延龄草根茎组织培养研究

目的建立延龄草组织培养体系,为解决资源问题、快速繁殖延龄草奠定基础。方法从延龄草子房、叶、茎、地下根茎、根尖等材料中筛选出适宜的外植体,筛选适宜的无机盐离子(MS、1/2MS和B5)、细胞分裂素(BA、KT和2-ip)、生长素(IAA、NAA和IBA)种类和浓度,探索延龄草根茎愈伤组织诱导和芽分化的条件。结果仅地下根茎可诱导愈伤组织,愈伤组织诱导率约36.4%;低浓度的无机盐离子浓度利于愈伤组织的诱导,BA是愈伤组织诱导的主要因素。结论根茎是诱导延龄草愈伤组织的最适宜外植体,愈伤组织诱导的最适培养基为1/2MS+BA 2.5 mg·L~(-1)+IAA 1.5 mg·L~(-1)+3%蔗糖+0.6%琼脂,芽分化最适培养基为1/2MS+BA 2.0 mg·L~(-1)+IAA 1.5 mg·L~(-1)+3%蔗糖+0.6%琼脂。     

延龄草组织培养研究

目的：探索延龄草Ｔｒｉｌｉｕｍｔｓｅｈｏｎｏｓｋｉ组织培养繁殖技术，为保护和利用这一珍贵药用植物提供新的技术途径。方法：以ＭＳ培养基为基本培养基，附加不同浓度的ＢＡ，ＩＡＡ，ＮＡＡ，玉米素，对不同器官，不同取材时期的延龄草外植体进行愈伤组织诱导和芽分化研究。结果：ＢＡ和ＩＡＡ有利于延龄草愈伤组织的诱导。生长旺盛的根茎是较适宜的培养器官，其愈伤组织诱导频率达２１９％，且较容易分化根茎而形成植株。结论：组织培养繁殖延龄草是一种可行的、具有应用潜力的生物技术方法。而如何进一步提高愈伤组织分化小根茎的频率，是建立延龄草组培繁殖技术的关键。     

朱砂根的组织培养与植株再生

目的:研究药用植物朱砂根组培快繁技术,为其产业化生产提供科学依据.方法:考察不同基本培养基、植物激素、添加物等对腋芽诱导、增殖及植株再生的影响.结果:以朱砂根带芽茎段为外植体,初代培养腋芽诱导的最佳培养基为MS+6-BA 0.5 mg·L~(-1)+NAA 0.1 mg·L~(-1).腋芽增殖的最佳培养基配方为MS+6-BA 2.0 mg·L~(-1)+NAA 0.1 mg·L~(-1)+KT 0.5 mg·L~(-1).生根培养基为1/2MS+IBA 0.2 mg·L~(-1);添加0.2%的活性炭可明显促进根的生长,提高生根率、生根数.最有利于朱砂根无菌苗移栽存活的基质类型为河沙.珍珠岩-蛭石(1:1:1),或蛭石.珍珠岩(1:1),成活率在80%以上.结论:通过腋芽增殖快繁育苗技术可获得完整植株,达到快速繁殖的目的.     

广佛手组织培养中的污染及防治研究

目的:研究广佛手组织培养中的污染问题,并提出防治措施.方法:采取广佛手顶芽、带节茎及叶片为材料,以MT为基本培养基,附加0.1mg·L-1的6-BA,对影响外植体消毒效果的因素进行了研究.结果:采用0.1%升汞(HgCl2)消毒6min后再用50mg/L的头孢噻肟(Cefotaxime)浸泡30min,消毒效果最好;广佛手外植体在夏季污染率和死亡率均最高,冬季广佛手的污染率和死亡率均降至最低,成活率最高,达67.9%;不同外植体中顶芽的污染率最低,成活率最高,叶片次之,带节茎的污染率最高.结论:升汞与抗生素配合使用,消毒效果较好,能明显降低污染率与死亡率,提高成活率;冬季取材,外植体带菌率较低,可以提高广佛手组织培养的成功率.     

五指毛桃组织培养研究

以五指毛桃茎节为外植体,1/2MS培养基加不同植物生长调节剂的组培实验结果表明:不定芽最适诱导培养基为1/2MS BA1.0 mg/L NAA1.0mg/L和1/2MS BA1.5 mg/L NAA0.5 mg/L,增殖培养基为1/2MS 6-BA0.5 mg/L,生根培养基为1/2MS IBA 1mg/L.本文还对组织培养过程中,导致褐变产生的因素及防止褐变的方法进行了探讨.     

杜鹃花组织培养研究概况

杜鹃花(Rhododendron)的组织培养受基因型、外植体的来源、培养基种类、培养条件、生长调节物质、培养程序等诸多因素的影响,故具有一定的复杂性.文章概述了影响杜鹃花组织培养的关键因素:外植体种类,外植体消毒灭菌的方法,基本培养基的选择,根的诱导方法等的国内外研究现状,以期能给杜鹃花的组培研究带来一些借鉴价值.     

山大颜种子无菌萌发实验研究

目的建立基于组织培养技术的山大颜种子无菌萌发方法。方法观察、采集、记录山大颜果实、种子特征;以不同采收时期新鲜剥去种皮的种子为实验材料,分别进行无菌萌发实验,考察山大颜种子最佳采收时期;以剥去种皮的山大颜成熟种子为外植体,筛选适宜的外植体消毒时间;考察山大颜种子在4种不同培养基上的萌发情况;采用L9(34)正交试验设计法考察6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)、赤霉素(GA)、α-萘乙酸(NAA)3种激素对种子萌发的影响。结果 9月份采收的山大颜种子活性较强,可以用作实验材料;2.0 g·L~(-1)升汞溶液浸泡时间2 min的种子生长率高、污染率较小,适合无菌培养;山大颜种子萌发的最优培养基为MS+2.0 mg·L~(-1)6-BA+0.1 mg·L~(-1)GA+3.0 g·L~(-1)活性炭。结论该方法建立了山大颜种子无菌萌发的适宜条件,有助于提高山大颜的繁殖率,为山大颜种质的人工扩大繁殖提供参考。     

道地中药颖半夏组培快繁优化研究

目的:建立并优化道地中药颖半夏的组培快速繁殖体系。方法:将不同大小的茎尖接种于培养基MS+6-BA 2.0 mg/L+IAA 0.2 mg/L,考察最适宜大小的外植体;以MS培养基为基本培养基,通过不同种类和浓度的植物生长调节剂配比试验,筛选颖半夏试管苗快速繁殖与生根的最佳培养基组成。结果:最适宜的外植体为直径0.4mm的茎尖,诱导丛生芽的最适培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+KT 0.1 mg/L;诱导试管苗生根的最适培养基为1/2 MS+NAA 0.2 mg/L+PP333 0.2 mg/L。结论:采用组织培养方法可进行颖半夏的快速繁殖,为后续的道地药材种质资源保护奠定了基础。     

佛手组织培养中褐变控制研究

目的:探讨佛手组织培养中褐变的控制方法。方法:以佛手顶芽及带节茎为材料,开展了不同基本培养基、取材时间、激素种类和褐变抑制剂对佛手初代培养中外植体褐变的影响研究。结果:佛手初代培养选用1/2MS为基本培养基并附加1.0 mg/L 6-BA、0.2 mg/L NAA、1.0 mg/L ZT和3 g/L PVP,1～3月份取材,是控制褐变的有效措施。结论:适宜的培养基组分和抗褐变剂能明显减轻佛手组织培养中的褐变,提高组培成功率,初步建立佛手组织培养体系。     

对叶百部组培快繁技术体系的优化

目的 筛选获得一套便捷高效的对叶百部组培快繁技术体系以应用于生产。方法 以带芽茎段为试验材料，优化了外植体的灭菌方法，不同植物激素种类及其质量浓度对丛生芽诱导、增殖、生根等环节的影响，并对无菌苗进行了炼苗移栽。结果 以2%次氯酸钠溶液处理外植体12min效果最佳，萌芽率77.77%,污染率5.57%,褐化率16.66%; MS+6-BA 2.5mg/L+KT 0.2mg/L+IAA 1.0mg/L为初代诱导的最佳培养基，诱导出的丛生芽数量较多，且叶绿、植株长势良好；MS+6-BA 2.0mg/L+KT 1.5mg/L+IAA 0.2mg/L为最佳的继代增殖培养基，增殖系数为5.3,显著高于其它处理，且丛生芽的长势良好，数量多，叶片大；不定芽生根最适的培养基为1/4MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.5mg/L+活性炭500mg/L,生根率可达77%,显著高于其它处理；以泥炭土+蛭石为试管苗移栽的最佳基质，移栽30 d后成活率为100%。结论 研究结果成功构建了对叶百部的组培快繁技术体系，符合工厂化育苗的要求，可为对叶百部健康种苗的产业化生产提供技术支持。     

阳春砂愈伤组织的诱导

目的:通过阳春砂组织培养获得愈伤组织,建立阳春砂愈伤组织的诱导体系。方法:将阳春砂根状茎芽及阳春砂试管苗的茎段、根尖作为愈伤组织诱导的外植体材料,接种到以MS为基本培养基,分别添加不同浓度的6-苄基腺嘌呤(6-BA),ɑ-萘乙酸(NAA)及2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)的培养基中(各培养基的p H约为5. 8),探讨不同外植体材料及不同培养基对阳春砂愈伤组织诱导的影响。结果:研究结果显示,阳春砂根状茎芽及试管苗的茎段、根尖3种外植体材料均能有效地诱导产生愈伤组织;其中阳春砂根状茎芽、试管苗茎段2种外植体材料诱导产生愈伤组织的最适培养基为MS+6-BA(1. 5 mg·L-1)+2,4-D(1. 0 mg·L-1)+NAA(0. 5 mg·L-1),最高诱导率分别为15%和60%;试管苗根尖诱导产生愈伤组织的最适培养基为MS+6-BA(2. 0 mg·L-1)+2,4-D(1. 0 mg·L-1)+NAA(1. 0 mg·L-1),最高诱导率76%,为阳春砂愈伤组织诱导的最佳外植体材料。结论:该研究初步建立了阳春砂的根状茎芽及试管苗的茎段、根尖3种外植体的愈伤组织诱导体系,试管苗根尖为愈伤组织诱导的最佳外植体。     

款冬叶柄愈伤组织培养与再生体系建立

以款冬幼嫩叶柄为材料,研究植物生长调节剂对其离休培养与植株再生的影响,建立了款冬离体快繁技术体系。结果表明:款冬叶柄切段较理想的灭菌方法为75%乙醇浸泡30 s,转入饱和漂白粉上清液浸泡15 min;适合愈伤诱导的培养基为MS+6-BA 3.0 mg·L~(-1)+2,4-D 2.0 mg·L~(-1),诱导率96.2%;在培养基MS+ZT 2.0 mg·L~(-1)+NAA 0.3 mg·L~(-1)上芽苗分化效果较好,分化率91%,平均芽数8.26个;较佳的不定芽增殖培养基为MS+KT 1.0 mg·L~(-1)+IBA 0.3 mg·L~(-1),增殖倍数为11.81,平均苗高4.9 cm;生根培养基为1/2MS+IBA 0.2 mg·L~(-1),生根数平均为5.68条,生根率为95.22%以上;瓶苗移栽于河沙-有机肥3∶1的基质中生长良好,成活率达90%以上;大田试验表明:同等栽培条件下款冬组培株、栽培株和野生株在生长量与花粒产量等方面存在显著差异,以组培株生长量与花粒产量相对较高。组培品与野生品有效成分含量基本一致。     

箭根薯愈伤组织诱导及无性系的建立

目的 诱导箭根薯愈伤组织及建立无性系.方法 以箭根薯野生种为材料,采用不同激素组合对不同部位(根茎、叶片、叶柄)进行诱导,对比诱导效果,筛选出最佳部位及各个生长阶段的最佳激素组合.结果 外植体的消毒以0.1％ HgC12溶液处理8 min的效果最佳;诱导愈伤组织最佳外植体为叶柄;愈伤组织诱导的最佳培养基是MS +6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1mg/L+2,4-D 1.0 mg/L,在此培养基上使用叶柄诱导愈伤组织的诱导率达到100％;不定芽诱导分化的最适培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L,分化率高达90％;生根诱导的最佳培养基为含1/2 MS+NAA 0.5 mg/L,生根率高达100％.结论 筛选出诱导箭根薯愈伤组织最佳诱导外植体及激素组合.     

培养基类型、植物生长物质浓度对王枣子愈伤组织诱导和继代的影响＊

目的 优化王枣子愈伤组织的诱导和探究疏松愈伤组织的继代条件，为王枣子悬浮细胞培养奠定初步基础。方法 以王枣子无菌苗幼叶为外植体，采用单因素试验研究不同培养基类型对愈伤组织诱导的影响；采用L₉(3² )正交试验设计，研究2，4-D、KT不同浓度配比对王枣子疏松愈伤组织的增殖培养的影响。结果 愈伤组织的诱导率在MS、1/2MS和B₅培养基上呈上升趋势。MS的出愈时间最晚，1/2MS的出愈时间次之；在B₅培养基上出愈时间最早，且愈伤组织的质地和生长状态较好。正交试验的结果显示，愈伤组织的在B₅培养基上添加2，4-D 2.5 mg·L^-1 +KT 1.0 mg·L^-1增殖倍数最小为19.78倍，添加2，4-D 1.5 mg·L^-1 +KT 0.2 mg·L^-1 达到最大增殖倍数27.34倍；王枣子疏松愈伤组织增殖试验中2，4-D(P<0.01)的影响效应比KT(P=0.091)大。结论 B₅培养基是最佳的王枣子愈伤组织诱导培养基，B₅培养基中添加2，4-D 1.5 mg·L^-1 +KT 0.5 mg·L^-1 为疏松愈伤组织增殖的最佳配比。     

紫花鄂北贝母愈伤组织诱导及总生物碱的测定

目的研究紫花鄂北贝母Fritillaria ebeiensis var.purpurea外植体愈伤组织诱导的激素组合和配比,并考察原药材及愈伤组织中总生物碱的量。方法以紫花鄂北贝母新鲜鳞茎为外植体,用抗生素和NaCIO组合作消毒剂,基于MS固体培养基添加激素2,4-D+6-BA、2,4-D+KT设计正交试验进行离体培养;采用可见-紫外分光光度法测定总生物碱量。结果外植体适宜灭菌条件是以5%NaClO溶液消毒8 min:愈伤组织诱导激素水平为2,4-D 0.5 mg/L+6-BA2.0mg/L;原药材及其愈伤组织中总生物碱量分别为1.46%、1.09%。结论愈伤组织质地疏松,适合继代培养,其有效成分总生物碱量低于原药材。     

铁皮石斛原球茎高效再生体系的研究

目的以铁皮石斛Dendrobium officinale实生种子为外植体,研究铁皮石斛原球茎的增殖、分化、诱导生根等条件,筛选出适宜铁皮石斛原球茎高效再生的诱导条件,建立高效的再生体系。方法以铁皮石斛种子为外植体,在培养基上诱导产生原球茎,经过增殖培养后,转移到分化培养基中诱导芽苗分化,待分化的芽苗长到1~2 cm时,转移到生根培养基诱导生根,最终长成完整的再生植株。结果适宜铁皮石斛生长的基本培养基为1/2 MS;原球茎诱导的培养基为1/2 MS+1.0 mg/L6-BA+0.2 mg/L NAA+50 g/L土豆泥;原球茎增殖的最适培养基为1/2 MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA,最高增殖系数达23;最佳分化培养基为1/2 MS+2.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA,平均分化率最高达95%;最佳生根培养基为1/2 MS+0.3mg/L NAA+50 g/L土豆泥,生根率达100%。结论铁皮石斛实生种子是铁皮石斛离体繁殖的优良外植体来源。以铁皮石斛种子诱导获得的高效再生技术体系可以为铁皮石斛快速繁殖和工厂化生产提供理论基础。     

南方红豆杉愈伤组织培养及其紫杉烷二萜类成分的分析

目的研究南方红豆杉愈伤组织的出愈时间、诱导率、生长率、生长状态、褐变程度,比较愈伤组织中紫杉醇等5种紫杉烷二萜类成分的量。方法采用单因素比较、正交试验设计,研究影响南方红豆杉愈伤组织诱导和生长的各种因素;采用HPLC法测定不同来源愈伤组织中10-脱乙酰基巴卡丁Ⅲ(10-DAB)、巴卡亭Ⅲ、三尖杉宁碱、紫杉醇和东北红豆杉素5种紫杉烷二萜类成分的量;采用加权评分综合考虑以上各因素优选组织培养条件。结果外植体脱分化形成愈伤组织的能力,以完整叶片及茎段最好;暗培养有利于紫杉醇等5种萜类成分的富集;愈伤组织诱导的最适培养基为B5+2,4-D 3.0mg/L+6-BA 1.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L+KT 0.5 mg/L。结论南方红豆杉愈伤组织诱导、培养与外植体种类、培养基种类、光照有较大关联,紫杉醇等5种紫杉烷二萜类成分的富集受植物生长调节剂种类及浓度影响显著。     

五指毛桃组织培养获得再生植株的研究

目的采用组织培养快繁技术培养五指毛桃种苗,为人工种植提供种源。方法采用五指毛桃叶片作外植体,以MS和1/2 MS为基本培养基,采用正交设计研究植物生长调节剂多因素组合(6-BA、NAA、2,4-D、IAA、KT和IBA)对五指毛桃初代诱导、不定芽分化和诱导生根的影响。结果不定芽最佳诱导培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA,外植体经20 d诱导培养,可分化形成不定芽72个;MS+1.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L IAA+0.3 mg/L KT最利于不定芽继代增殖,增殖倍数6.67;1/2 MS+1.0 mg/L IBA+0.3 mg/L NAA最适于诱导生根获得再生植株,生根率100%;宜移栽于泥炭-珍珠岩(1︰1)的基质上,成活率为93%。结论此途径繁殖速度快、再生率高,能为栽培五指毛桃提供大量种苗。     

老鸦瓣芽茎组织培养初步研究

目的 建立老鸦瓣芽茎愈伤组织诱导及丛生芽增殖体系。方法 以老鸦瓣冷藏芯芽产生的芽茎为外植体,MS为基本培养基,考察不同质量浓度6-BA、NAA对愈伤诱导、分化及丛生芽增殖的影响。结果 芽茎诱导愈伤的最佳培养基为MS＋6-BA 0.5 mg/L＋NAA 2.0 mg/L,愈伤诱导率78.54%,诱导出的愈伤组织在原培养基上继代培养增殖后即可进行芽分化;愈伤分化不定芽最佳培养基为MS＋6-BA 2.0 mg/L＋NAA 0.2 mg/L,芽诱导率为66.21%;丛生芽增殖培养基为MS＋6-BA 0.5 mg/L＋NAA 0.2 mg/L,增殖系数2.48。结论 筛选出芽茎诱导愈伤、分化不定芽及丛生芽增殖的培养基,初步建立了老鸦瓣芽茎组织培养体系。     

雷公藤不定根培养体系的建立及中试放大研究

以MS为基本培养基,进行雷公藤不定根的诱导研究时发现,不论是以雷公藤幼叶还是以幼叶诱导的愈伤组织为外植体,在添加1.0 mg·L^-1 IBA的培养基上均可以诱导出不定根并建立良好的不定根培养体系;以雷公藤愈伤组织建立的悬浮细胞在添加2.0~4.0 mg·L^-1 NAA时,也可以形成不定根并建立稳定的不定根培养体系,雷公藤不定根的3个培养体系中雷公藤甲素含量均超过自然生长的根皮中的含量,其中AR3不定根中雷公藤甲素含量最高,为根皮的5.3倍。在使用5 L发酵罐进行中试放大培养时,与250 mL摇瓶培养相比,每升培养基不定根增长量、次生代谢产物含量差异不大,这为通过组织培养生产雷公藤次生代谢产物奠定了基础。