免疫表型检测对骨髓增生异常综合征诊断的意义

目的 探讨免疫表型检测对骨髓增生异常综合征(MDS)诊断及鉴别诊断的价值.方法 采用免疫细胞化学法中的生物素-亲和素桥联碱性磷酸酶酶标法(ABC-AP法)对38例初诊的MDS患者、8例再生障碍性贫血(AA)患者及17例正常对照的骨髓片进行免疫表型检测.结果 CD41阳性的淋巴样小巨核细胞在MDS组中较特异出现,且以RCMD组出现率最高;MDS患者骨髓单个核细胞(MNC)早期髓系抗原CD13、CD33表达升高,而T淋巴系抗原CD3表达下降,其主要表现在RAEB和RCMD组,而RA/RAS组不明显;干/祖细胞抗原CD34在MDS组未见明显增加.结论 酶标淋巴样小巨核及其他免疫表型检测有助于MDS的诊断及鉴别诊断.     

骨髓增生异常综合征患者Fas抗原的表达及临床意义

目的:探讨Fas(CD95)在骨髓增生异常综合征(MDS)发病机制中的作用及临床意义。方法:用酶联免疫夹心法检测25例MDS患者血浆可溶性Fas(sFas),用流式细胞术检测骨髓(BM)CD34+细胞、CD34-细胞、外周血单个核细胞(PBMNCs)Fas抗原的表达。结果:MDS难治性贫血伴有原始细胞增多(RAEB)/转变中的RAEB(RAEB-t)组患者骨髓CD34+细胞百分率显著高于对照组及难治性贫血(RA)组(均为P<0.01);RA组及RAEB/RAEB-t组骨髓CD34+细胞Fas表达显著高于对照组(分别为P<0.01,P<0.05),其中RA组高于RAEB/RAEB-t组,有统计学意义(P<0.05);RA组患者骨髓CD34-细胞Fas表达高于对照组及RAEB/RAEB-t组患者(均为P<0.05)。两患者组血浆sFas显著低于正常对照(均为P<0.01),sFas水平与患者血红蛋白(Hb)浓度呈正相关(r=0.67,P<0.01)。结论:MDS患者骨髓、外周血细胞Fas抗原广泛表达,Fas表达异常与MDS的发生、发展密切相关。     

骨髓增生异常综合征（MDS）免疫表型研究

[目的]探讨免疫异常表型对骨髓增生异常综合征（MDS）分型诊断及鉴别诊断价值。[方法]选用多种单克隆抗体,用流式细胞测定分析仪,对79例MDS、70例良性血液病人（贫血、粒细胞减少症、血小板减少性紫癜、感染）的骨髓细胞免疫表型进行测定分析。[结果]MDS89．3％以上有二系或三系免疫袁型异常,其中CD19、CD13、CD14、CD33、CD34、HLA—DR免疫标志变化最大,明显高于正常对照组（P〈0．01）。髓系抗原表达明显增高,而且随MDS进展恶化。FAB亚型抗原表达出现规律性变化：RA→RAS→RAEB→向RAEB—T转化。较早期髓系抗原表达（如CD13、CD33）逐渐增加,而较晚期髓系抗原表达（如CD15）逐渐减少;同时伴淋系抗原表达逐渐减少;骨髓干细肜祖细胞表面抗原（如CD34、HLA—DR）,随着MDS恶化发展,有逐渐明显增加异常表现,而且CD34、HLADR早期抗原表达增高者,常常预后较差,易于转化成白血病。[结论]MDS病人骨髓细胞免疫异常表型,有利于MDS诊断、分型诊断及鉴别诊断,并对治疗、预后判断有重要指导价值。     

探讨病态小巨核细胞在骨髓增生异常综合征各亚型中的分布情况

目的：探讨骨髓病态小巨核细胞数量的多少在骨髓增生异常综合征（ MDS）各型的分布情况。方法：采用瑞氏姬姆萨染色,在显微镜下对84例MDS患者骨髓片中的病态巨核细胞进行分类并计数数量,比较和分析。结果：在RA的12例,RARS的10例病例中,淋巴样小巨核细胞、单圆核和多圆核小巨核细胞检出率为0;在RCMD和RCMD－RS的25例病例中,检出淋巴样小巨核细胞8例占32．0％,单圆核小巨核细胞13例占52．0％,小双圆核及多圆核小巨核细胞15例占60．0％;在RAEB－1和RAEB－2的37例病例中,检出淋巴样小巨核细胞24例占64．9％,单圆核小巨核细胞28例占75．6％,小双圆核及多圆核小巨核细胞30例占81．0％。原始细胞过多难治性贫血（RAEB－1和RAEB－2）病态小巨核细胞数量高于其他类型（RA型,RARS型, RCMD型,RCMD～RS型）。结论：髓象中各种病态巨核细胞检出数量多少与MDS疾病严重程度呈相关性,对MDS分型有一定的意义。     

骨髓增生异常综合征患者骨髓CD4~+T细胞共刺激分子CD28/CTLA-4的变化

目的通过检测骨髓增生异常综合征（MDS）患者CD3^＋CD4^＋T细胞表面CD28^＋和CTLA-4^＋分子水平,探讨两者在MDS发病机制中的作用。方法用流式细胞技术检测38例初治MDS患者和11例正常对照组外周血CD3^＋CD4^＋T细胞表面CD28^＋和CTLA-4^＋表达率。结果（1）MDS组CD3^＋CD4^＋CD28^＋表达率为（79.82&#177;8.99）%[难治性贫血（RA）（78.65&#177;10.4）%、伴原始细胞增多性难治性贫血（RAEB）/转变中的原始细胞增多性难治性贫血（RAEB-t）（80.10&#177;7.28%）],低于正常对照组的（89.56&#177;3.06）%,差异有高度统计学意义（P﹤0.01）;（2）MDS组CD3^＋CD4^＋CTLA-4^＋表达率为（2.14&#177;1.25）%[RA（1.51&#177;0.80）%、RAEB/RAEB-t为（2.65&#177;1.33）%],显著高于正常组的（0.11&#177;0.12）%,差异有高度统计学意义（P﹤0.01）;随MDS疾病的进展,RAEB/RAEB-t组CD3^＋CD4^＋CTLA-4^＋的表达率与RA组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）;（3）CTLA-4/CD28免疫应答中相互拮抗的共刺激分子对比值在MDS-RA组中为2.14&#177;0.97,RAEB/RAEB-t组为3.58&#177;1.55,高于正常对照组的0.11&#177;0.11,差异有高度统计学意义（P﹤0.01）;并且RA组和RAEB/RAEB-t组之间的差异亦有高度统计学意义（P﹤0.01）。结论（1）MDS患者骨髓的CD3^＋CD4^＋T细胞表面的共刺激分子表达异常,CD28下调,CTLA-4上调,T细胞处于抑制状态;（2）随着MDS骨髓中原始细胞的增多,CD28/CTLA-4比值增高,进一步说明CD28/CTLA-4异常与MDS疾病的发生及进展相关。     

骨髓增生异常综合征患者血浆白细胞介素12的检测及临床意义

目的:探讨骨髓增生异常综合征(MDS)患者血浆白细胞介素12(IL-12)的水平及其临床意义。方法:用酶联免疫夹心法(ELISA)检测25例MDS患者及24名正常人血浆中IL-12(p70)水平,用流式细胞仪检测T细胞亚群。结果:MDS难治性贫血(RA)组患者血浆IL-12(p70)水平明显高于正常对照组及MDS难治性贫血伴有原始细胞增多(RAEB)/转变中的RAEB(RAEB-t)组(均为P<0.01),RAEB/RAEB-t组患者血浆IL-12(p70)水平低于对照组(P<0.05)。MDS患者IL-12(p70)水平与CD8细胞表达率呈正相关(r=0.41,P<0.01),与CD4表达率呈负相关(r=-0.53,P<0.01)。结论:IL-12与MDS的发生、发展密切相关。     

单抗CD41免疫酶标染色在全血细胞减少症中的诊断意义

目的：通过对116例全血细胞减少症的骨髓涂片采用单抗CD41免疫酶标染色，观察5种小巨核细胞在此类疾病中的不同。方法：于光学显微镜下，仔细观察染色后小巨核细胞的检出率，并作统计学处理。结果：单抗CD41免疫酶标染色对小巨核细胞的检出及形态学观察有较好的优越性，能及时发现体积小的淋巴样巨核细胞。结论：单抗CD41免疫酶标染色检测小巨核细胞具有方法简便、特异、敏感、染色后的巨核细胞颜色鲜明、细胞轮廓清楚、容易测量大小、观察形态等特点，特别容易发现淋巴样小巨核细胞．对MDS与其它全血细胞减少症的鉴别诊断有重要价值。     

骨髓增生异常综合征和再生障碍性贫血患者骨髓原始细胞免疫表型分析

目的检测骨髓增生异常综合征（MDS）和再生障碍性贫血（AA）患者骨髓原始细胞免疫表型特征,探讨其对二者发病机制、诊断、分型诊断及鉴别诊断的临床意义。方法选用多种单克隆抗体,应用直接免疫荧光法、流式细胞术和CD45/SSC设门,对MDS组23例、AA组14例、正常对照组9例的骨髓原始细胞各免疫标志的表达率进行检测。结果MDS组与正常对照组相比其造血干/祖细胞抗原CD34、HLA DR、髓系早期抗原CD13、CD33、单核系抗原CD14、T淋巴细胞抗原CD7的表达率增高,髓系成熟抗原CD15、B淋巴系抗原CD19、CD20的表达率降低,DI值增高（P＜0.05）;RAEB组与RA组相比CD34、HLA DR、CD13、CD33、CD14、CD7的表达率增高,CD15、CD3、CD19、CD20的表达率减低,DI值增高（P＜0.05）。AA组与正常对照组相比其CD34、CD13、CD33、CD15的表达率降低,CD3、CD7、CD25、CD22的表达率增高（P＜0.05）。MDS组与AA组相比其CD34、HLA DR、CD13、CD33、CD14的表达率增高,CD3、CD5、CD7、CD15、CD19、CD20、CD22、CD25的表达率显著降低（P＜0.05）。结论MDS和AA患者骨髓细胞免疫表型分析,有助于揭示二者的发病机制,为临床提供新的诊断、分型及鉴别诊断方法。     

建立小巨核细胞免疫酶标法在儿童血液病中的应用

目的建立常规的小巨核细胞免疫酶标染色方法，并讨论该方法对儿童血液病诊断及鉴别诊断中的应用意义。方法采用CD41，单抗免疫酶标法检测儿童血液病患者骨髓涂片小巨核细胞。结果对照组小巨核细胞阳性率为25％，未见淋巴样小巨核细胞。不同疾病组比较，小巨核细胞和淋巴样小巨核细胞阳性率MDS组最高，AA组阳性率最低。结论与常规骨髓瑞特染色比较小巨核细胞免疫酶标染色可准确识别淋巴样小巨核细胞，有助于某些儿童血液病的鉴别和辅助诊断。     

CD41标记的微小巨核细胞染色在老年贫血诊断中的应用

目的：探讨CD41标记的微小巨核细胞染色法（SAP染色法）在老年贫血诊断及鉴别诊断中的意义。方法：采用瑞特-姬姆萨染色和CD41标记的SAP染色法,分别检测了107例60岁以上老年贫血患者的骨髓涂片中微小巨核细胞的数量和类型。结果：CD41标记的SAP染色法对巨核细胞的检出率明显高于瑞特-姬姆萨染色法,两者相比差异有统计学意义（P〈0.01）。不同疾病组比较,微小巨核细胞阳性率MDS组最高,依次为MDS〉ITP〉MA〉ACD〉MM〉IDA〉RA〉AA〉PRCA〉CAA;淋巴样微小巨核细胞MDS组检出率为73.6%,其他组均未检出。结论：CD41标记的SAP染色可以显著提高巨核细胞检出率;且对老年贫血具有一定的鉴别诊断价值。     

雄激素联合小剂量全反式维甲酸治疗骨髓增生异常综合征长期疗效观察

目的 研究雄激素联合小剂量全反式维甲酸治疗骨髓增生异常综合征的长期疗效.方法 62例骨髓增生异常综合征(MDS),按FAB诊断分型标准:其中RA48例、RAS2例、RAEB9例、RAEB-t2例、CMML1例.司坦唑醇6 mg/d或炔烃雌烯异(口恶)唑0.6/d,全反式维甲酸10 ms/d.结果 异恶性循环治疗6个月时60例可评价者中36例维持原方案治疗,按照MDS国际工作组疗效判定标准:完全缓解1例,部分缓解6例,血液学改善19例.总有效率43.3%(26/60).RA/RAS有效率50.0%(24/48),RAEB/RAEB-t/CMML有效率16.7%(2/12).有效组和无效组在治疗前后的骨髓原始细胞比例、骨髓增生程度、病态造血以及粒/红差异均无统计学意义.治疗12个月时25例维持原方案治疗:完全缓解1例,部分缓解7例,血液学改善9例.总有效率28.3%(17/60).RA/RAS有效率35.4%(17/48).RAEB/RAEB-t/CMML有效率0%(0/12).长期追访中位时间47个月,39例RA患者有效组、无效组的中位生存期分别为54个月(95%可信区间41,66个月)、23个月(95%可信区间13,32个月),二者差异有统计学意义(P<0.05).不良反应大多数轻微不影响继续治疗.结论 雄激素联合小剂量全反式维甲酸治疗MDS对低危险组患者是一种比较有效、经济、安全的治疗方法,有效者能够改善生活质量,在一定程度上延长生存期.     

骨髓增生异常综合征患者血清白细胞介素8的检测

目的：探讨骨髓增生异常综合征（ＭＤＳ）患者血清白细胞介素８（ＩＬ－８）检测的临床价值。方法：夹心酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ法）检测１６例ＭＤＳ患者血清ＩＬ－８,并与正常对照组比较及ＭＤＳ亚型间比较。结果：ＭＤＳ患者血清ＩＬ－８水平显著高于正常对照组（Ｐ＜０ ．０５）,ＲＡＥＢ／ＲＡＥＢ－ｔ组显著高于ＲＡ／ＲＡＳ组（Ｐ＜０．０５）。结论：ＩＬ－８在ＭＤＳ的发病中有一定作用,ＩＬ－８的检测可为ＭＤＳ的疗效判断及预后转归提供有价值的线索。     

MDS患者P15基因高度甲基化的研究

目的 :研究P15基因通过甲基化失活在骨髓增生异常综合征 (MDS)发病中的作用。方法 :用甲基化敏感的限制性核酸内切酶消化 ,结合聚合酶链反应 (PCR)技术。结果 :2 0例MDS患者中发现有 9例 (45 % )存在P15基因高度甲基化 ,且多为高危MDS (RAEB、RAEB_t) (P <0 .0 5 )。结论 :P15基因可通过甲基化而失活 ,可能与部分MDS的发生及发展有关。     

流式细胞术分析骨髓增生异常综合征小巨核细胞的初步研究

目的：建立基于巨核细胞糖蛋白Ⅱb／Ⅲa（CD41a）和碘化丙啶（PI）双标记的流式细胞术（FCM ）分析骨髓小巨核细胞的方法,并研究其在骨髓增生异常综合征（MDS）诊断中的意义。方法采用异硫氰酸荧光素标记的单克隆抗体标记CD41a ,PI标记巨核细胞DNA ,用FCM分析巨核细胞倍体分布。结果42例MDS患者,FCM 检测小巨核细胞阳性率为90．5％,瑞氏‐姬姆萨染色和免疫组织化学方法检测阳性率分别为54．8％和64．3％,三者比较差异有统计学意义（χ2＝13．640,P＝0．001）;FCM检测MDS低危组和高危组小巨核细胞阳性率分别为81．8％和100％,差异有统计学意义（χ2＝4．019,P＝0．045）。结论 FCM检测M DS小巨核细胞检出率高,且高危患者小巨核细胞检出率更高,有助于M DS的早期诊断和预后评估。     

Transformation of myelodysplastic syndromes into acute myeloid leukemias

Background Myelodysplastic syndromes (MDSs), also called preleukemias, are a group of myeloid hematopoietic malignant disorders. We studied the transformation of MDS into acute myeloid leukemia (AML).Methods Leukemic transformation in 151 patients with MDS was dynamically followed up. The clinical manifestation, peripheral blood and bone marrow condition, karyotypes, immunophenotypes, response to treatment, and prognosis of AML evolution from MDS (MDS-AML) were also observed.Results During the course of this study, over the past eight years and seven months, 21 (13.91%) of 151 MDS patients progressed to overt leukemia, with a median interval of 5 (1-23) months. There were no significant differences between rates of leukemic transformation in comparison with the refractory anemia (RA), RA with excess of blasts (RAEB), and RAEB in transformation (RAEB-t) patient groups. Transformation occurred either gradually or rapidly. There were five parameters positively correlated to leukemic transformation: under 40 years of age, pancytopenia of 3 lineages, more than 15% blasts in the bone marrow, at least two abnormal karyotypes, and treatment with combined chemotherapy. All of the 21 patients with leukemia suffered from MDS-AML, and most of them were M2, M4, or M5. Two (9.52%) MDS-AML patients developed extramedullary infiltration. Leukopenia was found in 47.62% of these patients. Two thirds of these patients, whose bone marrows were generally hypercellular, suffered from neutropenia. After developing AML, 8 (47.06%) patients developed abnormal karyotypes. High expression of immature myeloid antigens, including CD33 ［(49.83±24.50)%］, CD13 ［(36.38±33.84)%］, monocytic antigen CD14 ［(38.50±24.60)%］, and stem cell marker CD34 ［(34.67±30.59)%］, were found on bone marrow mononuclear cells from MDS-AML patients after leukemic transformation. In some cases, lymphoid antigens, such as CD5, CD7, CD9, and CD19, coexisted with myeloid antigens. A low complete remission rate (31.25%) and a short survival time, with median survival of 6 (1-28) months, were found in patients with MDS-AML treated by induction chemotherapy.Conclusions MDS has a high risk of developing into AML, either gradually or rapidly. Patients with MDS-AML have specific biological characteristics and a worse prognosis.     

Evi-1 and MDS1-Evi-1 genes in pathogenesis of myelodysplastic syndromes and post-MDS acute myeloid leukemia

Ｔｈｅｅｃｏｔｒｏｐｉｃｖｉｒｕｓｉｎｔｅｇｒａｔｉｏｎｓｉｔｅ1(Ｅｖｉ1)ｇｅｎｅ,ｌｏｃａｔｅｄａｔｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｂａｎｄ3ｑ26,ｗａｓｏｒｉｇｉｎａｌｌｙｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄａｓａｇｅｎｅａｓｓｏｃｉａｔｅｄｗｉｔｈｒｅｔｒｏｖｉｒａｌｌｙｉｎｄｕｃｅｄｍｙｅｌｏｉｄｌｅｕｋｅｍｉａｉｎｍｉｃｅ1,2　ＭａｎｙｓｔｕｄｉｅｓｈａｖｅｓｈｏｗｎｔｈａｔｔｈｅＥｖｉ1ｇｅｎｅｉｓｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｅｄｉｎｍｙｅｌｏｉｄｌｅｕｋｅｍｉａｗｉｔｈ3ｑ26,ｉｎｖｏｌｖｉｎｇｃｈｒｏｍｏｓｏｍａｌａｂ…     

小儿骨髓增生异常综合症(MDS)13例临床分析

目的：探讨小儿骨髓增生异常综合症(MDS)的实验室检查特征及临床特点。方法：对13例诊断为MDS患儿的外周血、骨髓像及临床表现进行回顾性分析：结果：13例患儿11例为男性，2例女性。临床以发热、贫血、肝脾肿大为主要表现。13例患儿均为中重度贫血，外周血见有核红细胞，白细胞表现为增高、正常或减低。4例患儿外周血见幼稚细胞，血小板可正常或减低，网织红细胞多数偏高。骨髓均增生活跃，有红系或粒系病态造血，以巨幼样改变为主；诊断为RA10例，RAEB2例，RAEB-t1例。结论：小儿MDS诊断仍主要靠骨髓检查，骨髓至少一系出现病态造血，巨幼样改变较易见，并除外其他引起病态造血的疾病，需注意和再障相鉴别：