滋阴补肾法对卵巢切除所致骨质疏松大鼠成骨细胞COX-2蛋白和mRNA表达的影响

目的:通过观察滋阴补肾法对卵巢切除所致骨质疏松大鼠成骨细胞COX-2蛋白和mRNA表达影响,探讨其治疗骨质疏松症的机理。方法:将大鼠随机分为5组,即空白对照组、假手术组、模型组、雌激素组和补肾组。摘除大鼠双侧卵巢3个月后,灌胃给予左归丸,共给药3个月。采用骨组织形态计量学的方法对大鼠胫骨不脱钙骨切片进行形态计量,采用免疫组化和原位杂交的方法分别检测成骨细胞COX-2蛋白和mRNA的表达。结果:与模型组比较,补肾组大鼠胫骨TBV%显著增高,TRS%以及TFS%、MAR、OSW和mAR均明显降低;同时,其成骨细胞COX-2蛋白和mRNA的表达皆显著降低。结论:滋阴补肾法对成骨细胞PG的合成具有抑制作用,这是其能够治疗骨质疏松症的机理之一。     

五味子对去卵巢致骨质疏松大鼠胫骨护骨素、核因子-кB受体活化因子配体蛋白表达的影响

目的 探讨五味子对去卵巢大鼠骨质疏松症的治疗作用及其机理.方法 将59只雌性Wistar大鼠随机分为空白对照组、假手术组、模型组、阳性对照组及五味子组,其中五味子组11只,其余每组12只.摘除大鼠双侧卵巢1个月后,五味子组灌服五味子水煎剂(lg/ml),阳性对照组予己烯雌酚(0.008mg/ml)灌胃3个月(5.6m1/kg).对不脱钙骨切片进行形态计量并检测胫骨成骨细胞(OB)和骨髓基质细胞(MSC)中护骨素(OPG)、核因子-кB受体活化因子配体(RANKL)蛋白表达.结果 五味子组大鼠胫骨骨小梁体积百分比较模型组显著增高,除骨皮质类骨质平均宽度外,骨小梁吸收表面百分比、骨小梁形成表面百分比、骨小梁矿化率术较模型组均显著降低,OB及MSC中OPG蛋白表达明显增高(P＜0.05或P＜0.01),OB中RANKL蛋白表达明显降低(P＜0.05).结论 五味子对卵巢切除大鼠骨质疏松症治疗作用机理之一是通过促进OB和MSC中OPG的分泌,使之与RANKL的结合增多,进而抑制破骨细胞的活性.     

杜仲、千年健对去卵巢大鼠骨质疏松症的治疗作用及其机理探讨

目的:探讨具有温补肾阳作用的单味中药杜仲、千年健对去卵巢所致大鼠骨质疏松症的治疗作用及其机理。方法:将72只雌性Wistar大鼠随机分为空白对照组、假手术组、模型组、阳性对照组、杜仲组以及千年健组6组。给药3个月后,采用骨组织形态计量学方法对不脱钙骨切片进行形态计量,免疫组化和原位杂交法检测大鼠胫骨OB和MSC OPG、RANKL蛋白及其mRNA表达。结果:与模型组相比,杜仲组、千年健组胫骨TBV%显著增高,TRS%明显降低,千年健组TFS%、MAR、OSW明显降低,杜仲组无显著性变化;千年健组OB和MSC OPG蛋白及其mRNA的表达显著升高,RANKL蛋白及其mRNA表达明显降低;杜仲组OB和MSC RANKL蛋白及其mRNA表达明显降低。结论:千年健不仅可以增加OB和MSC OPG蛋白及其mRNA表达,还能抑制RANKL蛋白及其mRNA的表达,而杜仲是通过抑制OB和MSC RANKL蛋白及其mRNA表达达到治疗骨质疏松症作用的。     

骨碎补对卵巢切除所致大鼠骨质疏松症的治疗作用及其机理探讨

目的:探讨骨碎补对卵巢切除所致大鼠骨质疏松症的治疗作用及其机理。方法:将60只雌性Wistar大鼠随机分为空白对照组、假手术组、模型组、阳性对照组和骨碎补组5组,每组12只。摘除大鼠双侧卵巢1个月后,灌胃给予骨碎补水煎剂,给药3个月。采用骨组织形态计量学的方法对大鼠胫骨不脱钙骨切片进行形态计量;采用ELISA方法检测外周血清中IL-1、IL-6、BGP、CT含量。结果:与模型组比较,骨碎补组大鼠胫骨TBV%显著增高,TRS%、TFS%、MAR、mAR显著降低;外周血清中IL-1、IL-6、BGP显著降低,CT显著升高。结论:骨碎补对卵巢切除所致的大鼠骨质疏松症具有一定的治疗作用,具体体现在调节去卵巢所致的骨代谢高转换状态,能降低外周血清中IL-1、IL-6含量以及提高CT水平是其治疗机理之一。     

温补肾阳方对去卵巢所致骨质疏松大鼠IL-1和IL-6活性的影响

目的：探讨温补肾阳方防治骨质疏松症的机理。方法：以卵巢切除所致的骨质疏松大鼠为模型,采用骨组织形态计量学方法测定胫骨TBV％、TRS％和TFS％,分别采用小鼠胸腺细胞检测法和依赖株细胞增殖反应检测法测定IL-1和IL-6的活性。结果：温补肾阳方能使胫骨TBV％显著增高,使TRS％和TFS％均显著降低,并能使之降低到与正常大鼠相当的水平。大鼠切除卵巢后,IL-1和IL-6活性显著增高,而温补肾阳方时这两者均有明显的抑制作用。结论：温补肾阳方能够抑制IL-1、IL-6的活性是其防治绝经后骨质疏松症的机理之一。     

左归丸对卵巢切除所致骨质疏松大鼠IL-1和IL-6活性的影响

目的:探讨左归丸防治骨质疏松症的机理。方法:以卵巢切除所致的骨质疏松大鼠为模型,采用骨组织形态计量学方法测定胫骨骨小梁体积百分比(TBV%)、骨小梁吸收表面百分比(TRS%)和骨小梁形成表面百分比(TFS%),采用放射免疫分析法测定外周血清中雌二醇(E_2)含量,分别采用小鼠胸腺细胞检测法和依赖株细胞增殖反应法测定白细胞介素-1(IL-1)和白细胞介素-6(IL-6)的活性。结果:左归丸能使胫骨TBV%显著增高,使TRS%和TFS%显著降低。大鼠切除卵巢后,E_2含量大幅度降低,而IL-1和IL—6活性显著增高。左归丸对E_2含量无显著性影响,但对IL—1和IL—6活性有明显的抑制作用。结论:左归丸能够抑制IL-1和IL-6的活性是其防治骨质疏松症的机理之一。     

秦皮对去卵巢所致大鼠骨质疏松症的治疗作用及机理探讨

目的:初步探讨秦皮治疗骨质疏松症的作用机理。方法:健康雌性SD大鼠40只按随机数字表法分为空白对照组、假手术组各10只、造模组20只,造模组大鼠行双侧卵巢切除术制作骨质疏松症模型,造模结束后再将造模组大鼠按随机数字表法分为模型组和秦皮组各10只,开始给予相应药物。给药3个月后取左侧胫骨检测骨组织形态计量学指标,取右侧胫骨检测大鼠胫骨骨髓中OPG和RANKL的蛋白表达。结果:模型组大鼠胫骨TBV%、胫骨骨髓中OPG蛋白表达显著低于假手术组,而RANKL蛋白表达及TRS%、TFS%、OSW和MAR均明显高于假手术组。与模型组比较,秦皮组大鼠胫骨TBV%、OPG蛋白表达明显增高,但仍显著低于假手术组;而RANKL蛋白表达、TRS%、TFS%、OSW和MAR均明显降低。结论:秦皮对去卵巢所致的大鼠骨质疏松症具有一定的治疗作用,其作用途径是对OPG/RANKL通路进行调节,促进OPG蛋白表达而抑制RANKL蛋白表达,从而抑制过度增强的破骨细胞活性,防止骨量的快速丢失。     

桑寄生、枸杞子、桑椹对去卵巢大鼠骨质疏松症的治疗作用及其机理探讨

目的:探讨具有滋补肾阴作用的单味中药-桑寄生、枸杞子和桑椹对去卵巢所致大鼠骨质疏松症的治疗作用及其机理。方法:将82只雌性Wistar大鼠随机分为空白对照组、假手术组、模型组、阳性对照组、桑寄生组、枸杞子组、桑椹组7组。给药3个月后,采用骨组织形态计量学方法对不脱钙骨切片进行形态计量;免疫组化法检测大鼠胫骨OB和MSCOPG、RANKL蛋白表达,ELISA法检测外周血清中IL-1、IL-6含量。结果:与模型组相比,桑寄生组、枸杞子组胫骨TBV%显著增高,TRS%、TFS%、MAR明显降低,OSW、mAR无显著性差异;而桑椹组无显著性变化。桑寄生组OB和MSCOPG蛋白表达显著升高,外周血IL-1明显下降;枸杞子组OB和MSCOPG蛋白表达显著增高,RANKL蛋白表达明显降低,外周血IL-1、IL-6水平降低;桑椹组无显著性变化。结论:枸杞子的治疗作用机理是促进OB和MSCOPG蛋白表达,抑制RANKL蛋白表达,降低外周血中IL-1、IL-6水平;桑寄生的作用是促进OPG蛋白表达,降低IL-1含量。     

糖皮质激素诱导肾虚骨质疏松症大鼠骨组织中PPARγ2的mRNA及蛋白表达的影响

目的:研究糖皮质激素骨质疏松症大鼠骨组织中PPARγ2的mRNA和蛋白表达,揭示糖皮质激素骨质疏松症的发病机理,阐述纳米钙补肾中药的调节作用机制。方法:用糖皮质激素注射的方法复制骨质疏松症模型,用纳米钙及具有益肾填精、补钙壮骨作用的补肾中药高、低剂量对实验大鼠治疗8周,以骨疏康颗粒、盖天力钙片作为阳性对照组,正常大鼠和模型空白组为空白对照组。用PCR法、Western印迹法检测骨质疏松症大鼠骨组织中PPARγ2的mRNA和蛋白表达。结果:正常大鼠骨组织可以在基因、蛋白水平表达PPARγ2,而且在骨髓脂肪细胞分化中可能起到重要的作用,糖皮质激素对大鼠骨质疏松症的发生与骨组织中PPARγ2 mRNA和蛋白表达的变化有关,从而影响骨髓脂肪细胞形成。结论:纳米钙补肾中药通过调控大鼠骨组织中PPARγ2 mRNA和蛋白表达,抑制骨髓脂肪细胞的形成,从而对糖皮质激素性骨质疏松症有一定的防治作用。     

滋补肾阴方与温补肾阳方对卵巢切除所致骨质疏松大鼠IL-1和IL-6活性的影响

目的 :对比观察滋补肾阴方与温补肾阳方对卵巢切除所致骨质疏松大鼠白细胞介素 1(IL 1)和白细胞介素 6 (IL 6 )活性的影响。方法 :将 5 5只雌性大鼠随机分为正常对照组、假手术组、卵巢切除组、滋阴组和补阳组。于卵巢切除 1周后 ,给大鼠灌胃给药 ,连续给药 3个月。采用骨组织形态计量学方法对大鼠胫骨进行形态计量 ;分别采用小鼠胸腺细胞检测法和IL 6依赖株细胞增殖反应检测法测定IL 1和IL 6的活性。结果 :卵巢切除 3个月后 ,大鼠胫骨骨小梁体积百分比 (TBV % )明显降低 ,骨小梁吸收表面百分比(TRS % )和骨小梁形成表面百分比 (TFS % )皆显著增高。同时 ,IL 1和IL 6活性亦显著增高。给大鼠灌服滋补肾阴方和温补肾阳方后 ,均能使上述指标发生逆转 ,但程度有所不同 ,温补肾阳方的效果要明显优于滋补肾阴方。结论 :温补肾阳方对IL 1、IL 6活性的抑制作用明显强于滋补肾阴方 ,这是其对卵巢切除所致大鼠骨质疏松的预防作用之所以优于滋补肾阴方的机理之一。     

糖皮质激素诱导肾虚骨质疏松症大鼠骨组织中BMP6/BMP7mRAN及蛋白表达的影响

目的:研究糖皮质激素性骨质疏松症大鼠骨组织中BMP6/BMP7的mRNA和蛋白表达,揭示糖皮质激素骨质疏松症的发病机理,阐述纳米钙补肾中药的调节作用机制。方法:用糖皮质激素注射的方法复制骨质疏松症模型,用纳米钙及具有益肾填精、补钙壮骨作用的补肾中药高、低剂量对实验大鼠治疗8周,以骨疏康颗粒、盖天力钙片作为阳性对照组,正常大鼠和模型空白组为空白对照组。用PCR法、Western印迹法检测骨质疏松症大鼠骨组织中BMP6/BMP7mRNA和蛋白表达。结果:正常大鼠骨组织可以在基因、蛋白水平表达BMP6及BMP7,模空组大鼠骨组织中的BMP6/BMP7 mRNA和蛋白表达水平明显的下降。纳米钙补肾中药高、低剂量组、盖天力组、骨疏康组,用药8周后,与模空组相比较,均可上调骨组织中BMP6/BMP7 mRNA和蛋白的表达水平。结论:纳米钙补肾中药通过调控大鼠骨组织中BMP6/BMP7 mRNA和蛋白表达,抑制骨吸收,促进骨形成,从而对糖皮质激素性骨质疏松症有一定的防治作用。     

骨碎补总黄酮对去卵巢大鼠骨密度和骨组织形态计量学影响

目的 :以卵巢切除雌性大鼠为模型 ,观察骨碎补总黄酮对骨质疏松模型大鼠的组织形态计量学的影响。方法 :去卵巢制作模型 ,制作不脱钙骨切片及染色 ,采用LeicaQwin图象分析系统进行骨组织形态计量。结果 :对胫骨骨小梁体积百分比 (TBV % )的影响 ,与模型组比较 ,骨碎补总黄酮小剂量组和中剂量组的TBV %明显增高 ;对胫骨骨小梁吸收表面百分比 (TRS % )的影响 ,与模型组比较 ,骨碎补总黄酮小剂量组、中剂量组的TRS %显著降低 ;对胫骨骨小梁形成表面百分比 (TFS % ) ,活性生成表面百分比 (AFS % ) ,骨小梁矿化率 (MAR)和骨小梁骨生成率(BFR)的影响 ,骨碎补总黄酮小剂量组、中剂量组的TFS % ,AFS % ,MAR ,BFR较模型组皆明显降低 ;对胫骨类骨质平均宽度 (OSW)和骨皮质矿化率 (mAR)的影响 ,骨碎补总黄酮中剂量组的OSW和mAR与模型组比较 ,明显降低 ;骨碎补总黄酮小剂量组与之相比 ,有下降的趋势 ,但无统计学意义。结论 :给去卵巢大鼠灌服骨碎补总黄酮 6个月后 ,TBV %明显增高 ,TRS %以及TFS % ,AFS % ,MAR ,BFR ,OSW ,mAR均明显降低 ,表明骨碎补总黄酮对卵巢切除所致的骨质疏松症具有明显的防治作用。     

益气温阳护卫法对哮喘大鼠IL-4/STAT6信号通路的影响

目的:探讨益气温阳护卫法对哮喘大鼠白细胞介素4/信号传导子及转录激活子6(IL-4/STAT6)信号通路的调节作用.方法:50只SPF级雄性SD大鼠随机分为正常对照组、哮喘模型组、益气温阳护卫组、地塞米松组和卡介菌多糖核酸组,每组10只.采用TaqMan Real time PcR测定哮喘大鼠Th细胞IL-4和STAT6的mRNA表达变化.结果:哮喘模型组IL-4和STAT6的mRNA表达显著高于正常对照组(P＜0.01),益气温阳护卫组、地塞米松组和卡介菌多糖核酸组PBMC中IL-4和STAT6的mRNA表达显著低于哮喘模型组(P＜0.01),且与正常对照组IL-4和STAT6的mRNA表达相当.结论:益气温阳护卫法能够抑制哮喘大鼠IL-4/STAT6信号通路基因的表达,该作用可能是调节Th1/Th2细胞亚群趋于平衡的重要机制.     

左归丸对去卵巢所致大鼠骨质疏松症的治疗作用

目的：探讨左归丸对骨质疏松症的治疗作用。方法：以卵巢切除所致的骨质疏松大鼠为动物模型,采用骨组织形态计量学方法测定胫骨TBV％、TRS％、TFS％、AFS％、MAR、BFR、OWS和mAR。结果：大鼠切除卵巢后,胫骨TBV%显著降低,TRS％以及TFS％、AFS％、MAR、BFR、OWS和mAR均显著提高,从而表明卵巢切除所造成的是一种骨吸收大于骨形成的高转移型骨质疏松症。给大鼠灌服左归丸后,能使上述指标发生逆转。结论：左归丸对去卵巢所致大鼠骨质疏松症具有一定的治疗作用。     

温补肾阳方对去卵巢大鼠骨质疏松症的治疗作用

目的：探讨温补肾阳方对骨质疏松症的治疗作用。方法：以卵巢切除所致的骨质疏松大鼠为动物模型,采用骨组织形态计量学方法测定胫骨TBV％、TRS％、TFS％、AFSN、MAR、BFR、OWS和mAR。结果：大鼠切除卵巢后,胫骨TBV％降低,TRS％以及TFS％、AFS％、MAR、BFR、OWS和mAR均显著增高,从而表明卵巢切除所造成的是一种骨吸收大于骨形成的高转换型骨质疏松症。给大鼠灌服温补肾阳方后,能使上述情况发生逆转,即能使TBV％显著增高,使TRS％以及TFS％、AFS％、MAR、BFR、OWS和mAR均显著降低,并能使之降低到与正常大鼠相当的水平。结论：温补肾阳方对骨质疏松症具有良好的治疗作用。     

仙杞煎液对实验性骨质疏松大鼠骨密度、白介素6和血浆酸性磷酸酶的影响

目的:探讨仙杞煎液对大鼠实验性骨质疏松症的治疗作用及其作用机理。方法:选用7月龄SD雌性大鼠72只,随机分为2组。手术组60只行双侧卵巢切除术,假手术组12只行伪手术,复制成绝经后骨质疏松大鼠模型。将手术组随机分为模型组、西药组、仙杞煎液低、中、高剂量组,连同假手术组共6组按相应剂量灌胃给药。60天后摘眼球取血后将大鼠处死。分离血清和血浆,测定血清白细胞介素6(IL-6)和血浆酸性磷酸酶(ACP)水平,测大鼠脊柱和股骨骨密度。结果:与模型组相比,各中药组可显著降低IL-6和PCP水平(P<0.05或P<0.01).中药各剂量组及西药组间差异无显著性(P>0.05)。与模型组相比,各用药组骨密度均升高(P<0.05)。     

电针对佐剂性关节炎大鼠病灶局部皮肤组织IL-1β、IL-1ra mRNA表达的影响

目的 :观察电针对单侧佐剂性关节炎大鼠的疼痛试验评分、炎症灶局部病理反应 ,以及病灶局部皮肤组织IL 1β、IL 1ramRNA表达的影响。方法 :通过将完全弗氏佐剂 50 μL注入SD大鼠左后肢外踝关节皮下制造单侧佐剂性关节炎疼痛模型 ,电针“环跳”穴、“阳陵泉”穴 (刺激参数为0 .5～ 1.5V ,4～ 16Hz,3 0min) ,应用跖、背屈关节评分连续观察大鼠 7d内的痛反应曲线 ,应用HE组织化学染色方法观察病灶局部皮肤组织炎性病理反应 ,应用RT PCR技术检测IL 1β、IL 1ramRNA表达情况。结果 :电针可明显减少炎症痛大鼠的疼痛评分 ,抑制佐剂性关节炎大鼠病灶局部炎性病理反应 ,并抑制病灶局部皮肤组织IL 1βmRNA表达 ,促进IL 1ramRNA表达 ,使IL 1ra/IL 1β比值上升 (P <0 .0 1)。结论 :电针可能通过调节炎症灶局部致炎细胞因子及抗炎细胞因子之间的平衡 ,从根本上解除局部病灶免疫细胞的激活状态 ,达到扶正祛邪、平衡阴阳的调控作用 ,从外周途径缓解疼痛。