利用染色质隔离子构建人基质金属蛋白酶-12转基因表达载体

目的：在构建巨噬细胞特异表达且带有染色质隔离子的人基质金属蛋白酶-12（hMMP-12）转基因表达载体的基础上构建hMMP-12转基因兔动物模型。方法：首先通过RT-PCR方法扩增hMMP-12基因．产物亚克隆到pGEM—T载体，测序后获得pGEM—T-hMMP-12，然后利用pJC13构建带有染色质隔离子和清道夫受体A增强子、启动子和人生长激素尾的亚克隆pJC13-SR，再利用pGEM-T-hMMP-12和pJC13-SR重组质粒，构建巨噬细胞特异性的转基因表达载体pJCl3-SR．hMMP-12，最后pJCl3-SR—hMMP-12表达载体线性化，显微注射家兔受精卵制备转基因兔，并进行PCR扩增及Southern Blot转基因效果分析鉴定。结果：（1）通过DNA测序和限制性核酸内切酶酶切鉴定证实，hMMP-12成功克隆到所需表达载体中；（2）转基因后获得仔兔36只，以PCR检测结果计算，转基因总效率为1．4％-3．4％，整合率为20％-50％；以Southern Blot检测结果计算，转基因总效率为0．5％．2．2％，整合率为13％～17％。结论：转基图表达载体的成功构建，为hMMP-12转基因兔动物模型的构建和研究MMP-12在动脉粥样硬化的形成和发展中的作用机制奠定了基础。     

氟哌啶醇对新西兰兔心室肌细胞钾通道基因表达的影响

目的研究氟哌啶醇对兔左心室肌细胞钾通道基因水平的影响,探讨氟哌啶醇致心律失常的分子机制。方法实验组分别耳缘静脉注射氟哌啶醇(Haloperidol,Hal)1,2,4mg.kg-1.d-1,假手术组注射2ml.d-1生理盐水,同时监测心电图。应用逆转录-聚合酶链反应技术(RT-PCR),对ERG、KvLQT1和mink的基因表达进行半定量分析。结果氟哌啶醇低、中、高剂量组KvLQT1、mink及ERG mRNA表达较正常组降低(P<0.05),假手术组与正常组差异无统计学意义(P>0.05)。结论氟哌啶醇可能通过降低IKr、IKs钾通道基因KvLQT1、mink及ERG的表达,而使钾离子外流减少,心肌细胞动作电位时程延长,增加QT间期延长诱发Tdp的风险。     

改良型序列特异性引物PCR用于脂联素基因单核苷酸多态性的检测

目的运用序列特异性引物PCR技术（SSP-PCR）研究基因单核苷酸多态性。方法根据GenBank中人脂联素基因（APM1）序列及SNP信息,利用Primer5.0设计引物,通过PCR技术检测APM1的SNPs。结果建立并优化了序列特异性引物PCR（SSP-PCR）技术,并可快速、直观、准确地进行基因分型。结论改良的SSP-PCR技术是一种特异性更高、操作简便的SNP检测方法。     

β2肾上腺素能受体基因R16G多态与哈萨克族男性肥胖的相关性

目的 探讨β2肾上腺素能受体基因R16G多态在哈萨克族人群肥胖发病中所起的作用.方法 应用Taqman技术检测331例哈萨克族正常体重者,380例超重者以及232例肥胖者中ADRB2基因R16G多态性,观察各基因型和等位基因频率在不同BMI水平的分布及其与超重肥胖的关系.结果 哈萨克族正常体重组、超重组与肥胖组组间基因型和等位基因频率的分布无统计学差异,但突变型纯合子基因型频率在哈萨克族超重组及肥胖组有增高趋势;将哈萨克族人群按性别分层并用logistic回归模型校正年龄、血压之后,显示男性组间基因型频率分布存在统计学差异(χ2=8.707, P=0.013),携带突变型纯合子(AA基因型)的个体患肥胖的风险为GG基因型的2.18倍.结论 ADRB2基因R16G多态与哈萨克族男性肥胖相关,AA基因型可能是哈萨克族男性肥胖的风险因子.     

新疆金鸡菊提取物体外对α-葡萄糖苷酶的影响

目的：研究新疆金鸡菊五种提取物体外对α-葡萄糖苷酶活性的影响。方法：用醇提法并有机溶剂萃取法制备新疆金鸡菊5种提取物,用体外α-葡萄糖苷酶抑制模型对5种新疆金鸡菊提取物进行α-葡萄糖苷酶抑制活性筛选。结果：新疆金鸡菊的5种提取物体外对α-葡萄糖苷酶的活性均有抑制作用,其中提取物Ⅲ的IC50最低,活性最强。结论：在体外,新疆金鸡菊提取物在一定浓度下有抑制α-葡萄糖苷酶活性的作用。     

于天源“四步六法”治疗神经根型颈椎病理论探析

文章总结了于天源教授运用"四步六法"治疗颈椎病的临床经验,其中"四步骤"包括松筋、通经、整复、展筋;"六手法"包括一指禅推法、弹拨穴位、颈椎定位旋转扳法、颈部端提法、牵拉臂丛神经,拔伸颈部。四步六法操作集中在手太阳小肠经循行之处,通过松解局部肌肉、疏通经络气血,达到治疗神经根型颈椎病的目的。"四步六法"立足于经络理论,将传统医学与现代解剖学相结合,构建神经根型颈椎病的特色治疗方案,深化中西医结合疗法内涵,为神经根型颈椎病的临床治疗提供新思路。     

维吾尔族肥胖患者内脂素的表达及其相关因素

目的: 探讨新疆维吾尔族肥胖患者皮下和网膜脂肪组织中内脂素mRNA表达水平及血浆内脂素浓度与体质量指数、腰臀围比、空腹血糖、血脂等指标的关系.方法: 根据体质量指数将56名研究对象分为肥胖组和正常对照组.应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测受试者皮下和网膜脂肪组织中内脂素mRNA表达水平,酶联免疫法检测血浆内脂素浓度.结果: 肥胖组较对照组皮下和网膜脂肪组织内脂素mRNA表达水平有升高趋势,但差异无统计学意义;肥胖组血浆内脂素浓度较正常对照组显著升高(P<0.05);相关性分析显示,网膜脂肪组织内脂素mRNA表达量与BMI(r＝0.26,P<0.05)和三酰甘油(TG)(r＝0.55, P<0.05)显著正相关;皮下脂肪组织内脂素mRNA表达量与TG显著正相关(r＝0.54,P<0.05),血浆内脂素浓度与体质量(r＝0.38,P<0.05)、腰围(r＝0.33,P<0.05)、臀围(r＝0.27,P<0.05)呈正相关,而与HDL-C呈负相关(r＝-0.27,P<0.05).结论: 内脂素可能与维吾尔族肥胖及脂代谢有关.     

新疆维吾尔族肥胖患者网膜脂肪组织脂联素mRNA表达降低

脂肪组织是功能活跃的内分泌器官,其所分泌的脂联素(adiponeetin,APN)在血脂、糖、脂代谢、抗动脉粥样硬化中发挥有益的作用[1].本研究选取肥胖与2型糖尿病发病率较高的维吾尔族人群为研究对象,利用半定量RT-PCR技术检测不同部位脂肪组织脂联素mRNA表达水平,并探讨其影响因素.     

维吾尔族肥胖患者脂联素表达与胰岛素抵抗的关系

目的探讨维吾尔族肥胖患者腹部网膜和皮下脂肪组织脂联素的表达水平及其与血清脂联素、空腹血糖、血脂和胰岛素敏感性的关系。方法半定量RT-PCR方法检测41例肥胖和20例非肥胖研究对象腹部网膜和皮下脂肪组织脂联素mRNA的表达水平,ELISA法测血清脂联素,同时检测临床生化参数及胰岛素水平,并计算BMI、WHR和HOMA-IR。结果①网膜脂肪组织脂联素mRNA表达水平肥胖组显著低于非肥胖组,血清脂联素水平在两组之间无显著性差异;②肥胖组DBP和SBP均显著高于非肥胖组,HDL-C低于非肥胖组;③肥胖组网膜脂肪组织脂联素mRNA表达量与血清脂联素显著正相关,与BMI显著负相关,皮下脂肪组织脂联素mRNA表达量与BMI显著负相关。血清脂联素与BMI、TC、LDL-C显著负相关。结论维吾尔族肥胖患者脂肪组织脂联素mRNA表达量对血清脂联素浓度有影响,脂联素可能在维吾尔人腹型肥胖相关的代谢紊乱性疾病中起一定作用。