补阳还五汤对BMP2/4介导轴突再髓鞘化的影响

目的通过研究补阳还五汤对BMP2/4的干预作用,来探讨补阳还五汤对大鼠脊髓损伤后残存轴突再髓鞘化的影响。方法 将60只大鼠分为假手术组、模型组和治疗组(n=20);假手术组只打开胸10节段椎板,不损伤脊髓;模型组和治疗组采用改良Allen垂直打击法制作胸10节段脊髓损伤模型;术后治疗组给予补阳还五汤浓缩液灌胃,连续灌胃28天;分别于造模前、造模后当天、造模后7天、造模后14天、造模后28天评估每只大鼠的BBB评分,并于造模后28天取大鼠胸10节段脊髓组织,检测BMP2/4的表达变化。结果造模后28天治疗组大鼠BBB评分明显高于模型组,P0.05(差异有统计学意义)。分析免疫印迹检测结果提示:造模后28天治疗组和模型组脊髓损伤节段BMP2/4表达量大量增加,假手术组BMP2/4少量表达,治疗组BMP2/4表达少于模型组,各组组间差异具有统计学意义(P0.05)。结论补阳还五汤可有效抑制大鼠脊髓损伤局部BMP2/4的表达,可能通过此种途径来促进脊髓损伤后残存轴突的再髓鞘化。     

补阳还五汤对SD大鼠脊髓损伤后HIF-1α、VEGF表达的影响

目的:探讨补阳还五汤对SD大鼠脊髓损伤后脊髓损伤节段HIF-1α、VEGF蛋白含量的影响。方法:将54只SD大鼠随机分为假手术组、BYHWT组、模型组,每组18只;假手术组单纯去除T10椎板,不损伤脊髓,模型组及BYHWT组均采用Allen’s垂直打击法制备T10节段SCI大鼠模型,评价各组大鼠于造模前、造模后1 d及1周后的行为学BBB功能评分,于造模后1周取材,通过HE染色观察脊髓组织形态学改变,通过ELISA、免疫印迹检测HIF-1α、VEGF蛋白表达情况。结果:BYHWT组BBB评分高于模型组,损伤节段组织中HIF-1α、VEGF含量明显高于假手术组、模型组(P0.01)。结论:补阳还五汤能促进脊髓损伤后SD大鼠脊髓损伤节段HIF-1α、VEGF表达,改善局部缺血缺氧环境,减轻因脊髓损伤缺血缺氧时对脊髓造成的损伤,从而促进神经功能恢复。     

补阳还五汤对脊髓损伤大鼠脊髓星形胶质细胞增殖的影响

目的 探究补阳还五汤对脊髓损伤大鼠脊髓星形胶质细胞增殖的影响。方法 采用改良Allen重物打击法制作脊髓损伤模型，将大鼠分为3组，即假手术组、脊髓损伤模型组、补阳还五汤组，各10只。造模干预1、3、5周后，巴索-比蒂-布雷斯纳汉(Basso-Beattie-Bresnahan, BBB)评分和斜板试验，评价大鼠后肢运动功能；皮层体感诱发电位波潜伏期，检测大鼠脊髓神经传导功能。于术后5周，HE染色，观察脊髓组织形态学变化的情况；免疫荧光染色，检测脊髓损伤区域中脊髓星形胶质细胞数量；蛋白质印迹法，检测脊髓组织中GFAP蛋白表达。结果 在造模干预1、3、5周后，模型组BBB评分及斜板试验倾斜角度显著低于假手术组(P<0.05),皮层体感诱发电位波潜伏期显著高于假手术组(P<0.05);补阳还五汤组BBB评分及斜板试验倾斜角度明显高于模型组(P<0.05),皮层体感诱发电位波潜伏期明显低于模型组(P<0.05)。在造模干预5周后，HE染色见补阳还五汤组脊髓组织结构较清晰，白质及灰质中坏死区减小，胶质疤痕减少，细胞及组织结构接近假手术组。在造模干预5周后，模型组大鼠脊髓组...     

补阳还五汤对大鼠急性脊髓损伤后血清中MBP蛋白含量的影响

目的探讨补阳还五汤对大鼠脊髓损伤(SCI)后血清中髓鞘碱性蛋白(MBP)含量的影响。方法将45只大鼠随机分为模型组、补阳还五汤(BYHWT)组、假手术组(n=15);假手术组单纯咬除T10椎板,不损伤脊髓,模型组及BYHWT组均采用Allen’s垂直打击法来制备T10节段SCI大鼠模型,术后第1天,BYHWT组开始给予BYHWT浓缩液灌胃,于造模后3 d、7 d、14 d行大鼠后下肢BBB评分并用腹主动脉采血法取血提取大鼠血清,通过Elisa法检测各组血清中MBP蛋白含量情况。结果 BYHWT治疗后,血清中MBP含量较模型组明显下降,BBB评分较模型组模型升高。结论 BYHWT能减少SCI后MBP释放,减少SCI血清中MBP蛋白含量,从而减轻髓鞘组织的退变促进神经功能恢复。     

补阳还五汤对急性脊髓损伤大鼠NOD样受体蛋白1/半胱氨酸蛋白水解酶-1细胞焦亡通路的影响

目的:探究补阳还五汤对急性脊髓损伤(SCI)大鼠NOD样受体蛋白1(NLRP1)/半胱氨酸蛋白水解酶-1(Caspase-1)细胞焦亡通路的影响。方法:将32只SPF级大鼠随机分成假手术组、甲强龙组、补阳还五汤(BYHWT)组和模型组,造模成功后补阳还五汤组每天给予补阳还五汤灌胃1次,连续14d,甲强龙组给予甲强龙冲击治疗;假手术组及模型组注射等补阳还五汤剂量的生理盐水;干预后的第1,3,7及14天以BBB评分评价大鼠神经功能恢复情况,Western Blot法检测损伤脊髓中组织NLRP1,Caspase-1及IL-18蛋白的表达。结果:BBB评分:假手术组大鼠评分无变化,BYHWT组及甲强龙组治疗后3d,7d及14d评分大于模型组,差异有统计学意义(P0.05),治疗后7d及14d,各组大鼠评分变化不明显。干预后第14天大鼠损伤脊髓组织中NLRP1,Caspase-1及IL-18蛋白的表达结果:BYHWT组和甲强龙组蛋白表达均低于假手术组,高于模型组,差异有统计学意义(P0.05)。结论:补阳还五汤联合脊髓减压治疗急性SCI效果明显,作用机制可能是通过抑制NLRP1/Caspase-1通路以减少细胞焦亡。     

补阳还五汤对脊髓损伤大鼠脊髓功能修复及gp130、IL-6的影响

目的 探讨补阳还五汤对脊髓损伤大鼠脊髓功能修复及gp130、IL-6的影响。方法 采用改良Allen重物打击法制作脊髓损伤模型，将大鼠分为6组，即假手术组(Sham)、脊髓损伤模型组(Model)、补阳还五汤低剂量组(BYHWD-L)、补阳还五汤中剂量组(BYHWD-M)、补阳还五汤高剂量组(BYHWD-H)、阳性药物甲强龙组(MP),各10只。术后1、3、5周，采用BBB(Basso Beattie Bresnahan)评分和斜板试验评价大鼠后肢运动功能；用ViKing Quest型肌电诱发电位仪检测皮层体感诱发电位波潜伏期判断大鼠脊髓神经功能。术后5周，HE染色观察脊髓组织损伤情况；血液分析仪检测大鼠外周血白细胞计数与分类；蛋白质印迹检测脊髓组织中gp130、IL-6蛋白表达。结果 在1、3、5周时，与Sham组相比，Model组BBB评分、斜板试验角度显著降低(P<0.05),大鼠皮层体感诱发电位波潜伏期时长显著增加(P<0.05);与Model组相比，各治疗组BBB评分、斜板试验角度明显升高(P<0.05),大鼠皮层体感诱发电位波潜伏期时长明显降低(P<...     

补阳还五汤对大鼠脊髓损伤后神经功能影响的实验研究

目的:探讨补阳还五汤对大鼠脊髓损伤后神经功能影响。方法:45只健康雄性SD大鼠,随机分成中药治疗组、地塞米松对照组、模型对照组,每组15只,3组动物采用改良Avlen's脊髓打击造模方法制备大鼠急性脊髓损伤模型,应用补阳还五汤进行干预,观察造模术后不同时间点大鼠感觉运动及脊髓神经功能BBB评分变化。结果:3组大鼠神经均有一定恢复,术后7d,中药治疗组与地塞米松组BBB评分比较,差异无统计学意义(P>0.05),但术14 d,中药治疗组效果优于地塞米松组(P>0.05)。结论:补阳还五汤能有效改善急性脊髓损伤后大鼠神经功能状况。     

补阳还五汤联合鞘内注射间充质干细胞治疗脊髓损伤的研究

目的:探讨补阳还五汤联合鞘内注射大鼠间充质干细胞(rMSCs)对大鼠脊髓损伤(SCI)的修复作用。方法:将66只Wistar大鼠,随机分成模型组、假手术组、PBS对照组(简称对照组)、补阳还五汤组(简称中药组)、鞘内注射rMSCs组(简称移植组)和补阳还五汤联合鞘内注射rMSCs组(简称联合组)。造模后3天,对照组鞘内注射PBS液,中药组予以补阳还五汤灌胃30天,移植组鞘内注射rMSCs,联合组鞘内注射rMSCs同时给予补阳还五汤灌胃30天。治疗后第7、14、21、28天分别行BBB分级法检测神经功能恢复情况,HE染色法观察脊髓损伤病理改变和修复情况,应用免疫组化技术检测BrdU标记的rMSCs胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和神经元特异烯醇化酶(NSE)表达情况。结果:成功制作了大鼠脊髓半横断损伤模型,移植组和联合组BBB分级法检测平均得分较模型组、对照组和中药组有显著提高(P0.05),联合组在不同时间点的BBB平均得分都高于移植组。脊髓组织病理切片显示联合组较移植组组织水肿和炎性细胞浸润减轻更明显,胶质细胞增生更加活跃。双标免疫组化显示移植的rMSCs可迁移到宿主脊髓损伤处并存活,从第7天开始即有NSE和GFAP表达。联合组中GFAP、NSE阳性细胞数目均较移植组多(P0.05)。结论:鞘内注射移植rMSCs对大鼠脊髓损伤具有修复作用,联合应用补阳还五汤有协同增效的效果,有利于大鼠脊髓功能的恢复。     

补阳还五汤联合骨髓间充质干细胞对脑缺血大鼠血脑屏障通透性的影响

目的:为了研究补阳还五汤联合骨髓间充质干细胞(MSCs)对脑缺血再灌注大鼠血脑屏障(blood brain barrier, BBB)通透性及其影响因素AQP4的表达。方法:将大鼠80只随机分为假手术组、模型组、补阳还五汤组、MSCs组、补阳还五汤联合MSCs组(联合组),每组各16只。利用改良线栓法制备大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery obstruction,MCAO)缺血再灌注大鼠模型,在3、5 d运用干湿重法测定缺血脑组织含水量,采用伊文思蓝(Evans blue, EB)法检测血脑屏障的通透性,用透射电镜观察血脑屏障超微结构的变化,采用Western Blot法检测缺血脑组织中AQP4的表达。结果:与假手术组相比,在造模后3、5 d时间点,MCAO模型组大鼠脑组织含水量、EB含量显著升高,AQP4的蛋白表达水平上升,具有极显著性统计学意义(P0.01);与模型组相比,补阳还五汤组、MSCs组、联合组中缺血脑组织含水量、EB含量及AQP4的蛋白表达水平显著下降,各组间有显著统计学意义(P0.05)。联合组的作用在第5天更为明显,与MSCs组及补阳还五汤组相比,具有显著性差异(P0.05)。结论:补阳还五汤联合MSCs可以降低脑组织的含水量及血脑屏障的通透性,维持BBB结构的完整性,其作用机制与水通道蛋白AQP4的调控密切相关。     

补阳还五汤对大鼠局灶性脑缺血损伤血脑屏障的影响

目的观察补阳还五汤对大鼠局灶性脑缺血损伤血脑屏障的保护作用,阐明该方抗脑缺血的机理。方法采用线栓法复制大鼠局灶性脑缺血模型。将SD大鼠随机分为假手术组、模型组和补阳还五汤组,造模后24 h给药,补阳还五汤组给予补阳还五汤灌胃,假手术组、模型组给予等量生理盐水灌胃。造模后7 d,评价各组大鼠神经功能并处死取材,四氮唑红染色观察大鼠脑组织梗死体积,HE染色观察大鼠脑微血管的一般形态,ELISA检测大鼠脑组织内基质金属蛋白酶(MMP)-9、MMP-2、血管内皮生长因子(VEGF)蛋白水平及血清中血管性血友病因子(vWF)的表达。结果与模型组比较,补阳还五汤组能显著改善神经功能行为评分,减少脑梗死体积,降低MMP-9、MMP-2、VEGF、vWF水平。病理观察结果显示,补阳还五汤组脑组织病理变化较模型组减轻。结论补阳还五汤对大鼠局灶性脑缺血具有保护作用,其作用可能与保护血脑屏障,抑制MMP-9、MMP-2、VEGF、vWF的表达有关。     

补阳还五汤对心肌梗死后大鼠心肌微血管密度及血管内皮细胞生长因子-C表达的影响

目的观察补阳还五汤对大鼠心肌梗死后左室非梗死区心肌微血管新生的影响。方法雄性Wistar大鼠,结扎左冠状动脉主干造成心肌梗死模型,将造模成功的大鼠随机分为模型对照组及补阳还五汤低、中、高剂量组,加上假手术组,共5组,每组12只。补阳还五汤低、中、高剂量组分别按9.25、18.5、37 g/（kg.d）给予补阳还五汤水煎剂灌胃,假手术组、模型组给予0.2 mL/10 g生理盐水灌胃。连续给药12周后处死大鼠。免疫组化法检测心肌Ⅷ因子的表达,Westren blot及免疫组化法检测血管内皮细胞生长因子-C（VEGF-C）的表达。结果假手术组和不同剂量补阳还五汤组血管密度和VEGF-C的表达明显高于模型组（P〈0.001）;补阳还五汤中剂量组VEGF-C的表达与假手术组相当（P〉0.05）,补阳还五汤高剂量组VEGF-C表达高于假手术组（P〈0.01）。结论补阳还五汤可以促进心肌梗死后大鼠左室非梗死区血管新生,并且呈剂量依赖性,补阳还五汤促血管新生作用可能与升高VEGF-C表达有关。     

补阳还五汤对急性脊髓损伤大鼠内质网应激相关因子影响的研究

目的:探讨补阳还五汤灌胃治疗对大鼠急性脊髓损伤(Spinal Cord Injury,SCI)的修复作用及作用机制。方法:将SPF级3月龄Wistar雌性大鼠40只,随机分成假手术组、模型组、甲强龙组、补阳还五汤组(中药组)。造模后第1天,甲强龙组经尾静脉注射甲强龙治疗共24h,首剂量为30mg/kg,余以5.4mg/(kg·h)每4h给药1次;中药组以中剂量补阳还五汤颗粒剂,配制成含颗粒剂2.00g/mL的水溶液,每天3.5g/kg灌胃,相当于成人用量的1倍,1次/d,共14d.治疗后第1,3,7及14天分别以BBB分级法评价神经功能恢复情况,Western Blot法检测SCI节段Caspase-12,Caspase-9及Caspase-3蛋白的表达。结果:各时间点BBB评分随时间延长而上升,差异有统计学意义(P0.01);治疗后7d和14dBBB评分比较,差异无统计学意义(P0.05)。组间比较:中药组和甲强龙组的BBB评分高于模型组,差异有统计学意义(P0.01);中药组和甲强龙组比较差异无统计学意义(P0.05)。治疗后第14天大鼠脊髓组织中Caspase-12,Caspase-9及Caspase-3蛋白的表达:中药组和甲强龙组各蛋白表达均低于模型组,差异有统计学意义(P0.01);与假手术组比较,差异无统计学意义(P0.05);中药组和甲强龙组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:围手术期以补阳还五汤治疗急性SCI,对大鼠脊髓损伤具有修复作用,其作用机制可能是通过抑制过度的内质网应激反应,下调Caspase-12,Caspase-9及Caspase-3蛋白的表达。     

夹脊电针对急性脊髓损伤大鼠运动功能及脊髓组织NogoA、RhoA、ROCK Ⅱ蛋白表达的影响

目的:观察夹脊电针对急性脊髓损伤模型大鼠肢体运动功能和脊髓组织髓鞘相关抑制因子勿动蛋白A(Nogo-A)、Ras同源基因家族成员A(RhoA)和Rho激酶Ⅱ(ROCKⅡ)蛋白表达的影响。方法:将18只成年雌性Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组和夹脊电针组,每组6只。采用NYU打击器制备急性脊髓损伤模型,夹脊电针组给予损伤节段上下一对夹脊穴电针治疗。治疗1天、3天、7天、14天、28天后采用BBB评分法对大鼠急性脊髓损伤后运动功能进行评估;治疗28天后采用HE染色观察脊髓组织病理形态学变化;采用Western blot法检测脊髓组织Nogo-A、RhoA和ROCKⅡ蛋白表达。结果:与假手术组比较,模型组和夹脊电针组在各时间点BBB评分显著降低(P0.05);与模型组比较,夹脊电针组在治疗3天后BBB评分显著升高(P0.05)。与假手术组比较,模型组Nogo-A、RhoA和ROCKⅡ蛋白表达均显著升高(P0.05);与模型组比较,夹脊电针组Nogo-A、RhoA和ROCKⅡ蛋白表达均显著降低(P0.05)。结论:夹脊电针治疗能够显著改善急性脊髓损伤模型大鼠肢体运动功能和脊髓组织病理形态学变化,可能与其下调脊髓损伤微环境中Nogo-A、RhoA、ROCKⅡ蛋白表达有关。     

补阳还五汤对失神经肌萎缩大鼠Angptl4表达的影响

目的研究补阳还五汤(黄芪、当归、白芍、地龙、川芎、红花、桃仁)对失神经肌萎缩大鼠Angptl4基因表达的影响,探讨其对失神经肌萎缩的保护机制。方法建立大鼠腓总神经夹伤模型,将造模后的60只SPF级SD大鼠随机分为:假手术组、补阳还五汤高、中、低剂量组、弥可保组与模型组,术后每日灌胃给药。18 d后qRT-PCR与Western-blot检测Angptl4基因与蛋白的差异表达。结果与模型组相比,补阳还五汤中、高剂量组Angptl4 mRNA与蛋白表达均显著增高(P<0.05或P<0.01)。结论补阳还五汤可能通过增加Angptl4基因与蛋白表达,促进血管新生,改善失神经萎缩肌肉的血液供应,从而延缓肌萎缩的发生。     

补阳还五汤对大鼠脊髓损伤后P物质表达的影响

目的 研究中药补阳还五汤对脊髓损伤后P物质 (SP)表达的影响.方法 成年SD大鼠24只,随机分为假手术组、实验组和对照组,每组8只,实验组和对照组行脊髓右侧半横断损伤后,分别以补阳还五汤和蒸馏水连续灌胃,用免疫组织化学方法结合图像分析检测脊髓后角内SP的表达变化.结果 脊髓后角内SP的阳性神经元数和平均光密度在造模后第32天,实验组和对照组均比假手术组降低,实验组SP的表达明显高于对照组.结论 补阳还五汤能使脊髓后角内SP的表达上调,对脊髓半横断损伤后的感觉神经元有保护作用.     

补阳还五汤对脑缺血再灌注损伤大鼠PTEN mRNA的影响

目的:探讨补阳还五汤对脑缺血再灌注大鼠第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物基因(PTEN)mRNA表达与血小板活化的影响。方法:将无特定病原体(SPF)级SD大鼠60只随机分为假手术组、模型组、氢氯吡格雷组、补阳还五汤高、低剂量组,每组12只。氢氯吡格雷组ig给予氯吡格雷6.8 mg·kg-1·d-1,补阳还五汤高、低剂量组分别ig给予补阳还五汤26,6.5 g·kg-1·d-1,其余各组ig给予生理盐水,连续给药14 d后,采用大脑中动脉线栓法复制大鼠急性局灶性脑缺血再灌注模型,并在造模前2 h给予相应ig处理,造模60 min后拔除栓线再灌注12 h后收集相应标本保存,测定各组大鼠血浆P-选择素(CD62P)含量与海马组织PTEN mRNA表达情况。结果:与假手术组比较,模型组神经行为评分显著增加,与模型组比较,各用药组的神经行为评分显著降低;与假手术组比较,模型组血浆中CD62P表达显著升高(P0.05);与模型组比较,补阳还五汤组与氢氯吡格雷组均能显著抑制血浆中CD62P表达(P0.05),但补阳还五汤组与氢氯匹格雷组之间抑制作用无显著性差异;与假手术组比较,模型组PTEN mRNA表达显著增加;与模型组比较,各用药组的PTEN mRNA表达显著降低(P0.05),以补阳还五汤高剂量组尤为明显。结论:补阳还五汤对急性脑缺血再灌注损伤模型大鼠的保护机制可能与下调PTEN基因过表达及抑制CD62P表达有关。     

补阳还五汤对局灶性脑缺血大鼠TLR4表达的影响

目的探讨补阳还五汤对局灶性脑缺血大鼠脑组织TLR4表达的影响。方法 72只大鼠随机分为假手术组、模型组和补阳还五汤组,每组按给药后7、14、21 d 3个时间点再各分3组,用免疫组化、Western blot、RT-PCR法检测各组不同时间点TLR4的蛋白和基因表达。结果模型组和补阳还五汤组各时间点TLR4蛋白和mRNA表达均高于假手术组(P<0.05),补阳还五汤组在第7、14天TLR4蛋白表达明显低于模型组,但TLR4mRNA水平在第7天、14天却明显高于模型组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论补阳还五汤通过调节缺血后脑组织TLR4的表达可能是其治疗脑缺血的作用机制之一。     

补阳还五汤加水蛭对脑梗死大鼠学习记忆能力和神经元自噬的影响＊

目的 探讨补阳还五汤加入水蛭对脑梗死大鼠学习记忆及自噬相关蛋白Beclin 1和LC3-Ⅱ表达的影响。方法 采用颈动脉注射微栓子的方法制备大鼠脑梗死模型，筛选模型后随机分为模型组、补阳还五汤加水蛭低、中、高剂量组、补阳还五汤原方组，另设假手术组。分组后连续14天各组灌胃给予相应药物治疗。巴恩斯迷宫观察进入目标洞的潜伏期和探究非目标洞的错误次数，苏木素-伊红（HE）染色观察脑梗死边缘区组织形态及细胞结构变化；免疫组化定性检测Beclin 1、LC3-Ⅱ蛋白表达，免疫蛋白印迹法（Western blot）半定量检测Beclin 1、LC3-Ⅱ的表达。结果 巴恩斯结果显示，与假手术组比较，模型组到达目标洞的潜伏期明显延长，进入错误洞的次数增加；与经过模型手术的实验鼠相比，补阳还五汤加水蛭低、中、高、补阳还五汤原方组治疗的大鼠成功进入目标洞的潜伏期显著缩短；进入错误洞的次数分别减少。HE染色显示，梗死边缘区脑组织损伤明显，海马区神经元密度显著减少，残存神经元出现核固缩、噬伊红现象。免疫组化显示，经过模型手术的脑梗死致模大鼠海马神经细胞中Beclin 1、LC3-Ⅱ与假手术组相比，棕黄色颗粒呈现高表达状态，补阳还五汤加水蛭低、中、补阳还五汤原方组药物治疗组Beclin 1棕黄色颗粒呈现阳性表达显著降低，补阳还五汤加水蛭低、中、高、补阳还五汤组LC3-Ⅱ棕黄色颗粒呈现阳性表达比模型组明显减弱。免疫蛋白印迹结果呈现，与假手术组比经造模手术大鼠脑组织中Beclin 1和LC3-Ⅱ蛋白含量显著升高。与模型组相比，补阳还五汤加水蛭各治疗组及原方药物治疗组Beclin 1含量显著下降，LC3-Ⅱ的含有量明显下降。结论 补阳还五汤加水蛭可通过下调脑梗死大鼠脑组织内LC3-Ⅱ和Beclin 1蛋白表达，抑制脑组织受损后激活的自噬过度，降低脑梗死体积，改善大鼠因脑梗而带来的学习记忆等障碍，逐瘀的治疗作用也优于补阳还五汤原方，对脑神经功能有维持及保护作用     

活血通督汤对大鼠脊髓损伤后Ⅰ和Ⅳ型胶原蛋白表达的影响

目的:观察活血通督汤对大鼠脊髓损伤后Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)和Ⅳ型胶原蛋白(CollagenⅣ)表达的影响,探讨该方对脊髓损伤后肢体运动功能恢复的作用机制。方法:将36只成年SD大鼠随机分为假手术组(n=12)、模型组(n=12)及活血通督汤组(n=12)。假手术组行椎板切除术,不损伤脊髓,模型组和活血通督汤组采用NYU脊髓损伤打击器复制脊髓损伤模型。造模成功后,假手术组和模型组给予生理盐水灌胃,活血通督汤组给予活血通督汤灌胃,给药剂量为12.6mL/(kg·d),术后第1,3,5和7天行BBB肢体运动功能评分。采用Western blot检测CollagenⅠ和CollagenⅣ蛋白表达量,尼氏染色法观察神经细胞形态,免疫组织化学染色法检测脊髓组织中CollagenⅠ和CollagenⅣ定位表达。结果:1)术后第3天开始,活血通督汤组BBB评分高于模型组(P0.05);2)尼氏染色显示活血通督汤组神经元的结构形态优于模型组,神经元受损状况得到改善;3)免疫组化和Western blot显示,与假手术组比较,模型组和活血通督汤组可见较多CollagenⅠ和CollagenⅣ表达(P0.05),但模型组CollagenⅠ表达比活血通督汤组少,模型组CollagenⅣ表达多于活血通督汤组(P0.05)。结论:活血通督汤促进脊髓损伤后肢体运动功能的恢复,其机制可能与其促进CollagenⅠ的表达且抑制CollagenⅣ的表达有关。     

补阳还五汤对舒张性心衰大鼠心肌钙转运蛋白SERCA2a及受磷蛋白的影响

目的运用补阳还五汤对舒张性心衰(diastolic heart failure,DHF)模型大鼠进行干预,观察补阳还五汤对DHF大鼠左心室舒张功能的影响,检测钙转运蛋白肌浆网上的心肌钙转运蛋白(sarcoplasmic reticulum Ca~(2+)-ATPase2a,SERCA2a)及受磷蛋白(phospholamban,PLB)的表达量,初步探寻补阳还五汤治疗DHF的药物干预靶点。方法选用60只雄性SD大鼠,随机分为假手术组15只和模型组45只,利用腹主动脉缩窄法建立舒张性心衰大鼠模型,将造模成功的大鼠随机分为模型组、中药组、西药组,每组11只。其中中药组、西药组灌胃给予相应药物,假手术组、模型组给予等量的去离子水,各组均每日灌胃1次。药物干预8周后,观察药物对超声舒张功能相关指标的影响,运用蛋白免疫印迹法(Western blot)技术检测SERCA2a和PLB的蛋白表达量。结果与模型组相比,中药组大鼠一般状况好转,超声心动图检测二尖瓣环舒张早期运动速度/二尖瓣环舒张晚期运动速度(e’/a’)显著提高(P0.01)。模型组大鼠心肌中SERCA2a与PLB的蛋白表达量与假手术组相比均有下降(P0.05),而中药组大鼠心肌中SERCA2a与PLB的蛋白表达量较模型组则升高(P0.05)。各项结果中药组与西药组差异均无统计学差异(P0.05)。结论补阳还五汤可改善DHF大鼠左室舒张功能,在一定程度上延缓病情发展,且其的潜在作用靶点可能是心肌钙转运蛋白SERCA2a与PLB。