跨膜丝氨酸蛋白酶4在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的 探索跨膜丝氨酸蛋白酶4(TMPRSS 4)在胃癌组织中的表达情况及与胃癌病理学特征的关系,以及明确TMPRSS 4表达与胃癌临床预后的关系.方法 使用RT-qPCR技术和免疫组化检测TMPRSS 4在115例胃癌组织样本(胃癌及癌旁组织)中的表达情况;分析TMPRSS 4表达水平与胃癌病理学特征和预后的关系.结果 RT-qPCR结果提示胃癌组织中的TMPRSS 4 mRNA水平显著高于其在匹配癌旁组织中的表达水平,差异有统计学意义(P＜0.05).免疫组化结果显示TMPRSS 4在胃癌组织中的表达比在良性组织高(56.5％vs19.5％,P＜0.001).TMPRSS 4的过度表达与胃肿瘤的分化程度、淋巴道转移及TNM分期肿瘤显著相关(P＜0.01).TMPRSS 4是影响胃癌总体生存率及无病生存率的独立因素.结论 TMPRSS 4高表达与胃癌患者相关临床病理特征及患者的预后密切相关,TMPRSS 4有可能作为一个常规的胃癌的生物标志物,在一定程度上预测肿瘤的侵袭转移.     

IFITM3基因表达对胃癌细胞侵袭和转移的影响

目的探讨胃癌组织IFITM3基因表达对胃癌细胞侵袭和转移能力的影响。方法采用实时荧光定量PCR、免疫组织化学、Western blot等方法检测120例胃癌患者癌及癌旁组织IFITM3基因表达情况;运用Transwell侵袭实验和划痕实验检测转染shRNA-IFITM3质粒对胃癌细胞株(AGS和MKN45细胞)侵袭和转移能力的影响。同时观察裸鼠体内接种低表达的IFITM3胃癌AGS细胞后发生肺转移情况。结果胃癌组织IFITM3mRNA和蛋白表达水平均显著高于对应癌旁组织(P<0.05);AGS和MKN45细胞中IFITM3mRNA呈高表达。转染shRNA-IFITM3质粒后AGS和MKN45细胞侵袭能力均明显降低(P<0.05),AGS细胞迁移能力显著下降(P<0.05)。裸鼠体内接种低表达的IFITM3胃癌AGS细胞后肺转移率显著下降(P<0.05)。结论 IFITM3基因在胃癌组织呈高表达,IFITM3基因在胃癌的侵袭和转移过程中发挥重要作用。 更多还原     

FAT4、CUL4、YAP 在胃癌组织中的 表达及其临床意义

目的 探讨胃癌细胞侵袭过程中FAT4、CUL4、YAP 在调控Hippo 通路的作用及机制。方法 免 疫组织化学法检测胃癌组织及正常胃组织中FAT4、CUL4 及YAP 的表达情况,分析其表达水平与胃癌患者临 床病理特征的关系;Western blot 法测定胃癌组织及正常胃组织中FAT4、CUL4 及YAP 蛋白表达情况。结果 胃 癌细胞中FAT4、CUL4 和YAP 在性别、病理类型阳性表达率比较,差异无统计学意义（P >0.05）,在胃癌的 分化程度及淋巴结转移之间比较,差异有统计学意义（P <0.05）,且淋巴结无转移、分化程度较高的FAT4、 CUL4 和YAP 阳性表达率高;免疫组织化学发现胃癌组织中CUL4 和YAP 表达量较正常胃组织增多,胃癌 组织中FAT4 表达量较正常胃组织减少;胃癌组织中CUL4 及YAP 蛋白表达量高于正常胃组织,差异有统 计学意义（P <0.05）;胃癌组织中FAT4 蛋白表达量低于正常胃组织,差异有统计学意义（P <0.05）。结论 FAT4 通过调控Hippo-YAP 信号通路抑制胃癌细胞侵袭过程,CUL4 通过调控Hippo-YAP 信号通路促进胃 癌细胞侵袭过程。     

miR-27在胃癌中的表达及其作用研究

目的:探讨胃癌组织中miR-27的表达情况及miR-27对胃癌细胞系MKN-45转移侵袭能力的影响,预测并验证miR-27的靶向基因。方法:选取16例胃癌组织及其对应癌旁正常胃黏膜组织,通过RT-PCR检测miR-27在胃癌中的表达情况,并分亚组比较有淋巴结转移组和无淋巴结转移组miR-27表达水平的差异;转染miR-27类似物(miR-27mimics)或miR-27拮抗剂(miR-27inhibits)及其NC对照后,用Transwell assay检测胃癌细胞系MKN-45转移侵袭能力的变化;用生物信息学软件预测miR-27的靶基因,并用RT-PCR及Western-blot验证miR-27对其靶基因表达和翻译的调节作用。结果:miR-27在胃癌组织中表达上调,有淋巴结转移组比无淋巴结转移组miR-27表达水平更高;转染miR-27 mimics后,胃癌细胞系MKN-45的转移侵袭能力增强,转染miR-27inhibits后,胃癌细胞系MKN-45的转移侵袭能力减弱;PicTar、Targetscan和miRbase三个生物信息学软件同时预测出ZBTB10为miR-27的靶基因,RT-PCR检测显示:miR-27的表达对胃癌细胞中ZBTB10 mRNA的含量无影响,Western-blot检测显示:miR-27抑制胃癌细胞中ZBTB10蛋白的含量。结论:miR-27在胃癌中表达上调,促进胃癌细胞的转移侵袭,其机制可能与其抑制ZBTB10蛋白的翻译有关。     

血小板增高对胃癌细胞增殖和转移的影响及临床意义

目的 探讨血小板增高在胃癌组织中表达的临床意义及其对胃癌细胞增殖和转移能力的影响.方法 收集山东大学附属济南市中心医院胃癌组织及其配对癌旁组织各60例,通过免疫荧光技术检测组织中血小板的表达,分别以不同数量的血小板与MKN-45细胞共培养后,采用 CCK-8 检测胃癌细胞的增殖情况,Transwell 实验观察胃癌细胞侵袭和迁移能力的变化.Western blot和ELISA检测血小板与细胞共培养后MKN-45细胞中的蛋白表达.结果 血小板在胃癌组织中的表达高于癌旁组织.血小板的表达与胃癌的浸润深度、分化程度及淋巴转移有密切的关系.CCK-8 和 Transwell结果表明,血小板显著加强MKN-45细胞的增殖能力和转移能力,且其均呈浓度依赖性.经共培养后,MKN-45细胞中E-cadherin的蛋白表达水平降低,N-cadherin和 VEGFA的蛋白表达水平增加.结论 血小板增高与胃癌的发生、发展和转移密切相关,血小板计数可作为恶性肿瘤的预后指标.     

白介素32在胃癌细胞中的表达及意义

目的观察白介素32(IL-32)在胃癌细胞株中的表达情况,探讨其在胃癌发生、发展中的意义。方法采用逆转录PCR、real-time PCR及Western blot法分别从基因和蛋白水平上检测IL-32在正常胃上皮细胞GES-1以及胃癌细胞株MKN-45、KATO中的表达情况。结果逆转录PCR及real-time PCR结果均显示胃癌细胞IL-32 mRNA表达水平明显高于正常胃上皮细胞,逆转录PCR灰度比值(目的 /内参)为:GES-1(0.34±0.09)、MKN-45(0.79±0.11)、KATO(0.90±0.17),差异有统计学意义(P<0.05)。real-time PCR Ct值显示:MKN-45的IL-32基因表达量是GES-1的(5.34±1.09)倍,KATO是GES-1的(4.07±1.69)倍,差异均有统计学意义(P<0.05)。Western blot结果显示IL-32在蛋白表达水平的结果与前一致,灰度比值(目的 /内参)为:GES-1(0.30±0.10)、MKN-45(0.92±0.32)、KATO(0.86±0.15),差异有统计学意义(P<0.05)。结论IL-32在胃癌细胞株中呈高表达,推测其可能在胃癌的发生、发展中起一定作用。     

抑制GM130表达对胃癌细胞增殖、侵袭及迁移能力的影响

目的 分析GM130在不同分化人胃癌细胞系的差异表达,利用小干扰RNA技术来沉默GM130基因,研究其对胃癌细胞生物学行为的影响.方法 体外培养3株不同分化程度胃癌细胞系(高分化MKN-28、中分化SGC-7901、低分化MKN-45),Western blot和RT-PCR筛选出高表达的GM130细胞株MKN-45、SGC-7901,设计并化学合成、转染、筛选出针对GM130的小干扰RNA片段.通过MTF、Transwell、Matrigel侵袭实验,观测下调GM130后对胃癌细胞株的生物学行为影响,Western blot检测细胞中MMP-2、MMP-9蛋白的变化.结果 Western blot和RT-PCR检测结果显示,在MKN-45、SGC-7901细胞中GM130蛋白和mRNA水平呈现高表达水平.Westem blot和qRT-PCR结果显示在低分化胃癌MKN-45细胞中,GM130-siRNA-519转染组GM130基因的表达水平显著抑制(P＜0.05).与对照组相比,抑制转染组细胞的增殖、迁移能力明显下降,穿膜细胞数明显减少,MMP-2、MMP-9的蛋白表达水平显著降低(P＜0.05).结论 抑制GM130基因的表达下调可显著降低胃癌细胞的增殖和体外侵袭转移能力.     

KISS-1和基质金属蛋白酶-9蛋白在胃癌中的表达及意义

目的探讨肿瘤转移抑制基因KISS-1及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)与胃癌侵袭、转移的关系,为研究胃癌的转移机制及临床治疗提供理论基础。方法采用免疫组织化学法检测36例胃癌组织及36例正常胃黏膜组织中KISS-1及MMP-9蛋白的表达情况,分析其与胃癌患者各临床病理指标的关系及二者表达的相关性;采用Western blot法检测不同侵袭能力胃癌细胞株BGC-823(高侵袭)和MKN-28(低侵袭)中KISS-1和MMP-9蛋白的表达。结果KISS-1蛋白在胃癌组织中的阳性表达率显著低于正常胃黏膜组织(P<0.05),并且其低表达与淋巴结转移密切相关(P<0.05);MMP-9蛋白在胃癌组织中的阳性表达率显著高于正常胃黏膜组织(P<0.05),并且其高表达与胃癌的浸润深度和淋巴结转移均密切相关(P<0.05);KISS-1与MMP-9蛋白的表达呈负相关(P<0.05)。KISS-1蛋白在高侵袭胃癌细胞株中的表达低于低侵袭细胞株,但差异无统计学意义(P>0.05);MMP-9蛋白在高侵袭胃癌细胞株中的表达高于低侵袭细胞株,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 KISS-1蛋白的低表达和MMP-9蛋白的高表达可能与胃癌的浸润、转移有关,二者有望成为判定胃癌侵袭和转移能力的指标。     

尿苷三磷酸通过PTEN/Vimentin抑制胃癌细胞的侵袭

目的 研究尿苷三磷酸(uridine triphosphate,UTP)对胃癌细胞迁移和侵袭的影响及其分子机制.方法 采用细胞划痕实验检测UTP对胃癌细胞MKN-45和SGC-7901迁移能力的影响;Transwell检测UTP对正常人胃黏膜细胞GES-1和胃癌细胞MKN-45、SGC-7901侵袭能力的影响;Western blot检测UTP对胃癌细胞MKN-45和SGC-7901 PTEN磷酸化水平及Vimentin表达的影响.结果 细胞划痕实验表明UTP组抑制胃癌细胞MKN-45和SGC-7901迁移(P＜0.05).Transwell实验结果显示UTP组抑制胃癌细胞MKN-45和SGC-7901侵袭(P＜0.01),但对正常人胃黏膜细胞GES-1无影响(P＞0.05).Western blot实验证实UTP组可增强胃癌细胞MKN-45和SGC-7901 PTEN磷酸化水平,同时下调Vimentin的表达.结论 UTP抑制胃癌细胞的迁移和侵袭,可能是与其上调PTEN磷酸化水平,抑制Vimentin表达有关.     

miR-124抑制胃癌MKN-45细胞的侵袭与转移

目的探讨miR-124对胃癌细胞MKN-45侵袭能力的影响。方法使用脂质体将miR-124mimics转染MKN-45细胞．以无关序列（scramblemimics）作为阴性对照。采用细胞划痕实验观察miR-124过表达对胃癌细胞MKN-45侵袭能力的影响。结果细胞划痕实验显示,转染miR-124mimics24h、48h后伤IZl愈合率分别为（0．313±0．005）、（0．369±0．031）．与各自对照组（0．413±0．035）、（0．852±0.024）比较能明显减缓MKN-45细胞划痕伤口的愈合,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论miR-124能抑制胃癌细胞侵袭能力,它可能在胃癌的发生和进展中发挥重要作用。     

环氧化酶-2和基质金属蛋白酶-7在老年胃癌组织中表达及预后意义

目的 :研究环氧化酶 2 (COX 2 )和基质金属蛋白酶 7(MMP 7)在老年胃癌中表达及预后意义。方法 :采用免疫组化法检测了 87例老年胃癌COX 2、MMP 7表达情况 ,分析它们与胃癌临床病理特征关系及对预后的影响。结果 :COX 2、MMP 7在胃癌的表达明显高于慢性萎缩性胃炎 ,进展期癌的表达又高于早癌 (P <0 .0 1)。COX 2、MMP 7表达呈正相关 (P <0 .0 5 )。COX 2、MMP 7表达与肿瘤大小、淋巴结转移、血管癌栓、TNM分期呈正相关 (P <0 .0 1) ,COX 2、MMP 7表达阳性组的整体生存率明显低于COX 2、MMP 7阴性组 (P <0 .0 1) ,二者共同表达预后更差。多因素分析表明 :淋巴结转移、TNM分期、MMP 7阳性表达是老年胃癌预后独立因素。结论 :COX 2、MMP 7表达呈正相关 ,与胃癌生长、浸润转移关系密切 ,可作为评估老年胃癌预后的重要指标     

微管相关蛋白Tau mRNA在胃癌中的表达及临床意义

目的:探讨Tau mRNA在胃癌中的表达及与胃癌临床病理特征的关系。方法:采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测10例正常胃组织与60例胃癌组织Tau mRNA的表达。结果:胃癌组织TaumRNA的表达高于明显正常胃组织(P0.05)。低分化胃癌Tau mRNA的表达明显高于高中分化胃癌,有淋巴结转移者Tau mRNA的表达明显高于无淋巴结转移者,TNMⅢ+Ⅳ期者Tau mRNA的表达明显高于Ⅰ+Ⅱ期者(P0.05)。结论:胃癌Tau mRNA的高表达可能在胃癌的分化、转移及侵袭过程中具有重要作用。     

EGFL6在胃癌中的表达及其与预后的关系

目的：探讨表皮生长因子样蛋白（EGFL）6在胃癌中的表达及其与临床病理因素及预后的关系。方法： 收集2016年3月至2018年2月间温州医科大学附属第二医院育英儿童医院接受手术切除的原发性胃癌组织及癌旁组织各80例，以免疫组织化学染色法判定组织中EGFL6的表达，对染色结果与相关临床病理因素及预后进行统计学分析。结果：EGFL6的表达与胃癌肿瘤直径、浸润深度、淋巴结转移以及TNM分期具有相关性（P＜0.05）；EGFL6的表达、患者年龄、肿瘤直径、细胞分化、浸润深度、淋巴结转移、TNM分期均与胃癌患者的预后相关（P＜0.05）。结论：EGFL6的表达与胃癌患者临床病理因素存在相关性，提示EGFL6在胃癌的发生发展中起重要作用。     

胃癌患者MMP-2、CEA的表达及其临床意义

目的: 探讨胃癌患者基质金属蛋白酶2(MMP-2)、癌胚抗原(CEA)的表达及其临床意义。方法: 采用免疫组化S-P法测定胃癌患者活检或手术标本中的MMP-2表达,采用免疫放射分析法(IRMA)检测空腹血清CEA水平,并分析其与分化程度、TNM分期、淋巴结、肝、胰转移和腹膜、脉管受侵犯的关系。结果: CEA血清水平与淋巴结、肝脏、腹腔转移均有一定关系(P<0.01~P<0.005),而与胃癌分化程度、胰腺转移、脉管转移、临床分期均无关系(P>0.05)。MMP-2表达强度与淋巴结、肝脏、胰腺、脉管和腹腔转移与否差异均有统计学意义(P<0.005),与胃癌分化程度、临床分期均无明显关系(P>0.05)。结论: MMP-2、CEA在胃癌的发生和侵袭转移中可能起着重要作用,联合检测MMP-2、CEA的表达有望成为判断胃癌病变发展、预测肿瘤转移潜能的客观指标。     

ALDH1、CXCR4、E-cadherin在胃癌组织中的表达及与淋巴结转移的关系

目的探讨胃癌组织中ALDH1、CXCR4、E-cadherin 蛋白的表达及与淋巴结转移的关系。方法回顾性分析127例胃癌患 者临床病理资料及随访结果。免疫组化Elivision法检测胃癌标本及60例对照组织ALDH1、CXCR4、E-cadherin蛋白的表达情 况,进行统计分析,研究其对淋巴结转移的影响。结果ALDH1、CXCR4、E-cadherin 在胃癌组中的阳性率分别为57.5%（73/ 127）、63.8%（81/127）、36.2%（46/127）,与对照组之间差异均有显著性（P<0.05）。随着患者临床分期越晚及淋巴结转移的出 现,ALDH1的阳性表达率升高（P<0.05）。CXCR4蛋白的表达与肿瘤的浸润深度、分化程度、临床分期和淋巴结转移相关（P< 0.05）。E-cadherin蛋白的表达与胃癌的浸润深度、分化程度及淋巴结转移密切相关（P<0.05）。3者在淋巴结转移阳性组表达率 均高于阴性组（P<0.05）;E-cadherin蛋白的表达与ALDH1、CXCR4蛋白的表达呈负相关关系,ALDH1与CXCR4蛋白的表达呈 正相关关系（P均<0.001）。生存分析表明,ALDH1、CXCR4阳性表达的患者生存率明显低于阴性者;E-cadherin蛋白表达水平 降低患者生存率明显下降（P<0.05）。多因素分析表明ALDH1、CXCR4和E-cadherin 的表达是影响胃癌患者预后的独立因素。 结论ALDH1,CXCR4表达的升高及E-cadherin表达的降低与胃癌的侵袭、转移和预后等因素相关,其联合表达与淋巴结转移 呈正相关,检测以上指标为预测胃癌的转移及预后评估提供依据。     

胃癌组织中Twist、STAT3和E-cad的表达及其临床意义

目的:观察扭曲蛋白(Twist)、信号转导和转录激活因子3(STAT3)、上皮钙黏素(E-cad)在胃癌组织及癌旁组织中的表达,探讨三者与胃癌临床病理参数之间的相关性及三者的表达对判断胃癌预后的意义。方法:采用免疫组织化学方法链霉亲和素-生物素复合物(SABC)法检测手术切除胃癌组织及癌旁组织标本中的Twist、STAT3、E-cad表达,分析其与胃癌患者年龄、性别、肿瘤的组织学类型、转移及TNM分期等参数的关系。结果:在胃癌组织中Twist、STAT3、E-cad的阳性率分别为57.3%、64.7%、12.0%,癌旁组织中的阳性率分别为17.3%、10.8%和68.0%,差异均有统计学意义(P0.01)。Twist的表达在肿瘤远处转移、淋巴结转移、TNM分期和浸润深度间差异均有统计学意义(P0.05~P0.01);STAT3的表达在肿瘤淋巴结转移、浸润深度及TNM分期间差异均有统计学意义(P0.05~P0.01)。Twist、STAT3表达与E-cad表达均呈明显负相关关系(P0.01)。结论:胃癌组织中Twist、SATA3表达与肿瘤的生物学特征均有一定关系,SATA3的激活可能会增强Twist、E-cad的表达,检测Twist、STAT3、E-cad对预测肿瘤侵袭转移、判断预后具有一定价值。     

老年胃癌组织血管内皮生长因子的表达和微血管密度与预后的关系研究

目的探讨老年胃癌组织血管内皮生长因子(VEGF)的表达和微血管密度(MVD)与预后的关系。方法选择68例老年胃癌患者作为研究对象,应用免疫组织化学方法检测胃癌组织及癌旁组织VEGF及MVD,对VEGF、MVD与患者预后的关系进行统计学分析。结果胃癌组织与癌旁组织VEGF阳性率分别为60.3%及8.8%,胃癌组织高于癌旁组织(P<0.01);VEGF阳性及MVD升高患者3 a生存率及5 a生存率低于VEGF阴性及MVD正常者(P<0.01);VEGF及MVD与患者临床分期、淋巴结转移及远行转移有关(P<0.01)。结论 VEGF表达与血管生成和肿瘤进展密切相关,可作为预测老年胃癌患者预后的重要因素。     

VEGF-C和VEGF-D在胃癌组织中的表达 与淋巴结转移的关系

目的：探讨胃癌患者血管内皮生长因子C和D(vascular endothelial growth factor-C and-D, VEGF-C and VEGF -D)在胃癌组织中的表达及其与肿瘤淋巴结转移的关系。方法：应用免疫组织化学SABC法及Real-time PCR法检测32例胃癌组织和32例正常胃组织中VEGF-C,VEGF-D蛋白及其mRNA的表达。 结果：胃癌组织VEGF-C和VEGF-D表达明显高于正常胃组织（P<0.01）, 其中淋巴结转移组VEGF-C,VEGF-D的表达与淋巴结未转移组间差异有统计学意义（P<0.05）。VEGF-C和VEGF-D在胃癌组织中的表达与淋巴结转移有关(P<0.01)。VEGF-C和VEGF-D的表达在高分化癌、中分化癌和低分化癌中的差别有统计学意义(P<0.05)。VEGF-C和VEGF-D 在胃癌细胞中的表达与患者年龄、 性别和淋巴结远处转移无关（P>0.05）。结论：胃癌细胞非摄入性高表达的VEGF-C和VEGF-D与淋巴结转移密切相关,可作为评估胃癌患者预后的重?慰贾副辍?     

变异型CD44在胃腺癌中的表达及其临床意义

目的探讨胃腺癌组织中变异型ＣＤ４４（ＣＤ４４ｖ）的表达及其与淋巴结转移和预后的关系。②方法应用链霉菌抗生物素蛋白－过氧化酶（Ｓ－Ｐ）免疫组织化学技术,对１０５例胃腺癌ＣＤ４４ｖ６的表达进行了检测。③结果ＣＤ４４ｖ６蛋白的阳性表达率为４８．６％,ＣＤ４４ｖ６在胃腺癌的表达与肿瘤分化、浸润深度、临床分期和预后均有关系（χ２＝４．４１～８．９７,Ｐ均＜０．０５）,与淋巴结转移关系密切（χ２＝９．２３,Ｐ＜０．０１）。④结论ＣＤ４４ｖ６表达是判断胃腺癌淋巴结转移及病人预后有价值的指标之一。