葛根芩连汤激活PPARγ上调脂联素和GLUT4表达改善脂肪胰岛素抵抗

该实验研究复方葛根芩连汤体内外改善脂肪胰岛素抵抗(IR)的药效及相关分子机制。采用高糖高脂饮食加小剂量链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠模型,葛根芩连汤给药干预3个月,检测糖尿病大鼠空腹血糖、胰岛素和糖化血清蛋白,计算胰岛素抵抗指数。提取大鼠脂肪组织总RNA,q PCR检测糖尿病大鼠过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、脂联素(ADPN)、葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)、葡萄糖转运蛋白2(GLUT2)、乙酰辅酶A羧化酶α基因(ACACA)和乙酰辅酶A羧化酶β(ACACB)基因mRNA表达水平。1μmol·L~(-1)地塞米松诱导建立稳定IR-3T3-L1脂肪细胞模型,CCK-8法检测葛根芩连汤含药血清对细胞活力的影响,采用5%,10%,15%葛根芩连汤含药血清干预24 h检测细胞培养液葡萄糖含量、游离脂肪酸(NEFA)含量和外泌脂联素含量,测定细胞内甘油三酯(TG)含量。荧光定量q PCR和Western blot分别检测IR-3T3-L1细胞PPARγ,ADPN和GLUT4 mRNA和蛋白质表达水平。结果显示葛根芩连汤给药3个月可明显降低糖尿病大鼠的空腹血糖、胰岛素和糖化血清蛋白(P0.01),下调胰岛素抵抗指数(P0.05),具有较好的降糖效果。葛根芩连汤可显著升高糖尿病大鼠脂肪组织PPARγ,ADPN,GLUT4,GLUT2,ACACA和ACACB基因mRNA表达水平。5%,10%,15%葛根芩连汤含药血清均可显著性上调IR-3T3-L1脂肪细胞葡萄糖消耗量(P0.01);降低IR-3T3-L1细胞TG含量(P0.01);一定程度下调NEFA含量但并不显著。此外,葛根芩连汤含药血清剂量依赖上调外泌ADPN,15%含药血清上调ADPN非常显著(P0.01);各剂量含药血清显著上GLUT4表达(P0.01)。该研究显示葛根芩连汤激活PPARγ上调ADPN和GLUT4调节糖代谢改善脂肪IR。     

葛根芩连汤整方剂量变化治疗糖尿病大鼠的量效关系研究

目的: 探讨葛根芩连汤整方剂量变化治疗2型糖尿病的量效关系, 获得基于药效学的经方"剂量阈"。方法: SD大鼠给予高脂饲料喂养4周后按30 mg·kg^-1 尾 iv 新鲜配制的STZ(链脲佐菌素)诱导2型糖尿病大鼠模型,正常对照组注射同体积的柠檬酸盐缓冲液。实验分组:正常组、 糖尿病模型组、葛根芩连汤整方剂量变化的9个剂量组(分别为生药1.65,4.95,8.25,11.55,14.85,18.15,21.45,24.75,28.05 g·kg^-1,)、阳性药物对照组(二甲双胍200 mg·kg^-1),取血检测血糖、胰岛素水平、胰岛素抵抗指数(IR)、糖化血清蛋白(GSP)、糖化血红蛋白(HbA1c)等指标。结果: 给药10周后,葛根芩连汤明显降低2型糖尿病大鼠血清中的血糖水平与IR(P<0.05,P<0.01)、降低糖化血清蛋白、糖化血红蛋白水平(P<0.05,P<0.01),指标与葛根芩连汤剂量存在着一定的量效关系,在一定剂量范围内,随着葛根芩连汤整方剂量的增大,药效增强,其"剂量阈"为27.01~1.09 g·kg^-1。结论: 葛根芩连汤整方剂量变化治疗2型糖尿病具有良好的量-效特征。     

葛根芩连汤有效组分“止消渴”药效作用研究

目的:探讨葛根芩连汤有效组分葛根异黄酮与酒蒸黄连生物碱组分配伍"止消渴"的药效作用。方法:观察葛根芩连汤有效组分对不同糖尿病动物模型及正常小鼠血糖等相关指标的影响。结果:葛根芩连汤有效组分能明显或部分降低不同糖尿病小鼠模型的空腹血糖(FBG)和糖化血红蛋白(GHb)的含量,升高血浆胰岛素(Ins)的含量,提高胰岛素敏感指数(IAI)的敏感性,同时对STZ高脂模型引起的血脂紊乱也有明显的调节作用,降低血清胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)的含量,并能降低正常小鼠血糖。结论:葛根芩连汤有效组分葛根异黄酮与酒蒸黄连生物碱组分配伍"止消渴"疗效确切,具有明显改善糖脂代谢紊乱,改善胰岛素抵抗的作用。     

葛根芩连汤含药血清对HepG2肝细胞胰岛素抵抗模型糖代谢的调节作用

目的:探讨葛根芩连汤含药血清对Hep G2肝细胞胰岛素抵抗模型糖代谢的调节作用。方法:大鼠分别按含生药6 g·kg-1剂量ig葛根芩连汤,空白组ig给予等量蒸馏水,按3 mg·kg-1剂量ig吡格列酮,2次/d,连续7 d,末次给药1 h后,心脏穿刺取血制备葛根芩连汤、空白和吡格列酮含药血清。采用MTT法检测葛根芩连汤含药血清对细胞增殖的影响;Hep G2细胞以含10%胎牛血清(FBS)的DMEM培养基传代培养,将处对数生长期细胞消化后,用含2%FBS DMEM培养基调整细胞密度为106个/m L,以10 mg·L-1胰岛素处理24 h,复制Hep G2细胞胰岛素抵抗模型,葡萄糖氧化酶法检测葛根芩连汤含药血清对Hep G2细胞葡萄糖消耗的影响;蒽酮法检测细胞内糖原含量;乳酸脱氢酶偶联比色法测定肝细胞磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)的活性。结果:与正常组比较,模型组葡萄糖消耗量明显下降(P0.01),糖原含量显著降低(P0.05),而PEPCK活性升高(P0.05);8%葛根芩连汤含药血清作用Hep G2细胞胰岛素抵抗模型24 h能显著增加葡萄糖消耗量(P0.05),且葛根芩连汤含药血清(8%,16%)能够增加糖原含量,葛根芩连汤含药血清(4%,8%,16%)能够降低PEPCK活性(P0.05)。结论:葛根芩连汤含药血清可调节肝糖代谢,进而可改善肝细胞胰岛素抵抗。     

葛根芩连汤干预2型糖尿病前期大鼠的代谢机制研究

目的探讨葛根芩连汤对高脂诱导的2型糖尿病大鼠预防作用的代谢机制。方法将SD大鼠随机分为正常组(8只)和高脂造模组(40只),分别使用基础饲料和高脂饲料喂养12周。高脂造模组大鼠产生胰岛素抵抗(IR)后,将高脂造模组大鼠再随机分为模型组及葛根芩连汤低、中、高剂量组(1.65、4.96、14.86 g·kg-1),每组8只。模型组及不同剂量给药组继续给予高脂饲料喂养,给药组给予不同剂量的葛根芩连汤进行干预,灌胃给药,给药体积为10 mL·kg-1,每天1次,连续16周。检测大鼠空腹血糖值及空腹胰岛素含量,计算IR指数;使用超高效液相色谱-四级杆飞行时间串联质谱(UHPLC/Q-TOF-MS)结合多元分析方法,分析大鼠血清中的内源性代谢物及其变化差异,寻找葛根芩连汤干预IR大鼠及预防2型糖尿病的潜在生物标记物。结果高脂饲料喂养12周后,与正常组比较,造模组大鼠的IR指数明显升高(P<0.05),血糖无明显变化(P>0.05)。给药16周后,与正常组比较,模型组大鼠的IR指数及血糖值均显著升高(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,葛根芩连汤低、中剂量组大鼠的IR指数显著降低(P<0.01),葛根芩连汤高剂量组的IR指数无明显变化(P>0.05);葛根芩连汤低剂量组的空腹血糖值明显降低(P<0.05),而葛根芩连汤中、高剂量组的空腹血糖值无明显变化(P>0.05)。大鼠血清代谢组分析鉴定共得到4种潜在代谢标志物,分别是Hippuric acid(马尿酸)、12-Ketodeoxycholic acid(12-去氧胆酸)、3-Oxo-4,6-choladienoic acid和LysoPC[20∶4(5Z,8Z,11Z,14Z)](溶血磷脂酰胆碱,LPC)。结论葛根芩连汤可以降低IR大鼠的胰岛素抵抗指数,同时可预防血糖升高,其机制可能与调节胆汁酸代谢、磷脂代谢以及肠道菌群代谢有关。     

葛根芩连汤对新发2型糖尿病胰岛素抵抗的影响研究

目的探讨葛根芩连汤对新发2型糖尿病(T2DM)胰岛素抵抗患者临床症状及相关糖脂代谢因子的影响。方法将70例T2DM胰岛素抵抗患者随机分为2组。所有患者均给予饮食控制、运动疗法等基础治疗,对照组予二甲双胍口服,观察组予葛根芩连汤口服,2组疗程均为8周。观察2组治疗前后空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)、糖化白蛋白(GA)、糖化血红蛋白(Hb A1c)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、体质量指数(BMI)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高敏C反应蛋白(hs-CRP)变化情况,并根据中医证候积分评价2组临床症状改善情况。记录2组在治疗过程中出现的不良反应。结果疗程结束后,2组FPG、FINS、GA、HOMA-IR、LDL-C、hs-CRP均较治疗前明显下降(P均0.05),且观察组各指标较对照组改善更明显(P均0.05);疗程结束后,2组Hb A1c、TC、BMI与治疗前比较差异均无统计学意义(P均0.05)。观察组治疗后中医证候积分明显低于对照组(P0.05)。2组不良反应发生率比较差异无统计学意义(P0.05)。结论葛根芩连汤可以显著提高机体胰岛素敏感性,改善机体胰岛素抵抗状态,调节机体血糖及血脂水平,提高患者生活质量。     

葛根芩连汤及其主要成分对L6骨骼肌细胞糖代谢的调节作用

目的建立地塞米松(DEX)诱导的L6骨骼肌细胞胰岛素抵抗模型,探讨葛根芩连汤及其主要成分(葛根素、小檗碱、黄芩苷)对L6骨骼肌细胞胰岛素抵抗模型葡萄糖消耗量的影响。方法将诱导分化好的L6肌细胞按106个·ml-1接种于96孔板内,以MTT法检测葛根芩连汤含药血清对L6肌细胞增殖的影响;以1μmol/L DEX诱导L6肌细胞24 h产生胰岛素抵抗,予以不同浓度的葛根芩连汤含药血清及其主要成分(葛根素、小檗碱、黄芩苷)进行干预,100 nmol/L胰岛素刺激30min,采用葡萄糖氧化酶法检测L6肌细胞的葡萄糖消耗量。结果葛根芩连汤含药血清对L6肌细胞增殖无显著影响。与正常组比较,模型组葡萄糖消耗量明显下降;葛根芩连汤含药血清(5%、10%、15%)、葛根素(1,10,100μmol·L-1)、小檗碱(1μmol/L)和黄芩苷(1,10,100μmol·L-1)能显著增加L6骨骼肌细胞胰岛素抵抗模型葡萄糖消耗量(P0.05)。结论葛根芩连汤及其主要成分(葛根素、小檗碱、黄芩苷)可调节L6骨骼肌细胞胰岛素抵抗模型糖代谢,进而可改善肌细胞胰岛素抵抗。     

葛根芩连汤治疗2型糖尿病研究进展

葛根芩连汤治疗2型糖尿病(diabetes mellitus type 2,T2DM),可降低血糖水平、改善糖脂代谢及胰岛功能等。实验研究也表明,葛根芩连汤可通过改善胰岛素抵抗、调节糖脂代谢、调节肠道菌群、抑制炎症因子表达等控制血糖水平,缓解T2DM病情。目前的研究仍存在不足之处：葛根芩连汤在治疗T2DM的应用中,缺乏统一规范的疗效判定标准及大量的临床样本,其具体的分子生物学机制尚不明确。此外,葛根芩连汤原方中“两”的剂量历来没有统一的规范,以往的临床应用与研究中,各医家对其具体剂量的使用均有不同,主要从临床经验入手来确定其具体用量,缺乏严谨性,不便于临床规范应用。今后,应结合现代分子生物学技术探讨葛根芩连汤治疗T2DM的具体机制,并建立统一规范的疗效判定标准和剂量使用标准,充分发挥中医药治疗T2DM的优势,为提高疗效及扩大临床应用补充有利依据。     

葛根芩连汤治疗2型糖尿病60例临床观察

目的:观察葛根芩连汤治疗2型糖尿病的临床效果。方法:选取120例2型糖尿病患者作为对象,按照治疗方式不同分为对照组与实验组各60例。对照组给予二甲双胍治疗,观察组给予葛根芩连汤治疗,比较两组临床疗效及对血糖波动的影响。结果:观察组治疗后空腹血糖、餐后2h血糖、糖化血红蛋白,均低于对照组(P<0.05);观察组治疗后肿瘤坏死因子-a、白细胞介素-6及C反应蛋白水平,低于对照组(P<0.05);两组不良反应发生率无统计学差异(P>0.05)。结论:葛根芩连汤治疗2型糖尿病对控制患者血糖水平,降低炎症因子水平有较好效果,值得临床推广。     

葛根芩连汤对肥胖型2型糖尿病前期大鼠慢性缺氧的干预机制

目的 研究葛根芩连汤(GQD)对肥胖模型大鼠和胰岛素抵抗(IR)模型大鼠慢性缺氧的影响，探究GQD对肥胖型2型糖尿病前期的干预作用。方法 雄性SD大鼠，随机分成正常对照组、模型组、辛伐他汀组及葛根芩连汤低、中、高3个剂量组，每组8只。除正常对照组喂食普通饲料以外，其余各组喂食60%高脂饲料。肥胖组大鼠造模4周，从第5周开始每天灌胃给药1次，连续给药11周；胰岛素抵抗大鼠造模12周，从第13周开始每天灌胃给药1次，连续给药16周。结束后于腹主动脉取血，全自动生化分析仪测定血清中生化指标，包括总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及空腹血糖(FBG),ELISA法测定空腹血清胰岛素(FINS),并依据HOMA模型计算胰岛素抵抗指数HOMA-IR;ELISA法测定血清中促红细胞生成素(EPO)和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)水平；血气分析仪检测全血pO₂、pCO₂、Hct、ctHb、SaO₂、ctO₂。使用SPSS 19.0软件将各组大鼠...     

小儿紫癜中医辨证治疗

目的:为进一步做好小儿紫癜中医辨证治疗作用的研究工作提供科学依据。方法:通过对80例小儿紫癜患者随机分成实验组和对照组,其中实验组使用中药进行治疗,对照组采用常规西药保守治疗,观察两组的作用疗效。结果:中药组对小儿紫癜总有效率达到92.5%,而西药对照组总有效率只达到57.5%,两组治疗效果差异有明显统计学意义(P0.01),即中药组对小儿紫癜患者治疗后临床作用明显有效。结论:小儿紫癜采用中医辨证治疗效果好、副作用少,值得在临床中大力推广。     

Multiple Chromatographic and Chemometric Methods for Quality Standardisation of Chinese Herbal Medicines

目的：观察伤益气雾剂中栀子苷透皮吸收的特点，探讨伤益气雾剂外用时栀子苷的透皮吸收的动力学。方法：利用体内外实验对栀子苷透皮量及其血药浓度进行测试观察。结果：无论体内体外试验均表明，给药后半小时栀子苷即可透过皮肤，在皮下组织中分布，同时血中也能明显测到栀子苷。其透出量具有累积增多的线性关系。结论：伤益气雾剂中栀子苷可明显透过皮肤，并在皮下组织及血液中分布。本实验为该药外用治疗相关病症的应用提供了实验依据。     

人工骨异烟肼体外及家兔体内释放度研究

 目的：了解蜂蜡为阻滞剂包裹的异烟肼-人工骨(INH-PHA-wax)与未包裹蜂蜡的异烟肼-人工骨(INH-PHA)体外及家兔体内的释放度。方法：用RP-HPLC在不同时间分别测定体外及植入家兔体内的包裹或未包裹蜂蜡的异烟肼-人工骨中异烟肼的浓度。结果：包裹15%蜂蜡INH-PHA-wax,体外20 d释药66%;包裹25%蜂蜡INH-PHA-wax,20 d释药22%;未包裹蜂蜡INH-PHA,6 d释药97%。包裹25%蜂蜡INH-PHA-wax植入家兔体内，可持续释药达240 d,而未包裹蜂蜡INH-PHA持续释药仅60 d。结论：INH-PHA-wax可有效地控制药物的释放，对治疗骨结核可能是一有效植入式缓释剂。     

中国八省市居民亚健康状态的职业特征分析比较

目的:了解不同职业人群的亚健康状态。方法:通过中国人亚健康状态调查问卷(CSHS-3),采用整群随机抽样的方法,对中国东西南北中8个省市20～60岁调查对象进行现场调查,运用卡方检验、协方差分析、秩和检验等统计方法,比较亚健康状态不同方面的职业特征及不同职业的亚健康状态的差异及特点。结果:亚健康状态不同方面的职业特征存在差异;不同职业的亚健康状态存在差异。其中亚健康状态总得分最高的是工人;躯体表现领域得分最高的是工人;心理领域学生得分最高;社会适应领域得分最高的是工人;性生活领域农民得分最高。结论:对不同职业的亚健康状态的差异及特点进行分析,可为职业相关的亚健康状态的干预提供流行病学依据。     

川芎挥发油中藁本内酯在大鼠体内的药动学研究

目的 测定川芎挥发油中藁本内酯在大鼠体内的药动学.方法 采用RP-HPLC法,以蛇床子素为内标物测定大鼠口服川芎挥发油的β-环糊精包合物后藁本内酯的血药浓度,使用3P97药动学软件计算其药动学参数.结果 藁本内酯在大鼠体内符合二室模型,主要的药动学参数:t_(1/2)(α)为(1.429±1.161)h,t_(1/2)(β)为(6.877±2.275)h,t(peak)为(3.401±1.951)h,AUC为(70.87±25.92)μg/mL·h.结论 以蛇床子素为内标,RP-HPLC法能够准确、灵敏地测定藁本内酯在大鼠体内的药动学.     

黄芩及其制剂中黄芩苷定量方法研究进展

综述了近5年来黄芩苷定量分析方法研究状况，系统阐述了4种方法：紫外分光光度法、薄层扫描法、高效液相色谱法和高效毛细管电泳法测定黄芩苷的应用，为我们选择合适的方法提供了较全面的依据。     

荧光原位杂交技术在宫颈癌中的应用进展

荧光原位杂交技术(FISH)技术是一门新兴的分子细胞学遗传技术,具有快速、安全、高灵敏度及探针可长期保存等优点,在分子细胞遗传学、肿瘤生物学、产前诊断等领域已得到广泛应用。从FISH与常规宫颈癌检测技术比较、荧光探针类型及标记方法和在宫颈癌中的应用做简要综述。     

体内药代高通量筛选研究进展

随着组合化学和高通量活性筛选技术的发展，大量的活性化合物被发现，而这些活性化合物要最终成为上市的药物必须具备合适的药代动力学特征，这就对这些活性化合物的药代属性进行筛选提出要求。因此，在新药研发领域迫切需要发展高通量的药代筛选技术。目前，这项研究主要从体外和体内两个方面着手开展，本文介绍了体内药代高通量筛选所必需的生物样品分析技术的发展近况和体内药代高通量筛选模型的研究进展。     

小胶质细胞功用在认知功能障碍中的研究进展

在认知功能减退的多项影响因素中,血管性因素显得尤为重要。任何血管性事件的发生都会影响到神经元,进而异常激活小胶质细胞,直接并间接导致神经元受损,从而引起认知功能的减退。小胶质细胞是一种通过清除大脑内可疑抗原、受损神经元,来保护大脑、维持中枢神经系统稳定、促进神经元发育的重要免疫细胞。在被异常激活后,小胶质细胞则会引起神经炎症,并加剧认知功能的减退。通过研究小胶质细胞作用的关键靶点,恢复小胶质细胞的稳态、消耗小胶质细胞的数量被认为是可能治疗认知功能障碍的有效途径。     

彝族药伤益气雾剂中栀子苷透皮吸收的动力学观察

目的：观察伤益气雾剂中栀子苷透皮吸收的特点，探讨伤益气雾剂外用时栀子苷的透皮吸收的动力学。方法：利用体内外实验对栀子苷透皮量及其血药浓度进行测试观察。结果：无论体内体外试验均表明，给药后半小时栀子苷即可透过皮肤，在皮下组织中分布，同时血中也能明显测到栀子苷。其透出量具有累积增多的线性关系。结论：伤益气雾剂中栀子苷可明显透过皮肤，并在皮下组织及血液中分布。本实验为该药外用治疗相关病症的应用提供了实验依据。