Expression and significance of sonic hedgehog signaling pathway–related components in brainstem and supratentorial astrocytomas

Background: This study was undertaken to investigate the role of the sonic hedgehog (SHH) signaling pathway in the occurrence of brainstem and supratentorial gliomas by examining the expression of SHH-related cascades in normal brain tissue and brainstem and supratentorial astrocytoma. Methods: Real-time quantitative polymerase chain reaction and immunohistochemistry were used to detect the expression of SHH-related components in 5 normal brain tissue, 10 grade II brainstem glioma, and 10 grade II supratentorial glioma specimens. Results: The mRNA expression levels of SHH-related genes were higher in brainstem astrocytomas than in supratentorial astrocytomas and normal brain tissues. The level of PTCH was statistically significantly higher in brainstem astrocytomas than in supratentorial astrocytomas and normal brain tissues (P < 0.01). Immunohistochemistry semi-quantitative analysis was consistent with the QPCR result that PTCH expression was increased statistically significant in brainstem astrocytomas at the protein level (P <0.05). Conclusion: Enhanced expression of PTCH and activation of the SHH pathway are involved in the occurrence of brainstem glioma. This may be related to the malignant biological behavior difference of brainstem and hemispheric glioma and could be an ideal therapeutic target in cases of brainstem glioma. However, it still cannot be considered a determining factor in the worse prognosis of brainstem glioma than of supratentorial glioma.     

Hedgehog信号通路活化在结直肠病变的意义

目的 探讨Hedgehog(Hh)信号通路蛋白表达在结直肠病变中的意义.方法 采用免疫组织化学技术检测人正常结直肠黏膜、结直肠息肉及结直肠癌组织中Hh信号通路蛋白音刺猬因子(sonic hedgehog,SHh)、受体patched(PTCH)和分泌型Frz相关蛋白(SFRP1)的表达水平.结果 正常结直肠组织中,SH...     

白介素-17与转化生长因子-β1在人脑胶质瘤组织中的表达及临床意义

目的 探讨人脑胶质瘤组织中白介素-17(IL-17)与转化生长因子β1(TGF-β1)表达的相关性及临床意义.方法 应用免疫组化二步法检测135例脑胶质瘤、15例正常脑组织中IL-17与TGF-β1的表达.结果 IL-17在正常脑组织中未见表达,在高、低级别胶质瘤中表达差异有统计学意义(P<0.01),其在高级别胶质瘤中的表达明显高于低级别胶质瘤.胶质瘤组织中TGF-131高表达77例,低表达58例,高表达率57.03%.高级别胶质瘤组织中TGF-β1的表达明显高于低级别(P＜0.05),正常脑组织中未见表达.胶质瘤组织中IL-17与TGF-β1表达呈正相关(r=0.285,P＜0.01).Kaplan-Meier生存分析提示IL-17、TGF-β1高表达组生存时间与低表达组生存时间差异有统计学意义(P＜0.01或P＜0.05).Cox模型多因素分析显示年龄、KPS评分、IL-17是影响胶质瘤患者术后生存时间的独立预后因素(P＜0.01).结论 人脑胶质瘤组织中IL-17的表达可能与TGF-β1有关.IL-17、TGF-β1的表达与人脑胶质瘤的恶性程度及预后相关.

Abstract：

Objective To investigate correlation between the amount of interleukin-17 (IL-17) producing cells and the expression of transforming growth factor (31 (TGF-β1) in glioma,and evaluate the clinical values of IL-17 and TGF-pl in predicting the prognosis of glioma. Methods The presence of IL-17 and TGF-pl was measured by immunohistochemistry in 135 human glioma (WHO Ⅰ 18,WHO Ⅱ 45,WHO Ⅲ 53,WHO Ⅳ 19) tissues and 15 normal brain tissues. Results There was no IL-17 positive staining in normal brain tissues. Of 135 glioma specimens showed low TGF-pl expression and 77 (57. 03% ) showed high TGF-pl expression. No TGF-β1 expression was detected in normal brain tissue. Furthermore,TGF-β1 expression was positively correlated with the amount of IL-17 producing cells in glioma tissues ( r=0.285, P<0.01). Compared with the low grade,the levels of IL-17 and TGF-pl positive cells were obviously increased in high grade. The Kaplan-Meier analysis showed that there were significant differences in overall survival (OS) between the IL-17 and TGF-pl high-expression and lowexpression group (P＜0.01, P＜0.05). The 3-year OS rates of IL-17 of high expression and low expression were 33.75% and 76. 36%. Multivariate Cox proportional hazards regression analysis indicated that age,KPS score, IL-17 were independent prognostic factor for OS (P＜0.01). Conclusion Intratumoral IL-17-producing cell density and the expression of TGF-β1 was associated with the malignancy of human glioma.     

DNA跨损伤修复基因在人脑胶质瘤中的表达

目的 研究DNA跨损伤修复基因Rev1、Pol ζ(Rev3和Rev7)、Pol η、Pol ι、和Pol κ在脑胶质瘤中的表达,探讨这些基因的表达水平与脑胶质瘤发生、发展的关系.方法 利用SYBR Green实时定量PCR技术检测DNA跨损伤修复基因在85例原发脑胶质瘤病人和14例正常脑组织中的mRNA表达情况.结果 与正常脑组织相比,Rev1基因在Ⅳ级胶质瘤中表达上调(ΔCt为5.55±1.12,P＜0.05);Rev3基因在Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级胶质瘤中表达上调(ΔCt分别为5.46±1.35、5.13±1.53和6.14±1.10,均P＜0.05);Rev7基因在Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级胶质瘤中表达上调(ΔCt分别为5.88±0.82、5.41±1.43和5.56±0.96,均P＜0.05);Pol η基因在Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级胶质瘤中表达上调(ΔCt分别为5.97±1.15、5.83±1.03和6.34±1.01,均P＜0.05);Pol ι基因在Ⅱ～Ⅳ级胶质瘤中表达上调(ΔCt分别为6.67±1.17、6.33±1.39和7.03±1.06,均P＜0.05);Pol κ基因在Ⅳ级胶质瘤中表达上调(ΔCt为5.25±1.58,P＜0.05).Spearman秩相关分析表明,跨损伤修复基因Rev1、Rev3、Pol η、Pol ι和Pol κ的表达量与肿瘤病理学分级呈正相关(均P＜0.01).结论 DNA跨损伤修复基因可能与胶质瘤的发生、进展相关.     

SYBR Green实时定量PCR检测人脑原发胶质瘤中LATS1和LATS2基因的表达

目的：运用实时定量PCR检测肿瘤抑制基因LATS1和LATS2的mRNA在人脑原发胶质瘤组织中的表达情况，并进一步分析其表达变化与临床资料之间的关系。 方法：建立SYBR Green 实时定量PCR的检测方法；通过标准曲线法对肿瘤抑制基因LATS1和LATS2的mRNA在30例原发胶质瘤（WHO分级：Ⅱ级10例，Ⅲ级10例，Ⅳ级10例）和10例正常脑组织中的表达进行定量检测；统计学分析不同级别胶质瘤及正常脑组织间的表达差异，并进一步结合临床资料分析不同性别和不同年龄组的表达差异。 结果：与正常脑组织相比，在各病理级别胶质瘤中LATS1和LATS2的mRNA表达均下调(P＜0.05)，但胶质瘤不同级别组之间的差异均无统计学意义(P＞0.05)。LATS1和LATS2在不同性别组和年龄组胶质瘤中的表达差异也无统计学意义（P＞0.05）。 结论：①成功地建立了SYBR Green实时定量PCR检测LATS1和LATS2基因表达的方法；②胶质瘤中LATS1和LATS2的mRNA表达水平均低于正常脑组织，但不同病理分级间的表达无明显差异。     

脑胶质瘤组织肿瘤浸润性树突状细胞及其分子标志物MHC-Ⅱ与CD54的表达情况及意义

目的 探讨脑胶质瘤组织肿瘤浸润性树突状细胞(tumor infiltrating dendritic cells,TIDC)及其分子标志物MHC-Ⅱ、CD54表达情况及意义。 方法 选择宁波市李惠利医院神经外科2013年1月-2017年6月脑胶质瘤组织标本70例作为脑胶质瘤组织组,正常脑组织标本70例作为正常脑组织组,脑胶质瘤组根据WHO病理分级分为低级别脑胶质瘤组(Ⅰ级+Ⅱ级)19例和高级别脑胶质瘤组(Ⅲ级+Ⅳ级)51例。采用免疫组化法测定脑胶质瘤组织TIDC数量和正常脑组织中树突状细胞(dendritic cells,DC)数量,采用流式细胞仪检测脑胶质瘤组织TIDC和正常脑组织中DC膜表面MHC-Ⅱ、CD54表达。 结果 细胞核出现棕褐色颗粒为S-100阳性染色的DC细胞。脑胶质瘤组织中TIDC数量低于正常脑组织中DC数量(P<0.05);高级别脑胶质瘤组织中TIDC数量低于低级别脑胶质瘤组织中TIDC数量(P<0.05)。脑胶质瘤组织TIDC膜表面MHC-Ⅱ、CD54表达量低于正常脑组织中DC膜表面MHC-Ⅱ、CD54表达(P<0.05)。高级别脑胶质瘤组织TIDC膜表面MHC-Ⅱ、CD54表达量低于低级别脑胶质瘤组织TIDC膜表面MHC-Ⅱ、CD54表达量(P<0.05)。 结论 脑胶质瘤组织中TIDC细胞少于正常脑组织中DC细胞,随着脑胶质瘤级别的升高,TIDC细胞浸润数目减少,脑胶质瘤存在抗原提呈功能缺失或降低。      

P21和survivin蛋白在脑胶质瘤组织中的表达及其临床意义

目的:探讨不同级别人脑胶质瘤组织和正常脑组织中P21和survivin蛋白的表达情况,分析其临床意义。方法:按2007年WHO制定的病理分级标准,将41份脑胶质瘤组织标本分为Ⅰ级9份、Ⅱ级14份、Ⅲ级10份和Ⅳ级8份,另外12份正常脑组织作为对照组,采用免疫组织化学法检测脑胶质瘤和正常脑组织中P21和survivin蛋白的表达情况,并分析两者表达的关系。结果:在正常脑组织和脑胶质瘤组织中P21及survivin蛋白阳性表达率分别为91.7%和53.7%及0%和51.2%,不同组织中P21和survivin蛋白的阳性表达率比较差异均有统计学意义(P<0.05)。Ⅰ-Ⅱ和Ⅲ-Ⅳ级脑胶质瘤组织中P21蛋白阳性表达率分别为69.6％及33.3%,而survivin蛋白阳性表达率分别为34.8%和72.2%,Ⅲ-Ⅳ级脑胶质瘤组织中P21蛋白阳性表达率明显低于Ⅰ-Ⅱ级,而survivin蛋白的阳性表达率明显高于Ⅰ-Ⅱ级(P<0.05)。结论:P21蛋白的表达缺失和survivin蛋白的过度表达与脑胶质瘤恶性程度有关联,P21蛋白有抑制脑胶质瘤发生发展的作用,而survivin蛋白在脑胶质瘤的恶变过程中起促进作用。     

Survivin蛋白在人脑星形细胞瘤组织中的表达及意义

目的探讨凋亡抑制Survivin蛋白在人脑星形细胞瘤组织中的表达及其与脑星形细胞瘤发生、发展的关系。方法应用免疫组织化学Elivision二步法检测67例脑星形细胞瘤组织和10例对照组组织标本中Survivin蛋白的表达水平。结果对照组阳性表达率明显低于脑星形细胞瘤Ⅰ～Ⅳ级组（P〈0．01）。高分化组（脑星形细胞瘤Ⅰ～Ⅱ级组）阳性表达率为24．24％，明显低于低分化组（脑星形细胞瘤Ⅲ～Ⅳ级组）的70．59％（P〈0．01）。相关性分析结果显示，肿瘤分化高低与Survivin蛋白的表达强度呈正相关（r=0．437，P〈0．01）。结论Survivin蛋白在脑星形细胞瘤组织中呈高表达；且随脑星形细胞瘤病理级别的增高，阳性表达率和表达强度增强。Survivin蛋白在脑星形细胞瘤发生、发展过程中具有重要作用。     

Expression and significance of P53 protein and MDM-2 protein in human gliomas

Background  P53 is one of the most studied tumor suppressors in the cancer research, and over 50% of human tumors carry P53 mutations. MDM-2 is amplified and/or overexpressed in a variety of human tumors of diverse tissue origin. The aim of this study was to examine the expression of P53 protein and MDM-2 protein in gliomas, and to investigate the relationship between the expression of the two proteins and the histopathological grades of glioma. The relationship between MDM-2 protein expression and P53 protein expression was also analyzed.

Methods  The expression of P53 protein and MDM-2 protein was immunohistochemically detected using monoclonal antibodies in 242 paraffin embedded tissues, including 30 normal brain tissues from patients with craniocerebral injury and 212 tissues from patients with primary glioma (grade I–II group: 5 cases of grade I, 119 cases of grade II; and grade III–IV group: 53 cases of grade III, and 35 cases of grade IV).

Results  The P53 positive rate was significantly higher in the glioma groups than in the control group (P <0.0001). The P53 positive rate was significantly higher in glioma tissues of grade III–IV than in glioma tissues of grade I–II group (P=0.001). The MDM-2 positive rate was significantly higher in glioma groups than in the control group (P <0.0001). There was no significant difference in the MDM-2 positive rate between the two glioma groups (P=0.936). The expression of P53 protein was not related to expression of MDM-2 protein (P=0.069)

Conclusions  Overexpression of P53 protein might be related to the occurrence and progression of glioma. Overexpression of MDM-2 protein may play an important role in glioma tumorigenesis, but may not be involved in glioma progression. The overexpression of MDM-2 protein was an early event in malignant transformation of glioma. MDM-2 may be a key player in glioma in its own right.

     

抑癌p53基因在星形细胞瘤中阳性表达的意义

目的研究p53在星形细胞瘤发生、增殖过程中的作用及临床意义。方法采用免疫组织化学法(S-P法)检测62例资料完整的星形细胞瘤及10例正常脑组织的p53表达,分析p53蛋白在星形细胞瘤及正常脑组织中的表达情况。结果正常脑组织中未见p53蛋白阳性表达,62例星形细胞瘤中共有26例肿瘤p53蛋白表达呈阳性,二者差异有显著性(χ2=4.872,P<0.05),其中在Ⅰ级星形细胞瘤中阳性率为8.33%(1/12),Ⅱ级星形细胞瘤中阳性率为21.05%(4/19),Ⅲ级间变性星形细胞瘤中阳性率为60%(9/15),Ⅳ级胶质母细胞瘤中阳性率为75%(12/16)。结论星形细胞瘤中p53蛋白的表达与肿瘤的级别相关,分化程度越低,p53蛋白阳性表达率越高,检测p53有助于临床判断预后。     

星形细胞瘤中Livin的表达及其与细胞增殖、凋亡的关系

目的探讨一种新的凋亡抑止蛋白Livin在人脑星形细胞瘤中的表达及其对瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法分别采用免疫组织化学和原位细胞凋亡检测法检测人脑胶质瘤细胞中Livin、PCNA蛋白的表达和凋亡细胞,结合胶质瘤病理分级分析其相关关系。结果随着人脑胶质瘤WH0病理分级的增高,Livin、PCNA的表达强度明显升高（P〈0.05）,细胞凋亡率也明显升高（P〈0.05）,其中高度恶性组（WHO分级Ⅲ、Ⅳ级）均显著高于低度恶性组（WHO分级I、Ⅱ级）（P〈0.05）;随着Livin表达强度的增高,PCNA表达强度及细胞凋亡率均增高,但PCNA的表达比细胞的凋亡有更明显的增高趋势。结论人脑星形细胞瘤中Livin、PCNA的表达强度和细胞凋亡率异常升高;星形细胞瘤的发生和演变可能与Livin、PCNA及细胞凋亡的综合作用密切相关。     

Bag-1在胶质瘤中的表达及临床意义

目的：探讨Bcl-2结合抗凋亡基因-1（Bag-1）在胶质瘤组织中的表达及其临床意义。方法：采用免疫组化的方法检测手术切除的56例不同级别胶质瘤组织和10例正常脑组织中Bag-1蛋白的表达情况。结果：Bag-1在胶质瘤组织中高表达,在胶质瘤组织中阳性率为69．64％,其中胶质瘤低级别组（Ⅰ～Ⅱ级）40．91％,高级别组（Ⅲ～Ⅳ级）88．24％,其差异具有统计学意义（P〈0．05）;生存时间〉2年组与生存时间≤2年组间差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：Bag-1表达可能参与了胶质瘤的发生、发展过程,可作为胶质瘤恶性程度和预后分析的指标。     

脑胶质瘤增殖细胞核抗原和Cyclin Dl蛋白的表达及生物学意义

目的探讨增殖细胞核抗原（PCNA）和Cyclin D1蛋白在脑胶质瘤中的表达及其在胶质瘤发生、发展过程中的生物学意义。方法对已明确诊断的82例脑胶质瘤及10例瘤旁正常脑组织利用S—P免疫组化法检测PCNA和Cyclin D1蛋白。结果82例胶质瘤中PCNA标记指数（PCNALI）较正常脑组织明显升高,并随胶质瘤恶性程度的升高而呈上升趋势（P〈0．05）。Cyclin D1蛋白阳性率在正常脑组织及肿瘤组织间以及不同分级的胶质瘤间无明显差异（P〉0．1）。结论PCNA是胶质瘤发生和恶性转化的重要促进因子,而Cyclin D1可能不参与该类肿瘤的发生和发展。     

β1-整合素与膜受体PTCH在大肠癌中的表达及其相互关系研究

目的:检测β1-整合素(β1-integrin)及hedgehog(Hh)信号通路中膜受体蛋白patched(PTCH)在不同分化程度结直肠腺癌中的表达,探讨其表达与肿瘤生物行为学间的关系并分析两者间的相关性.方法:应用免疫组化SP法检测组织芯片69例结直肠腺癌中β1-integrin与PTCH的表达情况,并结合临床病...     

FAK在脑胶质瘤55例中的表达及其临床意义

目的:探讨脑胶质瘤细胞中局部黏着斑激酶(FAK)蛋白的表达水平与组织学分级之间的关系。方法:将55例脑胶质瘤标本按照WHO胶质瘤分类标准(2000年)分为4组,其中Ⅰ级13例,Ⅱ级16例,Ⅲ级17例,Ⅳ级9例,同时取11例正常脑组织标本(急性颅脑外伤患者手术内减压切除的脑组织标本)为对照组,分别行HE染色和免疫组织化学染色,观察FAK蛋白表达情况,并比较各组间的差异。结果: FAK蛋白在正常脑组织中均不表达;低级别(Ⅰ+Ⅱ)组的阳性表达率低于高级别(Ⅲ+Ⅳ)组(P<0.05);FAK表达强度与胶质瘤病理级别呈正相关(r=0.424,P<0.05)。结论:测定FAK蛋白在人脑胶质瘤中的表达水平将有助于判断人脑胶质瘤细胞的恶性程度。     

TRIM29基因在胶质瘤中的表达及其对胶质母细胞瘤细胞U-87MG增殖与迁移的影响

目的 观察TRIM29基因在胶质瘤组织中的表达及其与临床病理特征的关系,探讨其对胶质母细胞瘤细胞U-87 MG增殖与迁移的影响以及可能的作用机制.方法 采用免疫组织化学法检测56例胶质瘤组织和正常脑组织中TRIM29蛋白的表达,分析胶质瘤组织中TRIM29蛋白表达与临床病理特征的关系.Western blot检测胶质母细胞瘤组织、癌旁组织及正常组织中TRIM29蛋白的表达,同时检测其在不同胶质瘤细胞株(A172、LN-229、U-87 MG、U-118 MG) 中的表达.利用RNA干扰技术处理高表达TRIM29的胶质母细胞瘤细胞U-87 MG,并分为空白对照组、shScramble组(阴性对照组) 及shTRIM29组(实验组) .采用MTT实验、克隆形成实验和Transwell实验分别检测敲低TRIM29对胶质母细胞瘤细胞U-87 MG增殖和迁移能力的影响.进一步通过裸鼠成瘤实验检测敲低TRIM29在体内对胶质母细胞瘤细胞U-87 MG增殖的影响.采用Western blot检测TRIM29敲低后AKT通路蛋白的变化.结果 TRIM29在胶质瘤组织中较正常脑组织表达增加,且与患者WHO分级呈正相关(r = 0.535,P＜ 0.05) .Western blot检测结果 显示,与正常脑组织和癌旁组织相比,胶质母细胞瘤组织中TRIM29蛋白的表达明显上调(P＜ 0.05) .TRIM29在胶质瘤细胞A172、LN-229、U-87 MG、U-118 MG中蛋白的表达分别为(0.27 ± 0.02) 、(0.69 ± 0.04) 、(1.24 ± 0.08) 、(0.82 ± 0.06) .RNA干扰处理后, shTRIM29组U-87 MG细胞TRIM29蛋白的表达量为(0.27 ± 0.04) ,明显低于空白对照组和shScramble组[(1.64 ± 0.05) 、(1.51 ± 0.05) ,P＜ 0.05].同时,与空白对照组和shScramble组相比, shTRIM29组U-87 MG细胞的增殖、迁移能力明显下降(P＜ 0.05) .在胶质母细胞瘤细胞U-87 MG中敲低TRIM29后,p-AKT蛋白表达明显降低(P＜ 0.05) .结论 TRIM29在胶质瘤中高表达,与肿瘤的恶性程度呈正相关,可能通过AKT信号通路促进细胞的增殖及迁移.     

Livin、Survivin和Caspase-3在星形细胞瘤中的表达

目的探讨Livin、Survivin和Caspase-3在星形细胞瘤中的表达。方法采用免疫组织化学法检测50例星形细胞瘤标本及10例正常脑组织中Livin、Survivin和Caspase-3的表达,分析Livin、Survivin的表达与Caspase-3表达的关系。结果 Caspase-3在正常脑组织中的阳性表达率显著高于在星形细胞瘤(P<0.05),且在Ⅰ～Ⅱ级星形细胞瘤中的阳性表达率高于Ⅲ～Ⅳ级(P<0.05)。Livin和Survivin在星形细胞瘤中的阳性表达率显著高于正常脑组织(P<0.05),且在Ⅲ～Ⅳ级星形细胞瘤中的阳性表达率明显高于Ⅰ～Ⅱ级(P<0.05)。星形细胞瘤中Livin和Survivin的表达与Caspase-3蛋白的表达均呈负相关(r分别为-0.520和-0.360,P<0.05)。结论 Livin、Survivin和Caspase-3的表达可能与星形细胞瘤的发生及发展有关。     

脑胶质瘤60例CXCR_4与EGFR的表达及意义

目的:探讨CXCR4和EGFR在脑胶质瘤中的表达状况及其与肿瘤发生、发展和侵袭性生长的关系。方法:采用免疫组织化学SP法,检测60例脑胶质瘤、5例正常脑组织中CXCR4和EGFR的表达。用统计学方法分析其表达及与胶质瘤病理分级的关系。结果:60例胶质瘤患者中分别有39例表达CXCR4和EGFR。CXCR4在Ⅱ、Ⅲ及Ⅳ级胶质瘤中阳性表达率分别为38.10%、73.91%、87.50%;EGFR在Ⅱ、Ⅲ及Ⅳ级胶质瘤中阳性表达率分别为52.38%、60.87%、87.50%。正常脑组织均不表达CXCR4、EGFR。CXCR4、EGFR在不同级别胶质瘤间的表达有显著性差异(P<0.05),两者随着胶质瘤病理分级增高而表达增强(rs=0.426,P<0.05)。结论:CXCR4与EGFR表达呈正相关,均与胶质瘤的病理分级有关。     

脑星形细胞瘤中神经细胞粘附分子的表达

目的　研究人脑星形细胞瘤中神经细胞黏附分子的表达情况及其临床意义。方法　收集人脑星形细胞瘤标本 48例 ,行 S— P染色。结果　正常脑组织中 NCAM全部表达 ,星形细胞瘤中 — 级、 级、 级组阳性表达率分别为 95 % (19/2 0 )、38.9% (7/18)、2 0 % (2 /10 ) ,阳性细胞表达程度随肿瘤恶性程度的增高反而降低。结论　随人脑星形细胞瘤恶性程度的增高 ,NCAM表达下调 ,提示 NCAM表达减少参与肿瘤的生物恶性发展