Rip1-Tag2;PSGL-1^-/-小鼠模型的构建

目的构建Rip1-Tag2;PSGL^-1-/-小鼠模型。方法将Rip1-Tag2小鼠与P-选择素糖蛋白配体敲除（PSGL-1 KO）小鼠杂交,剪尾提DNA后用PCR法检测小鼠的基因型。结果 Rip1-Tag2小鼠与PSGL-1KO小鼠杂交3代后,Rip1-Tag2;PSGL-1-/-小鼠模型构建成功。结论将Rip1-Tag2小鼠与PSGL-1 KO小鼠杂交3代后成功建立了Rip1-Tag2;PSGL-1-/-小鼠模型,并进行繁育。     

Rip1-Tag2；PSGL-1-/-小鼠模型的构建

目的 构建Rip1-Tag2；PSGL-1-/-小鼠模型.方法 将Rip1-Tag2小鼠与P-选择素糖蛋白配体敲除(PSGL-1 KO)小鼠杂交,剪尾提DNA后用PCR法检测小鼠的基冈型.结果 Rip1-Tag2小鼠与PSGL-1KO小鼠杂交3代后,Rip1-Tag2；PSGL-1-/-小鼠模型构建成功.结论 将Rip1-Tag2小鼠与PSGL-1 KO小鼠杂交3代后成功建立了Rip1-Tag2；PSGL-1-/-小鼠模型,并进行繁育.     

PSGL-1＋/-；IL-2-/-小鼠模型的构建

目的构建PSGL-1＋/-;IL-2-/-小鼠模型。方法将白介素2敲除（IL-2KO）小鼠与P-选择素糖蛋白配体-1敲除（PSGL-1 KO）小鼠杂交,剪尾提DNA后用PCR法检测小鼠的基因型。结果IL-2KO小鼠与PSGL-1KO小鼠杂交三代后,PSGL-1＋/-;IL-2-/-小鼠模型构建成功。结论将IL-2KO小鼠与PSGL-1KO小鼠杂交三代后,成功建立了PSGL-1＋/-;IL-2-/-小鼠模型。     

Rip1-Tag2转基因小鼠模型的生物学特性

目的 研究胰腺癌Rip1-Tag2小鼠饲养管理及生物学特性.方法 Rip1-Tag2转基因小鼠饲养于SPF级环境中,记录小鼠的繁育情况.通过计数血性胰岛及肿瘤的数目,并测量肿瘤的体积,观察Rip1-Tag2小鼠肿瘤发生发展情况.通过组织病理学切片,观察Rip1-Tag2小鼠胰腺癌的病理学变化.结果 Rip1-Tag2小鼠已经成功繁育10代,共产仔620只.Rip1-Tag2小鼠肿瘤发生发展具有明显的阶段性:约6周出现血性胰岛,约8周出现肿瘤,并随着小鼠周龄的增加,肿瘤的数目和体积逐渐增多和增大.结论 Rip1-Tag2小鼠已被成功保种和扩群,具有较强的繁殖和适应能力,可稳定自发胰腺肿瘤,可作为研究肿瘤发生发展的经典动物模型.     

ApoE^-/-；SAP—Tg小鼠模型的构建

目的为研究SAP蛋白在动脉粥样硬化中的作用及机制,拟构建ApoE^-/-;SAP—Tg小鼠模型。方法分别选取6～8周龄的雄性ApoE^-/-小鼠与血清淀粉样蛋白P转基因（SAP—Tg）6周龄的雌性小鼠杂交,得到的杂交后代以剪尾方式提取基因组DNA,用PCR法检测小鼠的基因型。结果雄性ApoE^-/-小鼠与雌性SAP-Tg小鼠杂交得F1代后自交,在F2代获得ApoE^-/-;SAP—Tg基因型小鼠,模型构建成功。结论将ApoE^-/-小鼠与SAP—Tg小鼠杂交2代后成功建立了ApoE^-/-;SAP—Tg小鼠模型,并可通过筛选出的F2代ApoE^-/-小鼠和ApoE^-/-;SAP—Tg小鼠交配进行繁育筛选工作。     

P-选择素缺失对小鼠生理特征的影响

目的 探讨P-选择素基因（P-selectin）缺失对小鼠生理特征的影响。方法 P-选择素敲除（PKO）小鼠和C57小鼠饲养于SPF级环境中,通过基因鉴定确定其为纯和PKO小鼠。观察PKO小鼠的活动状态、繁育状况,检测血常规,确定P-选择素敲除后对小鼠一般情况的影响。分别于6周和18周处死小鼠,通过伊红&苏木素（HE）染色,观察P-选择素敲除后对小鼠各个脏器组织结构的影响。结果 PKO小鼠与正常C57小鼠的繁育状况相似,血常规无异常,HE染色发现PKO小鼠肝、脾、肺、肾组织结构均较正常。结论 P-选择素的缺失不会对小鼠生殖繁育、血液造成影响,对重要的组织脏器也未见明显影响,为以后进一步研究P-选择素在疾病中的作用提供了动物模型研究理论基础。     

APC^min／＋；Mac-1^-／-小鼠模型的构建

目的构建APC^min／＋;Mac-1^-／-小鼠模型。方法将自发肠腺瘤（APC^min／＋）模型同β2。家族整合素Mac-1缺失的小鼠（Mac-1^-／-）进行杂交,剪小鼠尾巴抽提DNA,然后用PCR法鉴定小鼠的基因型。结果将APC^min／＋小鼠与Mac-1^-／-小鼠杂交3代后,成功构建了APC^min／＋;Mac-1^-／-小鼠模型。结论将APC^min／＋小鼠与Mac-1^-／-小鼠杂交3代后成功建立了APC^min／＋;Mac-1^-／-小鼠模型,进一步扩大种群。的表达,并且这种作用能被L-精氨酸所抑制。     

P-选择素在基因敲除小鼠移植瘤中的作用研究

[摘要] 目的 探讨P-选择素与肿瘤生长的关系。方法 将体外培养的B16黑色素细胞株分别接种于P-选择素敲除的小鼠和C57/BL小鼠的皮下,建立移植瘤模型,从第9天开始计算移植瘤的体积;第21天断颈处死小鼠,切取移植瘤称重。通过检测Brdu来测定肿瘤细胞的增殖指数。结果 P-选择素敲除小鼠肿瘤体积增长相对缓慢,C57/BL小鼠肿瘤体积增长明显。实验组BrdU标记的阳性细胞数明显的高于对照组。结论 P-选择素缺失可以通过抑制肿瘤细胞的增殖而明显地抑制肿瘤生长。     

近交系小鼠过氧化氢酶-2遗传生化标记位点的研究

目的 为了进一步完善近交系小鼠遗传生化标记检测方法,对近交系小鼠过氧化氢酶-2生化标记位点进行研究.方法 将CBA/Ca与BALB/c交配得到杂交F1代动物,同时将CBA/Ca与C57BL/6交配得到杂交F1代动物,然后通过F1代动物之间的交配,以及F1代动物与母代的回交,得到F2动物,对F2代动物进行过氧化氢酶-2生化标记检测.结果 在杂交F1代不表现的过氧化氢酶-2的b型基因,在F2代出现.结论 近交系小鼠过氧化氢酶-2遗传生化标记位点的等位基因a是完全显性的.     

Fah-/-Rag2-/-IL2Rg-/-小鼠肝脏原位异种重建模型的建立及其评价

目的：构建猪-小鼠肝细胞嵌合模型,探讨猪肝细胞在无T淋巴细胞、B淋巴细胞和自然杀伤细胞(NK细胞)介导排斥条件下的移植及再生的相关条件,评估猪肝细胞在异种受体中的定居、增殖和功能因子分泌情况,为提高猪源化小鼠模型中猪肝细胞的重建效率提供依据。方法：采用脾脏内注射法将猪肝细胞移植至Fah^-/-Rag2^-/-IL2Rg^-/-(FRG)小鼠体内,构建移植模型。将16只FRG小鼠随机分为对照组、空白对照组、实验组和绿色荧光蛋白(GFP)基因实验组,每组4只。空白对照组小鼠停止给予2-(2-硝基-4-三氟甲基苯甲酰基)-1,4-环己二酮(NTBC),监测体质量;对照组4只小鼠注射猪肝细胞,移植前1周停止给予NTBC,移植后监测体质量,当体质量下降20%时,给予NTBC 3 d;实验组小鼠注射猪肝细胞,移植前1周停止给予NTBC,移植后监测体质量,当体质量下降20%时,给予NTBC 3 d;GFP基因实验组小鼠注射携带GFP基因猪肝细胞,移植前1周停止给予NTBC,移植后监测体质量,当体质量下降20%时,给予NTBC 3 d。观察各...     

缺氧诱导因子2α基因敲除对小鼠动脉粥样硬化发生的影响

目的 明确缺氧诱导因子（hypoxia inducible factor, HIF）-2α 对动脉粥样硬化病变的影响。方法 引进获得HIF-2α 基因LoxP 标记小鼠和Mx-Cre 转基因小鼠,利用Cre/LoxP 系统建立条件性HIF-2α 基因敲除的小鼠模型,同时以Mx-Cre 阴性的野生型小鼠和ApoE 基因缺陷小鼠为对照,高脂饲料喂养8 周后对小鼠主动脉进行HE 染色,观察动脉粥样硬化病变形成情况。结果 HIF-2α-LoxP 标记小鼠和Mx-Cre 转基因小鼠交配后,经过两次传代和基因型鉴定筛选,获得Mx-Cre阳性且HIF-2α 纯合LoxP 标记小鼠,采用聚肌胞腹腔注射后可成功建立HIF-2α 基因敲除小鼠模型。高脂喂养8 周后,ApoE 基因缺陷小鼠主动脉呈动脉粥样硬化样改变,野生型小鼠可见轻度内膜增生,而HIF-2α 基因敲除小鼠主动脉内膜未见增生。结论 HIF-2α 基因敲除可抑制小鼠动脉粥样硬化病变的形成,提示针对HIF-2α 的基因治疗可能是动脉粥样硬化防治策略的新方向。     

益气补肾中药对自然流产模型小鼠CD28分子表达的影响

目的：观察益气补肾中药对小鼠母胎免疫的调节作用。方法：以CBA雌鼠×DBA/2雄鼠建立小鼠自然流产模型,将20只CBA孕鼠随机分成四组,每组5只。空白对照组（NS组）予生理盐水灌胃,西药组予环孢菌素A（CsA）灌胃,中药组予益气补肾中药灌胃,中西结合组予中药＋CsA灌胃。妊娠14天处死孕鼠,取脾脏与母胎界面组织,用流式细胞分析术（FCM）分析各组孕鼠CD28分子的表达情况。结果：CD28分子在脾脏表达趋势从高到低依次为：生理盐水组、西药组、中西结合组、中药组,各治疗组CD28分子表达均低于NS组（P〈0.05）;CD28分子在母胎界面上表达趋势从高到低依次为：生理盐水组、中药组、西药组、中西结合组,中西结合组CD28分子表达低于NS组、西药组和中药组（P〈0.05）;中药组、西药组CD28分子表达均低于NS组（P〈0.05）。结论：益气补肾中药对自然流产模型小鼠有下调CD28分子表达的作用趋势。     

家族性肌萎缩侧索硬化症转基因鼠的繁殖和鉴定

目的 建立家族性肌萎缩侧索硬化症（FALS）转基因模型鼠的繁育方法,并对其子代鼠进行基因鉴定。方法 （1）以6只B6SJLSOD1G93～＋半合子雄鼠与6只B6SJLFIJ＋／＋雌鼠（1：1）交配;（2）由鼠尾血提取基因组DNA,PCR扩增hmSOD1基因的片段,电泳后观察结果;（3）对PCR产物进行纯化测序,并通过BLAST验证。结果 6对种鼠交配产鼠仔53只,存活率为98％（52／53）;G93AhmSODl阳性鼠约占44．2％（23／52）;PCR扩增产物分别为内对照（IL-2）：324bp;Tg（hmSOD1）：236bp;测序证实PCR产物的基因序列和hmSODl基因片段中的序列一致．并存在G93A突变。结论 B6SJL-Tg（SOD1-G93A）1Gur／J雄鼠与B6SJLFI／J雌鼠配种能成功繁育出Tg（hmSOD1）阳性的ALS半合子子代鼠：本实验的PCR法能准确鉴定hmSOD1基因阳性鼠,并证实该转人的基因按近似孟德尔方式遗传,为ALS实验研究奠定了基础。     

乙型肝炎病毒纯合子转基因小鼠(adr 1.2)的培育

目的：通过遗传学育种使外源基因整合位点随机的HBV转基因小鼠成为单一整合位点的纯合子转基因小鼠。方法：产生founder小鼠以后,将正常小鼠与转基因小鼠交配,通过PCR,Dot-blotting,Southern-blotting等方法检测 HBV DNA在转基因小鼠体内的整合状况,阳性率达50％左右后,进行近亲交配。结果：共得到了7代HBV转基因小鼠,其中包含有整合HBV基因纯合子的转基因小鼠。结论：外源基因在转基因小鼠体内可以稳定遗传,并得到了整合有HBV基因的纯合子转基因小鼠。 目的：通过遗传学育种使外源基因整合位点随机的HBV转基因小鼠成为单一整合位点的纯合子转基因小鼠。方法：产生founder小鼠以后,将正常小鼠与转基因小鼠交配,通过PCR,Dot-blotting,Southern-blotting等方法检测 HBV DNA在转基因小鼠体内的整合状况,阳性率达50％左右后,进行近亲交配。结果：共得到了7代HBV转基因小鼠,其中包含有整合HBV基因纯合子的转基因小鼠。结论：外源基因在转基因小鼠体内可以稳定遗传,并得到了整合有HBV基因的纯合子转基因小鼠。 目的：通过遗传学育种使外源基因整合位点随机的HBV转基因小鼠成为单一整合位点的纯合子转基因小鼠。方法：产生founder小鼠以后,将正常小鼠与转基因小鼠交配,通过PCR,Dot-blotting,Southern-blotting等方法检测 HBV DNA在转基因小鼠体内的整合状况,阳性率达50％左右后,进行近亲交配。结果：共得到了7代HBV转基因小鼠,其中包含有整合HBV基因纯合子的转基因小鼠。结论：外源基因在转基因小鼠体内可以稳定遗传,并得到了整合有HBV基因的纯合子转基因小鼠。     

SPF级C57BL/6J小鼠生长发育和繁殖性能指标的测定

目的 在SPF级动物饲养条件下，对本中心饲养的SPF级C57BL／6J小鼠生长发育和繁殖性能指标进行测定。方法 挑选80～90日龄C57BL／6J小鼠40只（雌、雄各半），采取1：1间歇同居，兄妹近交繁殖，并统计其生长发育和繁殖性能参数指标。结论 SPF级C57BL／6J小鼠离乳后体重增长较慢；第2、3胎繁殖性能较好，第5胎最差，种鼠连续繁殖5胎后要更换。