脾窦岸细胞血管瘤1例并文献复习

脾窦岸细胞瘤是1991年Falk首先提出的一种仅发生于脾脏的良性肿瘤Ⅲ。文献报道较少，国内迄今报道2例，国外已经报道44例，病人的发病年龄1～74岁，平均50岁，男女发病率无明显差异。笔者于2002年10月遇到1例，现报道并复习文献如下。     

转染maspin cDNA在胃癌细胞中的表达及其对uPA和uPAR表达的影响

目的 研究转染maspin cDNA在胃癌细胞中的表达及其对uPA和uPAR表达的影响,探讨maspin基因抑制胃癌浸润转移的机制.方法 构建 maspin/PCR2.1表达载体,转染胃癌细胞株MKN28和SGC7901,用RT-PCR和Western blot检测maspin基因,uPA和uPAR表达的变化.结果 经酶切证实,得到正向插入的真核表达质粒maspin/PCR2.1.成功转染到MKN28和SGC7901细胞中并表达,uPA和uPAR的mRNA和蛋白表达均降低.结论 成功构建了maspin/PCR2.1表达载体,maspin基因可在靶细胞表达,并能抑制uPA和uPAR的表达.     

抑制GM130表达对胃癌细胞增殖、侵袭及迁移能力的影响

目的 分析GM130在不同分化人胃癌细胞系的差异表达,利用小干扰RNA技术来沉默GM130基因,研究其对胃癌细胞生物学行为的影响.方法 体外培养3株不同分化程度胃癌细胞系(高分化MKN-28、中分化SGC-7901、低分化MKN-45),Western blot和RT-PCR筛选出高表达的GM130细胞株MKN-45、SGC-7901,设计并化学合成、转染、筛选出针对GM130的小干扰RNA片段.通过MTF、Transwell、Matrigel侵袭实验,观测下调GM130后对胃癌细胞株的生物学行为影响,Western blot检测细胞中MMP-2、MMP-9蛋白的变化.结果 Western blot和RT-PCR检测结果显示,在MKN-45、SGC-7901细胞中GM130蛋白和mRNA水平呈现高表达水平.Westem blot和qRT-PCR结果显示在低分化胃癌MKN-45细胞中,GM130-siRNA-519转染组GM130基因的表达水平显著抑制(P＜0.05).与对照组相比,抑制转染组细胞的增殖、迁移能力明显下降,穿膜细胞数明显减少,MMP-2、MMP-9的蛋白表达水平显著降低(P＜0.05).结论 抑制GM130基因的表达下调可显著降低胃癌细胞的增殖和体外侵袭转移能力.     

maspin、p27、skp2在大肠肿瘤的表达及意义

目的:探讨大肠癌maspin、p27、skp2的表达, 并探讨其与大肠癌发生、发展的关系．方法:应用免疫组化SP法检测30例结肠管状腺癌、20例结肠腺瘤、20例正常大肠黏膜组织中maspin、p27、skp2的表达情况．结果:30例管状腺癌中maspin、p27、 skp2阳性表达率分别为83．3％(25/30)、 50％(15/30)、36．7％(11/30);20例结肠腺瘤中maspin、p27、skp2的阳性表达率分别为 95％(19/20)、80％(16/20)、10％(2/20),20例正常切缘中maspin、p27、skp2的表达率分别为 95％(19/20)、90％(18/20)、5％(1/20)．maspin 表达与淋巴结转移(P=0．04)和Duke's分期相关(P=0．014);p27、skp2表达与分化程度相关(P=0．014,P=0．001),而与淋巴结转移、 Duke's分期、肿瘤浸润深度无关．maspin表达与p27表达正相关(r=0．447,P<0.05),与skp2 表达无相关性;p27表达与skp2表达无相关性．结论:maspin、p27在大肠癌中表达降低,skp2 在大肠癌中过表达,可作为反映大肠癌分化程度的指标之一．maspin可能在大肠癌的发生、发展(尤其是淋巴结转移)中起作用,有望成为诊断大肠癌及其发生淋巴结转移的分子生物学标记物之一．     

黏液基因2反义寡核苷酸对胃癌细胞黏附功能的影响

目的 观察应用反义脱氧寡核苷酸(ASODN)体外抑制MUC2对人胃癌细胞株SGC7901黏附活性的影响.方法 应用人工合成的MUC2 ASODN经阳离子脂质体包裹后转染入胃癌细胞株SGC7901,采用逆转录.聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫组织化学、玫瑰红法检测与内皮细胞黏附能力、噻唑蓝(MTT)法检测其与基质的黏附能力等方法体外观测对胃癌细胞黏附作用的影响.结果 RT-PCR结果显示SGC7901细胞转染MUC2 ASODN 48 h后,MUC2的mRNA(1.2380±0.1019)和蛋白(1.20±0.00)表达与对照组(1.8130±0.1651,6.50±0.45)比较均明显降低(P《0.01、P《0.05);癌细胞与基质(0.7335±0.0679)及内皮细胞(0.0350±0.0224)的黏附能力与对照组(0.9072±0.1057,0.1262±0.0660)比较都有明显下降(P《0.01);CD44V6表达明显降低(1.50±0.09,对照组5.50±0.25),而E.钙黏蛋白表达增高(5.50±0.23,对照组3.50±0.28)(P《0.05).结论 使用人工合成MUC2 ASODN能有效抑制胃癌细胞株SGC7901的黏附作用,降低肿瘤细胞的侵袭转移潜能.     

青年教师如何搞好病理实验课教学

本文从青年教师自信心的培养、课前准备工作、教学时间的合理安排及学生兴趣的提高等方面进行了探讨，旨在总结经验，提高青年教师的教学水平。     

反义MUC2体外抑制胃癌细胞侵袭活性的研究

目的：探讨应用反义脱氧寡核苷酸（ASODN）体外抑制粘蛋白MUC2对人胃癌细胞株SGC7901侵袭活性的影响。方法：采用人工合成MUC2ASODN经阳离子脂质体包裹后转染入胃癌细胞株SGC7901中,应用免疫组化及Boyden小室体外侵袭实验比较转染前后癌细胞侵袭能力的改变。结果：转染MUC2ASODN后,癌细胞穿膜细胞相对百分率较处理前明显下降;免疫组化S-P法染色提示转染MUC2ASODN后,SGC7901细胞的组织蛋白酶D及基质金属蛋白酶2表达水平明显降低。结论：使用人工合成MUC2ASODN能有效抑制胃癌细胞侵袭能力。     

沉默高尔基体α-甘露糖苷酶Ⅱ表达对人胃癌BGC-823细胞侵袭和迁移能力的影响

目的:探讨RNA干扰沉默高尔基体α-甘露糖苷酶Ⅱ(Golgi a-mannosidase Ⅱ,GM Ⅱ)基因表达对人胃癌BGC-823细胞侵袭和迁移的影响.方法:为沉默GM Ⅱ基因,构建了4个分别针对不同靶位点的短发夹RNA (short hairpin RNA,shRNA)质粒表达载体,同时合成阴性对照质粒表达载体.应用LipofectAMINE2000将质粒转染入BGC-823细胞.分别采用RT-PCR和蛋白质印迹法检测转染后GM Ⅱ mRNA和蛋白表达的变化,选出沉默效果最佳的质粒.应用Transwell侵袭实验和划痕损伤实验分别检测GM Ⅱ基因沉默对人胃癌细胞BGC-823侵袭和迁移能力的影响.结果:质粒载体pGPU6/GFP/Nco-1303沉默GM Ⅱ基因的效果最好.转染pGPU6/GFP/Neo-1303组穿透小室基质的细胞数明显少于空白对照组和转染阴性对照组(P＜0.05).无血清培养液培养24 h后,转染pGPU6/GFP/Neo-1303组细胞的迁移能力较空白对照组和转染阴性对照组明显降低(P＜0.05).结论:RNA干扰技术可沉默人胃癌BGC-823细胞中GMⅡmRNA和蛋白的表达,从而抑制BGC-823细胞的侵袭和迁移能力.GM Ⅱ可能成为胃癌治疗的新靶点之一.     

高尔基体α-甘露糖苷酶Ⅱ、E-cadherin和α-catenin在卵巢上皮肿瘤组织和不同转移能力的卵巢癌细胞中的表达

目的:检测高尔基体α-甘露糖苷酶Ⅱ(Golgiα-mannosidaseⅡ,GMⅡ)、E-cadherin和α-catenin在不同卵巢上皮肿瘤组织和不同转移能力的卵巢癌细胞中的表达。方法:运用免疫组织化学法检测46例卵巢上皮恶性肿瘤(其中有大网膜或淋巴结转移者27例)、15例卵巢上皮交界性肿瘤及12例卵巢上皮良性肿瘤组织中GMⅡ、E-cadherin和α-catenin的表达情况。体外培养卵巢癌A2780、SKOV-3和HO-8910细胞,分别应用RT-PCR、免疫荧光和蛋白质印迹法检测GMⅡ、E-cadherin和α-catenin mRNA和蛋白的表达情况。结果:在卵巢上皮恶性肿瘤中GMⅡ的阳性表达率(87%)和E-cadherin、α-catenin的异常表达率(80%和72%)明显高于卵巢上皮交界性肿瘤(60%、20%和40%)和卵巢上皮良性肿瘤(42%、0%和17%),且有转移患者肿瘤组织中的阳性表达率和异常表达率明显高于无转移者(P<0.05)。A2780、SKOV-3和HO-8910细胞中GMⅡ荧光表达强度逐渐增强,E-cadherin和α-catenin荧光表达强度逐渐减弱。在A2780、SKOV-3、HO-8910中,GMⅡmRNA和蛋白表达水平逐渐增加,而E-cadherin和α-catenin mRNA及蛋白表达水平则逐渐减弱,各组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论:GMⅡ、E-cadherin和α-catenin可能在卵巢癌的恶性进展中发挥重要作用,GMⅡ有望成为卵巢癌预后的标志和治疗靶点。