儿童特发性血小板减少性紫癜外周血中CD4、CD28、sFas和sFasL表达的临床研究

目的探讨T淋巴细胞表面分子CD4、CD28和凋亡蛋白sFas和sFasL在急慢性特发性血小板减少性紫癜（ITP）发病中的变化。方法用流式细胞术分别检测25例急性ITP和20例慢性ITP患儿及20例正常对照儿童外周血CD4＋ 、CD28＋、CD4＋ CD28＋的表达;用酶联免疫夹心法（ELISA）测定急性ITP和慢性ITP患儿及正常儿童外周血sFas和sFasL的水平。结果①ITP患儿外周血中CD4＋、CD28＋及CD4CD28＋表达均低于正常对照组（P〈0．05）,aITP和cITP组间没有显著差异（P〉0．05）;CD4＋细胞中CD三表达与正常对照相比无显著差异（P〉0．05）;②ITP患儿外周血淋巴细胞中的CD2s表达率与CD4表达率呈正相关（P〈0．05）;③aITP和cITP组患儿血清中的sFas和sFasL表达水平均明显高于对照组（P〈0．05）,且cITP组高于aITP组（P〈0．05）;3组之间有显著差异（P〈0．05）;④sFas和sFasL的表达水平呈正相关（r=0．660,P〈0．05）,CD28＋表达率和sFas水平没有明显相关性（P〉0．05）。结论①CD4＋T细胞分子和协同刺激分子CD28＋参与了儿童ITP的发病过程;且CD4＋分子减少并非由于协同刺激CD28分子表达降低所致,CD4T淋巴细胞无协同刺激分子CD28表达缺陷;②sFas和sFasL表达异常参与了儿童aITP和cITP的免疫病理过程,监测其变化有助于ITP的分型和预后。     

梅毒患者外周血淋巴细胞CD28-B7分子的表达及意义

目的探讨CD28-B7 T淋巴细胞活化协同刺激分子在梅毒发病、发展及转归中的作用。方法应用流式细胞仪和逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）对60例梅毒患者（早期梅毒患者和血清固定患者各30例）和30例正常人外周血淋巴细胞中B7（CD80/CD86）及CD4＋T淋巴细胞中CD28的表达进行检测。结果①梅毒患者外周血淋巴细胞表面CD28的表达水平低于正常对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）;血清固定组和早期梅毒组比较,CD28表达水平的差异无统计学意义（P〉0.05）。②梅毒患者外周血淋巴细胞CD80及CD86的表达水平明显低于正常对照组（P〈0.05）,但CD80和CD86的表达水平在血清固定组和早期梅毒组间无统计学意义（P〉0.05）。结论本研究提示梅毒患者外周血淋巴细胞表面CD80、CD86及其受体CD28的表达下调,通过影响CD28-B7协同刺激通路,抑制T细胞尤其是CD4＋T淋巴细胞活性功能,可能参与了梅毒的发病、发展及转归过程。     

老年急性冠脉综合征外周T淋巴细胞亚群水平变化研究

目的探讨老年急性冠脉综合征（ACS）患者血外周血T淋巴细胞亚群水平变化与发病关系。方法采用SAP法分别测定28例老年ACS患者、34例老年对照组（NC）的外周血T淋巴细胞亚群水平。结果ACS组CD3＋、CD4＋、CD4＋／CD8＋比值低于NC组（P〈0．001），而CD8＋则高于NC组（P〈0、001）。结论老年ACS患者存在细胞免疫功能紊乱，可能对老年ACS的形成和发展产生了影响。T淋巴细胞亚群比值变化可作为老年ACS严重程度的监测指标，免疫干预可能成为防治老年ACS的新途径。     

脓毒症患者T淋巴细胞亚群水平与APACEⅡ评分的关系

目的探讨脓毒症患者T淋巴细胞亚群水平与APACHEⅡ评分的相关性。方法采用流式细胞仪测定60例脓毒症患者（脓毒症组）和柏例同期住院的非脓毒症患者（对照组）的外周血CD4^＋T、CD8^＋T细胞水平,并计算CD4^＋T／CD8^＋T细胞比值和APACHEⅡ评分。按疾病转归将60例脓毒症患者分成死亡组（n=22）和存活组（n=38）,比较上述检测指标水平。结果脓毒症组的CD4^＋T、CD4^＋T／CD8^＋T细胞水平明显低于对照组,差异有统计学意义（P〈0．01）;死亡组患者CD4^＋T、CD4^＋T／CD8^＋T细胞水平明显低于存活组,差异有统计学意义（P〈0．01）。结论脓毒症患者APACHEⅡ评分与外周血CD4^＋T（r=-0．474,P〈0．01）和CD4^＋T／CD8^＋T细胞比值（r=-0．425,P〈0．01）呈显著负相关。     

Graves病患者外周血CD4+CD28-T淋巴细胞的检测和分选

目的 分析CD4^＋CD28ˉT淋巴细胞Graves病（毒性弥漫性甲状腺肿）患者外周血的表达及探索纯化该T细胞的有效方法。方法 运用常规密度梯度法分离Graves病患者外周血单个核细胞，用CD4、CD28单克隆抗体进行免疫荧光双标记后进行流式细胞术检测和分选。结果 Grave病患者外周血T细胞亚群中，CD4^＋CD28ˉ的表达率明显高于正常人（P〈0．01），采用流式细胞术和单克隆抗体双标记对CD4^＋CD28ˉT淋巴细胞进行快速无菌分选是可行的。结论 流式细胞术可用于Graves病患者外周血CD4^＋CD28ˉT淋巴细胞的检测和分选。     

类风湿关节炎患者血浆sHLA-G表达及其与Treg细胞的相关性研究

目的探讨类风湿关节炎（rheumatoidarthritis,RA）患者血浆sHLA-G表达水平及其与Treg细胞水平和RA临床特征的相关性。方法选择40例RA患者和40例健康对照者,采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测血浆sHLA-G表达水平,流式细胞术检测外周血CD3＋HLA-G＋T细胞、Treg细胞（CD4＋CD25＋Foxp3＋Treg细胞）含量。结果RA患者血浆sHLA-G水平显著低于健康对照组（P〈0．001）;RA患者外周血CD3＋HLA-G＋T细胞百分比明显低于健康对照组（P〈0．001）;Treg细胞百分比也较对照组明显降低（P〈0．01）。相关性分析显示,RA患者Treg细胞百分比与sHLA-G水平存在明显正相关性（P〈0．01）,而与CD3＋HLA-G＋T细胞百分比无显著相关（P〉0．05）;RA患者sHLA-G水平及CD3＋HLA-G＋T细胞百分比均与患者DAS28评分显著负相关（P〈0．05）,而与患者RF、ESR、CRP、抗CCP抗体和ANA水平等均无明显相关性（P〉0．05）。结论RA患者血浆sHLA-G表达异常降低,其可能参与了RA的发生和疾病进展;血浆sHLA-G水平与外周血Treg细胞百分比呈明显正相关,二者之间可能存在相互诱导和调节的信号途径,在诱导和维持机体自身免疫耐受中起着重要的协同作用。     

特应性皮炎患儿CD23与血清IgE的相关性研究

目的了解特应性皮炎（AD）患儿外周血淋巴细胞CD23与血清IgE的相关关系。方法采用流式细胞术检测56例AD患儿和35例正常儿童外周血淋巴细胞CD23的阳性细胞百分率（percentage of positive cell,PPC）,同时用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清IgE水平,并进行相关性分析。结果两组外周血淋巴细胞CD23的PPC和血清IgE水平差异有统计学意义（P〈0．01）,AD患儿高于正常对照组。进一步分析显示,CD23与血清IgE水平呈显著正相关（r=0．380,P〈0．01）。结论AD患儿CD23和血清IgE水平有明显升高,并且CD23和血清IgE关系密切,可能参与了AD的发生发展过程。     

共信号分子CD28、ICOS在慢性乙型肝炎病人外周血T淋巴细胞表面的表达及意义

目的:观察慢性乙型病毒性肝炎病人外周血T淋巴细胞表面共信号分子CD28、ICOS的表达水平,探讨CD28、ICOS在乙型肝炎病毒慢性感染中的意义.方法:选取慢性乙型病毒性肝炎病人56例作为观察组,纳入同期20名健康体检者作为对照组.流式细胞术检测受试者外周血T淋巴细胞表面CD28、ICOS的表达水平.结果:2组外周血C...     

恶性淋巴瘤患者外周血T细胞CD8~+CD28~-表达及意义

目的探讨恶性淋巴瘤患者外周血T细胞CD8^＋CD28^-表达及意义。方法采用流式细胞仪检测35例恶性淋巴瘤患者外周血T细胞CD8^＋CD28^＋及CD8^＋CD28^-。结果恶性淋巴瘤患者外周血T细胞CD8^＋CD28^＋及CD8^＋CD28^-与正常对照有显著性差异（P〈0．05）：治疗有效后两者趋于正常（P〉0．05）；而无效组与正常对照组相比仍有显著性差异（P〈0．05）。结论恶性淋巴瘤患者外周血T细胞CD8^＋CD28^＋及CD8^＋CD28^-表达异常，不同治疗效果表达不同，恶性淋巴瘤患者有免疫功能异常，治疗有效后免疫功能恢复正常。     

流式细胞术检测特发性血小板减少性紫癜患者血小板相关免疫球蛋白及T淋巴细胞亚群

目的：应用流式细胞术检测特发性血小板减少性紫癜（ITP）患者外周血中的血小板相关免疫球蛋白（PAIg）水平和T淋巴细胞亚群分布情况。方法：应用三色免疫荧光多参数流式细胞术检测ITP患者（n=30）和对照者（n=30）外周血PAIg水平和T淋巴细胞免疫表型（CD3^＋、CD3^＋CD4^＋及CD3^＋CD8^＋）。结果：ITP患者外周血PAIgG、PAIgM及PAIgA的平均荧光强度均显著高于正常对照组（P〈0．01）；与对照组比较，ITP患者外周血CI）3^＋、CD3^＋CD4^＋亚群明显减低（P〈0．05），CD3^CD8^＋亚群明显升高（P〈0．05），而CD3^＋CD4^＋／CD3^＋CD8^＋比值显著减低（P〈0．01）。结论：ITP患者PAIg水平显著增高，且存在T淋巴细胞亚群分布漂移。此方法简便易行，有助于ITP的诊断．     

特应性皮炎患者外周血白介素-17和白介素-23水平的检测

目的探讨特应性皮炎(AD)患者外周血中白介素-17(IL-17)、白介素-23(IL-23)的含量及其在AD发病机制中的作用。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测40例AD患者外周血中IL-17、IL-23的含量,并与AD疾病严重程度作相关性分析。AD疾病严重程度用SCORAD评分标准判断。同时以30例性别、年龄匹配的健康人作为对照组。结果AD组外周血中IL-17的含量为(36.23±8.66)pg/L,明显高于健康对照组(17.11±2.25)pg/L(t=13.38,P0.01);其含量与SCORAD评分呈显著正相关(r=0.412,P0.05)。AD组外周血中IL-23的含量为(52.78±8.56)pg/L,高于健康对照组(24.86±3.12)pg/L(t=19.02,P0.01);其含量与SCORAD评分呈显著正相关(r=0.493,P0.05)。结论AD患者外周血中IL-17、IL-23的含量增高且与病情的正相关性,提示过量表达的Th17细胞调控因子IL-23可能激发Th17细胞处于功能活跃状态,Th17细胞分泌过量的效应因子IL-17促进AD发病发挥一定作用。     

淋巴细胞PPAR-α的表达在冠心病的意义

目的探讨淋巴细胞过氧化物酶体增生激活型受体a（PPARa）的表达水平与冠心病（CHD）的关系。方法选择66例冠状动脉造影明确诊断的冠心病患者,其中稳定型心绞痛（SAP）19例,不稳定型心绞痛（UAP）25例和急性心肌梗死（AMI）22例。另选择冠脉造影正常的23例非冠心病患者作为对照组,以ELISA法测定其淋巴细胞中的PPAR-α水平。结果冠心痛患者与非冠心病患者组比较PPAR-α的表达水平明显减低（37．97±12．98;57．53±12．87。P〈0．01）;不同类型冠心病患者的PPAR—a表达水平分别为：AMI（28．05±8．28）〈UAP（38．04±12．70）〈SAP（49．37±7．50）;以AMI、UAP和SAP分别代表病情的严重程度,相关分析显示PPAR-α的表达水平与AMI、UAP和SAP呈负相关（r=-0．723,P〈0．01）;SAP组比正常对照组PPAR-α的表达水平轻度下降,但无统计学意义（P〉0．05）。结论冠心病患者外周血淋巴细胞中PPAR-α的表达下调,随着CHD病情加重PPAR-α的表达进一步下降;PPAR-α可能参与急性冠脉综合征（ACS）的发生发展,并与斑块的不稳定性有关。     

Graves’病患者外周血T细胞表面膜型CD28及血清中可溶性CD28的表达及其意义

目的分析Graves′病(Graves′disease,GD)患者外周血T细胞表面膜型CD28及血清中可溶性CD28的表达水平,探讨CD28分子在GD免疫病理机制中的作用。方法选取105例GD患者为试验组,67例健康者为对照组,通过溶血及流式细胞术检测所有受试对象外周血T细胞表面膜型CD28的表达,酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中可溶性CD28的含量。结果试验组外周血CD4+CD28+T细胞为(23.367±8.562)%,CD8+CD28+T细胞为(10.156±3.114)%,较对照组[分别为(30.786±5.143)%和(17.200±3.624)%]显著减少(P<0.0.5、P<0.0.1),血清中可溶性CD28水平观察组[(2.35±0.58)μg/L]较对照组[(0.53±0.23)μg/L]显著增加(P<0.01)。结论共刺激分子CD28很有可能参与了GD的免疫病理机制。     

B7/CD28家族共刺激分子在蒙古族儿童的川崎病发病机制中的作用

目的：阐明B7/CD28家族刺激分子在蒙古族儿童川崎病的发病机制中起到的重要作用。方法：通过荧光定量PCR对蒙古族儿童川崎病患者和用IVIG后ICOS和CTLA-4mRNA表达量变化进行研究。结果：川崎病组CTLA-4mRNA表达水平显著降低,比较有显著性差异（P〈0.05）,而ICOSmRNA表达水平显著增高,差异显著（P〈0.05）。川崎病IVIG治疗组ICOSmRNA的表达显著降低（P〈0.05）,CTLA-4mRNA表达显著升高（P〈0.05）。结论：B7/CD28家族成员中的活化及抑制作用,以及它们之间的相互关系,不仅可以探讨川崎病的发病机制,而且可能为它的免疫治疗提供新的思路。进而更好地为少数民族儿童的身体健康提供基础。     

冠状动脉粥样硬化与外周血CD4＋CD28-T细胞的关系

目的探讨冠心病患者外周血CD4＋CD28-T细胞水平变化,以及CD4＋CD28-T细胞与冠状动脉粥样硬化严重程度的相关性。方法选择2012-06／2012—12月在南方医科大学珠江医院心血管内科住院、经冠状动脉造影术检查的患者57例,其中造影检查正常对照组13例,稳定型心绞痛组14例,不稳定型心绞痛组15例,急性心肌梗死组15例。采用流式细胞仪检测外周血CD4＋CD28T细胞占CD4＋T细胞比例,并对其与冠状动脉粥样硬化严重程度（改良Gensini标准）进行相关性分析。结果①外周血CD4＋CD28-T细胞占CD4＋淋巴细胞比例在对照组、稳定型心绞痛组、不稳定型心绞痛组、心肌梗死组分别为（12．61±9．06）％,（13．04±6．44）％,（20．68±9．50）％和（22．65±11．55）％。急性心肌梗死组、不稳定型心绞痛组较稳定型心绞痛组、对照组存在统计学差异（P〈0．05）,而急性心肌梗死组与不稳定型心绞痛组之间、稳定型心绞痛组与对照组之间的差异无统计学差异（P均〉0．05）。②外周血CD4＋CD28-T细胞比例与Gensini评分呈正相关（r=0．399,P〈0．01）。结论CD4＋CD28-T细胞参与了冠心病的发生发展,是导致动脉粥样斑块的不稳定的原因之一,对冠心病临床危险分层有一定的预测价值。     

乙型肝炎外周血T淋巴细胞上CD28分子表达与病毒载量的关系

目的：分析HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者、HBeAg阳性乙肝病毒携带者外周血T淋巴细胞上CD28表达情况及其与HBV病毒载量的关系。方法采集健康人、HBeAg阳性乙肝病毒携带者、HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者的外周血,抗体标记,采用流式细胞技术检测CD4^＋、CD8^＋、CD4^＋CD28^＋、CD8^＋CD28^＋T淋巴细胞,同时检测肝功能HBV DNA。结果慢性乙型肝炎组、乙肝病毒携带组CD4^＋CD28^＋T细胞、CD8^＋CD28^＋T细胞百分率明显低于健康对照组（P〈0.05）;HBV DNA≥107组CD8^＋CD28^＋T细胞百分率低于HBV DNA＜107组（P〈0.05）。结论乙型肝炎病毒感染者CD8^＋T细胞上CD28的低表达与高病毒载量有关。     

生殖器疱疹患者外周血淋巴细胞B7-CD28/CTLA-4的检测分析

目的研究外周血B7-CD28/CTLA-4（CD152）T淋巴细胞活化协同刺激分子在生殖器疱疹（Genital herpes,GH）患者发病机制中的作用。方法用流式细胞仪检测51例GH患者和15例健康体检者外周血淋巴细胞CD80/86及CD4＋/CD8＋T淋巴细胞中B7-CD28/CTLA-4的表达。结果GH患者恢复组与对照组比较,CD80、CD86的阳性表达较对照组明显升高,差异有统计学意义（P〈0.05）。其余各组间CD80、CD86比较差异无统计学意义。恢复组CD8＋/CD28阳性表达显著高于非复发组（P〈0.05）;非复发组显著高于对照组（P〈0.05）;复发组的CD4＋/CD152、CD8＋/CD152的阳性表达显著高于非复发组（P〈0.05）。其余各组间CD4＋/CD152、CD8＋/CD152及CD4＋/CD28、CD8＋/CD28表达差异无统计学意义。结论单纯疱疹病毒感染可诱导CD80、CD86、CD28和CD152活化增殖,高表达负性共刺激分子和分泌抑制性细胞因子,通过多种机制抑制机体的抗病毒免疫应答。     

急性冠脉综合征患者外周血CD4~＋CD28~-细胞增多的意义

目的探讨急性冠脉综合征（ACS）患者外周血CD4＋CD28-细胞增多的意义。方法ACS组43例、稳定性心绞痛（SA）组19例、胸痛综合征（CPS）组23例均经冠状动脉造影证实。采用酶联免疫吸附法测定超敏C反应蛋白（hsCRP）,流式细胞术检测CD4＋CD28-细胞。结果与CPS和SA组相比较,ACS组中hsCRP和CD4＋CD28-细胞水平均增高,差异有高度统计学意义（P〈0.01）;且hsCRP与CD4＋CD28-细胞水平呈正相关（P〈0.01）。结论ACS患者外周血CD4＋CD28-细胞可能参与了ACS的发病过程。     

乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群变化及临床意义

目的 观察不同类型乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）感染者外周血T淋巴细胞亚群变化特点.方法 对我院2013年6-11月门诊及住院的200例乙肝患者和50例健康对照者采用流式细胞术（flow cytometry,FCM）检测外周血淋巴细胞（CD45＋）、T淋巴细胞（CD45＋CD3＋、CD45＋CD3＋CD4＋、CD45＋CD3＋CD8＋）、B淋巴细胞（CD45＋CD3-CD19＋）、NK淋巴细胞（CD45＋CD3-CD16＋56＋）百分比和细胞绝对计数.结果 急性乙型肝炎组T淋巴细胞总数、CD4＋和CD8＋T淋巴细胞数较健康对照组显著升高（P＜0.01）.慢性乙型肝炎组、肝硬化组和肝衰竭组：T淋巴细胞总数、CD4＋和CD8＋T淋巴细胞数、CD4＋/CD8＋比值均较健康对照组降低,其中肝衰竭组＜肝硬化组＜慢性乙型肝炎组.慢性乙型肝炎组CD4＋淋巴细胞百分比较健康对照组显著降低（P＜0.01）.肝硬化组CD4＋淋巴细胞百分比较慢性乙型肝炎组显著降低（P＜0.01）,CD8＋T淋巴细胞百分比显著升高（P＜0.01）.肝衰竭组T淋巴细胞和CD4＋T淋巴细胞百分比较肝硬化组显著降低（P＜0.01）.结论 乙型肝炎患者CD4＋T淋巴细胞持续降低,与疾病病程发展密切相关.