药用植物短蕊万寿竹的组织培养研究

目的:更好的开发利用短蕊万寿竹。方法:以短蕊万寿竹的幼嫩茎段为外植体,MS为基本培养基,采用正交设计研究外源激素的种类和配比对诱导丛生芽和生根的影响。结果:最适的启动培养基为MS+6-BA 1.0 mg·L~(-1)+NAA 0.2 mg·L~(-1)+IBA 0.5 mg·L~(-1),诱导丛生芽的最佳培养基为MS+6-BA 1.5 mg·L~(-1)+NAA 0.2 mg·L~(-1)+KT 1.0 mg·L~(-1),丛生芽的增殖系数达到6.88,最佳的生根培养基为MS+6-BA 0.5 mg·L~(-1)+NAA 2.0 mg·L~(-1)+AC 2.0 g·L~(-1),生根率达到96%以上。结论:建立短蕊万寿竹的组织培养繁殖体系,为人工种植提供大量种苗。     

朱砂根的组织培养与植株再生

目的:研究药用植物朱砂根组培快繁技术,为其产业化生产提供科学依据.方法:考察不同基本培养基、植物激素、添加物等对腋芽诱导、增殖及植株再生的影响.结果:以朱砂根带芽茎段为外植体,初代培养腋芽诱导的最佳培养基为MS+6-BA 0.5 mg·L~(-1)+NAA 0.1 mg·L~(-1).腋芽增殖的最佳培养基配方为MS+6-BA 2.0 mg·L~(-1)+NAA 0.1 mg·L~(-1)+KT 0.5 mg·L~(-1).生根培养基为1/2MS+IBA 0.2 mg·L~(-1);添加0.2%的活性炭可明显促进根的生长,提高生根率、生根数.最有利于朱砂根无菌苗移栽存活的基质类型为河沙.珍珠岩-蛭石(1:1:1),或蛭石.珍珠岩(1:1),成活率在80%以上.结论:通过腋芽增殖快繁育苗技术可获得完整植株,达到快速繁殖的目的.     

白藓组织培养及无性系建立的研究

目的 对白藓资源进行种质保存,满足人们栽培对种苗的需求.方法 以白藓嫩茎为材料,以植物组织培养方法为手段,进行了愈伤组织诱导,愈伤组织和不顶芽分化,试管苗生根,试管苗移栽、扦插和移植的研究.结果 1/2MS+BA0.5 mg·L~(-1)+NAA1.0～1.5 mg·L~(-1)为嫩茎愈伤组织的诱导培养和继代培养的理想培养基;MS+AgNO31.5mg·L~(-1)+BA0.8mg·L~(-1)+naa0.2mg·L~(-1)是嫩茎愈伤组织和不定芽分化培养的理想培养基;1/3MS+IAA0.4～0.6mg·L~(-1)是生根培养和试管苗生根继代培养的理想培养基;移栽的试管苗保持了野生白藓的所有生物学性状,成功地建立起白藓的无性系.结论 嫩芽诱导的愈伤组织建立的无性系能对其进行种质保存,所繁殖的种苗能满足人们栽培的需求.     

多花黄精组织培养体系的研究

为加快多花黄精优良种苗的繁育,通过叶片叶龄及部位、基本培养基和植物生长调节剂等关键因子的综合调控,建立多花黄精的组培快繁体系并通过细胞学观察解析愈伤组织形成与分化。结果表明:30 d龄多花黄精试管苗叶基部在MS+6-BA 1. 50 mg·L~(-1)+2,4-D 0. 20 mg·L~(-1)培养基上愈伤组织诱导率最高,为80. 00%,愈伤组织脱分化启动及愈伤组织的形成是多起源的;不定芽分化最佳培养基为MS+6-BA 4. 00 mg·L~(-1)+2,4-D 0. 20 mg·L~(-1),分化率达90. 33%,每块愈伤组织平均分化芽数5. 16个,不定芽有外起源和内起源2种发生方式,分别由愈伤组织近表层细胞和愈伤组织内部拟分生组织形成;采用正交试验设计筛选出不定芽最佳增殖培养基为MS+6-BA 2. 00 mg·L~(-1)+NAA 0. 10 mg·L~(-1)和MS+6-BA 2. 00 mg·L~(-1)+NAA0. 20 mg·L~(-1);切分三叶无菌苗接入培养基1/2 MS+IBA 2. 00 mg·L~(-1)中,生根率最高,为94. 00%;移栽于泥炭-蛭石1∶1的基质中生长良好,存活率达85. 00%以上。该研究为多花黄精工厂化育苗提供了关键解决途径。     

多花黄精组培苗快速繁殖体系建立研究

目的:目前多花黄精种植种苗紧缺,为了满足多花黄精大面积种植的种苗需求,利用植物组织培养技术建立多花黄精组培苗规模化生产体系。方法:以多花黄精成熟种子为启动材料进行组培快繁,研究不同阶段,各种因素对多花黄精组培生长的影响,优选出最佳方案。结果:多花黄精组培过程中,启动、继代增殖、和生根壮苗阶段的最宜培养基分别为:MS+6-BA 1.5 mg·L~(-1)+NAA 0.2 mg·L~(-1)+GA30.5 mg·L~(-1);MS+6-BA 2.0 mg·L~(-1)+NAA 0.2 mg·L~(-1);1/2MS+IBA 1.0 mg·L~(-1)+0.1 NAA mg·L~(-1)。继代增殖系数2.5,植株生长健壮。     

五鹤续断快繁体系的建立和优化

目的 研究五鹤续断快繁体系关键技术的建立和优化.方法以五鹤续断(Wu-He Dipsacus asper)初春萌发的幼嫩茎、茎尖和叶作为外植体,对五鹤续断愈伤组织的诱导及根和芽分化的培养基进行优化筛选.结果诱导愈伤组织的最适培养基为MS+6-BA1.5 mg·L~(-1)+NAA0.2 mg·L~(-1),在光照下培养长势好;诱导丛生芽的最优培养基为MS+6-BA2.0 mg·L~(-1)+NAA0.5 mg·L~(-1);诱导生根的最佳培养基为1/2MS+NAA1.0 mg·L~(-1)+ PP3 330.4 mg·L~(-1).结论 建立了一套五鹤续断快速繁殖技术体系.     

玄参组织培养及炼苗技术

目的:以玄参茎段、叶柄、带腋茎段和叶片为外植体,筛选出适宜的植株再生体系以及最佳的炼苗条件。方法:通过L_(16)(4~5)正交试验研究玄参不同外植体、不同激素和不同浓度对丛生芽的诱导和增殖;采用单因素方差分析不同浓度激素对不定芽生根的诱导;同时选择不同基质、不同浇水周期和不同过渡方式对玄参生根苗炼苗关键技术的优选。结果:带腋茎段为最佳外植体,其次依次为茎段,叶片和叶柄;其在MS+6-苄氨基腺嘌呤(6-BA) 0. 5 mg·L~(-1)+萘乙酸(NAA) 0. 2 mg·L~(-1)中不定芽诱导率和芽增殖倍数分别为100%和9. 84;适宜不定芽生根的培养基为1/2 MS+吲哚-3-丁酸(IBA) 0. 2 mg·L~(-1),生根率100%,根数为39. 45条;就基质而言,以营养土-蛭石-珍珠岩(5∶2∶1)为移栽基质,可保持基质中肥力、透气性与保水性适当搭配;浇水周期选择每2 d浇1次水,过渡方式为室内炼苗20 d,室外遮阴大棚炼苗10 d后移栽大田,成活率可达到95%以上。结论:建立玄参无性快速繁殖体系,为提供玄参高效、快速、稳定的植株再生,优质的种苗繁育以及适宜的炼苗条件提供了有效途径。     

白术组培快繁技术

白术外植体诱导及植株再生试验结果表明:NAA为白术叶片、叶柄愈伤组织诱导和芽分化的主导因子;MS BA 1.0 mg/L NAA 0.3 mg/L GA30.2 mg/L为白术叶片、叶柄愈伤组织诱导、芽分化的最佳培养基;腋芽增殖的培养基以MS BA 0.3 mg/L IBA 0.5 mg/L较为理想,诱导率达95%;1/2MS IBA 0.1~0.5 mg/L为白术试管苗生根的最佳培养基,生根率在90%以上;试管苗移栽成活率达90%以上。     

广豆根无菌播种产业化繁育技术研究

目的:为推动广豆根种苗产业发展,获得规模化快速成苗生产技术。方法:以广豆根种子为外植体,按照种子-丛生芽-植株-炼苗移栽的繁育途径,对各阶段的培养基与其他影响因素开展研究,结果:结荚后生长90～120 d的种子在离体条件下均能萌发,其中结荚150～180 d的种子萌发效果最好,萌发率为95.7%;丛生芽增殖的最佳培养基为MS+1.5 mg·L~(-1)6-BA+0.3 mg·L~(-1) IAA+0.3 mg·L~(-1) KT,增值倍数约为7倍/30 d;20 d后转入4000 lux光照下培养10 d,获得叶片展开、木质化程度较高的健壮枝条;将枝条转接到生根培养基1/2MS+1.0 mg·L~(-1)NAA+0.2 mg·L~(-1) IBA+0.5g·L~(-1) AC上,培养20 d后转入炼苗棚炼苗10 d,生根率达到95%。在南宁地区,生根苗以3—5月和10—11月为最佳移栽期,以通过泥炭土、碳化稻谷壳和珍珠岩的质量比例为4∶4.5∶1.5混合后为基质,移栽成活率可达95%。结论:通过组织培养技术建立了广豆根无菌播种规模化快速成苗生产技术,推动广豆根种苗产业发展。     

湖北麦冬花药愈伤组织诱导及再生植株的获得

目的:探讨药用植物湖北麦冬花药愈伤组织诱导和植株再生条件.方法:以湖北麦冬花药为外植体,采用MS培养基,附加不同的植物激素进行实验.常规压片法结合显微镜进行再生植株染色体的计数分析.结果:MS+2,4-D 1.0 mg·L~(-1)+KT 2.0 mg·L~(-1)诱导愈伤组织效果最好,愈伤组织诱导率可达41.07%.MS+6-BA 1.5～2.0 mg·L~(-1)+NAA0.1～0.3mg·L~(-1)适于不定芽的诱导,不定芽转入附加NAA 0.1～0.3 mg·L~(-1)的1/2 MS的生根培养基上,生根后获得完整的再生植株,再生植株为体细胞起源.同时,讨论了4℃低温预处理对愈伤组织诱导的影响.结论:建立了湖北麦冬花药体细胞组织培养体系和快速繁殖途径.     

TDZ和NAA对老鸦瓣不定芽诱导和丛生芽增殖的影响

以老鸦瓣鳞茎芯芽和子茎（芽茎顶端膨大形成的子鳞茎）为外植体,探索噻苯隆（TDZ）和α-萘乙酸（NAA）诱导老鸦瓣外植体直接成芽的方法,建立老鸦瓣器官途径丛生芽组培体系。研究结果表明,芯芽和子茎在MS+ TDZ 2.0 mg·L^-1+NAA 2.0 mg·L^-1和MS+TDZ 2.0 mg·L^-1+NAA 4.0 mg·L^-1培养基中可直接诱导不定芽,芽诱导率分别为72.92%,79.22%;利用子茎不定芽在MS+TDZ 0.2 mg·L^-1+ NAA 0.2 mg·L^-1培养基中可进行丛生芽增殖,增殖系数2.23,形成的芽体健壮,叶色嫩绿;增殖后的丛生芽在含有IBA 1.0 mg·L^-1的MS培养基中即可生根,生根率52.6%,平均3~5条根。利用老鸦瓣芯芽和子茎,筛选出了老鸦瓣芯芽和子茎直接诱导不定芽及丛生芽增殖和生根的最适培养基,建立了器官途径丛生芽组培体系。     

北柴胡花药愈伤组织高效再生体系的建立

以花粉发育处于单核期的北柴胡花药为外植体诱导出愈伤组织,愈伤组织经多次继代培养后,置于20种含不同植物激素的分化培养基上诱导分化。分别在培养21,49 d后,统计每种培养基中分化出苗数,同时观察再生植株生长状况,从中筛选出分化率高,分化速度快,且植株生长状态良好的分化培养基。结果共在19种培养基均可分化出苗,分化率在3%~60%,大部分低于20%。在MS+KT 0.5 mg·L^-1+蔗糖30 g·L^-1+植物凝胶5 g·L^-1培养基上分化率最高,为60%,其次为MS+ ZT 1.0 mg·L^-1+蔗糖30 g·L^-1+植物凝胶5 g·L^-1,为58%。另外,针对在分化培养基中未能生根的再生芽,进行了生根培养基筛选。结果显示再生芽在生根培养基MS+蔗糖30 g·L^-1 +植物凝胶5 g·L^-1和1/2 MS+ NAA 0.5 mg·L^-1+蔗糖30 g·L^-1 +植物凝胶5 g·L^-1中均可生根,生根率均为100%。由此建立了北柴胡花药愈伤组织高效稳定的再生体系。     

不同激素配比对远志愈伤诱导及其黄酮积累的影响

目的:研究不同激素配比对远志根、茎、叶愈伤组织诱导的影响,并对远志根、茎、叶愈伤组织中的黄酮量进行测定分析。方法:以MS为基本培养基,分别以远志无菌苗的根、茎、叶为外植体,应用正交试验法确定2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D),萘乙酸(NAA),6-苄氨基嘌呤(6-BA)这3种激素对远志根、茎、叶不同部位愈伤组织诱导及其黄酮积累量的影响。结果:2,4-D,NAA,6-BA对远志根、茎、叶愈伤诱导率均有显著影响。叶的最佳愈伤诱导组合为MS+3. 0 mg·L~(-1)2,4-D+1. 0 mg·L~(-1)NAA+1. 5 mg·L~(-1)6-BA;茎的最佳愈伤诱导组合为MS+1. 0 mg·L~(-1)2,4-D+3. 0 mg·L~(-1)NAA+1. 5 mg·L~(-1)6-BA;根的最佳愈伤诱导组合为MS+1. 0 mg·L~(-1)2,4-D+1. 0 mg·L~(-1)NAA+1. 0 mg·L~(-1)6-BA。2,4-D,NAA,6-BA对远志茎愈伤组织中黄酮积累均影响显著,以MS+3. 0 mg·L~(-1)2,4-D+1. 0 mg·L~(-1)NAA+0. 5 mg·L~(-1)6-BA为最佳黄酮积累组合; NAA,6-BA对远志叶愈伤组织中黄酮积累影响均显著,而2,4-D则无明显影响,以MS+3. 0 mg·L~(-1)2,4-D+2. 0 mg·L~(-1)NAA+1. 0 mg·L~(-1)6-BA为最佳黄酮积累组合; 3种激素分别对远志根愈伤组织中黄酮积累无明显影响,以MS+2. 0 mg·L~(-1)2,4-D+1. 0 mg·L~(-1)NAA+1. 5 mg·L~(-1)6-BA为最佳黄酮积累组合。结论:在该条件下远志根、茎、叶愈伤组织诱导率均达100%,其中尤以远志叶愈伤组织长势最好,其次分别是远志茎和远志根。在该条件下远志根、茎、叶愈伤组织中黄酮量分别达到21. 31,24. 56,23. 61 mg·g-1。     

抱茎苦荬菜的组织培养及植株再生

目的:探讨苦荬菜组织培养和植株再生条件。方法:以苦荬菜叶片为外植体,应用正交设计方法,对愈伤组织的诱导和分化培养基进行优化筛选。结果:最佳的愈伤组织诱导培养基为MS+2,4-D 1.5 mg.L^-1+6-BA1.5 mg.L^-1+NAA1.0 mg.L^-1+IBA1.5 mg.L^-1+KT1.5 mg.L^-1,最佳的不定芽诱导培养基为MS+2,4-D 0.2 mg.L^-1+6-BA0.5 mg.L^-1+NAA 0.5 mg.L^-1+IBA 0.5 mg.L^-1+KT0.5 mg.L^-1,不定芽经附加IBA0.1 mg.L-1的1/4 MS培养基生根后移栽成活,获得再生植株。结论:建立了一套有效的苦荬菜组织培养再生体系。     

阳春砂愈伤组织的诱导

目的:通过阳春砂组织培养获得愈伤组织,建立阳春砂愈伤组织的诱导体系。方法:将阳春砂根状茎芽及阳春砂试管苗的茎段、根尖作为愈伤组织诱导的外植体材料,接种到以MS为基本培养基,分别添加不同浓度的6-苄基腺嘌呤(6-BA),ɑ-萘乙酸(NAA)及2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)的培养基中(各培养基的p H约为5. 8),探讨不同外植体材料及不同培养基对阳春砂愈伤组织诱导的影响。结果:研究结果显示,阳春砂根状茎芽及试管苗的茎段、根尖3种外植体材料均能有效地诱导产生愈伤组织;其中阳春砂根状茎芽、试管苗茎段2种外植体材料诱导产生愈伤组织的最适培养基为MS+6-BA(1. 5 mg·L-1)+2,4-D(1. 0 mg·L-1)+NAA(0. 5 mg·L-1),最高诱导率分别为15%和60%;试管苗根尖诱导产生愈伤组织的最适培养基为MS+6-BA(2. 0 mg·L-1)+2,4-D(1. 0 mg·L-1)+NAA(1. 0 mg·L-1),最高诱导率76%,为阳春砂愈伤组织诱导的最佳外植体材料。结论:该研究初步建立了阳春砂的根状茎芽及试管苗的茎段、根尖3种外植体的愈伤组织诱导体系,试管苗根尖为愈伤组织诱导的最佳外植体。     

夏枯草愈伤组织诱导和植株再生技术的研究

目的:探讨夏枯草愈伤组织诱导和植株再生条件。方法:采用正交试验法研究不同外植体、蔗糖、植物生长物质及其配比对夏枯草愈伤组织诱导和分化的影响。结果和结论:以叶片为外植体诱导愈伤效果最好,茎段次之,叶柄不能诱导出愈伤组织;6-BA是影响夏枯草愈伤组织形成的主要因素;诱导愈伤组织的适宜培养基为MS+6-BA 3.0 mg.L-1+NAA 0.1mg.L-1+2,4-D 0.5 mg.L-1+蔗糖3%;宜于愈伤组织分化的培养基为1/2 MS+6-BA 3.25 mg.L-1+NAA1.25 mg.L-1+蔗糖2%;最佳生根培养基:MS+IBA 1.0 mg.L-1+蔗糖3%。     

雷公藤不定根培养体系的建立及中试放大研究

以MS为基本培养基,进行雷公藤不定根的诱导研究时发现,不论是以雷公藤幼叶还是以幼叶诱导的愈伤组织为外植体,在添加1.0 mg·L^-1 IBA的培养基上均可以诱导出不定根并建立良好的不定根培养体系;以雷公藤愈伤组织建立的悬浮细胞在添加2.0~4.0 mg·L^-1 NAA时,也可以形成不定根并建立稳定的不定根培养体系,雷公藤不定根的3个培养体系中雷公藤甲素含量均超过自然生长的根皮中的含量,其中AR3不定根中雷公藤甲素含量最高,为根皮的5.3倍。在使用5 L发酵罐进行中试放大培养时,与250 mL摇瓶培养相比,每升培养基不定根增长量、次生代谢产物含量差异不大,这为通过组织培养生产雷公藤次生代谢产物奠定了基础。     

巫山淫羊藿分蘖芽组织培养研究

目的:建立巫山淫羊藿的组培快繁体系,为实现其工厂化育苗提供理论依据.方法:以巫山淫羊藿分蘖芽为外植体,MS,B5,WPM为基本培养基,添加不同浓度6-BA,NAA,GA3等植物生长调节物质,对芽的诱导与增殖条件进行了系统研究.结果:芽适宜的消毒方法为75％乙醇消毒30 s,再用0.1％ HgCl2连续2次消毒(4+2) min,污染率可控制在5％以内,存活率为75％.芽诱导适宜的培养基为WPM+ 6-BA 2.0 mg·L-1+NAA0.1 mg·L-1+GA3 0.5 mg·L-1,诱导率为75.5％,且基本培养基和6-BA对诱导率的影响达到极显著水平;芽增殖的适宜培养基为WPM+6-BA2.0mg·L-1 +NAA0.5mg·L-1,增殖系数为3.3;最佳生根培养基为1/2 WPM+IBA0.5 mg·L-1 +0.05％活性炭,生根率为90％,每株3～6条根,苗生长健壮.结论:筛选出了分蘖芽适宜的消毒方法及不定芽诱导、增殖和生根适宜的培养基,建立了巫山淫羊藿分蘖芽的组培快繁体系.     

催眠睡茄植株再生体系的建立

目的:建立和优化催眠睡茄植株再生体系。方法:以催眠睡茄的叶片作为外植体,探讨不同植物生长物质对愈伤组织诱导,丛生芽分化以及试管苗生根的影响。结果和结论:愈伤组织诱导的最佳培养基是MS+1.0 mg.L-12,4-D+0.1mg.L-1KT;丛生芽诱导的最优培养基是MS+1.0 mg.L-16-BA+0.1 mg.L-1NAA,试管苗生根诱导最优培养基为1/2MS+0.5 mg.L-1NAA;在珍珠岩-腐殖土(1∶1)的基质中,再生植株室外移栽成活率达到92%。