HPLC-HRMS鉴定抗癌先导物T-OA在鼠尿中的代谢产物

目的：研究抗癌先导化合物T-OA（齐墩果酰基-3,5,6-三甲基吡嗪-2-甲酯）在大鼠尿液中的代谢产物,初步推断其在大鼠体内的代谢方式。方法：收集空白组、原料组（川芎嗪TMP与齐墩果酸OA摩尔等量）及T-OA组大鼠尿液;尿液冷冻干燥,固体经乙酸乙酯超声提取后,提取物用色谱乙腈复溶;HPLC-HRMS联用技术在ESI⁺和ESI^-模式下寻找可能的质谱峰,通过对比3组谱图的异同得出代谢产物的相关信息。结果：原料组鉴定出1个OA的代谢产物和2个TMP的代谢产物;T-OA 组未检测到原料的代谢产物,而得到1个Ⅱ相代谢产物。结论：在大鼠尿液中首次鉴定出1个T-OA的Ⅱ相代谢产物,1个OA的Ⅱ相代谢产物,初步推断T-OA在体内不以原料的形式发挥药效;所建立的HPLC-HRMS方法可用于相关衍生结构的代谢产物鉴定;该文也可为以齐墩果酸为母体的前药设计提供一定的借鉴。     

γ-氨基丁酸转氨酶抑制剂筛选方法的建立及其在天麻成分筛选中的应用

目的建立以γ-氨基丁酸转氨酶(GABA-T)抑制剂类抗癫痫神经系统药物筛选模型,并运用此模型对天麻有效成分及其类似物进行体外活性筛选和构效关系分析。方法优化酶催化反应温度、反应时间、底物NAD+浓度、底物α-酮戊二酸浓度、底物γ-氨基丁酸(GABA)浓度等因素建立GABA-T酶系活性筛选模型,采用对羟基苯甲醛(HBA)及其11种结构类似物验证模型可靠性。结果成功构建GABA-T酶系抗癫痫活性筛选模型,HBA及11个结构类似物测定结果与文献报道抗癫痫作用相一致,且构效分析发现-OH及苯环对位上的-CHO为必需药效团。结论建立的模型可应用于GABA-T酶抑制剂的高通量筛选,为GABA-T酶抑制剂类抗癫痫活性成分的筛选及其作用机制研究提供参考。     

新型姜黄素衍生物的合成及其抗癌活性研究

目的：研究新型姜黄素衍生物的合成及其体外抗癌活性。方法：以“十全大补丸”方中抗癌活性成分为原料,利用拼合原理,设计、合成姜黄素衍生物,并采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法体外检测姜黄素衍生物在HT-29（人结肠癌细胞）、Bel7402（人肝癌细胞）、HepG2（人肝癌细胞）、Hela（人宫颈癌细胞）4种癌细胞模型的抗癌活性和对正常细胞MDCK（犬肾上皮细胞）的毒性。结果：发现化合物4和CU-T能明显抑制4种人源性癌细胞的增殖,二者体外抗癌活性（IC₅₀）与顺铂相似,显著高于姜黄素;且对MDCK细胞的毒性明显小于顺铂。结论：以拼合原理为指导,进一步验证了从经典方药中发现高效、低毒的抗癌先导化合物的研究思路是可行的。