同型半胱氨酸对神经小胶质细胞IL-1β、IL-6表达的影响

目的：研究同型半胱氨酸（HCY）对神经小胶质细胞（bv-2细胞）白介素-1β（IL-1β）、白介素-6（IL-6）表达的影响。方法：在细胞培养液中加入HCY、半胱氨酸（DL-CY）、空白对照组及溶剂对照组干预后,用细胞计数试剂盒（CCK8法）观察各组细胞增殖活性,并用酶联免疫吸附测定（ELISA）法测定细胞培养上清液IL-1β、IL-6浓度,用实时荧光定量核酸扩增检测系统（QPCR）的方法评价IL-1β、IL-6 mRNA表达改变。结果：实验各组中细胞增殖活性差异均无统计学意义（P＞0.01）,而HCY组IL-1β、IL-6的mRNA表达及上清液中蛋白表达与其他各组相比均有显著增加（P＜0.01）。结论：HCY上调神经小胶质细胞IL-1β、IL-6的表达。     

同型半胱氨酸对神经小胶质细胞IL-1β、IL-6表达的影响

目的：研究同型半胱氨酸（HCY）对神经小胶质细胞（bv-2细胞）白介素-1β（IL-1β）、白介素-6（IL-6）表达的影响。方法：在细胞培养液中加入HCY、半胱氨酸（DL-CY）、空白对照组及溶剂对照组干预后,用细胞计数试剂盒（CCK8法）观察各组细胞增殖活性,并用酶联免疫吸附测定（ELISA）法测定细胞培养上清液IL-1β、IL-6浓度,用实时荧光定量核酸扩增检测系统（QPCR）的方法评价IL-1β、IL-6 mRNA表达改变。结果：实验各组中细胞增殖活性差异均无统计学意义（P＞0.01）,而HCY组IL-1β、IL-6的mRNA表达及上清液中蛋白表达与其他各组相比均有显著增加（P＜0.01）。结论：HCY上调神经小胶质细胞IL-1β、IL-6的表达。     

达纳康对类老年痴呆大鼠脑组织胶质细胞原纤维酸性蛋白和IL-1β、IL-6及APP mRNA表达的影响

目的研究达纳康(EGb761)对β-淀粉样蛋白(Aβ)25~35所致类老年性痴呆(AD)模型大鼠神经免疫调节的作用机制。方法采用双侧杏仁核注射Aβ25~35造成类AD大鼠模型,观察大鼠莫里斯(Morris)水迷宫空间记忆能力,并分别通过免疫组化和RT-PCR方法研究类AD大鼠神经元胶质细胞原纤维酸性蛋白(GFAP)、APP mRNA表达;观察炎性细胞因子IL-1β、IL-6的变化以及EGb761的影响。结果类AD模型大鼠Morris水迷宫测试出现空间记忆能力下降,皮层、海马APP mRNA的表达上调;海马、皮层GFAP阳性胶质细胞和IL-6 mRNA以及海马IL-1βmRNA表达增高。EGb761能够提高模型大鼠定向学习记忆能力,降低海马、皮层GFAP阳性胶质细胞表达,降低海马部位APP mRNA的表达。结论EGb761能显著改善Aβ诱导的痴呆模型大鼠学习记忆障碍,降低海马APP mRNA表达,减轻神经细胞的炎症和免疫联级反应。提示有效控制AD患者脑内Aβ免疫联级反应是EGb761的重要作用机制之一。     

银杏叶提取物对rhTNF-α诱导HeLa细胞凋亡和Caspase-8活性的影响

目的研究银杏叶提取物EGb761对肿瘤坏死因子-α（TNF-α）诱导HeLa细胞凋亡和Caspase-8活性的影响。方法采用流式细胞术检测细胞凋亡，Caspase-8荧光检测试剂盒测定Caspase-8活性。结果EGb761在10～40mg／L终浓度范围内对rhTNF-α诱导的HeLa细胞凋亡均有显著的抑制作用（P〈0．01），呈剂量依赖关系；EGb761在10～40mg／L终浓度范围内对rhTNF-α诱导的HeLa细胞Caspase-8活化均有显著的抑制作用（P〈0．01），呈剂量依赖关系。结论结果提示，EGb761抑制TNF-α诱导的HeLa细胞凋亡可能与其抑制Caspase-8活化有关。     

鞘内注射丹参酮ⅡA对骨癌痛小鼠痛行为及脊髓水平炎症因子的影响

目的探讨鞘内注射丹参酮ⅡA对骨癌痛小鼠热痛觉过敏及脊髓水平白介素-1β（IL-1β）、白介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-理（TNF-仅）表达的影响。方法C3H／HeNCrlVr雄性小鼠84只,应用随机数字表法分为：（1）丹参酮IIA10μg组;（2）丹参酮IIA20μg组;（3）丹参酮IIA40μg组;（4）正常组;（5）DMSO＋Sham组;（6）丹参酮IIA＋Sham组;（7）DMSO＋Tumor组。用热辐射刺激仪测定缩足潜伏期（PWTL）。应用Real．timePCR技术检测mRNA表达。结果各组小鼠基础PⅥ吼差异无统计学意义（P〉0．05）。术后14d,与正常组相比,假手术组PwTL差异无统计学意义（P〉0．05）,而骨癌痛组PWTL明显降低（P〈0．05）。术后21d,和正常组相比,丹参酮IIA＋Sham组、DMSO＋Sham组PwTL和脊髓IL-1β、IL-6、TNF-α表达差异均无统计学意义（P〉0．05）;DMSO＋Tumor组PWTL[（6．19±1．26）s]明显低于正常组[（16．01±1．59）s]（P〈0．05）,脊髓IL—1β、IL-6、TNF—α表达则高于正常组;丹参酮IIA20μg组[（9．83±1．26）s]、丹参酮IIA40μg组[（10．29±2．95）s]PWTL高于DMSO＋Tumor组,脊髓IL-1β、IL-6、TNF-α表达则低于DMSO＋Tumor组（P〈0．05）;丹参酮IIA10μg组PwTL[（6．67±0．96）S]、脊髓IL-1β、IL-6、TNF-α表达水平与DMSO＋Tumor组相比差异无统计学意义（P〉0．05）。结论鞘内注射丹参酮ⅡA具有剂量依赖性抗癌痛作用,抑制脊髓水平表达释放炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α可能是其机制之一。     

银杏叶提取物对肾病患儿外周血单个核细胞中细胞因子mRNA表达的影响

目的 探讨银杏叶提取物对原发性肾病综合征（NS）患儿外周血单个核细胞（PBMC）中炎症细胞因子IL-1、IL-6、IL-8和TNF-α的mRNA表达的影响.方法 将我科2000年10月～2005年3月收治的35例小儿NS患儿随机分为两组,银杏叶组20例,采用泼尼松加银杏叶提取物治疗;激素组15例,采用常规泼尼松治疗.8周为1个疗程,疗程结束后判断疗效.分别于治疗前、后观察临床和生化指标,同时应用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测PBMC培养上清液中IL-1、IL-6、IL-8和TNF-α的含量变化;采用原位逆转录聚合酶链反应（In Situ RT-PCR）检测PBMC中IL-1、IL-6、IL-8和TNF-α的mRNA表达情况.结果 治疗8周后,临床症状及血液生化指标明显改善;两组NS患儿PBMC上清液中IL-1、IL-6、IL-8和TNF-α的含量间差别均有显著性意义（P＜0.01）;两组NS患儿PBMC上清液中IL-1、IL-6、IL-8和TNF-α的mRNA表达量间差别亦均有显著性意义（P＜0.01）;35例患儿治疗前mRNA均呈强阳性表达,治疗后表达强度降低.结论 银杏叶提取物对PBMC中IL-1、IL-6、IL-8和TNF-α蛋白及其mRNA表达有明显的抑制作用,银杏叶提取物治疗NS安全、有效,辅助激素治疗值得临床应用.     

老年高血压病患者血清Hcy与细胞因子的相关性研究

目的：研究老年高血压病患者血清同型半胱氨酸（homocysteine，Hcy）与肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、白介素-6（interleukin-6，IL-6）、血浆内皮素（endothelin，ET）、一氧化氮（nitric oxide，NO）的改变及其之间的相关性，从免疫炎症因子、血管内皮因子角度探讨Hcy在老年高血压病中的作用机制。方法：测定177例老年高血压病患者血清Hcy、TNF-α、IL-6、ET、NO，根据血清Hcy浓度分为Q1组、Q2组、Q3组，用单因素方差分析3组间指标参数差异。采用Pearson相关性分析Hcy与各指标之间的相关性。并用二项logistic回归分析血清Hcy对TNF-α、IL-6、ET、NO的具体影响。结果：①Q2、Q3组Hcy、TNF-α、IL-6、ET均较Q1组明显升高而NO明显降低（均P<0.05）；②Pearson相关分析显示，Hcy与TNF-α、IL-6、ET呈正相关（r=0.676、0.852、0.730），与NO呈负相关（r=-0.637）；③校正其他影响因素后，logistic回归分析显示Hcy是TNF-α、IL-6、ET升高的危险因素（均P<0.05），但是NO升高的保护因素（P<0.05）。结论：老年高血压病患者血清Hcy与TNF-α、IL-6、ET、NO具有相关性，高Hcy可能导致免疫炎症损伤、血管内皮功能紊乱，进而参与老年高血压病的病理过程。     

丙泊酚对小胶质细胞炎症因子的影响及其机制研究

目的 探讨丙泊酚对小胶质细胞炎症因子的影响及其机制。方法 将小胶质BV-2 细胞分为对照组、丙泊酚组、脂多糖（LPS）组、LPS+ 丙泊酚组,对照组细胞加入PBS 液,丙泊酚组细胞加入丙泊酚30μmol/L,LPS 组细胞加入LPS 1μg/ml,LPS+ 丙泊酚组细胞加入丙泊酚30μmol/L+LPS 1μg/ml。采用MTT 比色实验测定细胞活性,采用酶联免疫吸附法测定细胞上清液中白细胞介素1β（IL-1β）、白细胞介素6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平,采用逆转录- 聚合酶链反应测定细胞p38MAPK 和TLR4mRNA 的表达,采用Western blot 检测细胞p38MAPK 和TLR4 蛋白表达量。结果 LPS 组和LPS+ 丙泊酚组小胶质细胞活性低于对照组和丙泊酚组（P <0.05）,LPS+ 丙泊酚组小胶质细胞活性高于LPS 组（P <0.05）;LPS 组和LPS+ 丙泊酚组小胶质细胞上清液中IL-1β、IL-6、TNF-α 水平高于对照组和丙泊酚组（P <0.05）,LPS+ 丙泊酚组小胶质细胞上清液中IL-1β、IL-6、TNF-α 水平低于LPS 组（P <0.05）;LPS 组和LPS+ 丙泊酚组小胶质细胞p38MAPK、TLR4 mRNA 和蛋白表达量高于对照组和丙泊酚组（P <0.05）,LPS+ 丙泊酚 组小胶质细胞p38MAPK、TLR4 mRNA 和蛋白表达量低于LPS 组（P <0.05）;丙泊酚组和对照组小胶质细胞各指标比较,差异无统计学意义（P >0.05）。结论 丙泊酚能抑制小胶质细胞过度活化和炎症反应,其机制可能与丙泊酚可下调TLR4-p38MAPK 信号通路有关。     

藏药帕珠丸对慢性酒精性肝损伤大鼠肝组织IL-1、IL-6、TNF—α、TGF—β1含量及TGF—β1 mRNA表达的影响

目的观察藏药帕珠丸对酒精性肝损伤大鼠肝组织IL-1、IL-6、TNF一α、TGF—β1含量及TGF—β1 mRNA表达的影响。方法分别给予慢性酒精性肝损伤模型大鼠50、100、200mg·kg^-1帕珠丸混悬液,观察其对肝组织IL-1、IL-6、TNF—α、TGF—β1含量及TGF—β1 mRNA表达的影响。结果藏药帕珠丸低、中、高剂量组肝组织IL-1、IL-6、TNF-α、TGF—β1含量均显著降低（P〈0．05）,TGF—B,mRNA表达下降（P〈0．05）。结论藏药帕珠丸可能是通过降低肝组织中IL-1、IL-6、TNF-α、TGF—β1含量及TGF—β1 mRNA表达,对大鼠慢性酒精性肝损伤发挥保肝作用。     

IL-1β和TNF-α对软骨细胞基质降解的影响及相关机制研究

目的研究白介素-1β（IL-1β）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）对关节软骨细胞外基质降解的作用及相关分子机制。方法体外培养大鼠原代关节软骨细胞,单独或联合使用IL-1β和（或）TNF-α刺激软骨细胞,分别设为IL-1β刺激组、TNF-α刺激组、IL-1β和TNF-α联合刺激组;另设无任何刺激的对照组。在细胞培养24、48、72h时点,采用倒置显微镜观察软骨细胞外基质的变化;采用Real-TimePCR法检测基质金属蛋白酶-13（MMP-13）、蛋白聚糖降解酶-1（Adamts-4）和蛋白聚糖降解酶-2（Adamts-5）mRNA的表达。结果细胞在培养48、72h时点,显微镜观察显示对照组与TNF-α刺激组的软骨细胞外基质降解情况无明显差异;IL-1β刺激组、IL-1β和TNF-α联合刺激组细胞外基质失染、降解,细胞形态缩小,细胞间隙增宽。与对照组比较,细胞培养24h时点,IL-1β刺激组MMP-13、Adamts-4和Adamts-5mRNA的表达显著上调（P〈0.01）;而在培养48、72h时点有所下调。IL-1β和TNF-α联合刺激组与IL-1β刺激组比较,在培养各时点,MMP-13、Adamts-4和Adamts-5mRNA表达差异均无统计学意义（P〉0.05）。结论 IL-1β诱导软骨细胞产生大量的MMP-13、Adamts-4和Adamts-5而直接降解软骨细胞外基质;TNF-α可能不直接引起软骨细胞外基质的降解。     

红花注射液对急性冠脉综合征患者炎症反应的影响

目的：探讨红花注射液对急性冠脉综合征患者血浆炎症因子的影响。方法：将60例患者随机分为红花组及对照组,在治疗前及治疗15 d后,抽取静脉血,检测超敏C反应蛋白（hs-CRP）、白介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和同型半胱氨酸（Hcy）的浓度。结果：红花组与对照组在治疗15 d后,血浆hs-CRP、IL-6、TNF-α和Hcy水平均较治疗前明显下降,差异有统计学意义（P〈0.05）。与对照组治疗后hs-CRP、IL-6、TNF-α和Hcy水平[（18.83±2.02）mg/L、（29.42±6.25）pg/ml、（61.27±12.54）fmol/L、（6.13±1.24）μmol/L]比较,红花组[（6.58±1.73）mg/L、（20.13±7.46）pg/ml、（41.85±9.78）fmol/L、（4.56±1.17）μmol/L]下降更明显（P〈0.05）。结论：常规治疗基础上加用红花注射液可降低急性冠脉综合征患者血浆超敏C反应蛋白、白介素-6、肿瘤坏死因子-α和同型半胱氨酸的水平,抑制炎症反应。     

肝素治疗对重度子痫前期孕妇血清肿瘤坏死因子和白细胞介素6 含量的影响

目的观察小剂量肝素对重度子痫前期孕妇血清肿瘤坏死因子(TNF-α)及白细胞介素6(IL-6)水平变化的影响,探讨肝素治疗重度子痫前期的机制。方法重度子痫前期孕妇40例,随机分为治疗组和治疗对照组各20例,治疗组连续7 d每日静脉滴注250 g.L-1硫酸镁60 mL+肝素25 mg;治疗对照组连续7 d每日静脉滴注250 g.L-1硫酸镁60 mL。另选择同期正常晚期妊娠孕妇20例作为正常组。采用酶联免疫双抗体夹心法检测各组孕妇血清TNF-α、IL-6水平变化。结果治疗组与治疗对照组治疗前TNF-α、IL-6比较差别无统计学意义(P>0.05)。与正常组比较,治疗组和治疗对照组治疗前后TNF-α、IL-6含量均明显升高(P<0.01)。治疗组治疗后血清中TNF-α、IL-6含量均低于治疗前,差别有统计学意义(P<0.01);治疗对照组治疗后血清中TNF-α、IL-6含量与治疗前比较差别无统计学意义(P>0.05)。治疗后治疗组血清TNF-α、IL-6较治疗对照组明显降低,差别有统计学意义(P<0.01)。结论炎症反应在重度子痫前期的发病中起一定作用,肝素能通过抗炎机制达到治疗重度子痫前期的作用。     

人环状RNA＿0114428对脂多糖诱导的人肾小管上皮HK-2细胞损伤的作用及其机制

目的：探讨人环状RNA＿0114428 (circ＿0114428)对脂多糖(LPS)诱导的人肾小管上皮HK-2细胞损伤的作用,阐明circ＿0114428通过调节微小RNA-139-5p (miR-139-5p)/转化生长因子β受体2 (TGFBR2)轴改善HK-2细胞损伤的可能分子机制。方法：体外培养HK-2细胞,双荧光素酶报告基因实验验证miR-139-5p与circ＿0114428和TGFBR2的靶向调控关系,CCK-8法筛选合适的LPS干预浓度和时间。给予10 mg·L^-1 LPS干预12 h构建HK-2细胞损伤模型,HK-2细胞分为对照组、LPS组、LPS+circ＿0114428沉默对照(LPS+si-NC)组、 LPS+circ＿0114428沉默(LPS+si-circ＿0114428)组、LPS+circ＿0114428沉默+miR-139-5p抑制剂对照(LPS+si-circ＿0114428+in-NC)组和LPS+circ＿0114428沉默+miR-139-5p抑制剂(LPS+si-circ＿0114428+in-miR-139-5p)...     

IL-32在急性心肌梗死中的表达及与其它细胞因子表达水平的相关性

目的 探讨IL-32在急性心肌梗死中的表达及其与各细胞因子间的相关性。方法 运用ELISA法测定36例急性心肌梗死患者以及30例对照组患者血清的水平,比较急性心肌梗死组与正常组IL-32、IL-1β、IL-6、IL-18、TNF-α和IL-10的表达情况,以及IL-32与各细胞因子间的相关性。结果 急性心肌梗死组IL-32升高为（11.5±0.5）a,对照组的为（4.8±0.3）,两组对比差异有统计学意义（P〈0.05）。IL-1β、IL-6、IL-18、TNF-α和IL-10表达水平均也升高;提示IL-32与IL-1β、IL-6、IL-18、TNF-α和IL-10水平呈正相关。结论 急性心肌梗死后,IL-32表达水平明显升高;IL-32与传统细胞因子IL-1β、IL-6、IL-18、TNF-α和IL-10表达水平呈正相关。     

百草枯中毒大鼠胃肠损伤的实验研究

目的:观察百草枯(PQ)中毒大鼠胃肠损伤的病理变化及胃肠组织中肿瘤坏死因子-(TNF-)、白介素-1(IL-1)、超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)的表达变化,探讨炎症反应及氧自由基在PQ所致胃肠损伤中的作用。方法:40只SD大鼠,随机分为对照组和中毒组。其中对照组10只用0.9%氯化钠注射液一次性灌胃;中毒组30只给予0.9%氯化钠注射液稀释PQ,按180 mg/kg一次性灌胃,分别于6、24、72 h后处死10只,留取胃肠标本,观察胃肠大体,HE染色的病理改变,并采用免疫组织化学SP法检测胃肠组织中MDA、SOD、TNF-和IL-1的表达,ELISA法检测胃肠组织中TNF-和IL-1的表达。结果:PQ中毒大鼠胃肠有明显病理损伤;中毒组大鼠胃肠组织中TNF-、IL-1及MDA的表达均明显高于对照组(P0.01);中毒组SOD表达明显低于对照组(P0.01)。结论:PQ中毒大鼠胃肠有明显病理损伤,炎症反应及氧自由基在PQ所致胃肠损伤中可能起重要的作用。     

Graves病131 I治疗中的细胞因子变化

目的：研究放射性碘（^131 I）治疗Graves病过程中的血清细胞因子的变化,并探讨其临床应用价值。方法：采用ELISA法分别测定初诊甲亢患者（初诊组,n=61）以及甲亢患者131I治愈后（治愈组,n=65）的血清细胞因子白细胞介素（IL）-1β、sIL-2R、IL-5、IL-6以及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的水平,并与健康对照组（n=68）比较;分析各种细胞因子水平与甲状腺激素之间的相关性。结果：初诊组及治愈组患者血清IL-1β、sIL-2R、IL-5、IL-6及TNF-α的水平均显著高于健康对照组（ P〈0.05-P〈0.01）;治愈组的血清细胞因子IL-1β、sIL-2R、IL-5、IL-6及TNF-α与初诊组相比显著下降（P〈0.01）,而TNF-α的水平与健康对照组差异无统计学意义（P〉0.05）;IL-1β与FT4,sIL-2R与TRAb,以及TNF-α与TRAb均呈正相关关系（P〈0.01）。结论：细胞因子IL-1β、sIL-2R、IL-5、IL-6以及TNF-α水平与甲状腺的功能密切相关,可作为评判甲亢患者131 I治疗效果的有价值的指标。     

双氢青蒿素抑制LPS诱导的小胶质细胞炎症反应

目的 观察双氢青蒿素(dih ydroartemisinin,DHA)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的BV-2小胶质细胞神经炎症反应的影响及其机制.方法 LPS诱导BV-2小胶质细胞活化建立炎症模型,用不同浓度DHA(0.5、1、2、4μmol/L)处理细胞,CCK-8检测细胞活性;选取lμmol/L DHA干预细胞,倒置相差显微镜下观察细胞形态的变化;RT-PCR检测iNOS、IL-1β、IL-6、TNF-α基因表达水平;ELISA检测培养基中IL-1β、IL-6、TNF-α的表达水平;Western blot检测NF-κB、IκBα及TLR4的蛋白表达.结果 低剂量的DHA(＜2μmol/L)对BV-2细胞活性无明显影响(P＞0.05),DHA可抑制LPS引起的BV-2细胞形态变化,DHA抑制活化的BV-2细胞iNOS、IL-1β、IL-6、TNF-α mRNA的表达(P＜0.01),减少IL-1β、IL-6、TNF-α炎症因子释放(P＜0.01),明显降低TLR4的蛋白表达,减少细胞质内IκBα的表达,并抑制NF-κB向核内移位(P＜0.01).结论 DHA可能通过作用于TLR4/NF-κB通路,抑制LPS诱导的BV-2小胶质细胞NF-κB的激活,从而抑制炎症因子的产生,发挥抗炎作用.     

穿心莲内酯对巨噬细胞炎症因子表达的影响

目的研究穿心莲内酯对小鼠巨噬细胞氧化亚氮（NO）、肿瘤坏死因子（TNF-α）和白细胞介素-6（IL-6）生成的影响。方法培养小鼠巨噬细胞RAW264.7,分别加入脂多糖（lipopolysaccharide,LPS,终质量浓度1μg/mL）和不同浓度的穿心莲内酯（终浓度1、10、50μmol/L）进行干预,并设空白组和穿心莲内酯单独作用组作为对照。取培养24h细胞上清,用Griess法检测NO产量;用Elisa法检测TNF-α、IL-6浓度。结果与空白组比较,LPS明显促进了RAW264.7细胞NO、TNF-α、IL-6等炎症因子的生成;穿心莲内酯单独作用不影响炎症因子的表达,但穿心莲内酯能显著下调LPS诱导的炎症因子表达,与LPS组差异有显著性。结论穿心莲内酯可明显降低LPS诱导的巨噬细胞炎症因子表达,抑制炎症反应。