补肾方药对去卵巢大鼠骨密度及血清雌激素水平影响的实验研究

目的：探讨补肾方药对去卵巢大鼠骨质疏松的防治作用及其作用机制。方法：采用切除大鼠双侧卵巢的方法造成骨质疏松模型，然后给予补肾方药治疗。结果：补肾方药可使卵巢切除大鼠骨密度(BMD)增加，血清雌激素水平(E2)增加。结论：补肾方药可以防治卵巢切除大鼠所致的骨质疏松症，升高血清雌二醇可能是其作用机制之一。     

补肾益气生精中药对去卵巢大鼠骨组织Smad4表达的影响

目的:研究补肾益气生精中药对去卵巢(OVX)大鼠TGF-β1信号转导分子Smad4表达的调节,探讨Smad4在骨质疏松发病中的作用机制及补肾益气生精中药对其调节作用.方法:用去卵巢的方法建立绝经后骨质疏松症模型,给予补肾益气生精中药防治12周,并以尼尔雌醇为阳性对照,用双能-X线骨密度仪检测大鼠离体股骨骨密度,用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)、免疫组化(SABC)法和Westem blot杂交法分别检测Smad4 mRNA、蛋白的表达及其在组织中的定位.结果:卵巢切除大鼠离体股骨骨密度显著下降,骨组织中Smad4的蛋白及mRNA表达水平均下降.补肾益气生精中药能够提高去卵巢大鼠的骨密度,并且可以从蛋白及mRNA水平提高骨组织中Smad4的表达.结论:TGF-β1的信号转导分子Smad4表达水平的下调可能是原发性骨质疏松症发生的重要机制,补肾益气生精中药通过上调Smad4的表达而有效改善骨密度.     

补肾活血方对老龄去卵巢大鼠骨质疏松症模型骨密度和骨代谢的影响

目的：探讨补肾活血方治疗原发性骨质疏松症的疗效。方法：10月龄SD雌性鼠去卵巢建立绝经后骨质疏松模型。予以补肾活血方、尼尔雌醇水溶液灌胃治疗8周，观察有关指标的改变。结果：大鼠去卵巢后，含密度明显下降，模型复制成功。补肾活血方明显改善去卵巢大鼠的一般形态，显著提高去卵巢大鼠腰椎含密度，抑制卵巢大鼠尿羟脯氨酸／肌酐、尿钙／肌酐、血清骨钙素水平，而对血清尼尔雌醇水平未见明显影响。结论：补肾活血方可延缓实验性骨质疏松大鼠的含量丢失，改善其含代谢；此作用不是通过升高雌激素水平实现的。     

中药复方对骨质疏松大鼠雌激素受体mRNA及Ⅰ型胶原mRNA表达的影响

目的:探讨自拟中药复方对实验性骨质疏松大鼠雌激素受体mRNA及Ⅰ型胶原mRNA表达的影响及骨细胞数目的影响.方法:切除大鼠卵巢造成骨质疏松模型,随机分组对照处理,3月后应用原位杂交法和HE色观察雌激素受体mRNA及Ⅰ型胶原mRNA的表达及成骨细胞数量.结果:中药复方组成骨细胞数目增加(P＜0.01),雌激素受体mRNA及Ⅰ型胶原mRNA表达水平提高(P＜0.01).结论:自拟中药复方具有拟雌激素样作用,可使骨质疏松大鼠骨内雌激素受体mRNA及Ⅰ型胶原mRNA表达增强,调节骨代谢,增加骨质疏松大鼠成骨细胞数目.     

强骨膏治疗去卵巢大鼠骨质疏松的实验研究

目的 :探讨中药强骨膏对去卵巢形成的骨质疏松大鼠骨密度、生物力学及性激素的影响。方法 :通过切除大鼠卵巢形成骨质疏松模型 ,观察强骨膏对骨质疏松大鼠骨密度、股骨最大载荷等生物力学指标和血清雌二醇的影响 ,并与葡萄糖酸钙及龙牡壮骨冲剂对照。结果 :强骨膏治疗的去卵巢骨质疏松大鼠的骨密度值 ,最大载荷、最大应力、屈服点值及雌二醇均明显高于模型组。结论 :强骨膏能提高去卵巢骨质疏松大鼠的骨密度 ,增强抗外力冲击的能力 ,其作用机理可能与其拟雌激素样作用有关。     

滋肾丸对去卵巢骨质疏松雌鼠的骨组织形态学的改善作用及机制的实验研究

目的:探讨补肾中药滋肾丸对去卵巢大鼠骨质疏松的骨形态学的改善作用及机制研究。方法:将66只SD大鼠随机分为6组,每组11只,空白组做假手术,其余5组做卵巢切除术,术后2周开始给药,用药12周后处死。处死后取股骨远端1/3部分及胫骨近端1/3进行骨组织形态学研究,取血测定血清雌二醇、碱性磷酸酶含量。结果:模型组的骨量明显减少,骨组织退化,出现骨小梁数目减少,厚度变薄,面积百分率下降;血清碱性磷酸酶升高,血清雌二醇下降。中药滋肾丸大、中、小剂量及尼尔雌醇均能对上述指标有所改善,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:补肾中药滋肾丸对去卵巢骨质疏松大鼠的骨组织形态学有改善作用,使其骨量增加,骨结构改善。其疗效与其升高血清雌二醇,降低碱性磷酸酶,从而降低骨高转换率有关,表明补肾中药滋肾丸对骨质疏松有一定的治疗作用。     

补肾方剂防治去卵巢大鼠骨丢失作用机制的探讨

目的:探讨补肾方剂对去卵巢大鼠骨丢失的疗效作用及其作用机理。方法:选用6月龄雌性SD大鼠,切除卵巢并诱发的骨质疏松模型,分别设为假手术组、模型组、雌二醇组和中药治疗组,治疗3个月后,观察大鼠骨密度、骨组织形态学及骨代谢相关生化指标。结果:补肾方剂组大鼠与模型组大鼠比较:补肾方剂可提高大鼠的平均骨密度,病理切片可见骨小梁明显致密,骨髓腔缩小。其生化指标显示雌二醇(E2)、黄体生成素(LH)、皮质醇(COR)、雌激素水平升高,而睾酮(T)水平明显降低,各指标之间统计分析均有统计学意义(P<0.05)。结论:补肾方剂有类似雌激素样作用,可有效防治卵巢切除大鼠的骨量丢失,可作为绝经后骨质疏松症的预防用药。     

仙灵骨葆对大鼠骨质疏松预防作用的分子机制初探

目的：观察仙灵骨葆对摘除双侧卵巢诱导的大鼠骨质疏松模型的预防作用，并探讨其作用机制。方法：采取双侧卵巢切除的方法建立大鼠骨质疏松症的动物模型，术后3个月内给予仙灵骨葆预防治疗，借助病理切片HE染色，观察经过治疗后的大鼠骨骼骨松质的变化；运用荧光定量PCR方法，考证仙灵骨葆的抗骨质疏松作用与骨组织内β型雌激素受体的mRNA表达水平的关系，从分子生物学层面探究仙灵骨葆的作用机制。结果：大鼠股骨干骺端矢状面的HE染色切片显示，仙灵骨葆组的股骨松质骨的网状结构明显比模型组完整，而模型组的β型雌激素受体的mRNA表达水平与对照组没有明显差别。结论：仙灵骨葆能较好地恢复骨质疏松大鼠骨小梁的网状结构，其作用机制与骨组织内β型雌激素受体的mRNA表达无关。     

补肾调冲方对去卵巢大鼠性激素水平及下丘脑雌激素受体α、雌激素受体β mRNA表达的影响

[目的]探讨补肾调冲方对去卵巢大鼠血清性激素水平及下丘脑雌激素受体α(ERα)、雌激素受体β(ERβ)mRNA表达的影响。[方法]以假手术组为对照,将去卵巢大鼠随机分为去卵巢空白组,补肾调冲方高、中、低剂量组,已烯雌酚组。采用放射免疫分析法测定血清雌二醇(E2)、促卵泡生成激素(FSH)、促黄体生成激素(LH)水平,采用逆转录-聚合酶联反应(RT-PCR)检测下丘脑ERα、ERβmRNA表达。[结果]去卵巢大鼠血清FSH、LH水平升高,E2及下丘脑ERα、ERβmRNA水平降低,补肾调冲方大鼠血清E2有升高趋势,FSH有降低趋势,补肾调冲方能降低去卵巢大鼠血清LH水平,升高下丘脑ERα、βmRNA的表达。[结论]补肾调冲方在改善去卵巢大鼠性激素水平同时,可能通过影响ERα、ERβmRNA的表达,提高ER的生物效应,从而降低更年期综合征的发生。     

补肾化痰方影响去势骨质疏松大鼠Leptin及β2-AR表达的实验研究

[目的]探讨补肾化痰方影响瘦素(Leptin)及β2肾上腺素能受体(β2-AR)的表达水平来防治绝经后骨质疏松症的机制。[方法]将75只大鼠随机分为假手术组、模型组、补肾化痰组、利维爱组、阿托伐他汀组,采用双侧卵巢摘除建立去势骨质疏松模型,假手术组只切除卵巢周围同等质量的脂肪组织。使用微计算机断层扫描技术(Micro-CT)检测大鼠右侧股骨的骨密度(BMD),酶联免疫吸附(ELISA)检测大鼠血清Leptin、雌二醇(E2),全自动生化仪检测甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),聚合酶链反应(PCR)检测骨组织中Leptin mRNA、β2-AR mRNA相对表达量。[结果]模型组相对于假手术组BMD、血清Leptin、E2水平明显降低;治疗后,补肾化痰组相对于模型组的BMD、血清Leptin、E2、HDL-C含量及骨组织Leptin mRNA表达水平明显提高,血清TC、TG、LDL-L含量及骨组织β2-AR mRNA表达水平明显降低,与利维爱组及阿托伐他汀组比较无明显差异。[结论]补肾化痰方可以有效提高绝经后骨质疏松大鼠的BMD,补充雌激素水平,通过调节Leptin水平来介导交感神经的活性,起到防治绝经后骨质疏松和改善脂代谢的作用。     

补肾健脾中药复方对去势大鼠血清中Bcl-2和Bax水平的影响

目的:探讨补肾健脾中药复方对去势大鼠血清中Bcl-2和Bax水平的影响。方法:48只6月龄的雌性SD大鼠随机分为对照组、模型组、中药组(补肾健脾中药复方)、西药组(雌激素)。治疗12周后,收集左侧股骨、血清分别行骨矿含量、骨密度测量和Bcl-2、Bax水平含量的检测。结果:模型组的骨密度值和骨矿含量均低于对照组(P0.05);中药组和西药组的骨密度值高于模型组(P0.05)。与空白组相比,模型组血清中Bcl-2表达水平下降,Bax表达水平上升(P0.05)。经过药物干预后,中药组和西药组均能提高血清中Bcl-2表达,降低Bax表达(P0.05)。结论:补肾健脾中药复方对去势大鼠血清中Bcl-2和Bax水平的影响作用与雌激素一致,有可能在一定程度上抑制细胞的凋亡。     

益妇宁软胶囊对去势大鼠骨组织雌激素受体表达的影响

目的:研究不同剂量的益妇宁软胶囊(YFN)对去势大鼠骨组织中雌激素受体(ER)表达的影响,探讨该方对绝经后骨质疏松症(PMO)的治疗机制.方法:采用3月龄SD雌性大鼠60只,50只行双侧卵巢切除术,随机分为YFN大剂量组(相当于原生药0.8 g/kg)、YFN中剂量组(相当于原生药0.4 g/kg)、YFN小剂量组(相当于原生药0.2 g/kg)和阳性药对照组(己烯雌酚0.1 mg/kg)、模型对照组,每组10只;另10只为假手术组.术后4周开始给药,给药12周后收集标本.采用放免法测定血清雌二醇水平,Western blotting免疫印迹法检测胫骨组织中ER表达情况.结论:YFN能明显提高去势大鼠体内雌激素水平及骨组织雌激素受体的表达量,通过这两条途径起到治疗绝经后骨质疏松症的作用.     

糖皮质激素诱导肾虚骨质疏松症大鼠骨组织中PPARγ2的mRNA及蛋白表达的影响

目的:研究糖皮质激素骨质疏松症大鼠骨组织中PPARγ2的mRNA和蛋白表达,揭示糖皮质激素骨质疏松症的发病机理,阐述纳米钙补肾中药的调节作用机制。方法:用糖皮质激素注射的方法复制骨质疏松症模型,用纳米钙及具有益肾填精、补钙壮骨作用的补肾中药高、低剂量对实验大鼠治疗8周,以骨疏康颗粒、盖天力钙片作为阳性对照组,正常大鼠和模型空白组为空白对照组。用PCR法、Western印迹法检测骨质疏松症大鼠骨组织中PPARγ2的mRNA和蛋白表达。结果:正常大鼠骨组织可以在基因、蛋白水平表达PPARγ2,而且在骨髓脂肪细胞分化中可能起到重要的作用,糖皮质激素对大鼠骨质疏松症的发生与骨组织中PPARγ2 mRNA和蛋白表达的变化有关,从而影响骨髓脂肪细胞形成。结论:纳米钙补肾中药通过调控大鼠骨组织中PPARγ2 mRNA和蛋白表达,抑制骨髓脂肪细胞的形成,从而对糖皮质激素性骨质疏松症有一定的防治作用。     

更年健上调老年雌性大鼠下丘脑雌激素受体mRNA表达对P物质和β-内啡肽的影响

目的：探讨中药复方更年健上调老年雌性大鼠下丘脑雌激素受体（ ＥＲ）和 ＥＲ信使核糖核酸（ｍＲＮＡ）对Ｐ物质（ＳＰ）和β－内啡肽（β－ＥＰ）的影响。方法：建立自然衰老的雌性大鼠模型，用放射配体结合分析法检测 ＥＲ，用 Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ分析 ＥＲｍＲＮＡ的改变，用放射免疫分析法检测 ＳＰ和β－ＥＰ含量。结果：老年雌性大鼠性减退期下丘脑 ＥＲ和 ＥＲｍＲＮＡ水平随血清Ｅ_２水平的下降较性成熟期显著下降，而更年健则使下降了的ＥＲ和ＥＲｍＲＮＡ水平明显提高，并通过上调下丘脑ＥＲｍＲＮＡ使ＳＰ明显下降，而β－ＥＰ则显著提高，与提高体内雌激素水平具有同样的效果。结论：更年健可增加ＲＲ在下丘脑的表达以增强雌激素的生物学效应，同时降低下丘脑 ＳＰ水平而提高 β－ＥＰ的含量。     

中西医结合治疗绝经后骨质疏松症的研究

２４例绝经后骨质疏松症患者给予０．２ｍｇ乙底酚与补肾中药联合治疗。结果表明：给服中西药物四个月后，患者肾虚症状积分值较治疗前明显下降，骨密度，骨矿含量较治疗前明显增加。提示这一疗法既能改善患者的肾虚状态，达到治疗骨质疏松症的目的，又能减少雌激素的应用剂量，避免大剂量雌激素长期应用所引起的毒副作用。     

两种不同补肾方法治疗去卵巢大鼠骨质疏松症的对比研究

目的：探讨评价中医药“活血补肾法”与“滋阴补肾法”治疗绝经后骨质疏松症的疗效作用。方法：以反应骨代谢状况的S—Ca，S—P，S—ALP，U—Ca，U—HYP，U—HYP／U—Cr，U—Ca／U—Cr等生化指标，E2、LH、CT等内分泌激素，以及股骨近端骨密度与子宫、肾上腺、股骨近端的组织形态学为观察指标，比较活血补肾的丹仙康骨胶囊与滋阴补肾的六味地黄丸对去卵巢大鼠骨质疏松症的影响。结果：活血补肾的丹仙康骨胶囊比滋阴补肾的六味地黄丸更能有效的提高模鼠骨密度、降低U—Ca，U—P，U—HYP，U—HYP／U—Cr，U—Ca／U—Cr，同时能提高S—ALP，差异显著。在光镜下观察，活血补肾组、滋阴补肾组其肾上腺皮质、子宫内膜，固有腺体瘦缩都有所减轻，但两组无明显差别。活血补肾组比滋阴补肾组骨干预端软骨骨化较好，骨小梁变粗明显。结论：不同补肾方法对骨重建过程骨吸收与骨形成具有选择性差异。同滋阴补肾的六味地黄丸相比，活血补肾的丹仙康骨胶囊不仅能抑制骨吸收，还能促进骨形成，具有较好的抗骨质疏松作用。     

补肾泻肝方治疗再生障碍性贫血临床疗效与IFN-γmRNA基因表达关系的研究

目的 :观察补肾泻肝方治疗再生障碍性贫血临床疗效与 IF N-γm RNA基因表达关系。方法 :2 1例患者均以补肾泻肝方为主治疗 ,用 RT-PCR技术分析 IFN-γ基因表达。结果 :2 1例患者中有效 12例 ,皆为肾阴虚、肝火伏热型 ;无效9例 ,皆为肾阳虚、阴亏瘀热型。用 RT-PCR技术分析 IF N-γ基因表达 ,12例中有 9例阳性 ,治疗后阳性者 2例 ,阴性者 7例 ;而无效的 9例中无一例阳性。结论 :补肾泻肝方治疗再障疗效较好 ,IFN -γm RNA基因表达在中医辨证分型和预测补肾泻肝方的疗效与治疗机理方面有重要的作用。     

滋阴补肾法对卵巢切除所致骨质疏松大鼠骨髓基质细胞IL-1和成骨细胞IL-6表达的影响

目的:通过观察滋阴补肾法对卵巢切除所致骨质疏松大鼠骨髓基质细胞IL-1和成骨细胞IL-6表达的影响,探讨其治疗骨质疏松症的机理.方法:将大鼠随机分为5组,即空白对照组、假手术组、模型组、雌激素组和补肾组.摘除大鼠双侧卵巢3个月后,灌胃给予左归丸,共给药3个月.采用骨组织形态计量学的方法对大鼠胫骨不脱钙骨切片进行形态计量;采用免疫组化和原位杂交的方法分别检测骨髓基质细胞IL-1和成骨细胞IL-6蛋白和mRNA的表达.结果:与模型组比较,补肾组大鼠胫骨TBV%显著增高,TRS%以及TFS%、MAR、OSW和mAR均明显降低;同时,其骨髓基质细胞IL-1和成骨细胞IL-6蛋白和mRNA的表达皆显著降低.结论:滋阴补肾法能使骨髓基质细胞IL-1和成骨细胞IL-6表达降低,是其能够治疗骨质疏松症的机理之一.     

电针对实验性骨质疏松大鼠性激素及胰岛素样生长因子IGF-1的影响

目的:探讨电针对实验性骨质疏松大鼠性激素及IGF-1的影响。方法:50只雌性未孕Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、假手术组、雌激素组、电针组,采用双侧卵巢摘除术复制骨质疏松模型,造模成功后,治疗3个疗程,检测大鼠骨密度、E2、LH、FSH及IGF-1变化。结果:骨质疏松大鼠骨密度(BMD)和骨矿含量(BMC)明显降低,E2水平明显降低,LH、FSH明显增加,IGF-1显著降低,与正常组大鼠比较,差异有统计学意义(P<0.05);雌激素组、电针组大鼠BMD、BMC及血清中E2水平、IGF-1含量明显增加,LH、FSH明显降低,与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。电针组与雌激素组之间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:电针可以通过提高E2水平,调节内分泌失衡状况,促进胰岛素样生长因子IGF-1表达,达到改善骨质疏松的效果,其作用与雌激素作用相近。     

纳米钙补肾中药对激素诱导骨质疏松大鼠股骨生物力学及骨形态的影响

目的：观察纳米钙补肾中药对氢化可的松诱导骨质疏松大鼠股骨生物力学及骨形态的影响。方法：氢化可的松15mg·kg^-1肌注，隔日1次连续8周，诱导建立骨质疏松大鼠模型，纳米钙补肾中药每日上午灌胃1次，连续8周后检测股骨生物力学指标及骨形态计量学指标。结果：纳米钙补肾中药组与模型组相比股骨的最大载荷，抗压强度，轴向刚度，水平剪切刚度均明显增高（P〈0．01）；骨小梁面积百分数（％Tb·Ar），骨小梁厚度（Tb·Th），骨小梁数量（Tb·N）显著增加（P〈0．01）；骨小梁分离度（Tb·Sp）显著降低（P〈0．01）。结论：纳米钙补肾中药对氢化可的松所致的大鼠骨强度的降低和结构的改变有明显的对抗作用。