程，并可以提高肾脏组织EPO的合成能力及血清EPO含量。结论非甾体类5α-还原酶抑制剂DQI对维持及恢复运动能力有一定作用。其机制与整合内源性睾酮及增加内源性EPO有关。     

蜂花前清茶对小鼠实验性前列腺增生的改善作用

目的:探讨蜂花前清茶对丙酸睾酮诱发小鼠实验性前列腺增生的改善作用以及作用机制.方法:采用皮下注射丙酸睾丸酮诱发小鼠实验性前列腺增生模型,同时连续3周灌胃给予125、250、500 mg/kg 三种不同剂量的蜂花前清茶提取物后,分别测定小鼠前列腺湿重、计算前列腺指数、血清睾酮(T)含量、前列腺组织中丙二醛(MDA)含量、抗氧化能力指数(ORAC)、谷胱甘肽(GSH)水平,光镜下观察前列腺组织形态学变化及HPLC法测定蜂花前清茶对体外5α-还原酶活性的影响.结果:与模型组相比,蜂花前清茶能显著减轻前列腺湿重,降低前列腺指数、血清T含量和前列腺组织中MDA含量,显著提高抗氧化能力指数和GSH水平,同时体外实验证明蜂花前清茶对5α-还原酶活性显示一定的抑制效果.结论:蜂花前清茶对丙酸睾酮引起的小鼠实验性前列腺增生具有一定的抑制作用,其作用机制可能与影响5α-还原酶活性以及调节体内过氧化状态相关.     

琴叶榕根提取物对α-葡萄糖苷酶、α-淀粉酶的抑制作用

目的:研究琴叶榕根2种提取物对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶活性的抑制作用。方法:采用超声辅助提取法制备琴叶榕根乙醇提取物,回流提取法制备琴叶榕根水提取物。以pNPG (对-硝基苯基-α-D-吡喃葡萄糖苷)和可溶性淀粉为底物分别测定琴叶榕根提取物对α-葡萄糖苷酶(酵母来源和小鼠小肠来源)和α-淀粉酶活性的影响。结果:琴叶榕根乙醇提取物和水提取物均具有较好的α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶抑制活性,其对酵母菌源α-葡萄糖苷酶的半数抑制浓度(IC50值)分别为:(128.13±3.28)、(1923.45±3.24)μg/mL;对小鼠小肠源α-葡萄糖苷酶的半数抑制浓度(IC50值)分别为:(531.04±5.72)、(2232.27±5.76)μg/mL;对α-淀粉酶的半数抑制浓度(IC50值)分别为:(714.25±4.37)、(1141.28±1.23)μg/mL。结论:琴叶榕根乙醇提取物抑制α-葡萄糖苷酶活性和α-淀粉酶均强于水提取物,有作为新型α-葡萄糖苷酶抑制剂开发价值。