不同时间的缺血预处理对脂肪肝缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨缺血预处理（IP）对脂肪肝缺血再灌注（IR）损伤的保护作用,以及取得最佳效果的预处理时间。方法通过建立大鼠脂肪肝模型,给予不同时间的IP（5-10、8-10、10-10、15-10 min）和IR（缺血30 min,再灌注30 min）,检测血清AST、ALT、LDH及NO水平,肝组织中MDA、SOD、MPO含量的变化和肝脏病理学变化。以脂肪肝未行IP组和正常肝脏未行IP组及正常肝脏行10-10 min IP作对照。结果 IR后,脂肪肝未行IP组血清肝功能的变化、肝组织病理学改变及炎性浸润程度显著重于正常肝脏未行IP组。在脂肪肝组中,5或8-10 min IP组血清学及肝组织MDA、MPO水平低于其余组和未行IP组,而其SOD水平显著升高（P〈0.05）。各IP组中的NO水平明显高于其对应的IR组（P〈0.05）。脂肪肝IP组中,5或8-10 min IP组血清NO水平明显高于其余组（P〈0.05）。结论脂肪变性加重肝脏IR损伤,IP对脂肪肝的IR损伤具有保护作用,本实验认为5～8 min缺血和10 min再灌注的IP方案可能是中重度脂肪肝时的最佳预处理方案。     

脂蛋白相关磷脂酶A2基因R92H多态性与汉族人群冠心病易感性的关系

目的探讨脂蛋白相关磷脂酶A2基因R92H多态性与冠心病遗传易感性及冠状动脉病变程度的关系。方法采用单荧光标记探针技术检测261例冠心病患者及263例正常人脂蛋白相关磷脂酶A2基因R92H多态性。结果冠心病组RH基因型和H等位基因频率显著高于对照组(P<0.05和<0.01)。RH基因型、H等位基因人群冠心病风险增高(P均<0.01)。Logistic回归分析显示,R92H多态性是冠心病的独立危险因素(P<0.05)。冠心病组中RH和HH基因型者总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇水平高于RR基因型者(P<0.05和<0.01),高密度脂蛋白胆固醇水平显著低于RR基因型者(P<0.05)。冠心病组中,RH和HH基因型者多支血管病变率比RR基因型者明显升高(P<0.05)。结论脂蛋白相关磷脂酶A2基因R92H多态性与中国汉族人群冠心病相关,携带RH、HH基因型人群发生冠心病风险较高,且与更严重的冠状动脉病变有关。     

人锌指蛋白23在原发性肝细胞肝癌中的表达及临床意义

Objective To detect the expression level of human zinc finger 23 (ZNF23) in hepatocellular carcinoma tissue samples and HepG2 cell lines and investigate the relationship between hZNF23 expression and clinicopathological characteristics of HCC and cell apoptosis. Methods The expression levels of hZNF23 and GAPDH mRNA in 37 cases of HCC were measured by real-time RT-PCR. The association between the expression of hZNF23 and the clinicopathological characteristics of HCC was analyzed. Cultured HepG2 cells were divided into 4 groups ( control group, 1.25 μg/ml , 2.5 μg/ml and 5 μg/ml cisplatin)or 6 groups( control group, 1.25 μg/ml, 2.5 μg/ml, 5 μg/ml, 10 μg/ml and 20 μg/ml cisplatin). MTT method was employed to evaluate cell proliferation. Annexin V-FITC assay was used to assess percentage of apoptotic HepG2 cells. The expression levels of hZNF23 and GAPDH mRNA of HepG2 cells after apoptosis induced by cisplatin with a series of concentrations were measured by real-time RT-PCR.Results The median ( quartile1, quartile 3) expression levels of hZNF23 mRNA in 37 HCC tissue samples and adjacent tissue samples were 8.84 (3.59-15.05), 22.20 ( 13.85-42.90 ), respectively. There was significant difference ( U = 259.5, P ＜ 0.01 ). The median ( quartile1, quartile 3 ) expression levels of hZNF23 mRNA in cancer tissue samples with Edmondson stage Ⅰ + Ⅱ [12.80(4.80-19.50)] was much higher than those in stage Ⅲ + Ⅳ [5.01 ( 2.88-11.68 ), U = 99.00, P ＜ 0.05] The median ( quartile1,quartile 3 ) expression levels of hZNF23 mRNA in patients with and without hepatic cirrhosis were 9.92(3.80-15.25) , 3.21 (2.78-3.60), respectively. The median ( quartile1, quartile 3 ) expression levels of hZNF23 mRNA in HBV infection and non-infection patients was 9.09(3.72-15.25 ), 2.48 (1.79-12.10),respectively. There was no significant difference between groups with and without hepatic cirrhosis and between HBV infection and non-infection groups( U = 16. 00 and 24.00, P ＞0.05 ). MTT assay indicated that cisplatin significantly inhibited HepG2 cells proliferation in a dose-dependent manner. Annexin V-FITC/PI assay showed that HepG2 cells apoptosis rates were (0.9 ± 0.2 ) %, ( 4. 2 ± 0.3 ) %, ( 9.8 ± 4. 3 ) %,(23.0 ± 6.0)%, respectively. Cisplatin significantly induced HepG2 cells apoptosis in a dose-dependent manner( F = 27.89, P ＜ 0.01 ). The expression levels of hZNF23 mRNA in cisplatin groups [( 10.39 ±3.08) × 10-5, (24.10 ± 2.09) × 10-5, (6.90 ± 2.24) × 10-4] were significantly lower than that of the controlgroup[(94.80±1.80) ×10-5, F=6.027, P＜0.01]. Conclusions The expression level hZNF23 mRNA is related to Edmondson stage of HCC. The apoptosis effect of cisplatin on HepG2 cells may be associated with the upregulation of hZNF23.     

红景天苷通过抑制内质网应激减少高同型半胱氨酸诱导的人脐静脉内皮细胞损伤

目的研究红景天苷对高同型半胱氨酸诱导的内皮细胞损伤的保护作用及其机制。方法不同浓度同型半胱氨酸(Hcy)预处理人脐静脉内皮细胞(HUVEC),再使用1 mmol/L Hcy与不同浓度红景天苷共同作用HUVEC。24 h后,MTT法检测细胞存活率。实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测免疫球蛋白重链结合蛋白(Bip)和C/EBP同源蛋白(CHOP)的基因表达水平,Western blot检测Bip、CHOP蛋白表达水平、PKR内质网激酶(PERK)及内质网核信号转导蛋白1α(IRE1α)磷酸化水平。结果与正常对照组比较,Hcy组细胞存活率降低,Bip和CHOP的基因和蛋白水平升高,PERK和IRE1α的磷酸化水平升高(P0.05)。与Hcy组比较,高浓度红景天苷(300μmol/L)与Hcy共同作用后细胞存活率升高,Bip和CHOP的基因和蛋白表达水平下降,PERK和IRE1α的磷酸化水平下降(P0.05)。结论红景天苷对高同型半胱氨酸诱导的HUVEC损伤具有保护作用,其机制可能与抑制内质网应激信号通路的活化有关。     

实时荧光定量PCR检测MT2-MMP在肺癌中的表达及其临床相关性

目的建立实时荧光定量PCR检测肺癌组织中膜型基质金属蛋白酶2(MT2-MMP)基因表达的方法,并探讨MT2-MMP的临床相关性。方法肺癌组织及癌旁正常组织取自21例非小细胞肺癌手术患者。设计人MT2-MMP、内参照β-actin基因的引物及Taq Man探针,将MT2-MMP及β-actin基因扩增片段纯化后分别构建重组质粒,制备标准品。检测肺癌及癌旁正常组织中MT2-MMP及β-actin的基因表达水平,并分析其临床相关性。结果经测序验证,PCR扩增产物为MT2-MMP及β-actin基因的特异片段。MT2-MMP、β-actin基因表达灵敏度分别为600拷贝/ml、300拷贝/ml,线性范围分别为6×102~6×107拷贝/ml、3×102~3×107拷贝/ml,相关系数均为1.000,扩增效率分别为88.1%、86.2%,批间变异系数分别为0.40%~1.55%、0.59%~3.98%。MT2-MMP在肺癌组织中的基因表达水平显著高于癌旁正常组织(P<0.05),但与患者临床病理参数无相关性。结论成功构建了检测人MT2-MMP的实时荧光定量PCR方法,该法特异性好,灵敏度高;MT2-MMP可能参与肺癌的...     

旋转式钴60放射治疗系统分次治疗在颅底肿瘤中的临床应用

目的探讨旋转式钴60放射治疗系统(伽玛刀)分次治疗颅底肿瘤的可行性。方法回顾性分析经伽玛刀分次治疗颅底肿瘤早期临床疗效。结果经伽玛刀治疗的患者,可在短期内起到良好的局控作用和使肿瘤消失,术后未见放射性早、晚发反应,未见正常组织结构、功能异常及并发症发生。结论伽玛刀分次治疗颅底肿瘤是一种新型可选择的放射治疗手段,治疗效果较好。     

术中腹腔游离癌细胞检测用于胃癌TNM分期

目的 探讨术中腹腔游离癌细胞的检测在胃癌TNM分期中的应用.方法 用实时荧光RT-PCR方法检测胃癌患者术中腹腔游离癌细胞(free cancer cell,FCC),并进行5年的随访.用MedCalc软件分析FCC最佳阳性判定值,大于此值表示FCC的存在,标记为FCC(+),然后把FCC(+)当作远处转移(M1)重新进行分期,并作新的生存曲线图.结果 (1)在最佳阳性判定值为31.21拷贝/ml时约登指数最高;(2)把FCC(+)当作M1重新进行分期,各分期之间的5年生存曲线显示:Ⅰ～Ⅱ期P=0.134;Ⅱ～Ⅲ期P=0.004;Ⅲ～Ⅳ期P=0.022.新分期各分期的5年生存率分别为Ⅰ期100%(18/18),Ⅱ期88%(7/8),Ⅲ期24%(4/17),Ⅳ期9%(2/22).结论 (1)FCC最佳阳性判定值为31.21拷贝/ml;(2)现行TNM分期中加入FCC检测结果则可使其更加完善,能更准确地评估进展期胃癌患者的手术预后.     

特发性血小板减少性紫癜患者CD8+T淋巴细胞免疫功能的研究

特发性血小板减少性紫癜(ITP)是一种自身免疫性疾病.近年来研究发现CD8+T淋巴可通过细胞毒作用对ITP患者的血小板造成破坏[1].本研究检测患者外周血单个核细胞中CD8+T淋巴细胞的数量、凋亡百分率及CD8+T淋巴细胞CX3CR1 mRNA的表达水平,进一步探讨CD8+T细胞免疫异常在ITP发病机制中的作用.     

CXCL16与急性冠脉综合征的相关性分析

目的探讨急性冠脉综合征（ACS）患者血清CXCL16的表达水平及其与基质金属蛋白酶-2（MMP-2）的关系。方法用ELISA法检测ACS患者,包括不稳定型心绞痛（UAP）40例、急性心肌梗死（AMI）40例及对照组20例患者的血清CXCL16和MMP-2水平并作比较,同时分析血清CXCL16与血清MMP-2的相关关系。结果与对照组相比,UAP组和AMI组CXCL16均显著升高,差异有统计学意义（均P〈0．01）;与UAP组相比,AMI组CXCL16显著升高,且差异有统计学意义（P〈0．05）。与对照组相比,UAP组和AMI组MMP-2均显著升高,差异有统计学意义（均P〈0．01）;与UAP组相比,AMI组MMP-2显著升高,且差异有统计学意义（P〈0．01）。血清CXCL16与MMP-2存在显著线性相关关系（r=0．622,P〈0．01）。结论血清CXCL16是ACS一个独立的生物学指标,并可以作为评价动脉粥样硬化斑块稳定性的指标．