复血康对小鼠骨髓造血祖细胞作用的实验研究

利用扩散盒方法观察了复血康煎剂对正常小鼠及骨髓抑制小鼠ＣＦＵ－Ｄ和ＣＦＵ－Ｅ的影响。结果表明,复血康煎剂不仅可提高正常小鼠ＣＦＵ－Ｄ及ＣＦＵ－Ｅ的产率,与正常对照组比较Ｐ＜０．０１,还可提高环磷酰胺所致骨髓抑制小鼠的ＣＦＵ－Ｄ及ＣＦＵ－Ｅ的产率,与模型对照组比较Ｐ＜０．００１,与正常组比较Ｐ＜０．０１。说明复血康煎剂能促进骨髓造血细胞的增殖、分化,并能促进损伤的骨髓造血祖细胞的增殖、分化,使其受损伤的骨髓恢复造血,推测复血康煎剂用于治疗再生障碍性贫血的临床疗效是可靠的。     

制首乌总多糖对贫血小鼠造血祖细胞增殖的影响

目的观察制首乌总多糖(PPS)对放化疗所致骨髓抑制贫血小鼠造血祖细胞增殖的影响。方法建立骨髓抑制贫血小鼠模型,采用造血祖细胞培养技术,观察PPS体内ip给药和细胞培养直接用药对造血祖细胞增殖和骨髓有核细胞(BMC)数目的影响。结果体内用药能显著增加BMC数目,提高BFU-E、CFU-E和CFU-Meg集落数产率(P<0.01),能增加CFU-GM集落数产率(P<0.05);在一定浓度下,体外直接用药,能增加CFU-Meg集落数产率(P<0.01)。结论PPS能通过间接作用促进红系和粒系祖细胞的增殖,能通过间接和直接作用刺激巨核系祖细胞的增殖。     

冬虫夏草对小鼠红系造血机能的影响

用微量甲基纤维素培养方法探讨冬虫夏草结晶制剂（CS-Cr)对小鼠骨髓红系祖细胞（CFU-E和BFU-E）增殖的影响。实验结果表明，CS-Cr明显提高骨髓CFU-E和BFU-E产率、自杀率，并能对抗三尖杉酯碱对造血机能的损害，采用液体培养技术发现CS-Cr促进骨髓成纤维祖细胞（CFU-F）增殖，其产率变化与CFU-E和BFU-E产率变化一致。     

生血丸促进骨髓抑制小鼠造血功能的机制研究

目的 通过观察骨骼抑制小鼠外周血网织红细胞、造血祖/干细胞集落产率的变化,探讨生血丸对⁶⁰Co合并环磷酰胺致骨髓抑制小鼠的促进造血功能的作用机制。方法 雄性BalB/C小鼠随机分为对照组、模型组、生血丸组、重组人粒细胞巨噬细胞刺激因子（GM-CSF）阳性对照组,除对照组外,其他3组小鼠以⁶⁰Co合并环磷酰胺制备骨髓抑制模型后24 h开始给药,生血丸组每天ig 10 g/kg的生血丸1 mL,对照组和模型组ig等体积生理盐水,阳性对照组ip GM-CSF 12 5 μg/kg,连续给药7 d。进行网织红细胞计数,造血干祖细胞培养术计数集落产率。结果 与模型组相比,生血丸组、阳性对照组均能明显改善骨髓抑制小鼠外周血网织红细胞的计数（P＜0.05）,生血丸组网织红细胞的形态接近对照组;生血丸组及阳性对照组大鼠各系祖细胞集落产率均得到改善,且两组间比较无显著差异（P＞0.05）。结论 生血丸能提高骨髓抑制小鼠外周血网织红细胞计数,改善各系造血祖细胞集落产率,可能为生血丸促进骨髓抑制小鼠造血功能的部分机制。     

冬虫夏草对小鼠红系造血机能的影响

用微量甲基纤维素培养方法探讨冬虫夏草结晶制剂(CS-Cr)对小鼠骨髓红系祖细胞(CFU-E和BFU-E)增殖的影响。实验结果表明,CS-Cr明显提高骨髓CFU-E和BFU-E产率、自杀率,并能对抗三尖杉酯碱对造血机能的损害。采用液体培养技术发现CS-Cr促进骨髓成纤维祖细胞(CFU-F)增殖,其产率变化与CFU-E和BFU-E产率变化一致。     

中药制剂兰州方对免疫介导的再生障碍性贫血模型小鼠骨髓增殖的影响

目的通过观察中药制剂兰州方对免疫介导的再生障碍性贫血模型小鼠骨髓组织形态学及股骨有核细胞数的影响,以此证实其的确切疗效并探讨机理。方法将BALB/C小鼠90只随机分为6组:兰州方大、中、小剂量组,贞芪扶正颗粒对照组,模型组和正常对照组,每组15只。除正常对照组外,其余75只小鼠均经3.0 GY直线加速器γ射线全身照射,照射4小时内输入取自DBA/2小鼠的胸腺、淋巴结细胞悬液。照射一周后,通过检测血象、骨髓象,证明造模成功。各组用药40天后将小鼠脱颈处死,取双侧股骨进行有核细胞计数和病理学切片观察,并对所测结果进行统计学处理。结果模型组,兰州方大、中、小剂量组,贞芪扶正颗粒对照组小鼠BMC计数较正常对照组小鼠明显减少(P<0.05或P<0.01);兰州方大、中、小剂量组,贞芪扶正颗粒对照组BMC计数较模型组显著升高(P<0.05或P<0.01)。模型组,兰州方大、中、小剂量组,贞芪扶正颗粒对照组造血组织容量百分率较正常对照组明显减少(P<0.05或P<0.01);模型组,兰州方大、中、小剂量组,贞芪扶正颗粒对照组脂肪组织容量百分率较正常对照组明显增多(P<0.05或P<0.01);兰州方大、中、小剂量组,贞芪扶正颗粒对照组造血组织容量百分率较模型组显著升高(P<0.05),而脂肪组织容量百分率较模型组亦显著升高(P<0.05或P<0.01);兰州方中剂量组造血组织容量百分率高于兰州方大、小剂量组和贞芪扶正颗粒对照组(P<0.05);兰州方中剂量组脂肪组织容量百分率低于兰州方大、小剂量组和贞芪扶正颗粒对照组(P<0.05)。结论中药制剂兰州方具有改善骨髓微环境、促进骨髓造血细胞的增殖分化、提高造血祖/干细胞数量、抑制非造血组织细胞增生分化的作用,并通过以上环节使骨髓造血功能恢复。     

补肾生血药干预不同时间对环磷酰胺所致骨髓抑制小鼠细胞周期与细胞增殖的影响

目的观察补肾生血药干预不同时间对环磷酰胺诱发骨髓抑制小鼠骨髓细胞周期及细胞增殖的影响。方法52只雄性BALB/c小鼠随机分为空白对照组、模型对照组、阳性对照组、补肾生血药低剂量组、补肾生血药高剂量组。先预防用药3 d,补肾生血药低剂量组、高剂量组灌胃不同剂量补肾生血药,其余组灌胃蒸馏水。第4~6天造模,除空白对照组腹腔注射生理盐水外,其余组均腹腔注射环磷酰胺。造模同时进行干预,阳性对照组皮下注射重组人粒细胞刺激因子,其余组给药同预防用药,分别持续到造模后第10天、第12天、第14天。收集小鼠骨髓细胞,流式细胞仪检测10 d、12 d、14 d骨髓细胞周期,12 d、14 d骨髓细胞CD34+率;造血祖细胞培养法观察10 d、14 d红细胞集落形成单位(CFU-E)、爆式红细胞集落形成单位(BFU-E)、粒细胞-巨噬细胞集落形成单位(CFU-GM)数量。结果细胞周期分析,10 d时造模各组明显阻滞在G₀/G₁期、S期、G₂/M期(P<0.01),补肾生血药低剂量组则明显阻滞在G₀/G₁期、G₂/M期(P<0.05,P<0.01);12 d时细胞周期阻滞解除,各组间比较差异无统计学意义(P>0.05);14 d时补肾生血药高剂量组明显由G₀/G₁期进入到G₂/M期(P<0.05)。CD34+率,12 d时各组间比较差异无统计学意义(P>0.05),14 d时补肾生血药高剂量组明显升高(P<0.01)。集落计数,10 d时补肾生血药高剂量组BFU-E数量明显增加(P<0.01);14 d时补肾生血药高剂量组CFU-E、BFU-E数量明显增加(P<0.01),补肾生血药低剂量组CFU-E、BFU-E、CFU-GM数量明显增加(P<0.001,P<0.01)。结论对于环磷酰胺所致骨髓抑制小鼠,应用补肾生血药干预14 d时能发挥较明显的促骨髓细胞增殖作用,表现为促进骨髓细胞进入增殖周期,刺激红系、粒-巨系造血祖细胞增殖,提升造血干/祖细胞比例。     

昆布多糖对大鼠骨髓巨噬细胞生物活性的影响

目的 研究昆布多糖对大鼠骨髓巨噬细胞生物活性的影响.方法 制备并体外培养大鼠骨髓造血干/祖细胞、巨噬细胞;制备昆布多糖作用后的骨髓巨噬细胞条件培养液,测定培养液中造血生长因子促红细胞生成素(EPO)、粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白细胞介素-3(IL-3)表达及活性;测定昆布多糖条件培养液作用后造血祖细胞的集落产率.结果 经昆布多糖诱导的骨髓巨噬细胞培养上清液可显著提高骨髓造血祖细胞的集落产率;经昆布多糖诱导后,骨髓巨噬细胞的EPO、GM-CSF和IL-3的表达增高.结论 昆布多糖可刺激骨髓巨噬细胞造血因子表达增高,从而促进髓系多向性造血祖细胞(CFU-Mix)、红系祖细胞(CFU-E)、粒一单系造血祖细胞(CFU-GM)的增殖分化.     

三尖杉酯碱对红系造血机能的影响

用微量甲基纤维素培养方法检测三尖杉酯碱(Harringtonine,Ha)促进小鼠骨髓红系祖细胞CFU-E和BFU-E增殖的作用。结果表明,适当剂量的Ha能增强骨髓红系造血机能;如剂量过大反而起抑制作用。双盲实验也表明Ha有促进骨髓CFU-E和BFU-E增殖的作用。     

参芪扶正注射液对化疗后小鼠造血功能影响的实验研究

目的 探讨参芪扶正注射液对化疗后小鼠造血功能的影响.方法 用5-氟尿嘧啶（5-FU）225 mg/kg腹腔注射复制骨髓抑制动物模型,治疗组给予参芪扶正注射液5 ml/kg,对照组给予同剂量生理盐水.治疗1周后,做血细胞计数、各系造血祖细胞集落（CFU-GM、CFU-E、CFU-MK）培养和骨髓病理检查.结果 参芪扶正注射液能升高外周血细胞计数：治疗组小鼠外周血的红细胞、白细胞和血小板计数均高于对照组（P〈0.05）.促进造血祖细胞增殖：治疗组小鼠的CFU-GM、CFU-E、CFU-MK集落数均大于对照组（P〈0.05）.改善骨髓抑制：骨髓病理检查对照组出现大片空白区,造血细胞稀少,而治疗组造血组织结构较完整,造血细胞量丰富.结论 化疗后小鼠在骨髓抑制、造血功能低下时,参芪扶正注射液能通过促进骨髓各系造血祖细胞的增殖,改善骨髓造血组织增生,从而促进血细胞的生成.     

重组人类促红细胞生成素对尿毒症透析患者骨髓红系集落形成单位的影响(附11例病例分析)

分析11例重组人类促红细胞生成素对尿毒症透析患者骨髓有核红细胞和红系集落形成单位(CFU-E)的影响。结果表明,用药前CFU-E比正常对照明显下降(p<0.01),用药40～65d后CFU-E较用药前明显升高(p<0.05),同时骨髓有核红细胞数较用药前亦有所增多。认为重组人类促红细胞生成素能升高尿毒症透析者骨髓CFU-E水平,促进其增殖分化,从而改善肾性贫血。     

扶正养营汤对免疫介导再生障碍性贫血小鼠的治疗作用

目的：观察扶正养营汤对免疫介导再生障碍性贫血（再障）小鼠骨髓增殖及外周血IL-2水平的影响。方法：采用完全随机数字表法将制作的免疫介导再障小鼠(BALB/c)模型40只分为4组,另用10只同批正常小鼠设为正常对照组(E组)。采用盲法分别胃饲生理盐水(A组及E组)、扶正养营汤(B组)、环孢霉素A (C组)、扶正养营汤+环孢霉素A (D组)共10d。检测各组小鼠外周血象、骨髓有核细胞计数、测定各组骨髓造血组织容量及外周血IL-2水平。结果：A组小鼠外周血象、骨髓有核细胞数、造血组织容量显著低于E组(P<0.05);B,C,D组较A组增加(P<0.05),尤以D组最为明显(P<0.05);而B组与C组比较差异无统计学意义(P>0.05)。A组小鼠外周血IL-2水平明显高于E组(P<0.05);B,C,D组低于A组(P<0.05);D组低于B组及C组(P<0.05);B组与C组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论：扶正养营汤具有促进免疫介导再障小鼠骨髓增殖,降低其外周血IL-2水平的作用。     

螺旋藻多糖对骨髓造血干/祖细胞增殖能力影响的实验研究

目的 了解丁钝螺旋藻多糖（SPP）对造血干／祖细胞的刺激活性，以期发现恢复放射损伤造血功能的新药。方法 用内外源性脾集落和体外琼脂培养法。观察放射损伤小鼠注射SPP后CFU－S、CFU－GM及骨髓有核细胞数的改变。结果 给药组小鼠CFU－S、CFU－GM及骨髓有核细胞数均有显著的升高，与对照组比较有非常显著的差异（P＜0.001)。结论 SPP对造血干／祖细胞有显著的促增殖和分化的作用。     

IL-33转基因小鼠骨髓造血干/祖细胞向髓系细胞分化的能力增强

目的利用IL-33转基因小鼠研究IL-33对造血干/祖细胞的增殖和分化影响。方法利用流式细胞仪分析IL-33转基因小鼠及同窝野生对照小鼠的外周血、脾脏、骨髓细胞的免疫表型及造血干细胞分化不同阶段细胞的数量变化;利用体外成克隆实验和细胞周期分析研究IL-33对于造血干细胞增殖能力的影响。结果与野生型小鼠相比,IL-33转基因小鼠B细胞和T细胞在外周血中都明显降低,粒细胞在外周血和骨髓中都有明显增加;IL-33转基因小鼠的骨髓造血干细胞和多能祖细胞数量减少,共同淋系祖细胞数量减少,共同髓系祖细胞和粒单系祖细胞数量增加;IL-33转基因小鼠的造血干细胞处于S-G2-M的细胞增多;体外单克隆实验发现IL-33转基因小鼠造血干细胞形成的集落数增加。结论 IL-33转基因小鼠造血干细胞增殖能力增强,更易向髓系细胞分化。     

rhGM-CSF/IL-3融合蛋白对小鼠造血功能的影响

目的:观察重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子/白细胞介素-3(rhGM-CSF/IL-3)融合蛋白对小鼠造血功能的影响.方法:利用环磷酰胺(CTX)抑制骨髓及辐照致骨髓损伤造模,检测rhGM-CSF/IL-3对CTX所致骨髓抑制小鼠外周血WBC、RBC、血小板、脾重、骨髓有核细胞(BMC)的影响及对脾集落形成单位(CFU-S)的影响和对小鼠生存的保护作用.结果:rhGM-CSF/IL-3对CTX骨髓抑制小鼠外周血WBC、R13C、血小板及BMC均有明显提升作用(P＜0.01),并显著提高生存率(P＜0.05)和CFU-S数(P＜0.01),而对脾重影响差异无显著性(P＞0.05).结论:rhGM-CSF/IL-3有减轻骨髓损伤和促进造血干/祖细胞增殖和分化的作用.     

当归补血汤及其拆方对骨髓抑制模型小鼠Wnt蛋白及其受体的影响*

目的探讨当归补血汤及其拆方对骨髓抑制模型小鼠Wnt蛋白及其受体的影响。方法应用环磷酰胺所致的骨髓抑制小 鼠模型,全自动血细胞分析仪检测外周血白细胞、红细胞、血小板数,ELISA法检测骨髓Wnt3a蛋白,qPCR法检测骨髓造血 干细胞Frizzled 2 mRNA表达水平。结果与正常组比较,模型组外周血白细胞、红细胞、血小板计数明显降低（P<0.05或 P<0.01）,骨髓Wnt3a蛋白、骨髓造血干细胞Frizzled 2 mRNA表达水平显著降低（P<0.01）;与模型组比较,当归补血汤 组外周血红细胞、血小板数明显升高（P<0.05或P<0.01）,骨髓Wnt3a蛋白、骨髓造血干细胞Frizzled 2 mRNA表达水平明 显提高（P<0.05或P<0.01）;黄芪组、当归组上述指标与模型组比较,差异均无显著性意义（P>0.05）。结论① 当归补血 汤具有提高骨髓Wnt3a蛋白及骨髓造血干细胞Frizzled 2 mRNA表达水平的作用;② 当归补血汤及其拆方对Wnt3a及其受体 Frizzled 2 mRNA的调控作用,体现了中医气血相生理论。     

复康片对卡马西平抑制骨髓造血功能的预防作用

目的观察复康片对卡马西平抑制大鼠骨髓的预防作用.方法给大鼠服用卡马西平90 d,预防组分别给予复康片低剂量与高剂量,用超清晰度骨髓细胞分析系统及光镜观察大鼠髓骨髓粒细胞系各期比值、有核细胞增生度,骨髓病理组织学,并观察比较不同剂量对大鼠骨髓抑制的作用.结果复康片低剂量组大鼠骨髓有核细胞增生程度明显恢复(P＜0.05),高剂量组增生程度明显活跃(P＜0.01);高低剂量组成熟粒细胞(主要是分叶核粒细胞)比例均明显降低(P＜0.05);高剂量组还可明显降低淋巴细胞比值,骨髓粒细胞系各期比值趋于正常(P＜0.05).结论复康片可预防或拮抗卡马西平对大鼠骨髓造血功能的抑制.     

三羟异黄酮对小鼠辐射损伤后造血功能的影响

目的 探讨三羟异黄酮(genistein, GEN)对辐射损伤造血功能的影响.方法 6.0 Gy γ射线一次全身照射BALB/c雄性小鼠复制出造血损伤模型.照射前24 h给予GEN灌胃(160 mg/kg体质量),分别观察照射后1、3、7、14、21、30 d不同时相点小鼠血清对粒单系集落形成单位(colony-forming unit-granulocyte/macrophage, CFU-GM)和红系集落形成单位(colony forming unit-erythroid, CFU-E)的支持或抑制活性.结果 辐射前24 h给予GEN,辐射后该组小鼠血清造血刺激活性显著增加,使正常小鼠骨髓有核细胞CFU-GM、CFU-E形成数量明显增多,而且对CFU-GM的刺激活性较CFU-E强.同时,该组小鼠照后血清对CFU-GM、CFU-E的抑制活性明显降低,但对CFU-E和CFU-GM的抑制活性差异不明显.结论 提高辐射损伤后小鼠血清刺激活性可能是GEN防护放射性造血损伤、促进受损造血系统重建的分子机制之一.     

生血丸对骨髓抑制小鼠造血功能的调控作用

目的 观察生血丸对⁶⁰Co 合并环磷酰胺致骨髓抑制小鼠造血功能的影响,探讨该方促进全血细胞上调的作用机制。方法 通过全自动血细胞分析仪检测外周血象;流式细胞术检测骨髓细胞细胞周期;ELISA (酶联免疫吸附法) 检测骨髓基质中红细胞生成素 (EPO)、血小板生成素 (TPO)、粒细胞生长因子 (G-CSF) 的量。结果 生血丸能明显改善骨髓抑制小鼠外周血中白细胞 (WBC)、红细胞 (RBC)、血红蛋白 (HB)、血小板计数 (PLT)、骨髓有核细胞 (BMC) 的量 (P＜0.05),生血丸组升红细胞疗效更为突出 (P＜0.05);生血丸组能解除 G₀/G₁ 期细胞阻滞,促进 G₀/G₁ 期细胞进入增殖周期;生血丸能有效平衡微环境中 TPO 的量;能改善 EPO 的表达;对骨髓抑制小鼠骨髓细胞上清中 G-CSF 有明显的正调控作用。结论 生血丸能提高骨髓抑制小鼠外周血血细胞和骨髓有核细胞计数;可促进骨髓抑制小鼠骨髓细胞从 G₀/G₁ 期进入增殖周期;并能有效调节骨髓微环境中 TPO、EPO 和 G-CSF 的表达,从而促进骨髓抑制小鼠的造血功能。     

rhGM-CSF／IL-3融合蛋白对小鼠造血功能的影响

目的：观察重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子／白细胞介素-3(rhGM-CSF／IL-3)融合蛋白对小鼠造血功能的影响。方法：利用环磷酰胺(CTX)抑制骨髓及辐照致骨髓损伤造模，检测rhGM-CSF／IL-3对CTX所致骨髓抑制小鼠外周血WBC、RBC、血小板、脾重、骨髓有核细胞(BMC)的影响及对脾集落形成单位(CFU-S)的影响和对小鼠生存的保护作用。结果：rhGM-CSF／IL-3对CTX骨髓抑制小鼠外周血WBC、RBC、血小板及BMC均有明显提升作用(P＜0．01)，并显著提高生存率(P＜O．05)和CFU-S数(P＜O．01)，而对脾重影响差异无显著性(P＞O．05)。结论：rhGM-CSF／IL-3有减轻骨髓损伤和促进造血干／祖细胞增殖和分化的作用。