产超广谱β-内酰胺酶表型及基因型特征的研究

目的分析大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌临床分离株中超广谱β内酰胺酶（ESBL）的基因型分布情况。方法用表型确证试验确定临床标本中产ESBL的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌分别用TEM、SHV和CTX-M通用引物进行聚合酶链反应（PCR）扩增,鉴定其基因型。结果 66%的菌株为TEM基因型,14%的菌株为SHV基因型,10%的菌株为CTX-M型。结论大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌临床分离株中超广谱β内酰胺酶（ESBL）的基因型分布以TEM基因型为主,部分菌株为SHV、CTX-M型。同一菌株内可以产生2种不同基因型的超广谱β-内酰胺酶。     

超广谱β内酰胺酶分子流行病学研究

目的：了解杭州市2000－2001年产超广谱β内酰胺酶（ESBLs)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的分离率和各基因型的流行情况。方法：收集本市5家医院大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌共198株，采用酶抑制剂增强纸片扩散法检出产ESBLs菌并测定对头孢噻肟，头孢他啶的最低抑菌浓度；等电点测定及PCR扩增对产ESBLs初步分型；PCR扩增阳性产物测序，序列分析进一步明确基因型，结果；杭州市大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的ESBLs分离率为25．76％，SHV型，TEM型，CTX－M型分别占产ESBLs菌的17．65％，84．31％，基因型分布为：SHV－11，12，TEM－1，CTX－M－3，13，14及CTXM－3－like型。结论：CTX－M型ESBLs是本市产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中最主要基因型。     

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs株的耐药性与基因检测

目的研究深圳市人民医院2002年1月-2003年12月临床下呼吸道分离的产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性、ESBLs基因型以及基因型和耐药表型的相关性。方法共收集临床下呼吸道分离产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌61株，采用酶抑制剂增强法作表型确证试验，琼脂稀释法作药敏试验，应用PCR、序列分析，确定ESBLs基因型。结果61株产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对亚胺培南的敏感率是100％，MIC50 0．5mg／L，两种细菌表现出不尽相同的耐药表型。共检出10种0内酰胺酶基因型，CTX-M型、SHV型和TEM型的检出率依次为83．6％、44．3％和37．7％，其中以CTXM14最多，共38株；SHV型仅见于肺炎克雷伯菌，SHV-12最常见，有20株；TEM型均为TEM-1。结论本院临床下呼吸道产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药情况严重，为多重耐药菌。ESBLs有7种基因型，CTX—M型是主要的基因型，其次是SHV型；两种菌中各基因型的分布不同，其耐药表型也不同。     

产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药性和基因型分布

目的了解广州地区腹腔感染产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性及ESBLs基因型分布。方法采用纸片扩散法(K-B法)对大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌进行抗菌药物的敏感性试验,通过PCR法分析其所产生基因型。结果产ESBLs菌株对亚胺培南全部敏感,对头孢哌酮-舒巴坦、头孢他啶和哌拉西林-三唑巴坦的敏感率为42.1%～76.3%,而对其他抗菌药物敏感率较低,对头孢噻肟的敏感率仅为0%～2.6%;基因型分析显示有35株产TEM型酶,14株产SHV型酶,29株产CTX-M型酶。结论腹腔感染产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药严重,CTX-M型ESBLs多见。     

产ESBLs肺炎克雷伯菌基因型分析

目的分析肺炎克雷伯菌临床分离株产超广谱β-内酰胺酶(ESBL s)的主要基因型。方法用表型确定的临床分离产ESBL s的肺炎克雷伯菌34株,分别用TEM,SHV,CTX-M-1,CTX-M-2和CTX-M-9扩增引物进行聚合酶链反应(PCR)扩增,并对PCR产物进行序列分析。结果PCR扩增结果显示TEM,SHV,CTX-M-1,CTX-M-2和CTX-M 9的阳性率分别为47.06%,85.29%,26.47%,32.35%和52.94%,CTX-M型总阳性率为88.24%,序列分析证实扩增为目的产物。结论34株ESBL s肺炎克雷伯菌的主要基因型是CTX-M型和SHV型,且同时携带2种以上基因的菌株占所测菌株的82.35%,需引起临床的高度重视。     

大肠埃菌和肺炎克雷伯菌超广谱β内酰胺酶的基因分型

目的：分析我院大肠埃希菌，肺炎克雷伯菌临床分离株中超广谱β内酰胺酶（ESBLs)的主要基因型。方法：用表型确证试验确定临床标本中产ESBLs的大肠埃希菌和克雷伯菌，用Etest检测其最低抑菌浓度（MIC），分别用TEM，SHV和CTX-M通用引物进行聚合酶链反应（PCR）扩增并对PCR产物进行序列分析。结果：大部分产ESBLs菌株体外对头孢噻肟耐药而对头孢他啶敏感，PCR扩增结果显示TEM，SHV和CTX-M的阳性率分别为68%，39%和83%，序列分析证实TEM扩增产物均属于TEM-1基因，CTX-M扩增产物均属于CTX-M-3基因，而SHV扩增产物则分别属于SHV-12，SHV-11或SHV-1基因，结论：CTX-M-3和SHV-12是我院产ESBLs菌株的主要基因型；尚未发现TEM起源ESBLs。     

广州地区泌尿系统感染的产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌的耐药特征和基因分型

目的了解本地区泌尿系统感染的产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌耐药特征及其基因型分布。方法收集广州地区13家医院2001~2003年间自尿培养分离的大肠埃希菌623株,用NCCLS规定的ESBLs初筛和确证试验检测ESBLs,用K-B琼脂扩散法进行药物敏感试验,用PCR方法对分离的产ESBLs菌株进行SHV、CTX-M基因型检测。结果产ESBLs大肠埃希菌检出率为33.4%(208株),其中53.8%(112株)携带CTX-M基因,20.7%(43株)携带SHV型基因,并有2.8%(6株)同时携带CTX-M基因和SHV型基因。产酶株的耐药率显著高于非产酶株,产ESBLs细菌对青霉素类、环丙沙星及头孢菌素类抗生素耐药率较高(高达84.1%~97.6%),对加用酶抑制剂克拉维酸或他唑巴坦的耐药率较低。结论广州地区泌尿系统感染的产ESBLs大肠埃希菌具有多重耐药的特点,其中CTX-M型是流行的基因型。     

佳木斯地区大肠埃希菌和阴沟肠杆菌质粒介导头孢菌素酶、超广谱β-内酰胺酶基因型分布

目的 了解佳木斯地区临床分离的大肠埃希菌和阴沟肠杆菌中质粒介导头孢菌素酶(AmpC酶)和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)流行情况及主要的基因型别.方法 127株临床分离无重复大肠埃希菌81株与阴沟肠杆菌46株,采用酶提取物三维实验检测产AmpC酶和ESBLs菌株,聚合酶链反应(PCR)扩增质粒型AmpC酶与ESBLs基因及其序列测定以确定其基因亚型.结果 46株阴沟肠杆菌中,单产AmpC酶者、单产ESBLs者、高产AmpC酶并产ESBLs者分别占21.7％、28.3％、6.5％;81株大肠埃希菌中,单产AmpC酶者、单产ESBLs者、高产AmpC酶并产ESBLs者分别占19.8％、38.3％、9.9％.大肠埃希菌ESBLs基因型为TEM、SHV、CTX-M,质粒AmpC酶基因型为DHA.阴沟肠杆菌ESBLs基因型为TEM、SHV、CTX-M,质粒AmpC酶基因型为DHA.结论 CTX-M型和DHA-1型分别是本地区大肠埃希菌和阴沟肠杆菌ESBLs和质粒介导AmpC酶的主要流行基因型.     

产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌儿童分离株的耐药性和基因型检测

目的 研究我院临床分离的产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性及ESBLs基因型与耐药表型的关系.方法 收集我院2007年1-3月临床分离的92株产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌,用K-B纸片法作药敏试验,酶抑制剂增强法表型确证,应用PCR、产物测序,确定ESBLs基因型.结果 我院临床分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中产ESBLs菌株的检出率分别为50.6%和57.3%;产ESBLs菌株对亚胺培南100%敏感,产ESBLs大肠埃希菌对头孢噻肟、头孢他啶、头孢吡肟和环丙沙星的耐药率分别为88.2%、14.7%、5.9%和29.0%,产ESBLs肺炎克雷伯菌则分别为75.6%、35.6%、28.9%和5.2%.92株产ESBLs菌株中,共检出7种β内酰胺酶基因型,TEM型酶的检出率为70.7%,均为TEM-1广谱酶, CTX型、SHV型ESBLs的检出率分别为66.3%和44.6%,其中CTX-M-14阳性率为48.1%;SHV基因型都在肺炎克雷伯菌中检出.结论 我院临床分离产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药情况严重,且其耐药表型也不尽相同.CTX-M型是我院产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中流行的基因型.     

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶检测及其耐药基因分析

目的了解大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的发生率,分析及研究其耐药性和耐药基因分型。方法用药敏纸片法对142株大肠埃希菌和79株肺炎克雷伯菌进行抗生素药物敏感试验,并对这2种菌株做ESBLs初筛和确证试验。对其中60株ESBLs阳性菌(大肠埃希菌29株,肺炎克雷伯菌31株)用聚合酶链反应(PCR)检测TEM、SHV、CTX-M3种基因并进行测序分型。结果142株大肠埃希菌和79株肺炎克雷伯菌中确证试验阳性率分别为56.3%和41.8%。产ESBLs菌对头孢类抗生素高度耐药,对庆大霉素、环内沙星的耐药率为71.3%~88.5%,对亚胺培南高度敏感(100.0%),对头孢西丁、头孢哌酮-舒巴坦、哌拉西林-他唑巴坦等的敏感性在63.8%~92.0%。60株ESBLs阳性菌中,TEM、SHV、CTX-M3种基因检出率分别为58.3%、33.3%、66.7%。其中29株大肠埃希菌中,TEM基因检出率为75.8%,SHV基因检出率为0,CTX-M基因检出率为86.2%。31株肺炎克雷伯菌中,TEM基因检出率为41.9%,SHV基因检出率为64.5%,CTX-M基因检出率为48.4%。有35株(58.3%)菌株同时检测到2种以上基因型。序列分析证实TEM扩增产物均属于TEM-1基因,CTX-M扩增产物均属于CTX-M-3基因,而SHV扩增产物则分别属于SHV-1、SHV-5、SHV-11、SHV-12、SHV-28。结论大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中产ESBLs的检出率较高,CTX-M-3、SHV-11和SHV-12是我院产ESBLs菌株的主要基因型。     

福州地区急性呼吸道感染患儿呼吸道合胞病毒检测及亚型分析

目的:分析福州地区2006-2007年冬春季我院收治急性呼吸道感染患儿呼吸道合胞病毒(RSV)及其亚型流行情况。方法:采用RT-PCR方法检测176例急性呼吸道感染患儿的鼻咽拭子中RSV并进行亚型鉴定分析。结果:(1)在176例标本中,RSV阳性28例(15.9%)。其中急性下呼吸道感染阳性率为38%,显著高于急性上呼吸道感染的4%(!2=33.15,P<0.05)。(2)28例RSV阳性标本中,A亚型23例(82%),B亚型4例(14%),不明分型者1例(4%);上、下呼吸道感染组患儿间RSV亚型分布差异无显著性(P>0.05),都以A型为主。(3)RSV阳性患儿的年龄主要以3岁以下为主。结论:RSV是婴幼儿急性下呼吸道感染的重要病原体;福州地区2006-2007年冬春季RSV两种亚型同时流行,以A亚型为主。     

比阿培南和亚胺培南对呼吸道和泌尿道致病菌的体外抗菌活性比较

目的研究比阿培南和亚胺培南对呼吸道和泌尿道致病菌的体外抗菌活性。方法采用琼脂二倍稀释法，测定比阿培南和亚胺培南对294株呼吸道和泌尿道致病菌的MIC。结果比阿培南对所有测试菌的MIC价MIC90和敏感率范围分别为≤0．03～4μg／ml、0．06～〉128μg／ml及90％～100％，亚胺培南为≤0．03—2μg／ml、0．06～〉128μg／ml及86．7％～100％。比阿培南对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌的MIC90（4，1μg／ml）是亚胺培南MIC90（2，0．25μg/ml）的2—4倍，对大肠埃希菌、阴沟肠杆菌、奇异变形杆菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌的MIC90（0．125—4μg／ml）是亚胺培南MIC90（0．5～8μg／ml）的1／4～1／2，对肠球菌属、肺炎链球菌、肺炎克雷伯菌、流感嗜血杆菌的MIC90与亚胺培南相当，分别为〉128、0．06、0．5、2μg／ml。结论比阿培南对革兰阳性菌和革兰阴性菌均具有广谱抗菌活性，其中对革兰阴性菌的作用优于亚胺培南，对革兰阳性菌的作用稍差于亚胺培南。     

加替沙星和左氧氟沙星治疗呼吸道感染的临床研究

目的　评价加替沙星治疗呼吸道细菌感染的临床疗效与安全性。方法　以左氧氟沙星为对照药进行随机双盲对照临床试验 ,共治疗呼吸道细菌感染患者 5 3例 ,其中加替沙星组 2 6例 ,左氧氟沙星组 2 7例。结果　加替沙星组临床痊愈率为 5 3 85 % ,有效率为 88 4 6 % ,细菌清除率为 90 91% ;而对照组分别为4 0 74 % ,6 2 96 %和 83 33%。加替沙星组临床有效率高于左氧氟沙星组 ,两组差异有显著性意义 (P <0 0 5 )。两组不良反应发生率分别为 11 5 4 %与 14 81% ,差异无显著性意义 (P >0 0 5 )。结论　加替沙星治疗呼吸道感染的有效性与安全性与左氧氟沙星相似 ,是一种高效、广谱、安全的抗生素     

两种培养基对嗜血杆菌属分离鉴定的比较

目的比较两种分离嗜血杆菌的培养基对呼吸道嗜血杆菌进行鉴定与分型。方法采用进口原料配制的培养基（Ｈ１）和国产原料配制的培养基（Ｈ２）分离２５４份呼吸道标本中的嗜血杆菌，从菌落生长、杂菌抑制和分离率等方面比较两种培养基的分离效果。结果Ｈ１与Ｈ２培养基差异无显著性，副流感嗜血杆菌、流感嗜血杆菌分离率分别为１０．２％、３．５％，儿童、成人嗜血杆菌属，流感嗜血杆菌分离率分别为３６．１％、１３．１％、８．８％、０．５％。９株流感嗜血杆菌中非ｂ型８株，ｂ型１株，均产β－内酰胺酶。结论国产原料配制的培养基可用于嗜血杆菌属的鉴定与分型，对大多数细菌室有参考价值     

降钙素原对成人下呼吸道感染诊断价值的研究

目的 评价降钙素原在成人下呼吸道感染中的诊断价值.方法 收集2008年7-12月北京大学人民医院的疑似下呼吸道感染的成人患者97例,分为下呼吸道感染合并脓毒症组、医院获得性肺炎组、社区获得性肺炎组、慢性阻塞性肺病急性加重组、其他下呼吸道感染组以及非感染性疾病组.记录各组患者的外周血血常规、红细胞沉降率、C反应蛋白、降钙素原、痰细菌培养、血培养等资料,所有病例均进行APACHEⅡ评分.降钙素原的检测采用荧光免疫夹心法.结果 下呼吸道感染合并脓毒症组、医院获得性肺炎组、社区获得性肺炎组、慢性阻塞性肺病急性加重组、其他下呼吸道感染组、非感染性疾病组降钙素原水平分别为10.1(0.7 ～37.0)、0.3(0.1 ～0.8)、0.2(0.1 ～0.9)、0.2(0.1～0.4)、0.3(0.1 ～0.5)、0.1(0.1 ～0.2)mg/L,差异有统计学意义(H=19.898,P＜0.01);两两比较显示,下呼吸道感染合并脓毒症组、医院获得性肺炎组、社区获得性肺炎组、其他下呼吸道感染组降钙素原水平均高于非感染性疾病组(U值分别为0、18.000、81.000、20.000,P值均＜0.01);且下呼吸道感染合并脓毒症组降钙素原水平显著高于其余感染组(U值分别为11.000、45.000、3.000、4.500,P均＜0.01).对细菌培养阳性患者的降钙素原和APACHEⅡ评分进行Pearson相关分析,r为0.499.取0.5 mg/L为临界值,降钙素原诊断下呼吸道感染的敏感度为32.6％,特异度为100％;而临界值为0.235 mg/L时,敏感度为53.9％,特异度为100％,诊断正确率为53.9％.结论 降钙素原在成人下呼吸道感染的诊断中具有一定价值,尤其是合并脓毒症时.适当下调降钙素原临界值可以进一步提高其诊断敏感度.     

福多司坦胶囊治疗呼吸道感染性疾病的临床研究

目的评价福多司坦胶囊祛痰作用的疗效和安全性。方法以盐酸氨溴索片为对照药,采用随机双盲平行对照的试验方法,将44例有呼吸道感染性疾病(包括急性支气管炎,慢性支气管炎,支气管扩张,肺炎)的患者随机分为两组,即福多斯坦组22例和盐酸氨溴索组22例。分别给药,连续7d。结果福多司坦组在改善痰的性状,咳痰难易程度,痰量多少,咳嗽频度方面与盐酸氨溴索组无差异(P>0.05)。盐酸氨溴索组中有1例出现转氨酶升高,可能与用药有关,停药及保肝治疗3d后恢复正常。结论福多司坦胶囊是一种安全有效的祛痰药物。     

阿奇霉素对ICU老年下呼吸道多药耐药铜绿假单胞菌感染的前瞻研究

目的:评价阿奇霉素对ICU老年下呼吸道多药耐药铜绿假单胞菌(MDRP)感染的抗生素耐药性、细菌清除率和临床疗效的作用。方法:ICU老年下呼吸道MDRP感染患者30例,随机分为阿奇霉素干预组(实验组)和常规治疗组(对照组),两组均以抗铜绿假单胞菌的两种敏感抗生素(β内酰胺类联用氟喹诺酮类或氨基糖苷类)为基础治疗,实验组加用阿奇霉素0.5g/d,疗程21d。将治疗前后经纤支镜获得的下呼吸道分泌物标本,分别按氨基糖苷类、β内酰胺类、喹诺酮类等抗生素进行细菌敏感性及耐药情况分析,并观察细菌清除率和临床疗效。结果:实验组治疗后的氨基糖苷类的耐药率显著低于治疗前(χ2=5.12,P=0.024)和对照组(χ2=9.87,P=0.02);实验组临床总有效率为85.7%,显著高于对照组的35.7%(χ2=5.39,P=0.02),其细菌清除率为78.6%,高于对照组的57.1%,但差异无显著性(χ2=3.493,P=0.062)。结论:阿奇霉素在老年ICU下呼吸道MDRP感染的治疗中,作为敏感抗生素的辅助用药,可以降低氨基糖苷类抗生素的耐药率,显著提高临床总有效率。     

A virologic survey of patients admitted to a critical care unit for acute cardiorespiratory failure

Objective To document the prevalence of respiratory virus infections in patients with chronic cardiac or pulmonary disorders admitted to a critical care unit for acute cardiorespiratory failure.Design, setting, patients The study took place in a critical care unit during two consecutive winters. All patients admitted to the unit for acute respiratory or cardiac failure were enrolled. A nasal swab was taken for polymerase chain reaction (PCR) detection of influenza virus, respiratory syncytial virus (RSV), metapneumovirus, rhinovirus, and coronavirus.Results One hundred twenty-two patients were enrolled. Their mean age was 69 years; 42% of the patients were female; the new simplified acute physiology score (SAPS II) score on admission was 35.6; 94% of patients had acute respiratory failure, 14% reported influenza-like illness before admission, and 11% of patients died in the unit. Twenty-one patients (17%) tested positive for a respiratory virus. The per-1,000 positivity rates were influenza virus 66, RSV 49, rhinovirus 33, metapneumovirus 16, and coronavirus 8. No link was found between virologic results and clinical outcome. A strong link was found between the rate of influenza virus positivity and the incidence of flu-like illness in the community (p=0.017).Conclusion These results show that respiratory virus infection—particularly influenza virus infection during epidemic periods—is common among patients hospitalized for acute cardiorespiratory failure.The authors have no conflicts of interest. The study was supported by a grant from Roche (France).     

C反应蛋白检测在呼吸道感染中的应用的研究进展

呼吸道感染性疾病是呼吸科病原体病毒、细菌侵入呼吸道病变,发作反复,临床小儿较为常见,影响生长发育。C-反应蛋白是当机体出现炎性反应或受到各种损伤后由肝脏合成的一种急性时相的反应蛋白,为国内外公认的最敏感炎性指标之一。呼吸道感染中应用C反应蛋白检测,对于临床区分病毒、细菌感染,病情的检测有重要的参考价值。本研究检索国内外文献,综述呼吸道感染中应用C反应蛋白检测,以期临床各位同仁参考。     

应用小瓶离心培养法分离检测2009年1-6月广州市成人流感样病例相关病毒

目的 应用高通量的小瓶离心法快速分离检测广州市成人流感样病例相关病毒,分析广州地区患有ILI的成人呼吸道病毒感染情况,评价其在临床实验室开展快速病毒培养的意义.方法 采集2009年1-6月广州市成人流感样病例患者标本652份,应用小瓶离心法(包括MDCK、HEp-2、LIE-MK_2和MRC-5 4种细胞),离心接种后,通过观察CPE、血凝(HA)、血吸附(HAD)及直接免疫荧光法(IF)等方法进行病毒分离鉴定.结果 652份成人流感样病例标本中共检出阳性161份,5种病毒病原体,病毒培养阳性率为24.69%,其中甲型流感病毒62株(62/161,38.51%),乙型流感病毒88株(88/161,54.65%),副流感病毒8株(8/161,4.96%),腺病毒2株(2/161,1.24%),呼吸道合胞病毒1株(1/161,0.62%).用小瓶离心培养法发出各种病毒培养报告的平均时间分别为:流感病毒2 d、腺病毒3 d、副流感病毒3 d.结论 (1)离心培养法具有快速、灵敏、高通量的特点,对临床实验室诊断病毒具有应用推广价值.(2)在分离的Iu病原体中,流感病毒占主导,乙型流感病毒为优势毒株,自2009年1月延续至6月,并呈逐步增多的态势,出现夏季高峰.