UPLC-Q-TOF-MS/MS鉴定马钱苷大鼠体内代谢产物

目的采用超高效液相色谱与串联四级杆飞行时间质谱仪联用技术（UPLC-Q-TOF-MS/MS）分析鉴定大鼠灌胃马钱苷后其在尿液中的代谢产物,阐明马钱苷代谢途径。方法大鼠灌胃给予马钱苷,收集给药前后的尿样,经固相萃取进行预处理,采用超高液相色谱C18色谱柱,流动相为乙腈-1%甲酸水,梯度洗脱,采用动态背景扣除（DBS）触发信息关联采集（IDA）进行MS/MS数据采集。结果经MetabolitePilot代谢物分析软件处理后,根据MS/MS给出质谱碎片信息对代谢产物进行结构推测,共鉴定马钱苷代谢物3种,并归纳了马钱苷在大鼠体内的代谢过程。结论该方法简单可靠,灵敏度高,可用于体内微量成分的分析鉴定。     

UFLC-ESI-IT-TOF鉴定六味地黄丸中的化学成分和代谢成分

目的：鉴定六味地黄丸中的化学成分和代谢成分。方法：采用超快液相色谱梯度洗脱，飞行时间质谱正负离子同时检测。结果：在六味地黄提取物中鉴定了40种化学成分，在大鼠血中鉴定了6种原型药物和9种代谢产物，并推断了以上产物的代谢途径。结论：UFLC—ESI-IT—TOF方法适合于复杂中成药样品的分析，有助于全面了解六味地黄丸中的化学成分和代谢成分。     

全二维气相色谱飞行时间质谱在现代分析中的应用进展

全二维气相色谱-飞行时间质谱(GC×GC-TOFMS)技术是将全二维气相色谱的高分离效能与飞行时间质谱的强大结构定性识别功能完美结合,不仅实现对复杂物质体系更准确的分离、检测及结构鉴定,而且简化了样品的前处理过程,样品分析时间更短,为样品成分分析及结构鉴定提供了一个重要和全新的技术支撑。文章综述了全二维气相色谱-飞行时间质谱技术在燃料油、环境监测、中药化学成分等方面的应用进展,阐述其在各领域应用范围及研究现状,旨在为应用者提供参考依据,促进全二维气相色谱-飞行时间质谱的应用推广和技术发展。     

二至丸对四氯化碳致大鼠急性肝损伤血浆代谢组学研究

目的 研究四氯化碳（CCl₄）致大鼠急性肝损伤模型大鼠血浆内源性代谢物变化特点和二至丸对异常代谢的调节作用,寻找二至丸治疗急性肝损伤可能的代谢生物标志物,以探索二至丸治疗肝损伤的作用机制。方法 运用快速分离液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱（RRLC-Q-TOF/MS）技术,对大鼠血浆中内源性代谢物进行测定。结果 定性鉴定出9种潜在代谢生物标志物,通过独特通路分析（IPA）,找到2条肝损伤代谢通路。结论 二至丸可以使造模后大鼠的体内代谢物含量有不同程度的恢复,提示其治疗作用可能与2条肝损伤代谢通路的调节有关。独特通路分析能有效的识别药物靶标,这有助于进一步了解药物作用机制,提高研究效率。     

UFLC-ESI-IT-TOF鉴定六味地黄丸中的化学成分和代谢成分

目的：鉴定六味地黄丸中的化学成分和代谢成分。方法：采用超快液相色谱梯度洗脱，飞行时间质谱正负离子同时检测。结果：在六味地黄提取物中鉴定了40 种化学成分，在大鼠血中鉴定了6 种原型药物和9 种代谢产物，并推断了以上产物的代谢途径。结论：UFLC-ESI-IT-TOF 方法适合于复杂中成药样品的分析，有助于全面了解六味地黄丸中的化学成分和代谢成分。     

基于UPLC-Q-TOF-MS的林泽兰内酯C血清药物化学研究

目的:采用超高效液相色谱四级杆飞行时间质谱仪联用技术(UPLC-Q-TOF-MS)分析鉴定大鼠灌胃林泽兰内酯C后血清中的代谢产物,阐明林泽兰内酯C代谢转化过程。方法:灌胃给药后眼眶取血,制备血清样品,采用Agilent ZORBAX XDB-C8柱,流动相为乙腈-0.2%甲酸水,梯度洗脱,动态背景扣除触发信息关联采集进行MS/MS数据采集。结果:结合PeakView、MetabolitePilot代谢物鉴定软件,分析结果显示林泽兰内酯C经过水解、氧化、还原、甲基化等Ⅰ相反应及葡萄糖醛酸化、磷酸化、谷胱甘肽结合等Ⅱ相反应,形成系列相关代谢产物共26种。结论:该方法高效灵敏,明确了林泽兰内酯C在大鼠体内的代谢转化过程,为中药野马追的药效物质基础、新药研发及临床应用研究等提供相关科学参考。     

参麦方对于大鼠尿液代谢组学影响的初步研究

目的:运用代谢组学方法研究大鼠灌服参麦方后机体内源性代谢物的变化,探讨参麦方在体内的作用及其机制。方法:通过超高效液相色谱-飞行时间质谱(UPLC/TOF-MS)分析药物作用后大鼠尿液的代谢物图谱,采用主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)寻找各组代谢物差异,变量重要性投影(VIP)及t检验筛选潜在内源性标志物。结果:鉴定出16种内源性代谢物。结论:结果表明参麦方可通过改变色氨酸、组氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸等氨基酸代谢,脂肪酸、嘌呤以及能量代谢来影响机体的生理功能从而发挥功效。该研究为参麦方在疾病模型的分析以及临床应用方面提供了依据。     

淫羊藿中化学成分的UPLC／Q-TOF-MS分析

目的建立淫羊藿Epimedium brevicornu中化学成分的超高压液相色谱一飞行时间质谱（UPLC／Q-TOF-MS）的分析方法。方法Acquity UPLC BEHC 18色谱柱（100mm×2．1mm,1．7μm）,流动相为0．1％甲酸水溶液-乙腈,梯度洗脱;体积流量为0．4mL／min;柱温为45℃;进样量为2μL。质谱检测采用正、负离子模式,电压分别为3．0、2．5kv;离子源温度110℃;雾化温度400℃;雾化气体积流量800L／h。结果在10min内完成淫羊藿中40个化学成分的鉴定。结论建立了一种简单、快速、高效的UPLC／Q．TOF—MS方法对淫羊藿中化学成分进行了鉴定,为全面控制淫羊藿的质量和机理研究提供了基础。     

基于 UHPLC-Q-TOF-MS 技术的洋川芎内酯A在大鼠体内的代谢产物分析

目的 分析鉴定大鼠灌胃洋川芎内酯A后血浆、尿液、胆汁及粪便内存在的代谢产物并推测其在大鼠体内的代谢途径。方法 SD (sprague dawley, SD)大鼠一次性灌胃给药后,收集不同时间(段)的血浆、尿液、胆汁及粪便,前处理后,采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(ultra-high-performance liquid chromatography-quadrupole time-of-flight tandem mass spectrometry, UHPLC-Q-TOF-MS)技术,对代谢物进行结构表征。结果 最终在大鼠血浆、尿液、胆汁和粪便中共检测到43个代谢产物,其中38个为首次在洋川芎内酯A代谢产物中分析确认,其体内代谢主要发生氧化、去甲基化、内水解和饱和双键加氢等Ⅰ相代谢,以及硫酸盐结合、谷氨酰胺结合、牛磺酸结合、半胱氨酸结合和葡萄糖醛酸化等Ⅱ相代谢。结论 本研究初步揭示了洋川芎内酯A在大鼠血浆、尿液、胆汁和粪便中的代谢情况,为后期洋川芎内酯A活性代谢物筛选及作用机制研究提供参考。     

类风湿性关节炎疾病分型的血浆代谢组学研究

现代医学以及传统中医从不同的视角认识疾病，并有望在系统生物学的范畴内得到统一。本文采用基于超高效液相色谱-时间飞行质谱（UPLC—Q—TOF）的血浆代谢组学方法，运用多维数据分析来研究类风湿性关节炎（RA）的疾病分型。主成分分析（PCA）的方法能够区分对照组和RA疾病组。进一步采用正交滤噪（OSC）并结合偏最小二乘判别分析（PLS—DA）可明显区分类风湿性关节炎的不同病程（稳定期与活动期）以及中医特定证候（寒证与热证）等疾病亚型。代谢组学在阐明传统中医理论，促进中医与现代医学的交流上有着广泛的应用前景。     

Structural mass spectrometry: rapid methods for separation and analysis of peptide natural products

A significant challenge in natural product discovery is the initial discrimination of discrete secondary metabolites alongside functionally similar primary metabolic cellular components within complex biological samples. A property that has yet to be fully exploited for natural product identification and characterization is the gas-phase collision cross section, or, more generally, the mobility-mass correlation. Peptide natural products possess many of the properties that distinguish natural products, as they are frequently characterized by a high degree of intramolecular bonding and possess extended and compact conformations among other structural modifications. This report describes a rapid structural mass spectrometry technique based on ion mobility-mass spectrometry for the comparison of peptide natural products to their primary metabolic congeners using mobility-mass correlation. This property is empirically determined using ion mobility-mass spectrometry, applied to the analysis of linear versus modified peptides, and used to discriminate peptide natural products in a crude microbial extract. Complementary computational approaches are utilized to understand the structural basis for the separation of primary metabolism derived linear peptides from secondary metabolite cyclic and modified cyclic species. These findings provide a platform for enhancing the identification of secondary metabolic peptides with distinct mobility-mass ratios within complex biological samples.     

高分辨质谱在药物代谢产物鉴定中的应用进展

高分辨质谱由于具有快速、灵敏、专属的特点,在药物及代谢产物的鉴定中有着重要的应用。文章综述了质谱系统在代谢物鉴定中的进展,重点介绍了多种新型高分辨质谱数据采集和处理技术在代谢物鉴定方面呈现的优势,以期为代谢产物鉴定研究提供参考。     

液相色谱-质谱联用法在药物研究中的应用

LC／MS已成为药物研究中的主流分析技术。本文简要回顾了现代药物研究对分析技术的需求和LC／MS的发展，通过一些实例，着重介绍了LC／MS／MS在生物样品定量分析和药物代谢产物鉴定中的应用，并总结了该项技术的一些特点。     

Isolation of labeled 9-dihydrobaccatin III and related taxoids from cell cultures of taxuscell cultures of taxus canadensis elicited with m.

Cell suspension cultures of Taxus canadensis rapidly produced paclitaxel (1) and other taxoids in response to elicitation with methyl jasmonate. Three of these taxoids, of potential value in the synthesis of taxoid analogues, have been isolated from cell cultures of Taxus canadensis and identified as 13-acetyl-9-dihydrobaccatin III (2), baccatin VI (3), and 9-dihydrobaccatin III (4). Of these metabolites, 9-dihydrobaccatin III (4) has not been isolated from any Taxus species, whereas 13-acetyl-9-dihydrobaccatin III (2) and baccatin VI (3) have been isolated from a number of natural sources. 2D NMR techniques, mass spectrometry, and partial synthesis were used to rigorously elucidate the structure and stereochemistry of these natural products.     

LC-MS鉴定肝毒性吡咯里西啶类生物碱千里光碱大鼠体内代谢产物

目的 研究肝毒性吡咯里西啶类生物碱千里光碱的大鼠体内代谢。方法 SD大鼠口服千里光碱,收集胆汁、尿液及粪便样本,采用液相色谱-多级质谱联用对代谢产物进行研究,推导其体内代谢模式。结果 正负离子下共检测到38种代谢产物,主要为千里光碱及其代谢物的氮氧化物,羟化产物,水解产物,以及硫酸结合物,葡萄糖醛酸结合物和谷胱甘肽结合物。另外,尿液、胆汁与粪便中检测到的代谢物有一定差异,胆汁和尿液中代谢产物较多。结论 千里光碱在大鼠体内代谢广泛,形成多种代谢产物。     

Identification and characterization of reactive metabolites in natural products-driven drug discovery

Toxicity of natural products arising from their metabolic biotransformation into reactive chemical intermediates is an important reason for high attrition rates in early drug discovery efforts. Screening promising natural products for their likelihood to form such metabolites is therefore an important step in identifying potential liabilities in the drug development process. However, such screening is complicated by the need to have test methods that are sensitive, reliable, accurate, efficient, and cost-effective enough to allow for routine identification and characterization of the reactive metabolites. These metabolites are typically formed in minute quantities, usually through minor metabolic pathways, and, due to their highly reactive and therefore transient chemical nature, pose considerable analytical challenges in attempts to determine their properties. Understanding the formation of reactive metabolites may be used as the basis for synthetic chemical modification of parent natural products aimed at bypassing such harmful bioactivation. This paper highlights the general principles and protocols commonly used to predict and study the formation of reactive metabolites in vitro and how the data obtained from such studies can be used in the development of safer drugs from natural products.     

高分辨质谱数据MDF技术的进展

近年来,质谱在药物鉴定中的应用日益广泛,许多质谱采集及数据挖掘技术,如全信息串联质谱(MSE)扫描、提取离子流技术、中性丢失过滤技术、产物离子过滤技术等,也相应得到较大程度的开发和发展。其中一种基于高分辨质谱数据的过滤技术——质量亏损过滤技术(MDF),根据代谢物与原形药物具有相近的质量亏损这一规律,对采集的高分辨质谱数据进行处理和识别,通过一次或有限几次进样可从复杂背景中发现和鉴定药物及其代谢产物,显现出独特的优势。     

基于液质联用数据库技术的中药及天然产物化学成分快速鉴定方法的建立

目的:应用液质联用数据库技术建立中药及天然产物化学成分的快速鉴定方法。方法:采用超高效液相色谱电喷雾离子化四级杆飞行时间串联质谱(UPLC-ESI-Q-TOF)技术,采集不同类型中药及天然产物化学成分的保留时间和质谱信息并建立质谱信息库,应用Masslynx工作站的Chromalynx XS模块的Identify功能,自动快速鉴定色谱图中各个色谱峰;运用保留时间校正方法,对相同化合物在不同色谱系统下的保留时间进行校正,以扩大该方法适应性。结果:该方法中建立的质谱信息库现收录了包含生物碱类、黄酮类、醌类、苯丙素类、萜类等不同类型的210余个化学成分的液质联用信息,包括正负离子模式下各成分的保留时间,准分子离子峰及其碎片离子的精确质量数。使用该方法进行样品成分鉴定测试,检出准确率90%左右。结论:与人工成分鉴定相比较,该方法简便、快捷、准确率高。保留时间校正方法的应用,一定程度上解决了不同色谱系统下保留时间不同导致质谱库无法统一的问题,扩大了本方法的应用范围。     

头花蓼有效组分在大鼠粪便和胆汁中的代谢研究

目的考察头花蓼有效组分在大鼠粪便和胆汁中的代谢转化。方法以头花蓼提取物为研究对象,采用UHPLC-ESI-Q-TOF-MS联用技术,结合Metabolite ToolsTM、质量亏损过滤(MDF)等代谢产物分析技术,系统分析头花蓼有效组分在大鼠粪便和胆汁中的代谢产物。结果在大鼠体内共检出4个原型成分和26个代谢产物,其中粪便、胆汁分别有12、19个成分(含交叉成分),代谢产物主要以槲皮素葡萄糖醛酸化、甲基葡萄糖醛酸化、硫酸化代谢产物为主。结论建立的高分辨质谱方法可以分析头花蓼有效组分在大鼠粪便和胆汁中的代谢产物,初步阐明了头花蓼有效组分的体内代谢特征。     

代谢组学在天然产物毒性评价和毒理学研究中的应用进展

为了尽可能避免毒性效应并安全使用天然产物,更全面的毒性认知已成为迫切需要。通常认为小分子代谢产物可以代表生物体的生理或病理状态,因此,基于代谢组学的毒理学研究既可以用于评价毒性,也可以鉴定天然产物的毒理学生物标志物,有助于指导临床用药并减少药物不良反应。近几十年来,代谢组学在中药单体成分、提取物和复方制剂诱导的肾毒性、肝毒性、心脏毒性和中枢神经系统的毒性评价中应用广泛。综述常用的代谢组学技术,包括样品制备、样品检测、数据处理和分析方法,以及基于代谢组学的天然产物毒理学研究等方面的进展,并对该研究的潜在问题进行探讨并对今后的发展方向进行展望。