清肝泻肺方治疗肝火犯肺增加流感病毒易感性的作用研究

本实验采用慢性拘束应激诱导的H1N1流感病毒易感的小鼠模型,模拟临床上情志郁结、肝火犯肺,研究清肝泻肺方(黛蛤散合黄芩泻白散)治疗流感病毒性肺炎的作用。小鼠感染流感病毒后观察21天内的生存和发病情况,并于感染后的第6天取部分小鼠肺脏检测病毒性肺炎和磷脂过氧化等指标。实验结果显示,清肝泻肺方能够缓解慢性拘束应激负荷H1N1流感病毒引起的小鼠生存率和健康率下降,抑制小鼠肺部流感病毒的复制、炎症因子的产生,降低磷脂过氧化水平,改善小鼠肺炎症状。利用中药网络药理学技术构建的清肝泻肺方活性化合物-作用靶点网络,结果显示,该网络包含171个单体化合物和260个靶点,涉及氧化应激、炎症和免疫等相关信号通路。以上结果表明,清肝泻肺方治疗流感病毒性肺炎的作用机制可能与其调控氧化应激有关。实验方案经暨南大学动物实验伦理委员会批准,所有程序均严格按照动物使用和护理的伦理原则进行。     

Omega-6型多不饱和脂肪酸增加急性心肌缺血损伤“易感性”的机制研究

脂质代谢紊乱是冠心病的常见病理特征。虽然增加不饱和脂肪酸(PUFA)的摄入一直以来被认为可以有效预防冠心病,但是越来越多的临床试验却否定了该观点。PUFA在冠心病中的具体作用机制尚不明确。本实验通过建立omega-6型PUFA负荷急性心肌缺血的动物模型,来探讨PUFA对心肌缺血损伤的影响及其潜在机制。实验方案及程序均符合动物使用和护理的伦理原则,并已获暨南大学动物实验伦理委员会批准。实验采用亚油酸(LA)连续灌胃14天后,大剂量腹腔注射异丙肾上腺素(ISO)诱导急性心肌缺血以建立动物模型。24 h后,采用小动物超声影像系统检测心脏功能。随后,采集血清及心肌组织样本进行心肌酶、磷脂组学分析、试剂盒含量测定和Western blot检测。心脏功能结果表明,与单纯LA组比较, LA负荷ISO小鼠的左心室射血分数(EF%)和左心室缩短分数(FS%)显著降低,天门冬氨酸转移酶(AST)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)和乳酸脱氢酶(LDH)显著增加。磷脂组学分析表明,与ISO组比较, LA负荷ISO小鼠心肌组织中的PUFA显著增加,且氧化型磷脂酰乙醇胺(ox-PE)的含量变化最为显著。还原型辅酶Ⅱ(...     

1,3,7,9-四甲基尿酸激活SirT3/AMPK/ACC信号通路减少高脂饮食小鼠肝脏脂肪化

目的研究嘌呤生物碱1,3,7,9-四甲基尿酸(theacrine)对高脂饮食小鼠肝脏甘油三酯蓄积的影响,并进一步探讨其作用机制。方法 C57BL/6J小鼠高脂喂养17周诱导单纯性脂肪肝模型,连续6周给予theacrine后,分别对肝组织切片进行HE和苏丹IV染色,测定肝脏中甘油三酯(TG)水平,用Western blot法检测肝脏中SirT3蛋白表达、AMPK及ACC蛋白的磷酸化水平。应用compound C抑制HepG2细胞中AMPK磷酸化,检测theacrine干预后相关蛋白的表达。结果 Theacrine能减少高脂饮食小鼠肝脏中TG水平,改善肝脏脂肪变性状态,增加肝脏中SirT3蛋白表达及AMPK和ACC蛋白的磷酸化水平。抑制细胞内AMPK的磷酸化后,theacrine仍能激活SirT3,但抑制了ACC的磷酸化作用。结论 Theacrine对SirT3的激活不依赖于AMPK的激活,而对ACC的磷酸化依赖于AMPK的激活。其改善高脂饮食小鼠肝脏脂肪化的作用可能与激活SirT3/AMPK/ACC信号通路相关。     

23-羟基白桦酸诱导LoVo细胞凋亡与线粒体膜电位的变化

目的探讨23-羟基白桦酸对人结肠癌细胞株LoVo细胞增殖和凋亡的影响。方法采用MTT法检测23-羟基白桦酸对LoVo细胞的增殖抑制作用。Hoechst染色、流式细胞仪检测细胞凋亡及线粒体膜电位的变化。结果23-羟基白桦酸能抑制LoVo细胞的增殖,其作用呈明显的时间和剂量依赖性。Hoechst33258染色显示细胞凋亡特征。23-羟基白桦酸25、50、100及200μmol·L-1作用LoVo细胞48h后,其凋亡率分别为11.32%±0.92%、19.23%±0.78%、24.51%±5.88%及42.22%±2.32%,显示一定的剂量依赖性关系。与空白组相比,23-羟基白桦酸可明显降低LoVo细胞线粒体膜电位(P<0.01)。结论23-羟基白桦酸可抑制LoVo细胞的增殖,其机制与降低线粒体膜电位继而诱导LoVo细胞凋亡有关。     

溴酸钾诱导小鼠肾组织氧化应激研究

目的:探讨溴酸钾诱导小鼠肾组织氧化应激状态的改变,建立小鼠肾组织氧化应激模型。方法:200mg/kg溴酸钾腹腔注射诱导小鼠氧化应激,采用荧光酶标仪测定小鼠肾组织的抗氧化能力指数,HPLC测定小鼠血清中肌酐含量及肾组织中维生素C含量,分光光度法测定小鼠肾组织中丙二醛含量和谷胱甘肽过氧化物酶活力,Griess反应法测定血浆及肾组织的一氧化氮含量。结果:与正常组相比,腹腔注射溴酸钾后小鼠肾组织的抗氧化能力指数、维生素C及谷胱甘肽过氧化物酶水平均有不同程度下降,同时血清肌酐水平、肾组织中丙二醛含量、血浆及肾组织中一氧化氮水平也不同程度升高。结论:溴酸钾诱导的氧化应激可导致肾组织损伤,其机制可能与肾组织的内源性抗氧化能力降低及氧自由基产生过多和蓄积有关。     

榴莲壳醇提物对应激性肝损伤小鼠的保护作用

目的探讨榴莲壳醇提物对拘束负荷诱发小鼠应激性肝损伤的保护作用。方法拘束负荷18h诱发小鼠应激性肝损伤，分别用赖氏法测定小鼠血浆丙氨酸转氨酶（ALT）活性、硫代巴比妥酸法测定血浆丙二醛（MDA）水平、HPLC法测定肝组织谷胱甘肽（GSH）含量、Griess化学法测定肝组织一氧化氮（NO）含量，荧光酶标仪测定体外抗氧化能力指数（ORAC）。结果与拘束负荷模型组相比，榴莲壳醇提物可以明显降低拘束负荷小鼠血浆ALT活性，有效地降低拘束负荷小鼠血浆MDA水平与肝组织NO含量，对肝组织GSH含量也有一定程度的改善作用；榴莲壳醇提物显示出较强的体外抗氧化能力。结论榴莲壳醇提物对拘束负荷诱发小鼠应激性肝损伤具有一定的保护作用，其作用机制可能与清除自由基和减少拘束负荷小鼠氧化应激水平有关。     

论"上火"与应激反应

“上火”是传统的概念，没有特异性的生理指标，且因人而异。“上火”是一种生理过程中不协调的应激性反应，是失去机体内环境稳定状态的身心疲劳综合症。“上火”为由内而生，余气所致，虽不为病，但持续的余气如不能及时疏解，则会引起机体的免疫力等生理机能低下，结果导致积劳成疾。“上火”是心理情绪反应，除对中枢神经递质影响引起的精神不振外，“上火”也可以诱发体内能量代谢低下带给人们疲倦感。常言有心宽火降，心静自然凉，尽管人们可以通过减少工作量，调整生活习惯与精神状态，改善生活环境达到“泻火”目的。但事实上，单凭心理上的调整可能远远不够，因此需要针对不同人群的各自特症以相应的药物及健康食品等加以改善。如今，随着现代工作和生活条件的改善，体力上的劳累已不再是人们疲劳的主要原因，随着现代人更多是在面对环境变化，生活习惯改变及物理化学等各种应激源带给人们的身心疲劳与“上火”。本文在简述近年来人们对抗应激研究现状的同时，也对“上火”与应激反应加以说明，旨在为“上火”这一现代社会的普遍现象的认识提供参考的信息。     

王老吉凉茶对氧化应激负荷小鼠脂代谢的影响

目的:研究王老吉凉茶对拘束负荷诱发小鼠脂代谢机能低下及体内过氧化状态的影响。方法:实验将雌性小鼠分为正常对照组、应激对照组、125mg·kg^-1人参皂苷对照组、125mg·kg^-1及500mg·kg^-1王老吉凉茶给药组,连续给药5d后拘束负荷20h,尾静脉注射10%脂肪乳剂(Intralipids?)40min后检测血脂消除能力、肠系膜脂肪酶活性,同时测定血浆过氧化状态及抗氧化能力。结果:与应激对照组相比,王老吉凉茶明显增加应激小鼠血浆甘油三酯消除速率及肠系膜脂肪组织中脂肪酶活性。此外,王老吉凉茶有效改善拘束负荷升高的血浆脂质过氧化反应产物丙二醛(MDA)含量,提高体内抗氧化能力指数(ORAC)水平。结论:王老吉凉茶改善拘束负荷诱发小鼠脂代谢机能低下,其作用机制可能与缓解机体内的过氧化状态有关。     

藤茶总黄酮对拘束负荷引起小鼠肝损伤的保护作用

目的研究藤茶总黄酮对拘束负荷造成小鼠肝损伤的保护作用。方法采用拘束负荷方法引起小鼠应激性肝损伤模型。赖氏法和TBARS法分别测定小鼠血浆中谷丙转氨酶活性和丙二醛含量,HPLC法测定肝组织匀浆中维生素C及谷胱甘肽水平,ORAC方法测定肝组织的抗氧化能力指数及藤茶总黄酮和二氢杨梅素的体外抗氧化活性。结果与拘束模型组相比,藤茶总黄酮可以明显提高拘束负荷小鼠肝组织匀浆的抗氧化能力指数、维生素C和谷胱甘肽水平,有效降低血浆中丙二醛含量和谷丙转氨酶水平。藤茶总黄酮及二氢杨梅素在体外显示出较强的抗氧化能力。结论藤茶总黄酮对拘束负荷引起的小鼠肝损伤具有一定的保护作用,其作用机制可能部分来自于清除自由基和抑制脂质过氧化过程。     

束缚应激反应对小鼠晶状体抗氧化能力指数的影响

目的探讨束缚应激反应对小鼠晶状体抗氧化能力指数的影响。方法建立小鼠束缚应激模型,采用荧光酶标仪测定晶状体的抗氧化能力指数,用高效液相-电化学检测器(HPLC-ECD)测定小鼠晶状体中谷胱甘肽含量。结果随着应激时间的延长,小鼠晶状体的抗氧化能力指数和谷胱甘肽含量与正常组相比均有不同程度下降。结论束缚应激状态下,晶状体的抗氧化能力指数和谷胱甘肽水平均相应降低,其机制可能与晶状体内的内源性抗氧化能力降低及氧自由基产生过多和蓄积有关。