严重烧伤后血浆AVP水平与脑含水量的相关性研究

目的:探讨大鼠在严重烧伤后血浆精氨酸加压素(AVP)水平的动态变化及其与脑含水量(BWC)变化的关系.方法:用放射免疫分析法(RIA)检测严重烧伤后血浆AVP含量,干湿重法测定脑组织含水量的变化.所得数据分别经统计学处理.结果:严重烧伤后各时相点AVP水平和脑含水量不同程度的升高,在烧伤后6h达高峰,二者呈显著正相关(r=0.8790,P＜0.01).结论:血浆AVP水平可反映严重烧伤后脑水肿严重程度.     

严重烧伤后大鼠脑组织AQP4的表达变化及其与血浆AVP的相关性

背景：严重烧伤后脑水肿常发生在烧伤后早期,是导致病人死亡的重要原因之一。研究烧伤后脑水肿发生、发展规律,探讨其发生机制,对临床早期诊断、治疗具有十分重要的意义。 目的：研究严重烧伤后脑水肿病理过程中AQP4 及其mRNA表达变化及其与血浆AVP水平的相关性。 设计和实验时间：本实验于2007年在重庆医科大学神经科学试验中心设计,并于2008年在重庆医科大学神经科学研究中心完成。 材料：健康成年wistar大鼠180只,雌雄不拘,体重250g-300g,由重庆医科大学实验动物中心提供。免疫组化试剂盒、原位杂交试剂盒购自北京中山公司和博士德生物公司。 方法：采用30%TBSAⅢ度烧伤大鼠模型,干湿重法测脑组织含水量,免疫组化、原位杂交、Western blotting、RT-PCR检测AQP4及其 mRNA的表达变化,并用放射免疫分析法（RIA）观察血浆AVP水平的动态变化。 结果：严重烧伤后脑含水量有不同程度增加,AQP4及其 mRNA在视上核、视交叉上核、室旁核、海马、脉络丛、大脑皮质等部位表达上调,Western blotting、RT-PCR结果与免疫组化和原位杂交结果基本一致。血浆AVP水平在烧伤后也有不同程度升高,烧伤后6h达高峰。在整个脑水肿过程中,AQP4及其mRNA的表达分别与血浆AVP水平呈高度正相关（r=0.848,P<0.01;r=0.807, P<0.01）。 结论:严重烧伤后AQP4及其 mRNA表达增强,提示其在烧伤后脑水肿形成过程中起重要作用。血浆AVP水平上调与AQP4及其mRNA表达规律一致,AVP可能对AQP4 及其mRNA在脑组织的表达有一定调节作用。     

以颅内压增高就诊的脊髓肿瘤1例

患者,男,52岁.2006年3月17日因头痛伴复视、视力下降1 年入院.患者于1 年前无明显诱因出现头部涨痛,呈阵发性、进行性加重.4个月后出现双眼视力下降、复视.曾于多家医院就诊.     

人体解剖标本考试评价方法的实践与探索

医学是一门实践性很强的应用学科,医学生动手操作及临床实践能力的高低是评价医学教育质量的重要指标之一。人体解剖学不仅是重要的基础学科,也是基础医学向临床医学过渡的桥梁学科,采用恰当的教学手段提高学生实践和动手能力对于其他基础医学和临床医学课程的学习具有举足轻重的作用，而人体解剖标本的学习和考试是实现这一教学目标极其重要的方式[1]。本文现将人体解剖标本考试评价方法的实践与探索报告如下。     

水通道蛋白3在小鼠鼻腔中的表达

目的:研究水通道蛋白3(AQP3)在小鼠鼻腔中的表达.方法:应用免疫荧光和免疫印迹法研究野生型和AQP3基因敲除小鼠鼻腔嗅黏膜、呼吸道黏膜和犁鼻器中AQP3的表达特征.结果:免疫荧光结果表明,AQP3在小鼠嗅黏膜上皮层的基底细胞和支持细胞膜上表达强烈,并在嗅黏膜固有层中Bowman腺的基底外侧膜上表达;AQP3在嗅黏膜...     

严重烧伤后脑组织水通道蛋白-4的表达变化及意义

目的 探讨大鼠严重烧伤后，在脑水肿形成过程中水通道蛋白-4（aquaporin-4，AQP4）的表达变化。方法 采用30％TBSAm度烧伤大鼠模型，用干湿重法和免疫组织化学方法分别检测烧伤后不同时间段脑含水量和AQP4的表达变化。结果 严重烧伤后2h脑含水量和AQP4表达增加；烧伤后6h达到高峰，烧伤后48h仍高于正常；AQP4的表达与脑含水量呈显著正相关（r=0．8703，P〈0．01）。结论 严重烧伤后AQP4表达明显增强，提示AQP4与烧伤后脑水肿的形成密切相关。     

蛋白酶体抑制剂对神经细胞nicastrin表达的影响

目的:探讨蛋白酶体抑制剂能否引起神经细胞内nicastrin(NCT)蛋白表达及分布的变化,以明确NCT的蛋白降解是否与蛋白酶体有关。方法:在用人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)建立稳定表达NCT细胞株的基础上,应用蛋白酶体抑制剂处理NCT细胞株,并结合Western blotting、放射性同位素脉冲示踪技术、免疫荧光双标技术,检测蛋白酶体抑制剂处理后神经细胞内NCT的蛋白表达变化。结果:Western blotting结果显示,特异性蛋白酶体抑制剂处理后,神经细胞内源性和外源性转染的NCT的表达显著增强,高度特异的蛋白酶体抑制剂lacta-cystin对NCT蛋白的增强效应呈剂量依赖性和时间依赖性;放射性同位素脉冲示踪结果显示,蛋白酶体抑制剂可显著增强细胞内新合成的NCT蛋白的表达水平,其增强作用是通过阻止[35S]-NCT的蛋白降解来实现的;免疫荧光双标结果提示,NCT与泛素在细胞内共存。结论:神经细胞内NCT的降解由蛋白酶体途径介导;NCT在降解之前经泛素化修饰。     

双氢青蒿素抑制LPS诱导的小胶质细胞炎症反应

目的 观察双氢青蒿素(dih ydroartemisinin,DHA)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的BV-2小胶质细胞神经炎症反应的影响及其机制.方法 LPS诱导BV-2小胶质细胞活化建立炎症模型,用不同浓度DHA(0.5、1、2、4μmol/L)处理细胞,CCK-8检测细胞活性;选取lμmol/L DHA干预细胞,倒置相差显微镜下观察细胞形态的变化;RT-PCR检测iNOS、IL-1β、IL-6、TNF-α基因表达水平;ELISA检测培养基中IL-1β、IL-6、TNF-α的表达水平;Western blot检测NF-κB、IκBα及TLR4的蛋白表达.结果 低剂量的DHA(＜2μmol/L)对BV-2细胞活性无明显影响(P＞0.05),DHA可抑制LPS引起的BV-2细胞形态变化,DHA抑制活化的BV-2细胞iNOS、IL-1β、IL-6、TNF-α mRNA的表达(P＜0.01),减少IL-1β、IL-6、TNF-α炎症因子释放(P＜0.01),明显降低TLR4的蛋白表达,减少细胞质内IκBα的表达,并抑制NF-κB向核内移位(P＜0.01).结论 DHA可能通过作用于TLR4/NF-κB通路,抑制LPS诱导的BV-2小胶质细胞NF-κB的激活,从而抑制炎症因子的产生,发挥抗炎作用.     

Kir 4.1基因沉默对U-251细胞周期的影响

目的:针对人内向整流性钾离子通道(inwardly rectifying potassium channel protein,Kir)4.1基因构建si RNA干扰载体,探讨其对U-251细胞增殖、生长的影响,为临床治疗及开发新的抗肿瘤药物提供实验依据。方法:采用细胞培养、质粒转染、流式分选、RT-PCR、Western blot及流式细胞仪对构建的质粒进行鉴定并观察对照组和干扰组细胞周期的变化。结果:对DH5α中抽提的重组载体测序验证结果和插入序列一致;成功筛选出一个有效质粒;质粒转染U-251细胞后,细胞周期中的G2期细胞数量由19.39%降至1.5%,明显减少(P=0.018),S期细胞数量由36.32%升至51.22%,明显增多(P=0.027)。结论:成功构建针对人Kir 4.1基因的si RNA干扰载体;Kir 4.1干扰载体可能是通过抑制U-251细胞周期中的G2期,使U-251细胞的生长停滞在S期,从而达到干扰U-251细胞的增殖能力。     

慢性脑缺血对APP/PS1双转基因小鼠行为学及脑组织形态学的影响

目的:探讨慢性脑缺血对APP/PS1双转基因阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)模型小鼠的行为学以及脑组织形态学的影响。方法:将20只3月龄APP/PS1 AD模型小鼠随机分成2组,每组10只,对其中一组采用改良的双侧颈总动脉狭窄术,另一组双侧颈总动脉未结扎小鼠为假手术对照组。术后1个月分别采用Morris水迷宫、组织学和免疫组化染色,检测模型组和假手术组小鼠行为学的改变、海马区神经细胞形态学的改变、海马区神经细胞内Neu N和APP及Aβ的表达变化。结果:行为学实验结果:(1)可视平台下,2组小鼠找到平台的时间(t=1.31,P=0.19)及搜索的平均路程(t=0.04,P=0.97)无显著差异;(2)隐蔽平台下,脑缺血模型组小鼠(26.39±1.37)找到平台的时间较假手术对照组(20.19±1.19)明显延长(t=3.44,P=0.00);(3)空间探索实验中,经过平台的次数,脑缺血模型组小鼠(3.11±0.37)较对照组(4.25±0.34)明显减少(t=2.24,P=0.03)。HE染色:脑缺血模型组小鼠海马内神经细胞明显肿胀、细胞排列紊乱。免疫组化结果:脑缺血模型组小鼠海马内Neu N阳性神经元数量(93.40±10.44)较对照组(156.20±24.16)显著减少(t=2.39,P=0.04);而APP-阳性神经元(t=2.35,P=0.047)、Aβ40-阳性神经元(t=2.54,P=0.04)以及Aβ42-阳性神经元(t=2.476,P=0.04)较假手术组明显增加。结论:本实验新建立的改良双侧颈总动脉狭窄术能导致小鼠慢性脑缺血;慢性脑缺血可加速APP/PS1双转基因AD模型小鼠的病理进程。