HPLC-MS/MS分析黄连碱在大鼠体内外的代谢产物

目的:探讨黄连碱的体内外代谢产物及其代谢途径。方法:体内代谢采用单次灌胃大鼠黄连碱(剂量25 mg·kg~(-1)),收集给药后0～48 h的尿液和粪便,0～24 h的胆汁以及给药0. 25,1,2 h后的血浆和脑组织样品;体外代谢采用大鼠肝微粒体及肠道菌群孵育的方法;运用高分辨HPLC-MS/MS技术对生物样品中的药物原型及代谢物进行鉴定。选用ZORBAX SB-C_(18)色谱柱(4. 6 mm×150 mm,5μm),以乙腈-0. 1%甲酸水溶液为流动相梯度洗脱,流速1. 0 mL·min~(-1),柱温25℃。质谱使用电喷雾离子源(ESI),正、负离子检测模式,扫描范围m/z 50～1 200。对各色谱峰质谱图进行分析,根据准分子离子峰判断相对分子质量,进一步根据各色谱峰的主要碎片离子、保留时间等信息,与文献数据进行比较,推测化合物的结构。结果:在大鼠尿液、粪便、胆汁、血浆、脑组织、肝微粒体温孵和肠道菌群温孵样品中发现了黄连碱的17个代谢产物,Ⅰ相代谢产物11个,Ⅱ相代谢产物6个。这17个代谢产物是黄连碱在大鼠体内羟基化、去甲基化和脱氢作用、硫酸酯化、葡糖糖醛酸化后产生的。结论:黄连碱可在大鼠体内发生Ⅰ相和Ⅱ相代谢反应,代谢物主要存在于尿液中,主要代谢部位为肝脏;黄连碱胃肠道吸收较差,代谢少,大部分经粪便以原型排泄,为黄连碱的药效学和药理学研究提供了一定的物质基础。     

基于UHPLC-Q-Orbitrap HRMS技术的6-姜酚在大鼠体内代谢产物的鉴定及代谢途径的分析

目的 采用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱（UHPLC-Quadrupole-Orbitrap high resolution mass spectrometry,UHPLC-Q-Orbitrap HRMS）技术对6-姜酚在大鼠血浆、尿液和粪便中的代谢产物进行鉴定分析。方法 SD大鼠ig给药6-姜酚羧甲基纤维素钠混悬液后,收集其血浆、尿液、粪便以及胆汁样品。样品前处理后,采用Waters Acquity UPLC^® BEH C₁₈色谱柱（100 mm×2.1 mm,1.7 μm）;以0.1%甲酸水溶液（A）-乙腈（B）为流动相,梯度洗脱。在电喷雾电离源（ESI源）正、负离子模式下采集生物样品的质谱数据。结果 对代谢产物的质谱数据进行结构鉴定分析,检测到大鼠体内6-姜酚相关代谢产物共21个,其中血浆样品中5个代谢产物,尿液样品中9个代谢物,粪便样品中12个代谢产物,胆汁样品中8个代谢产物。结论 通过液质联用技术阐明了6-姜酚在大鼠体内的代谢产物及其代谢途径,为今后相关研究提供重要的理论依据,同时也为药物代谢鉴定研究提供一种综合研究方法。     

关黄柏水提物在大鼠血清、尿液和粪便中原型成分及其代谢产物的UPLC-Orbitrap Fusion Lumos Tribrid-MS鉴定

目的 应用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱-线性离子阱质谱法（UPLC-Orbitrap Fusion Lumos Tribrid-MS）分析关黄柏水提物在正常大鼠血清、尿液及粪便中的原型成分及其代谢物,探讨关黄柏在大鼠体内的药效物质基础。方法 采用ACQUITY UPLC^? CSH^TM C₁₈色谱柱（2.1 mm×100 mm,1.7 μm）,以0.1%甲酸水溶液（A）-乙腈（B）为流动相进行梯度洗脱（0~15 min,2%~25%B;15~25 min,25%~50%B;25~28 min,50%~98%B）,流速0.3 mL·min^-1,进样量10 μL,柱温40 ℃。运用加热电喷雾离子源（HESI）,扫描范围m/z 100~1 000,正离子模式采集数据。通过比较给药后样品和空白样品的差异,对灌胃给予关黄柏水提物后大鼠血清、尿液和粪便中的原型成分及其代谢产物进行鉴定。结果 灌胃给予关黄柏水提物后,从大鼠血清、尿液及粪便中鉴定和表征了70个外源性成分,包括15个原型成分和55个代谢产物。其中15个原型成分包括12个生物碱和3个柠檬苦素,55个代谢产物包括52个生物碱和3个柠檬苦素。关黄柏水提物在大鼠体内的代谢途径主要包括脱饱和、甲基化、氧化、硫酸化及葡萄糖醛酸结合等反应。结论 生物碱在大鼠体内进行Ⅰ相代谢和Ⅱ相代谢,柠檬苦素类在大鼠体内主要进行Ⅰ相代谢,可为进一步解析关黄柏体内过程,阐明其药效物质基础提供实验依据。     

HPLC-HRMS鉴定抗癌先导物T-OA在鼠尿中的代谢产物

目的：研究抗癌先导化合物T-OA（齐墩果酰基-3,5,6-三甲基吡嗪-2-甲酯）在大鼠尿液中的代谢产物,初步推断其在大鼠体内的代谢方式。方法：收集空白组、原料组（川芎嗪TMP与齐墩果酸OA摩尔等量）及T-OA组大鼠尿液;尿液冷冻干燥,固体经乙酸乙酯超声提取后,提取物用色谱乙腈复溶;HPLC-HRMS联用技术在ESI⁺和ESI^-模式下寻找可能的质谱峰,通过对比3组谱图的异同得出代谢产物的相关信息。结果：原料组鉴定出1个OA的代谢产物和2个TMP的代谢产物;T-OA 组未检测到原料的代谢产物,而得到1个Ⅱ相代谢产物。结论：在大鼠尿液中首次鉴定出1个T-OA的Ⅱ相代谢产物,1个OA的Ⅱ相代谢产物,初步推断T-OA在体内不以原料的形式发挥药效;所建立的HPLC-HRMS方法可用于相关衍生结构的代谢产物鉴定;该文也可为以齐墩果酸为母体的前药设计提供一定的借鉴。     

抑郁模型大鼠灌胃定志小丸提取物后血浆、尿液、粪便、胆汁中主要代谢产物的鉴定

研究经典古方开心散类方定志小丸主要化学成分在抑郁模型大鼠体内的代谢产物,并归纳总结其代谢途径。通过慢性不可预知温和刺激(CUMS)建立抑郁大鼠模型,灌胃给予大鼠定志小丸提取液后,收集血液、胆汁、尿液、粪便并进行预处理,采用UPLC-Q-TOF-MS^E技术进行检测,利用UPLC C₁₈色谱柱,以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,在负离子模式下获得MS/MS^E质谱信息,通过对比空白与含药样品的液质数据,利用Metabolynx代谢产物分析软件处理,最终对定志小丸中9个活性化合物在血浆、胆汁、尿液、粪便中的33个代谢产物进行推测,并总结了其体内代谢途径。其中从大鼠血浆中鉴定了代谢产物3个,胆汁中鉴定3个,尿液和粪便中鉴定代谢产物共27个。为阐明定志小丸在体内发挥疗效的药效物质基础和作用机制提供依据。     

超高效液相色谱-质谱联用法分析α-常春藤皂苷在大鼠体内的代谢产物

目的 研究大鼠口服α-常春藤皂苷后粪便中的代谢产物。方法 大鼠ig α-常春藤皂苷150 mg/kg后,采集其0～24 h粪便样品,应用超高效液相色谱-复合三重四级杆线性离子阱质谱（UPLC-Q/Trap-MS）联用技术对样品进行分析。结果 检测到原形药物、原形药物的同分异构体及7个可能的代谢产物,包括去甲基化代谢物（M1）、脱糖代谢物（M2、M3）、葡萄糖醛酸化代谢物（M4）和双键加成代谢物（M5、M6-1、M6-2）。结论 α-常春藤皂苷在大鼠胃肠道内会发生多种代谢反应,主要有脱糖代谢、葡萄糖醛酸化代谢、去甲基化代谢等。     

异绿原酸C大鼠体内代谢产物鉴定

目的 分析大鼠灌胃给予异绿原酸C（4，5-二咖啡酰奎宁酸）后粪便、尿液及血浆内存在的代谢产物并推测其在大鼠体内的代谢途径。方法 大鼠按20 mg·kg^-1一次性灌胃给予异绿原酸C后，收集不同时间（段）的粪便、尿液及血浆，采用超高效液相色谱与Q-Exactive Plus Orbitrap 高分辨质谱技术（UPLC-Q-Exactive Plus Orbitrap MS）+质谱自带的软件联合的方法分析，对生物样品进行检测，并完成鉴定其代谢产物。结果 基于总离子流色谱图和一级二级质谱提供的分子离子和碎片离子等精确信息，最终从大鼠粪便、尿液和血浆中共发现11种成分，包括1个原型和10个代谢产物，涉及的代谢途径有水解、甲基化、氧化、还原、葡萄糖醛酸化、硫酸酯化等。结论 本实验建立的分析方法检测快速、结果准确、灵敏度高，符合生物基质样品分析相关要求，适用于大鼠粪便、尿液和血浆中异绿原酸C代谢产物的分析，为异绿原酸C的药效作用机制及药动学研究提供一定参考价值。     

LC-MSn鉴定大鼠体内SIPI的代谢产物

 目的考察SIPI在大鼠体内的代谢转化。方法采用液相色谱-质谱(LC-MSⁿ)联用技术,检测在单剂量静脉注射给予SIPI后大鼠尿,粪及胆汁中的SIPI及代谢物。色谱柱为Diamonsil C₁₈柱;流动相为甲醇-水-甲酸(40∶60∶0.5),流速为0.5mL·min^-1;质谱仪离子源为电喷雾离子源(ESI),正离子方式检测。代谢物经LC-MSⁿ方法分离和分析,通过质谱和色谱行为推测其结构。结果在大鼠尿样中共检测到8种代谢物,在大鼠粪样中共检测到4种代谢物,在大鼠胆汁样品中共检测到3种代谢物。结论SIPI在大鼠体内广泛代谢,形成多种代谢产物。     

大鼠体内9-硝基喜树碱代谢物的HPLC-MSn分析

 目的研究9-硝基喜树碱在大鼠体内的代谢物。方法静脉注射9-硝基喜树碱(6 mg·kg^-1)12 h后,收集大鼠的胆汁、尿液和粪便。运用高效液相色谱和质谱联用技术检测9-硝基喜树碱的代谢产物。结果从给药后大鼠的胆汁、尿液和粪便中,发现并初步鉴定了6个主要代谢产物的化学结构。结论大鼠给予9-硝基喜树碱后,在胆汁中产生9-羟基喜树碱的葡萄糖醛酸结合物、9-乙酰胺基喜树碱、9-氨基喜树碱、9-羟基喜树碱及两个未知代谢产物;在尿液中的主要代谢产物为9-羟基喜树碱的葡萄糖醛酸结合物、9-乙酰胺基喜树碱、9-氨基喜树碱、9-羟基喜树碱;在粪便中的主要代谢产物为9-羟基喜树碱、9-乙酰胺基喜树碱及9-氨基喜树碱。     

LC-MS鉴定肝毒性吡咯里西啶类生物碱千里光碱大鼠体内代谢产物

目的 研究肝毒性吡咯里西啶类生物碱千里光碱的大鼠体内代谢。方法 SD大鼠口服千里光碱,收集胆汁、尿液及粪便样本,采用液相色谱-多级质谱联用对代谢产物进行研究,推导其体内代谢模式。结果 正负离子下共检测到38种代谢产物,主要为千里光碱及其代谢物的氮氧化物,羟化产物,水解产物,以及硫酸结合物,葡萄糖醛酸结合物和谷胱甘肽结合物。另外,尿液、胆汁与粪便中检测到的代谢物有一定差异,胆汁和尿液中代谢产物较多。结论 千里光碱在大鼠体内代谢广泛,形成多种代谢产物。     

珍珠母超微粉蛋白及寡肽对小鼠镇静安眠作用比较

目的比较珍珠母超微粉蛋白、寡肽对小鼠镇静安眠作用。方法利用PCPA制造小鼠失眠模型,观察小鼠的自主活动情况,ELISA法测小鼠血中ATCH含量并计算脑及脑系数。结果阳性对照组、寡肽组小鼠的自主活动次数显著降低,小鼠血中ACTH的含量增加,但脑干系数无影响。结论超微粉寡肽类成分(MCP)镇静安眠活性最强,为镇静安眠主要活性部位,调节ACTH可能是其镇静安眠机制。     

丁香苦苷不同给药途径的药物动力学研究

目的:研究并比较丁香苦苷单体两种给药途径在家兔体内的药物动力学过程,考察丁香苦苷单体口服后的绝对生物利用度。方法:家兔静脉注射丁香苦苷注射液和灌胃给予丁香苦苷水溶液,采集血样,固相萃取小柱活化方法处理血浆后高效液相色谱法测定丁香苦苷血浆浓度,采用药动学软件3P97进行数据处理,确定药动学参数。结果:丁香苦苷静脉给药后在体内符合二室模型分布,其主要药动学参数分别如下:T1/2α为2.41min,T1/2β为15.38min。灌胃给药后丁香苦苷的药动学行为符合一级吸收二室模型,Cmax为17.91min,T1/2(α)为9.642min,T1/2(β)31.748min。绝对生物利用度为35.9%。结论:丁香苦苷单体经口服和静脉两种给药途径给药后,吸收和消除均较快。     

《老老恒言》论老年养生

简要论述了《老老恒言》中有关老年养生的思想和方法 ,认为饮食以调理脾胃为要 ,应注意饮食有节、五味调和、清淡为补 ;起居以养静为要 ,应注意调顺四时、起居有常、静养与导引相结合 ;养性以安命为要 ,应注意清心寡欲、修心养性     

Evaluation of estrogenic activity of alcoholic extract of rhizomes of Curculigo orchioides

The rhizomes of Curculigo orchioides Gaertn. (Amaryllidacea) is an important Ayurvedic as well as Unani drug. It is present in several drug formulations used in the treatment of menorrhagia and other gynecological problems. In this study, we conducted a comparative study of estrogenic activity of alcoholic extract of Curculigo orchioides with diethylstilbestrol in bilaterally ovariectomized young albino rats. Bilaterally ovariectomized albino rats were divided into five groups (n=9) receiving different treatments, consisting of vehicle (0.6% w/v sodium carboxy methyl cellulose), ethanolic extract of rhizomes of Curculigo orchioides at three different doses (viz., 300, 600, 1200 mg/kg body weight) and standard drug diethylstilbestrol (DES) at a dose of 2 mg/kg body weight. All these were administered orally daily for 7 days. Estrogenic activity was assessed by taking percentage vaginal cornification, uterine wet weight, uterine glycogen content and uterine histology as parameters of assessment. Alcoholic extract of Curculigo orchioides showed a significant increase in percentage vaginal cornification, uterine wet weight (P<0.001), uterine glycogen content (P<0.001) and a proliferative changes in uterine endometrium compared to the control.     

中药产业竞争力提升战略研究

本文运用了竞争力理论与战略理论，分析了中药产业竞争力提升的环境与条件，提出了提升中药产业竞争力的三大战略目标、三大总体战略、四条战略举措及三个实施阶段与重点任务。     

对中医学科建设与学科带头人培养的思考

通过中医学术发展的历史沿革回顾,提出了中医药学科建设的总体构思,指出要发展一个大的一级学科,首先要有教育,这是发展学科的基础;其次是科研来提高教育水平,并指导临床;再次是临床;三者缺一不可。同时提出了学科带头人应具备的条件及如何培养学科带头人。     

胃脘痛证候量化诊断的探讨

目的:探讨胃脘痛证候的量化诊断规律。方法:以因子分析方法对808例胃脘痛患者的临床四诊信息进行分析。结果:因子分析从胃脘痛临床症状中提取12个因子,分别代表脾胃湿热、脾胃虚寒、肝胃气滞、气阴两虚、胃热炽盛、胃阴亏虚、肝胃郁热、脾胃气虚等8个证候,同时对各个证候进行量化。结论:因子分析所得的胃脘痛的常见证候分类及量化诊断为临床辨证提供客观依据。     

中医方剂学考试改革的探索与实践

传统的闭卷考试不能很好地反映方剂学教学的效果,因此,我们试行了以多种形式相结合的考试改革,考试成绩由笔试、机试、平时3个方面组成。结果大大提高了学生分析问题和解决问题的能力,激发了学生学习的兴趣,提高了教师教学水平,带动了教学改革和教学研究的全面进行。     

病性变化和转化的哲理数学原理

病性的变化和转化以及疾病的传变是中医病理学的2个核心问题。它们可分别从阴阳五行数学的公理1和公理2、3得到圆满的解释。病性变化,其症结在于主导属性明晰度的大小发生变化;病性转化,其症结则在于主导属性明晰度的正负号发生变化。     

中药产业竞争力提升战略研究

本文运用了竞争力理论与战略理论,分析了中药产业竞争力提升的环境与条件,提出了提升中药产业竞争力的三大战略目标、三大总体战略、四条战略举措及三个实施阶段与重点任务。