基于UHPLC-Q-TOF-MS分析荭草花提取物在H9c2心肌细胞中效应物质

目的:利用H9c2心肌细胞和UHPLC-Q-TOF-MS技术筛选荭草花抗心肌缺血作用的活性成分。方法:用心肌细胞选择性地结合荭草花提取液中的活性成分,洗去未结合的其他成分后,使细胞靶点失活,被结合的活性成分从心肌细胞中释放出来,采用Eclipse Plus C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm),流动相0.1%甲酸水溶液(A)-0.1%甲酸乙腈溶液(B)梯度洗脱(0~2 min,95%~79%A;2~5 min,79%A;5~6.5 min,79%~60%A;6.5~7.5 min,60%~55%A;7.5~9.5 min,55%~0%A;9.5~10 min,0%~95%A),电喷雾离子源(ESI)正、负离子模式下扫描采集数据,通过采用对照品比对及二级碎片离子对化学成分进行鉴定。结果:检测出荭草花提取物中可与心肌细胞结合的17个成分,采用对照品比对后,确定8个色谱峰所表征的化学成分,依次为原儿茶酸,儿茶素,山柰素-3-O-β-D-葡萄糖苷,槲皮素3-O-α-L-鼠李糖苷,山柰素-3-O-α-L-鼠李糖苷,N-p-香豆酰酪胺,槲皮素和山柰酚。结论:通过分析心肌细胞破碎液中与活性细胞相结合的成分,筛选出了荭草花提取物中能与心肌细胞有相互作用的成分,为明确荭草花的药效物质基础提供了科学依据。     

右旋酮洛芬氨丁三醇温敏水凝胶的释放度、稳定性及组织相容性研究

目的 建立右旋酮洛芬氨丁三醇（DKPF）温敏水凝胶的含量测定方法，考察其稳定性和组织相容性。方法 建立紫外分光光度法测定DKPF温敏水凝胶中DKPF含量，并考察方法的专属性、线性关系、定量限、精密度、回收率；应用建立的紫外分光光度法、恒温振荡法测定DKPF温敏水凝胶的释放度，检测高湿、光照、低温条件下的DKPF温敏水凝胶稳定性。随机选取80只昆明小鼠，分别sc 0.2 mL DKPF温敏水凝胶、空白水凝胶、DKPF生理盐水溶液（DKPF浓度同DKPF温敏水凝胶），于给药后1、3、6、9、12 d，每组各取5只脱颈处死，剖开注射部位皮肤观察水凝胶状态，并取皮下组织样本HE染色后光镜下观察，评价DKPF温敏水凝胶组织相容性。结果 DKPF在260 nm处有最大紫外吸收，DKPF质量浓度在1.70~25.56 μg/mL范围内呈良好的线性关系（r=0.999 9），方法学的日间、日内精密度，加样回收率均良好；DKPF温敏水凝胶主要以扩散为主，释放度符合规定，且工艺重现性好；水凝胶在低温、湿度75%条件下稳定性良好，不耐光照，需避光保存。sc给予小鼠水凝胶后，各组小鼠均成活，且水凝胶在皮下逐渐减小直至消失；病理切片结果提示，温敏水凝胶引起轻微炎症反应，随着时间延长逐渐消失，组织相容性良好。结论 本研究所建立的紫外分光光度法方法准确率高，重复性好，可应用于DKPF温敏水凝胶中DKPF含量测定；DKPF温敏水凝胶符合生物材料的安全标准。     

头花蓼有效组分在大鼠粪便和胆汁中的代谢研究

目的考察头花蓼有效组分在大鼠粪便和胆汁中的代谢转化。方法以头花蓼提取物为研究对象,采用UHPLC-ESI-Q-TOF-MS联用技术,结合Metabolite ToolsTM、质量亏损过滤(MDF)等代谢产物分析技术,系统分析头花蓼有效组分在大鼠粪便和胆汁中的代谢产物。结果在大鼠体内共检出4个原型成分和26个代谢产物,其中粪便、胆汁分别有12、19个成分(含交叉成分),代谢产物主要以槲皮素葡萄糖醛酸化、甲基葡萄糖醛酸化、硫酸化代谢产物为主。结论建立的高分辨质谱方法可以分析头花蓼有效组分在大鼠粪便和胆汁中的代谢产物,初步阐明了头花蓼有效组分的体内代谢特征。