形态学实验教学中数码显微互动系统的应用与管理心得

数码显微互动系统把现代信息技术与数码光学及显微镜的结合充分地融入了高等医学教育的实验课堂,师生不仅能共享图像,还能及时进行语音交流,存贮的图像信息可通过网络系统实现异地共享等优势。在形态学实验教学中真正实现师生之间多方位互动教学,培养学生动手能力,激发学生创新思维,深受欢迎。同时该系统的应用也对教师的教学方法和实验室的管理提出严格的要求,所以加强实验室的管理对提高实验教学效果及其重要。     

一个纤维蛋白原γ链g．7590G〉T杂合突变导致遗传性低纤维蛋白原血症家系的分析CSCD

目的对一个遗传性低纤维蛋白原血症家系进行基因突变分析,并探讨其发病的分子机制。方法采集先证者及其家系成员（3代共9人）的外周血样,用自动化血凝仪分析凝血酶原时间（prothrombin time,PT）、活化部分凝血活酶时间（activated partial thromboplastin time,APTT）和凝血酶时间（thrombin time,TT）;用凝血酶凝固法（Clauss法）与免疫比浊法分别测定血浆纤维蛋白原的活性（fibrinogen activity,Fg∶C）和抗原水平（fibrinogen antigen,Fg∶Ag）;用PCR扩增纤维蛋白原FGA、FGB和FGG基因的所有外显子及其侧翼序列,对PCR产物进行纯化后直接测序;用Swiss软件对突变蛋白进行预测。结果先证者APTT、PT和TT均延长,Fg∶C（0.69 g/L）和Fg∶Ag（0.72 g/L）明显降低;其母亲、外祖母Fg∶C分别为0.99 g/L和0.83g/L,Fg∶Ag为1.02 g/L和0.87 g/L,均有不同程度的降低。其他家系成员的凝血指标均在正常范围。先证者FGG基因第8外显子存在7590位置的G〉T杂合突变,导致纤维蛋白原D结构域的313位丝氨酸突变为异亮氨酸（Ser313Ile）;其母亲和外祖母亦为Ser313Ile杂合子,其他家系成员则为野生型。模型分析显示Ser313突变为Ile后,同Asn319、Asp320之间的氢键消失,可能影响钙离子的正常结合。此外,该突变导致中性非极性的Ser变成了非极性、疏水性的Ile,使侧链变长,可能影响纤维蛋白原的折叠、构象及稳定性,导致血浆纤维蛋白原水平降低。结论纤维蛋白原γ链Ser313Ile的杂合突变是引起该家系遗传性低纤维蛋白原血症的原因。     

HLA-B27抗原检测与强直性脊柱炎的关系

强直性脊柱炎 (ankylosingspondylitis ,AS)主要症状是腰、骶及下肢关节疼痛 ;晚期患者脊柱僵硬呈板状 ,活动受限 ,本病致残率高。近年来 ,随着白细胞抗原 (HLA)与疾病关系的研究不断深入 ,其中最具典型意义的当数HLA B2 7抗原与强直性脊柱炎二者之间呈高度相关性。我院自 2 0 0 2年开展HLA B2 7抗原检测 ,现将结果报道如下。1　材料和方法1 1　研究对象来自我院 2 0 0 2年至今病房和门诊的AS患者 ,均符合 1984年纽约修订标准 ,男性 14 5例 ,女性 4 0例 ,年龄 7～ 70岁。1 2　仪器和试剂流式细胞仪为美国Coulter公司生产 ,型号EPIC…     

肾康注射液治疗急性肾衰46例

<正>急性笔者自2007年1月至2011年10月采用肾康注射液治疗46例急性肾衰取得较好疗效,现报告如下。资料与方法 1病例选择46例病例中,男25例,女21例,年龄22⁶0岁,符合急性肾功能衰竭诊断标准(1982年全国危重病急救医学学术会议拟定标准)[1]。其中2例系外伤所致急性肾衰,2例为肾综合征出血热,1例为前列腺手术后,2例为梗阻性肾     

IL-1、IL-6、TNF-α及IFN-γ在脾肾阳虚型溃疡性结肠炎模型大鼠中的表达和意义

目的 通过对脾肾阳虚型溃疡性结肠炎模型大鼠血清及结肠组织中IL-1、IL-6、TNF-α及IFN-γ含量的检测,探讨它们在溃疡性结肠炎发生发展过程中的作用。方法 采用灌服大黄水煎液 肌肉注射氢化可的松并结合TNBS（2,4,6-三硝基苯磺酸） 乙醇灌肠建立动物模型。将60只大鼠随机分为空白组、脾肾阳虚型溃疡性结肠炎模型7天、14天及21天组,采用酶联免疫法检测各组大鼠血清及结肠组织中IL-1、IL-6、TNF-α及IFN-γ的含量。结果 与空白组比较,模型组大鼠血清及结肠组织中IL-1、IL-6、TNF-α及IFN-γ含量明显升高（P<0.05）;尤以模型21天组最为明显。结论 促炎性细胞因子IL-1、IL-6、TNF-α及IFN-γ在脾肾阳虚型溃疡性结肠炎发病过程中起重要作用。     

IL-1、IL-6、TNF-α及IFN-γ在脾肾阳虚型溃疡性结肠炎模型大鼠血清及组织中的表达

目的 通过对脾肾阳虚型溃疡性结肠炎(UC)模型大鼠血清及结肠组织中IL-1、IL-6、TNF-α及IFN-γ表达水平的检测, 探讨它们在UC发生发展过程中的作用。方法 采用灌服大黄水煎液+肌肉注射氢化可的松并结合TNBS(2,4,6-三硝基苯磺酸)+ 乙醇灌肠建立脾肾阳虚型UC动物模型。将60只大鼠随机分为空白组、脾肾阳虚型UC模型7、14d及21d组, 采用酶联免疫法检测各组大鼠血清及结肠组织中IL-1、IL-6、TNF-α及IFN-γ的含量。结果 与空白组比较, 脾肾阳虚型UC模型组大鼠血清及结肠组织中IL-1、IL-6、TNF-α及IFN-γ含量明显升高(P<0.05);尤以模型21d组最为明显。结论 促炎性细胞因子IL-1、IL-6、TNF-α及IFN-γ在脾肾阳虚型UC发病过程中起重要作用。     

肿瘤患者CD4+CD25+调节性T细胞流式细胞术分析

目的:分析比较肿瘤患者和健康人外周血CD4+CD25+调节性T细胞的特点,为肿瘤免疫学研究及治疗探索新方法.方法:收集并分离30例肿瘤患者和32例健康人的外周血单个核细胞(PBMCs),用荧光标记的抗人CD4及抗人CD25单抗标记肿瘤患者和健康人PBMCs细胞,FCM检测CD4+CD25+Treg细胞,分析CD4+CD25+Treg细胞在肿瘤患者和健康人中的差别.结果:肿瘤患者的CD4+CD25+Treg细胞百分数明显高于健康人(年龄<55者62.4 vs 40.4;年龄≥55者53.1 vs 31.0,P<0.05).结论:肿瘤患者的CD4+CD25+Treg细胞高于健康对照,为肿瘤免疫治疗提供新策略,通过删除CD4+CD25+Treg细胞,有可能增强抗瘤免疫反应.     

当归与激素对哮喘小鼠肺组织NF-κB的表达及阴虚证的影响

目的探讨当归与激素及其合用对哮喘小鼠肺组织NF-κB的表达及阴虚证的影响。方法小鼠分为空白对照组、阴虚模型组、哮喘模型组、氢化可的松组、当归组、合用组,采用卵蛋白经致敏、激发来复制哮喘模型、利用氢化可的松来复制阴虚模型,在观测平喘(哮喘行为学、肺功能和肺组织病理学)与阴虚证(进食及饮水量、自主活动、c AMP及c GMP)指标的同时探讨当归与激素及其合用治疗哮喘的机制(细胞因子、NF-κB及其基因表达)。结果 8g·kg~(-1)当归与0.05g·kg~(-1)氢化可的松及其合用可明显缓解哮喘发作及其症状,提高肺功能,改善肺组织病理学,降低BALF中TNF-α、IL~(-1)β及IL-6水平,抑制NF-κB蛋白及其基因(1.153±0.098、1.052±0.065、0.997±0.047,哮喘模型组为1.494±0.101)表达。同时,合用后当归可缓解氢化可的松所致小鼠进食及饮水量增加、自主活动增多、血清c AMP、c AMP/c GMP升高等阴虚证指标。结论当归与激素及其合用具有明显的平喘作用,抑制NF-κB通路表达是其平喘机制之一;同时合用后当归可缓解激素引起的阴虚症状。     

参苓白术散对脾虚湿困型溃疡性结肠炎大鼠结肠p38MAPK及TNF-α、IL-4的干预作用

目的:研究参苓白术散对脾虚湿困型溃疡性结肠炎大鼠结肠组织p38MAPK、TNF-α及IL-4基因、蛋白表达的干预作用。方法:SPF级Wistar大鼠60只,按随机数字表法标记,按性别不同分笼饲养。取雌、雄大鼠各5只作为空白组,其余大鼠依据性别不同分笼饲养;采用复合因素+TNBS/乙醇刺激法(乙醇浓度50%)构建脾虚湿困型UC大鼠模型;造模成功后,依随机数字表法将模型大鼠分为模型组、参苓白术散低、中、高治疗组,剂量分别为6 g/(kg·d)、12 g/(kg·d)、24 g/(kg·d)及阳性对照组,柳氮磺胺吡啶组,SASP组0. 2 g/(kg·d),每组各10只,雌雄各半、分笼饲养。其余各组大鼠均以蒸馏水灌胃治疗,剂量:10 g/(kg·d),疗程3周,每日灌胃1次。免疫组化法检测各组实验大鼠结肠组织p38MAPK、TNF-α、IL-4的蛋白含量表达; RT-PCR法检测UC各组大鼠结肠组织内p38MAPK、TNF-α及IL-4的基因表达水平。结果:与空白组比较,模型组大鼠结肠组织内p38MAPK、TNF-α蛋白含量、基因表达水平明显升高(P 0. 01或P 0. 05); IL-4的含量蛋白、基因表达水平显著降低(P 0. 01或P 0. 05);与模型组相比较,阳性对照组、参苓白术散中、高剂量组大鼠p38MAPK、TNF-α基因、蛋白表达水平降低显著(P 0. 01或P 0. 05); IL-4的蛋白含量、基因表达水平明显升高(P 0. 01或P 0. 05),尤以参苓白术散高剂量组及阳性对照组作用显著。结论:参苓白术散可明显调节脾虚湿困型UC大鼠病变部位结肠组织内p38MAPK、TNF-α及IL-4基因及蛋白表达的水平。     

地黄饮子孵育BMSCs移植对脑梗死大鼠MMP-9和TIMP-1的影响

目的研究地黄饮子孵育骨髓间充质干细胞（bone marrow stromal stem cells,BMSCs）移植对脑梗死大鼠脑组织中基质金属蛋白酶-9（MMP-9）和金属蛋白酶组织抑制剂-1（TIMP-1）的影响,探讨其对大脑的保护作用。方法将健康SPF级Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、BMSCs组、维甲酸组和地黄饮子组,用线栓法制成Wistar大鼠大脑中动脉缺血模型（MCAO）,术后24 h假手术组、模型组大鼠经尾静脉注射生理盐水,其余各组大鼠经尾静脉输入相应药物孵育的BMSCs。移植后7 d,14 d断头取脑,用免疫组化法检测脑组织中MMP-9和TIMP-1的表达情况。结果与假手术组比较,模型组MMP-9表达明显增加（P〈0.05）;地黄饮子组、维甲酸组、BMSCs组与模型组比较,MMP-9的表达均降低（P〈0.05）,但仍高于假手术组。模型组TIMP-1的表达明显降低（P〈0.05）,各治疗组均增高（P〈0.05）。结论地黄饮子孵育BMSCs可通过调节MMP-9与TIMP-1的表达,进而发挥脑保护作用。