慢性再生障碍性贫血患者中医证型与T-bet/GATA-3相关信号通路、Th亚群的相关性

目的从Th细胞失衡、转录因子T-bet/GATA-3及相关信号通路水平分析其与慢性再生障碍性贫血(CAA)中医证型的关系。方法选择CAA患者,辨证分为脾肾阳虚组和脾肾阴虚组各20例,另选20例健康者做对照(正常组),采用实时荧光定量PCR检测CAA患者外周血单个核细胞(PBMNC)T-bet、GATA-3及STAT4、STAT6mRNA表达,采用流式细胞术、酶联免疫吸附法检测CAA患者外周血Th1、Th2比例及PBMNC培养上清IFN-γ、IL-12、IL-4水平。结果脾肾阴虚组患者PBMNCT-bet、STAT4、T-bet/GATA-3比值、Th1、IFN-γ、IL-12均高于脾肾阳虚组(P<0.05),并且此2组患者亦高于正常组(P<0.05),而GATA-3、STAT6、IL-43组比较则无统计学差异(P>0.05)。结论与脾肾阳虚型患者相比,CAA脾肾阴虚型存在更严重的IFN-γ/T-bet、IL-12/STAT4通路异常活化和Th1偏移,脾肾阴虚型存在更明显的免疫异常状态。     

补肾强督方对强直性脊柱炎患者外周血IL-18、IFN-γ、IL-4 mRNA表达水平的影响

目的探讨补肾强督方治疗强直性脊柱炎(AS)的可能作用机制。方法30例AS患者予补肾强督方进行治疗,疗程为6个月。研究AS患者及健康志愿者外周血中白细胞介素18(IL-18)、干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素4 mRNA(IL-4 mRNA)表达水平及经补肾强督方治疗前后AS患者外周血中IL-18、IFN-γ、IL-4 mRNA表达水平的变化。结果AS患者外周血单个核细胞IL-18 mRNA、IFN-γ mRNA表达水平及IFN-γ mRNA/IL-4 mRNA较正常对照组显著增高(P<0.001)。经用补肾强督方治疗后,IL-18 mRNA、IFN-γ mRNA表达水平及IFN-γ mRNA/IL-4 mRNA明显下降(P<0.001)。AS患者红细胞沉降率水平与IL-18 mRNA、IFN-γ mRNA、IL-4 mRNA表达水平呈极显著相关(P<0.001);C反应蛋白水平与IL-18 mRNA表达水平呈显著相关(P<0.05),与IFN-γ mRNA表达水平呈非常显著相关(P<0.01)。结论AS患者外周血中IL-18 mRNA、IFN-γ mRNA水平比正常组明显升高;用补肾强督方治疗后,患者IL-18 mRNA、IFN-γ mRNA水平均有明显下降。     

补肾固表方对复感儿Th细胞培养上清液中γ-干扰素与白细胞介素-4蛋白含量的影响

目的:观察补肾固表方对反复呼吸道感染间歇期患儿外周血Th1、Th2特征性细胞因子的影响。方法:采集20例复感儿治疗前后外周血,采用流式细胞仪分选CD4+T细胞,培养36h后,ABC-ELISA法检测其培养上清液中的γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)蛋白含量,并与10例健康对照组进行比较。结果:补肾固表方治疗后IFN-γ升高(P<0.01),IL-4下降(P<0.01),与正常组相比,无显著性差异(P>0.05)。结论:补肾固表方可使患儿IFN-γ含量增加,IL-4含量下降,使Th细胞因子的蛋白表达恢复正常。     

补肾活血法治疗慢性再生障碍性贫血临床研究

目的:观察补肾活血法治疗慢性再生障碍性贫血(chronic aplastic anemia,CAA)的临床疗效。方法:选取68例CAA患者,并按照随机数字表法将其随机分为观察组和对照组,每组34例。对照组患者给予常规的西药治疗,观察组患者采用补肾活血法治疗。结果:观察组有效率为91.17%,高于对照组的73.53%,组间比较,差异具有统计学意义(P0.05);两组患者的CD8和CD4/CD8与治疗前相比差异显著(P0.05),组间比较,差异也均具有统计学意义(P0.05);两组患者的IFN-γ、TNF-α、IL-2水平较治疗前均有所降低,组间比较,其中TNF-α、IL-2水平的差异具有统计学意义(P0.05)。结论:补肾活血法治疗CAA疗效确切,能够通过改善患者T淋巴细胞的比例以及降低IFN-γ、TNF-α和IL-2的水平以缓解对造血功能的抑制,最终达到促进恢复造血功能的目的。     

补肾化瘀法治疗再生障碍性贫血的疗效及其对血清IFN-γ、TNF-α水平的影响

目的:观察补肾化瘀中药复方治疗慢性再生障碍性贫血(简称CAA)的疗效以及治疗前后细胞因子IFN-γ、TNF-α水平水平的变化。方法:采用ELISA法检测血清γ-IFN、TNF-α水平,观察补肾化瘀中药治疗前后两者水平的变化。结果:CAA患者造血负调控因子IFN-γ、TNF-α水平明显高于正常(P<0.05,P<0.01),补肾化瘀中药治疗后IFN-γ、TNF-α水平明显下降(P<0.05),与CsA对照组作用基本相似(P>0.05)。提示:补肾化瘀中药能降低造血负调控因子IFN-γ、TNF-α水平,从而减轻造血负调控因子对骨髓的造血抑制,促进造血功能改善和恢复。     

补肾泻肝方治疗再生障碍性贫血临床疗效与IFN-γmRNA基因表达关系的研究

目的 :观察补肾泻肝方治疗再生障碍性贫血临床疗效与 IF N-γm RNA基因表达关系。方法 :2 1例患者均以补肾泻肝方为主治疗 ,用 RT-PCR技术分析 IFN-γ基因表达。结果 :2 1例患者中有效 12例 ,皆为肾阴虚、肝火伏热型 ;无效9例 ,皆为肾阳虚、阴亏瘀热型。用 RT-PCR技术分析 IF N-γ基因表达 ,12例中有 9例阳性 ,治疗后阳性者 2例 ,阴性者 7例 ;而无效的 9例中无一例阳性。结论 :补肾泻肝方治疗再障疗效较好 ,IFN -γm RNA基因表达在中医辨证分型和预测补肾泻肝方的疗效与治疗机理方面有重要的作用。     

慢性再生障碍性贫血辨证分型与TNF-α、IFN-γ水平相关性研究

目的探讨慢性再生障碍性贫血(CAA)中医辨证分型与TNF-α、IFN-γ水平的相关性,为CAA的中医辨证分型提供客观化依据。方法选择90例患者(脾肾阳虚型、肾阴阳两虚型、肝肾阴虚型各30例),以15例健康志愿者为对照,采用ELISA法检测其血清、骨髓单个核细胞培养上清TNF-α、IFN-γ分泌水平;RT-PCR法检测骨髓单个核细胞TNF-α、IFN-γmRNA表达水平。结果患者血清、骨髓单个核细胞培养上清TNF-α、IFN-γ分泌水平均明显高于正常组(P<0.05,P<0.01);患者三组按照脾肾阳虚组、肾阴阳两虚组、肝肾阴虚组顺序,其TNF-α、IFN-γ水平逐渐升高,两两比较差异显著(P<0.05);TNF-α、IFN-γmRNA表达水平,脾肾阳虚组最低,肝肾阴虚组最高,而肾阴阳两虚组介于两者之间。结论TNF-α、IFN-γ可以作为CAA中医辨证分型的客观化依据。     

补肾活血方与益气补肾方治疗慢性再生障碍性贫血对照研究

目的:观察补肾活血方与益气补肾方治疗慢性再生障碍性贫血的临床效果。方法:94例随机分为两组各47例。对照组用补肾益气方治疗,观察组用补肾活血方治疗,对比两组治疗前后外周血IFN-γ、TNF-α和临床治疗有效率。结果:总有效率观察组与对照组比较差异无统计学意义(P0.05),治疗后血清IFN-γ和TNF-α观察组低于对照组(P0.05)。结论:补肾活血方和补肾益气方治疗慢性再生障碍性贫血均有明显临床效果,但补肾活血方能更显著地降低造血负调控因子水平,改善造血组织血供。     

生血合剂环孢菌素治疗慢性再障临床对照研究

目的:研究健脾补肾活血中药复方生血合剂治疗慢性再生障碍性贫血(CAA)的疗效和安全性,并比较CAA不同中医证型患者的疗效差异。方法:纳入62例CAA患者分为治疗组32例和对照组30例,治疗组患者辨证分为脾肾阳虚型(9例)和脾肾阴虚型(23例),脾肾阳虚型患者服用生血合剂1号,脾肾阴虚型患者服用生血合剂2号,对照组服用环孢菌素A(CsA),两组均配合支持治疗,治疗6月后,进行疗效观察和安全性评价。结果:治疗组、对照组在临床疗效、外周血象/骨髓象改善方面比较无明显差异(P>0.05),但治疗组在中医证候改善方面明显优于对照组(P<0.05),且生血合剂发生不良反应也明显少于CsA。脾肾阳虚型患者在临床疗效、血象改善方面优于脾肾阴虚型(P<0.05)。结论:生血合剂治疗CAA疗效与CsA相似,但在中医证候改善方面,生血合剂则明显优于CsA,且生血合剂治疗未见明显不良反应。CAA脾肾阳虚型治疗效果优于脾肾阴虚型,提示CAA"阳虚易治,阴虚难调"。     

消痤方对Ⅳ度痤疮患者细胞因子IL-4及IFN-γ水平的影响

目的:观察消痤方对Ⅳ度痤疮患者血清白细胞介素-4(IL-4)、γ-干扰素(IFN-γ)水平的影响。方法:40例Ⅳ度痤疮患者口服自拟消痤方治疗,每天1剂,疗程8周。检测用药前后血清中IL-4和IFN-γ水平,设30例健康人为对照组。结果:治疗组患者在服用消痤方前血清IL-4、IFN-γ水平与对照组比较,明显高于对照组(P<0.01)。治疗组治疗前后血清IL-4、IFN-γ水平比较均有明显差异(P<0.01),治疗后血清IL-4、IFN-γ与对照组比较,差异无显著性意义(P>0.05)。结论:消痤方能够调节Ⅳ度痤疮患者IL-4和IFN-γ细胞因子水平。     

补肾泻肝方对免疫介导再障模型小鼠的影响

为研究补肾泻肝方(主药：熟地黄、制首乌、补骨脂、菟丝子、淫羊藿、牡丹皮、黄连、水牛角等)治疗免疫介导再障的机理。Balb／C小鼠经^60Co5．5Gy γ射线照射后由尾静脉输入取自DBA／2小鼠胸腺淋巴结混合细胞悬液形成免疫介导再障模型。用补肾泻肝方灌喂模型小鼠后检测外周血象、T细胞亚群，应用RT-PCR技术检测IFN-γ基因表达。结果：与模型组相比，治疗组小鼠的周围血象及CD8明显升高、IFN-γ基因高表达则明显减弱。提示：调节免疫紊乱状态、减弱再障时的IFN-γ基因高表达，进而影响造血干／祖细胞增殖、分化可能是该方治疗再障的机理之一。     

益元生血方对慢性再生障碍性贫血患者外周血γ-干扰素与肿瘤坏死因子-α的影响

目的 :探讨益元生血方对慢性再生障碍性贫血 (CAA)患者外周血γ 干扰素 (γ IFN)、肿瘤坏死因子 α(TNF α)的影响。方法 :36例CAA患者分为肾阴虚组 ( 2 1例 )和肾阳虚组 ( 15例 ) ,采用微量细胞病变抑制法及L595细胞毒法 ,检测使用益元生血方前后外周血γ IFN、TNF α水平 ,并与正常组 ( 15名 )比较。结果 :外周血γ IFN、TNF α水平 ,治疗总组与正常组比较 ,治疗前有明显差异 (P <0 0 5 ,P <0 0 1) ,治疗后无明显差异 (P >0 0 5 ) ,肾阴虚组与肾阳虚组比较 ,治疗前后均有明显差异 (P <0 0 5 ,P <0 0 1) ,且有效率肾阳虚组高于肾阴虚组。结论 :益元生血方是通过降低CAA患者体内γ IFN、TNF α水平 ,调节紊乱的免疫状态而发挥治疗作用。     

“益肾生血方”联合西药治疗慢性再生障碍性贫血患者血清IFN-γ、IL-4和T细胞亚群的变化

目的:通过慢性再生障碍性贫血(CAA)患者血清IFN-γ、IL-4和T细胞亚群的变化,探讨"益肾生血方"联合西药治疗CAA患者的疗效。方法:将CAA患者40例随机分为治疗组和对照组,选取体检健康者20名为正常组。对照组以环孢素软胶囊联合安雄、司坦唑醇口服,治疗组在以上治疗的基础上加用"益肾生血方"中药,采用流式细胞技术检测治疗组、对照组治疗前后血清IFN-γ、IL-4和T细胞亚群的变化。结果:治疗组IFN-γ显著下降,有显著性差异(P0.05),而IL-4下降不明显。结论:CAA患者发病与免疫功能异常密切相关,"益肾生血方"可明显提高慢性再生障碍性贫血治疗效果。     

久泻灵颗粒对脾肾阳虚型溃疡性结肠炎大鼠相关细胞因子的影响

目的探讨久泻灵颗粒治疗脾肾阳虚型溃疡性结肠炎的作用机制。方法采用灌服大黄水煎液+肌肉注射氢化可的松并结合2,4,6-三硝基苯磺酸+乙醇灌肠建立动物模型。将90只大鼠随机分为空白组、模型组、柳氮磺吡啶组和久泻灵颗粒7、14、21 d组,各治疗组给予相应药物干预。采用酶联免疫法检测各组大鼠血清及结肠组织中白细胞介素(IL)-1、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及干扰素-γ(IFN-γ)含量。结果与空白组比较,模型组大鼠血清及结肠组织中IL-1、IL-6、TNF-α及IFN-γ含量均升高(P0.05);与模型组比较,各治疗组大鼠血清及结肠组织中IL-1、IL-6、TNF-α及IFN-γ含量均降低(P0.05),其中久泻灵颗粒21 d组作用最明显(P0.05)。结论久泻灵颗粒通过调节脾肾阳虚溃疡性结肠炎模型大鼠IL-1、IL-6、TNF-α及IFN-γ的分泌达到抑制炎症发生,从而保护结肠黏膜。     

龙胆泻肝汤加减对肝胆火炽型前葡萄膜炎患者外周血中炎性因子的影响

目的:探讨龙胆泻肝汤加减对肝胆火炽型前葡萄膜炎患者的治疗作用及对其外周血中炎性因子的影响。方法:肝胆火炽型前葡萄膜炎患者86例随机分为两组,44例患者采用龙胆泻肝汤加减联合西药治疗,42例患者采用单纯西药治疗,观察其疗效。并用ELISA检测两组患者治疗前后外周血中IFN-γ、IL-17、IL-10的表达。结果:观察6个月后发现,龙胆泻肝汤治疗组治愈率明显优于西药治疗对照组,视力提高类于西药治疗对照组,复发率明显低于西药治疗对照组。龙胆泻肝汤治疗组外周血中IFN-γ、IL-17的含量治疗后明显降低,与对照组比较差异均具有统计学意义(P 0. 05),IL-10的含量治疗后明显升高,与对照组比较差异均具有统计学意义(P 0. 05)。结论:龙胆泻肝汤加减治疗肝胆火炽型前葡萄膜炎可以明显提高患者的视力,提高治愈率,减少患者的复发,可能是通过调控肝胆火炽型前葡萄膜炎患者外周血中炎性因子的表达达到治疗作用。     

益髓生血颗粒加味对地中海贫血患者肾虚三证造血相关细胞因子的影响

目的:初步了解益髓生血颗粒加味对肾虚三证地中海贫血患者造血相关细胞因子的影响。方法:收集符合西医诊断标准的地中海贫血患者28例,按照中医辨证分型标准分为肾精不足证组(10例),肾阳虚组(7例),肾阴虚组(11例)。肾精不足证的地中海贫血患者服用益髓生血颗粒,肾阳虚证的地中海贫血患者服用益髓生血颗粒加味淫羊藿,肾阴虚证的地中海贫血患者服用益髓生血颗粒加味女贞子,疗程分别为3个月。检测治疗前后地中海贫血患者血清细胞因子(IL-1、IL-2、γ-INF、TNF-β)水平的变化。结果:肾精不足证、肾阴虚组的地中海贫血患者分别经经益髓生血颗粒及益髓生血颗粒加味女贞子治疗后,患者IL-1水平与疗前相比显著升高(P<0.05);γ-INF的水平显著降低(P<0.05);IL-2、TNF-β水平与疗前相比,有降低的趋势,但无统计学意义(P>0.05)。肾阳虚证的地贫患者经益髓生血颗粒加味淫羊藿治疗后,患者γ-INF、TNF-β、IL-2水平与疗前相比有降低的趋势,IL-1水平与疗前相比有升高的趋势,但均无统计学意义(P>0.05)。结论:补肾益髓法益髓生血颗粒加味改善地中海贫血患者肾虚三证患者的临床症状,可能与上调造血正调控细胞因子IL-1水平,下调造血负调控细胞因子IL-2、TNF-β、γ-INF水平有关,其客观规律仍需要进一步临床试验进行验证。     

补肾解毒方调控IL-12、IFN-γ水平对辐射后小鼠免疫防护作用研究

目的:探讨补肾解毒方对辐射后小鼠血清白细胞介素-12(IL-12)、干扰素-γ(IFN-γ)分泌水平的影响。方法:将90只小鼠随机分为空白组、辐射组、氨磷汀组、补肾解毒方防治结合组和补肾解毒方预防组,每组18只,并建立各组小鼠模型。在实验开始后第11天,除空白组外所有小鼠均接受一次性4Gy 60Coγ射线全身辐照,并于辐射后第1天、第7天、第14天每组随机抽取6只进行眼球取血,分离血清,应用ELISA法检测血清中IL-12、IFN-γ水平。结果:辐射后第1天,氨磷汀组IL-12水平高于辐射组(P<0.05),各组间IFN-γ水平无差异;辐射后第7天,防治组IL-12水平高于辐射组(P<0.05),防治组IFN-γ水平高于辐射组与氨磷汀组(P<0.01,P<0.05),预防组IFN-γ水平高于辐射组(P<0.05),空白组IFN-γ水平高于辐射组和氨磷汀组(P<0.05);辐射后第14天,各组IL-12、IFN-γ水平均无差异。结论:辐射后补肾解毒方可通过提高分泌血清中IL-12和IFN-γ的水平,起到增强辐射后小鼠免疫系统防护作用。     

补肾生血法对慢性再生障碍性贫血患者骨髓ERK信号通路相关蛋白表达的影响

目的:探讨补肾生血法对CAA患者骨髓细胞外调节信号通路相关蛋白的表达变化及其意义。方法:将60例CAA患者按照中医辨证分为肾阴虚型33例,肾阳虚型27例,均予以补肾生血之中药补髓生血颗粒治疗,另取20例健康志愿者作为正常对照组。采用蛋白质印迹方法(Western-blot)观察CAA患者治疗前后骨髓单个核细胞ERK1、ERK2的蛋白水平表达。结果:CAA患者治疗前骨髓单个核细胞ERK1、ERK2均低于正常对照组(P均0.05),经补肾中药治疗后,ERK1、ERK2表达均有所上升(P均0.05);治疗后肾阳虚型的ERK1、ERK2上升程度均较肾阴虚型明显(P均0.05)。结论:CAA患者骨髓单个核细胞ERK1、ERK2均表达异常,提示ERK信号通路异常与CAA发病相关,补肾中药可能通过调节ERK信号通路相关蛋白ERK1、ERK2的表达来改善CAA骨髓造血功能,且存在中医证型的疗效差异。     

龙胆泻肝胶囊治疗肝胆湿热型分泌性中耳炎临床研究

目的:研究龙胆泻肝胶囊治疗肝胆湿热型分泌性中耳炎(SOM)的效果。方法:选取78例肝胆湿热型分泌性中耳炎患者,按随机数字表法分为试验组和对照组各39例。2组均采用鼓膜穿刺术治疗,对照组术后给予头孢克洛和氯雷他定抗感染治疗,试验组给予龙胆泻肝胶囊。评价2组治疗效果,检测治疗前后血清干扰素γ(IFN-γ)和白细胞介素-4(IL-4)水平,计算IFN-γ/IL-4,进行中医证候评分,观察患耳含积液情况。结果:试验组总有效率为92.31%,高于对照组71.79%(P<0.05)。治疗前,2组IFN-γ、IL-4和IFN-γ/IL-4比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,2组IFN-γ、IL-4和IFN-γ/IL-4较治疗前降低,且试验组IFN-γ、IL-4和IFN-γ/IL-4均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗前,2组各项中医症状评分比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,2组各项中医症状评分及总分较治疗前降低,试验组各项中医症状评分及总分均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。试验组耳内含积液率为71.79%,低于对照组89.74%(P<0.05)。结论:采用龙胆泻肝胶囊治疗肝胆湿热型分泌性中耳炎,疗效令人满意,能够显著改善患者症状,可下调IFN-γ、IL-4表达,调节Th1/Th2平衡,值得临床推广应用。